淫羊藿总黄酮和戊酸雌二醇对骨质疏松症大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 研究淫羊藿总黄酮和戊酸雌二醇对骨质疏松症大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法 75只雌性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（Model组）、淫羊藿总黄酮组（TFE组）、戊酸雌二醇组（E2V组）、淫羊藿总黄酮联合戊酸雌二醇组（TFE+E2V组）,行双侧卵巢切除术造模,术后12周开始给予相应的药物干预12周。分别检测血清骨代谢指标,BMD和骨灰重比,骨骼生物力学参数,股骨形态计量学参数,股骨TGF-β1/Smads蛋白和mRNA表达。结果 模型组血清Ca、P、OC、PINP,股骨和椎体骨密度、灰重比,股骨最大载荷、最大位移、最大应力、弹性模量,股骨Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N,股骨TGF-β1、Smads2蛋白和mRNA表达较Sham组均显著降低（P＜0.01）,E2V组、TFE组、TFE＋E2V组上述指标较模型组均显著增加（P＜0.05）,TFE＋E2V组上述指标较E2V组、TFE组均显著增加（P＜0.05）。模型组血清ALP,股骨Tb.Sp、Oc.N较Sham组显著增加（P＜0.01）,E2V组、TFE组、TFE＋E2V组上述指标较模型组均显著降低（P＜0.05）,TFE＋E2V组上述指标较E2V组、TFE组均显著降低（P＜0.05）。结论 淫羊藿总黄酮联合戊酸雌二醇通过上调TGF-β1、Smad2表达,调节骨质疏松大鼠骨代谢,增加骨量,提高骨密度和骨强度,从而起到抗骨质疏松作用。     

去卵巢大鼠胫骨和椎骨松质骨微结构的显微CT分析

目的观察大鼠去卵巢后,椎骨和胫骨松质骨微结构变化。方法 50只7月龄SD大鼠随机分为基线组,去卵巢组和假手术组。基线组在试验开始时处死,去卵巢组和假手术组分别在去卵巢后3周、15周各处死。分离大鼠第五腰椎和左侧胫骨,用显微CT(microCT)对椎骨及胫骨骨骺端松质骨进行扫描,对其微结构定量分析。结果去卵巢第3周和第15周,OVX组胫骨骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)和连接密度(Conn.D)均显著性小于SHAM组,骨小梁间隔(Tb.Sp)和结构模型指数(SMI)均明显大于SHAM组。去卵巢第3周,OVX组椎骨BV/TV显著性小于SHAM组,SMI明显大于SHAM组,至第15周,OVX、SHAM两组间椎骨的微结构差异与胫骨相同。纵向观察,OVX组胫骨随着时间变化出现BV/TV和Conn.D进行性减少,Tb.Sp进行性增加,面积骨密度(tBMD)和骨小梁厚度(Tb.Th)在第3到15周分别出现下降和增加。OVX组椎骨BV/TV在去卵巢3周内下降,Conn.D和Tb.Sp在3到15周内分别出现减少和增加。胫骨和椎骨的Tb.N随时间均进行性减少,SMI均在3周内增加。结论雌激素缺乏时大鼠松质骨微结构改变呈现出区域性,胫骨松质骨微结构丢失的发生比椎骨早,更为显著。     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨组织OPG、 OPGL mRNA表达的影响

目的：探讨淫羊藿总黄酮（totalflavoneofepimedium,TFE）治疗骨质疏松症的分子机制,为传统中药的现代化和二次开发提供实验依据。方法：将60只4月龄健康雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（A组,20只,行假手术处理）,去卵巢纽（OVX组,20只,切除卵巢后不给予淫羊藿处理）,淫羊藿组（TFE纽,20只,切除卵巢后给予淫羊藿灌胃）。所有大鼠术前及术后4周以DEXA骨密度仪检测L4骨密度变化（若BMD下降〉20％,则骨质疏松模型建立）。模型建立后TFE组大鼠给予淫羊藿总黄酮（浓度30mg／ml,10ml／kg,1次／d）灌胃4周。所有大鼠处死前再行DEXA骨密度检测,过量麻醉法处死后取其股骨下部,切片匀浆提取骨组织中RNA,应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测骨组织护骨素（osteoprotegrin,OPG）、护骨素配体（0PGL）mRNA的表达。结果：①TFE组大鼠切除卵巢4周后,腰椎BMD均值降至（0．084±0．020）g／cm^2,降幅〉20％证明骨质疏松模型建立。TFE灌胃4周后其腰椎BMD提高至（0．112±0．009）g／cm^2,与给药前比较有明显改善,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TFE组大鼠骨组织中OPGmR—NA的表达较OVX组相比,明显增强,且有统计学差异（P〈0．05）,但对OPGLmRNA表达促进作用不明显,组间无统计学差异（P〉0．05）。结论：TFE是通过促进骨组织中OPGmRNA的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,从而达到治疗骨质疏松症的目的。     

淫羊藿总黄酮与己烯雌酚合用对去卵巢大鼠子宫和骨的影响

目的：观察淫羊藿总黄酮（epimedium pubescens flavonoids，EF）能否抑制己烯雌酚（diethylstibestrol，DES）刺激子宫不良反应，及对DES抗骨质疏松作用的影响。方法：50只4个月龄SD雌性大鼠随机分为5组：假手术组（Sham组）；去卵巢组（OVX组）；己烯雌酚组（DES组）；淫羊藿总黄酮组（EF组）；联合用药组（EF＋DES组）。实验12周，通过测量子宫内膜厚度及子宫湿重分析用药对子宫的刺激作用，测量骨小梁面积百分率（％Tb．Ar）、荧光周长百分数（％L．Pm）及破骨细胞数量（Oc．N）反映骨量、骨形成及骨吸收的变化。结果：DES组与OVX组比，子宫湿重及内膜厚度都显著增加，％Tb．Ar增加，％L．Pm、Oc．N减少；EF组与OVX组比，子宫湿重及内膜厚度、％Tb．Ar、Oc．N均无显著性差异；EF＋DES与DES组比，内膜厚度显著降低，％Tb．Ar增加；与假手术组比各参数无显著性差异。结论：淫羊藿总黄酮可有效抑制己烯雌酚对子宫内膜刺激作用并增强其防治骨质疏松作用。     

淫羊藿对骨质疏松型骨折局部骨形成蛋白mRNA表达的影响

目的 研究淫羊藿对骨质疏松型骨折局部骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响.方法 取4月龄雌性大鼠78只,随机分成实验组(切除双侧卵巢)57只,对照组(切除卵巢周围少许脂肪组织)21只,术后10周,电镜观察证实实验组骨质疏松动物模型已制备成功后,取实验组54只及对照组18只大鼠,制作右侧股骨远端骨折,共分为4组,即:(1)磷酸钙骨水泥(Calcium Phosphate Cement,CPC)治疗组(简称A 组);(2)CPC-淫羊藿复合物治疗组(以下简称C组);(3)CPC+口服淫羊藿组(简称B组);(4)非骨质疏松组(简称D组)分别于术后第4、8、12周行实时荧光定量RT-PCR检测骨折局部BMP-2 mRNA的表达.结果 实验组各时间点BMP-2的mRNA表达水平均低于非骨质疏松组,但淫羊藿治疗组第4、8周的表达量高于CPC组,其中尤以CPC-Y组增高明显.结论 局部应用淫羊藿能更为有效诱导骨质疏松型骨折局部内源性BMP-2mRNA的表达.     

白茅苷对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞功能和骨量的影响

目的观察白茅苷治疗去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞功能和骨量的影响并初步探索可能机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及白茅苷组(BMG),每组10只;其中BMG组去卵巢大鼠每天给予白茅苷(20 mg/kg)灌胃治疗;待12周治疗结束后分离培养各组大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),使用碱性磷酸酶(ALP)和茜素红(ARS)染色并使用蛋白质印迹检测BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1蛋白表达;进一步使用Micro-CT和骨生物力学检测观察治疗效果。结果 OVX组大鼠BMSCs向成骨细胞分化后ALP和ARS染色阳性面积以及BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1表达较Sham组明显降低(P0.05);而经过BMG治疗,BMG组大鼠BMSCs向成骨细胞分化后ALP和ARS染色阳性面积以及BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1表达较OVX组明显增加(P0.05)。OVX组股骨最大载荷和弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th较Sham组明显降低,而Tb.Sp则明显升高(P0.05)。BMG组左侧股骨最大载荷和弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th均明显高于OVX组(P0.05),而Tb.Sp明显低于OVX组(P0.05)。结论白茅苷通过促进BMSCs诱导成骨分化来减少去卵巢大鼠骨骨密度、骨量和骨强度下降。     

异补骨脂素对去卵巢骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞作用机制研究

目的探讨异补骨脂素对去卵巢骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenehymal stem cells,BMSCs)作用机制。方法18只C57/BL6雌鼠随机平均分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)和去卵巢加异补骨脂素组(OVX+ISO),各组6只。OVX组和OVX+ISO组分离背部近髂脊处肌肉,取出双侧卵巢,结扎上部输卵管,剪去双侧输卵管。Sham组相同入路后剪去包裹卵巢周围的部分脂肪组织。OVX+ISO组在去卵巢前5天开始灌胃异补骨脂素,灌胃剂量为20 mg/(kg·d),灌胃持续时间2个月,Sham组以等剂量生理盐水灌胃。造模后12周处死小鼠,取股骨下段评价骨髓腔中脂肪细胞量,行micro-CT扫描评价股骨下段骨量改变及RUNX2、PPAR-γ免疫荧光检测。结果异补骨脂素能明显减少由于去卵巢引起的股骨下段脂肪细胞增多;与此同时,异补骨脂素治疗能明显改善由于去卵巢引起的股骨下段骨量丢失,即OVX+ISO组骨小梁厚度(Tb.Th)、骨体积/总体积(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)大于OVX组,差异具有统计学意义(P0.05);而OVX+ISO组骨小梁体积(Tb.Sp)小于OVX组,差异具有统计学意义(P0.05)。对去卵巢C57/BL6小鼠股骨下段进行RUNX2和PPAR-γ免疫荧光提示,异补骨脂素治疗能增加股骨下段由于去卵巢引起的RUNX2表达降低,同时能抑制PPAR-γ表达增加,即OVX+ISO组股骨下段RUNX2、PPAR-γ免疫荧光表达强度高于OVX组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论异补骨质素对去卵巢小鼠BMSCs的作用机制为治疗骨质疏松提供了新的临床治疗手段。     

麦角甾苷治疗对去卵巢大鼠骨质疏松症保护机制研究

目的 探讨麦角甾苷(MJZG)治疗对去卵巢大鼠骨密度降低和骨量流失的潜在影响,并探索可能的机制。方法 通过双侧去卵巢构建骨质疏松大鼠模型;随后将大鼠随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及麦角甾苷(MJZG),每组10只;其中MJZG组大鼠接受麦角甾苷(100 mg/kg)治疗12周;待治疗截止时获取股骨标本和血液样品进一步检测股骨骨量、骨强度、骨代谢指标改变以及组织蛋白的表达。结果 术后12周,与Sham组相比,OVX组的大鼠骨小梁微观参数和骨密度和骨矿物质含量以及骨强度显著降低;而MJZG组大鼠BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp以及最大载荷和弹性模量较OVX组明显改善(P<0.05)。MJZG组大鼠血清BGP、ALP、TRACP-5b和DPD水平较OVX组明显降低,组间差异有统计学意义(P<0.05)。WB检测观察到,和OVX组比较,MJZG组的TRAF6、RANKL、NF-κB和NFAT2的蛋白水平表达下调(P<0.05),而PI3K、AKT和c-Fos上调(P<0.05)。结论 MJZG可以通过抑制RANKL/TRAF6/N...     

白藜芦醇抗切除卵巢大鼠发生骨质疏松的作用研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,R)抗切除卵巢大鼠发生骨质疏松的作用。方法 6月龄Wistar雌性大鼠40只,随机数字表法分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)、淫羊藿苷组(I)和白藜芦醇组(R)。I组给予25 mg/(kg·d)的淫羊藿苷灌胃,R组给予8.4 mg/(kg·d)的白藜芦醇灌胃,Sham和OVX组灌胃等体积蒸馏水。根据体质量每两周进行一次灌胃剂量调整。8周后待各组间骨密度出现显著性差异后立即处死,统计大鼠体质量并计算大鼠器官指数,检测离体骨密度、骨生物力学、血清生化指标,观察骨组织形态并测量分析骨小梁相关静态参数。结果各组大鼠体质量并未出现统计学差异,除子宫系数外其他器官指数无统计学差异(P0.05),但OVX组的子宫指数显著低于Sham组(P0.05),I组和R组子宫指数显著高于OVX组(P0.05);与OVX组相比,I组和R组的骨密度、最大载荷、弹性模量、骨形成指标OC以及Tb.N、BV/TV均显著升高(P0.05),而骨吸收指标TRACP-5b含量和Tb.SP均显著降低(P0.01);骨组织形态观察结果也显示I组和R组骨小梁网状结构呈致密性增加,骨小梁数目明显变多。R组与I组相比,其各指标平均值略低于I组,差异均无统计学意义(P0.05)。结论白藜芦醇可能通过增加骨密度、提高骨强度、促进骨形成、抑制骨吸收、改善骨质量从而发挥抗骨质疏松的作用。     

淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ通过BMP/Runx2/Osx信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的观察淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化过程中BMP-2/Runx2/Osx信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法贴壁筛选法体外培养BMSCs,随机分为空白对照组、阳性转化液组、抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅰ+抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅱ组及淫羊藿次苷Ⅱ+抑制剂组。通过茜素红染色,对各组促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价; ELISA法检测各组ALP活性、BGP、COL-Ⅰ、BMP2蛋白分泌量;RTReal-TimePCR法检测各组ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果茜素红染色结果表明,淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅱ组均可明显观察到大量的矿化结节的形成;ELISA实验结果表明,与空白对照组比较,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能明显促进ALP细胞活性及BGP、COL-Ⅰ、BMP-2蛋白分泌量,并且差异具有统计学意义(P0.05);两组药物作用强度均已达到阳性转化液组的80%以上。同时,淫羊藿次苷Ⅰ对ALP活性、 BGP蛋白表达均明显强于淫羊藿次苷Ⅱ,并且差异具有统计学意义(P0.05);对COL-Ⅰ、BMP-2的蛋白表达量,两者差异无统计学意义(P0.05)。RT-PCR实验结果表明,与空白对照组相比,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均可显著上调成骨相关转录因子ALP、BGP、RunX2,并进一步调节其下游基因Osterix的转录表达,差异具有统计学意义(P0.05);与阳性对照液组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对ALP、Osterix的mRNA表达无明显差异(P0.05);淫羊藿次苷Ⅰ与淫羊藿次苷Ⅱ组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对Osterix mRNA的表达明显强于淫羊藿次苷Ⅰ,并且差异具有统计学意义(P0.05)。对ALP、BGP、RunX2 mRNA的表达二者无显著性差异(P0.05)。结论淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ均能促进BMSCs定向成骨转化,其作用机制可能与激活BMP/Runx2/Osx信号通路有关。淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ作用差异可能与淫羊藿次苷Ⅰ在体内生物转化为淫羊藿次苷Ⅱ有关。     

高脂饮食通过抑制Wnt/β-catenin信号介导对骨质疏松大鼠骨密度和骨修复的负面影响

目的 评估高脂饮食（HFD）对骨质疏松大鼠骨密度（bone mineral density, BMD)及骨修复的影响并探讨可能的机制。方法 将雌性SD大鼠随机分为三组：假手术卵巢切除组（Sham）、手术卵巢切除模型组（OVX）、手术卵巢切除模型+HFD（OVX+HFD）;随后所有大鼠在双侧去卵巢手术或假手术后12周基础上制作双侧股骨干建立骨缺损模型,OVX+HFD组大鼠在股骨上接受HFD干预4周。随后使用影像学、血清学、骨生物力学以及基因水平检测来评估骨修复效果。结果 与Sham组相比,OVX和OVX+HFD组的血清E2、ALP水平均显著降低( P<0.05),而TRAP水平均显著升高(P<0.05);OVX和OVX+HFD组之间有显著差异(P<0.05)。Micro-CT检测显示OVX+HFD组骨修复效果较OVX和Sham组明显降低;定量检测结果显示OVX+HFD组的BMD、Tb.N和Tb.Th显著小于OVX组(P<0.01),而Tb.Sp(P<0.05)在OVX+HFD组中明显大于在OVX组。生物力学显示HFD干预后明显降低了去卵巢大鼠骨缺损部位的机械强度,包括大鼠股骨的极限载荷、刚度、能量吸收和弹性模量(P均<0.05);基因检测表明与OVX组相比,OVX + HFD组Smad2、Smad3和GSK-3βmRNA表达显著增加(P<0.01),而Wnt1和β-cateninmRNA表达均显著降低(P<0.01)。结论 HFD对骨质疏松状态下骨缺损愈合有负面影响,而这种影响可能是通过对Wnt/β-catenin信号传导抑制来实现的。     

淫羊藿不同提取物对去势大鼠PINP、NTx影响的实验研究

目的通过PINP、NTx指标的变化研究淫羊藿抗骨质疏松的作用机制。方法采用去卵巢方法诱发大鼠骨质疏松模型,淫羊藿不同提取物进行灌胃,检测PINP、NTx等相关指标的变化,评价淫羊藿抗骨质疏松的疗效。结果与空白对照组相比,模型组E2、PINP含量明显降低(P0.001),NTx水平升高(P0.001);与模型组比较,淫羊藿不同提取物各剂量组均可提高去势大鼠E2水平(P0.05),提高PINP水平(P0.05),降低NTx水平(P0.05);淫羊藿水煎液各组PINP和NTx含量高于其他各组,差异具有统计学意义。结论淫羊藿具有雌激素样作用,淫羊藿不同提取物均可改善去势大鼠骨质疏松症。     

关于补肾中药防治骨关节炎分子机制的体外实验研究

目的观察补肾中药单体淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷对间充质细胞中BMP2、BMP4、RUNX2表达的影响,以探讨和阐释肾中精气对关节软骨的调控作用及其分子机制,以丰富、补充和发展"肾藏精主骨"脏象理论。方法取1月龄野生型小鼠双侧后肢骨,分离间充质细胞(P1),分为空白组、对照组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组和二苯乙烯苷组,实时定量PCR法检测BMP2、BMP4、RUNX2基因表达;Western-Blotting法检测BMP2、BMP4、RUNX2蛋白表达含量。结果1与成骨对照组相比,四个中药组BMP4、RUNX2基因表达均显著增高(P0.05),与成骨对照组相比,淫羊藿组和二苯乙烯苷组BMP2基因表达显著增高(P0.05);2与成骨对照组比较,补四个中药组BMP2、BMP4蛋白表达均有不同程度增强;淫羊藿苷组和二苯乙烯苷组RUNX2蛋白表达较对照组增强。结论 1实验用四种补肾中药单体能够上调BMP2、BMP4、RUNX2基因和蛋白表达;2补肾中药对骨关节炎的防治作用可能与本研究的分子机制有关;3"肾主骨"理论包含了肾对关节软骨的调控作用。     

牛蒡苷元通过OPG/RANKL信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用

目的探讨牛蒡苷元(AGN)对去卵巢大鼠骨强度和骨量的影响,并探索可能的机制。方法本研究中通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及牛蒡苷元组(AGN),每组10只;其中牛蒡苷元组大鼠接受牛蒡苷元[40 mg/(kg.d)]治疗12周;待治疗结束后使用Micro-CT、Masson染色切片、骨代谢指标、骨生物力学检测以及蛋白质印迹观察治疗效果以及可能的机制。结果治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和Masson染色切片结果显示AGN组的大鼠骨小梁数量和骨密度得到明显改善。AGN组大鼠BMD、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P0.05)。治疗12周时,AGN组极限载荷和刚度较OVX组显著增加(P0.05),而AGN组骨代谢指标AKP和TRACP水平显著降低(P0.05),差异有统计学意义(P0.05)。和OVX组比较,AGN组OPG表达水平明显上调,而RANKL表达水平显著下调,差异有统计学意义(P0.05)。表明AGN组的大鼠OPG/RANKL信号通路被激活。结论牛蒡苷元可以通过OPG/RANKL信号通路介导对去卵巢大鼠骨骼的保护作用。     

LncRNA DANCR靶向调控对绝经后骨质疏松BMSCs成骨分化的作用

目的 研究长链非编码RNA（lncRNA）分化非蛋白编码 RNA（DANCR）靶向微小RNA（miR）-19a-3p对绝经后骨质疏松（PMOP）骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化的调控作用。方法 选择健康女性志愿者4例和PMOP患者4例，分离培养BMSCs；PMOP患者BMSCs进行分组，转染阴性对照（NC）siRNA、lncRNA DANCR siRNA、miR-NC抑制物、miR-19a-3p抑制物。检测lncRNA DANCR、miR-19a-3p、PTEN的表达水平，成骨诱导分化后检测茜素红染色的OD405水平、碱性磷酸酶（ALP）活力、骨钙素（OCN）及骨桥蛋白（OPN）的mRNA表达水平。结果 PMOP患者BMSCs中lncRNA DANCR、PTEN的表达水平高于健康女性，miR-19a-3p的表达水平及成骨诱导后的OD405水平、ALP活力、OCN及OPN的表达水平均低于健康女性。在PMOP患者BMSCs中，si-DANCR组的lncRNA DANCR、PTEN的表达水平低于si-NC组，成骨诱导后的OD405水平、ALP活力及miR-19a-3p、OCN、OPN的表达水平高于si-NC组；si-DANCR+miR-19a-3p抑制物组成骨诱导后的OD405水平、ALP活力及miR-19a-3p、OCN、OPN的表达水平低于si-DANCR+miR-NC抑制物组，PTEN的表达水平高于si-DANCR+miR-NC抑制物组。结论 LncRNA DANCR靶向miR-19a-3p调控PMOP患者BMSCs的成骨分化。     

曲古抑菌素A促进去卵巢大鼠钛植入物骨整合

目的 探讨TSA对去卵巢大鼠TI骨整合的影响。方法 将30只健康3月龄雌性SD大鼠随机分为Sham组（n=5）和OVX组（n=25）。正常饲养3个月后,两组各选取5只大鼠处死,取股骨远端样本行Micro-CT和HE染色以鉴定是否成功建立骨质疏松模型。随后在OVX组剩余大鼠双侧股骨干骺端植入直径1.5 mm TI,并将其分为2组：Control组（n=10）和TSA组（n=10）。连续给药4周。给药结束后处死全部大鼠并取股骨样本行Micro-CT扫描、HE染色以及Masson染色,ELISA法检测,拔钉实验。结果 与Sham组对比,Micro-CT显示OVX组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N降低（P<0.05）,而Tb.Sp、SMI升高（P<0.05）,HE染色显示OVX组骨小梁数量明显降低。与Control组对比,Micro-CT显示TSA组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N 、Conn.D均升高（P<0.05）,而Tb.Sp、SMI降低（P<0.05）,HE染色、Masson染色显示TSA组骨小梁数量、新生骨数量均升高,ELISA法检测结果显示TSA组OCN、BMP2均升高,拔钉实验显示TSA组TI轴向拔出力增大。结论 TSA通过上调OCN、BMP2等成骨相关蛋白,促进骨小梁形成和新骨形成,进而改善去卵巢大鼠TI骨整合。     

甲状旁腺激素通过增加血管及骨的形成防治骨质疏松

目的探索甲状旁腺激素(PTH)对去势大鼠骨质疏松的防治作用。方法 30只健康雌性SD大鼠随机行假手术(Sham,N=10)和双侧卵巢(OVX,N=20)切除手术后,所有OVX组大鼠随机的分成2组:OVX组、PTH+OVX组。术后第一天开始给予药物治疗,PTH+OVX组:PTH皮下注射(剂量60μg/kg,每周3次),直至手术后12周为止,实验截止时间之前所有大鼠注射碘海醇后处死取股骨行Micro-CT检测。结果与OVX组比较,PTH+OVX组股骨远端有较高的BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N、Conn.D、血管体积分数和较低的Tb.Sp,其中Sham组大鼠股骨远端有最高的BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N、Conn.D、血管体积分数和最低Tb.Sp。结论甲状旁腺激素通过促进血管形成及骨量增加来防治去势大鼠骨质疏松。     

大黄素治疗对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用机制研究

目的探讨大黄素(emodin,DHS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及大黄素组(DHS),每组10只;其中DHS组大鼠接受大黄素[90 mg/(kg·d)]治疗12周;待治疗结束后使用Micro-CT、HE染色切片、骨代谢指标、以及蛋白质印迹观察治疗效果以及可能的机制。结果治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和HE染色切片结果显示DHS组的大鼠骨小梁数量和骨密度得到明显改善。DHS组大鼠BMD、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P<0.05)。与OVX组相比,DHS组的BALP水平明显升高(P<0.05);而TRACP-5b和β-CTX水平显著降低(P<0.05)。和OVX组比较,DHS组OPG表达水平上调(P<0.05),而RANKL和β2AR表达水平下调(P<0.05)。结论大黄素可以通过降低β2AR表达和激活OPG/RANKL信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用。     

熊果酸通过BMP-2/Smad4/Wnt/β-catenin信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用

目的 探讨熊果酸(XGS)对去卵巢大鼠骨量流失的影响,并探索可能的机制。方法 通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及熊果酸组(XGS),每组10只;其中XGS组大鼠接受熊果酸(100 mg/kg)治疗12周;待治疗检测股骨骨量、骨密度(BMD)、骨矿物质含量(BMC)、骨代谢指标以及BMP-2、Smad4、Wnt 1和 β-catenin表达。结果 治疗12周后,与OVX组相比,Micro-CT和双能X线结果显示XGS组的大鼠骨小梁微观参数、骨密度和骨矿物质含量得到明显改善。XGS组大鼠BMD、BMC、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较OVX组明显改善(P＜0.05)。血清检测结果和生物力学检测结果显示XGS组的最大载荷和弹性模量均高于OVX组(P＜0.05);XGS组大鼠血清ALP、OPD和OCN水平较OVX组明显降低,组间差异有统计学意义(P＜0.05)。WB检测显示,和OVX组比较,XGS组BMP-2、Smad4、Wnt1和β-catenin表达水平明显上调,比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 熊果酸可以通过BMP-2/Smad4/Wnt/β-catenin信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失保护作用。     

淫羊藿总黄酮调节骨代谢作用及药理机制的研究新进展

实验研究发现淫羊藿对不同类型骨质疏松大鼠模型均有骨代谢调节作用,临床研究亦发现采用淫羊藿治疗绝经后骨质疏松症也取得了明显的效果。其药理作用机制可能与降低破骨细胞内Ca2+浓度,影响成骨细胞增殖、分化、矿化;增加骨护骨素(OPG)mRNA的表达,提高成骨细胞Osterix基因表达水平,从而促进骨形成;通过升高人成骨细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA的表达,增加骨形态生成蛋白2的生成刺激人类成骨细胞的增殖和分化;通过抑制TNF-αmRNA和促进TGF-β1mRNA的表达促进转化生长因子(TGF)-β1的产生,抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,进而阻止骨髓基质中破骨细胞的生成,减少骨质丢失;淫羊藿总黄酮增加骨桥蛋白(OPN)mRNA和Ⅰ型胶原的表达促进骨的生成;淫羊藿苷可通过选择性上调下丘脑和海马ERα,ERβmRNA的表达,降低骨组织中IL-6的表达,从而减少骨吸收;淫羊藿总黄酮可通过抑制DKK1蛋白的表达,调控去势雌性大鼠BMSCs成骨和成脂分化平衡调节骨代谢;淫羊藿苷通过上调Cbfal、BMP2和BMP4mRNA的表达而促进成骨细胞的分化,诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化;淫羊藿总黄酮可显著改善雄性生殖系统和生殖内分泌功能,促进性腺的分泌,产生类雄激素样作用而促进成骨细胞的增殖与分化。笔者从多个层面对淫羊藿黄酮类成分抗骨质疏松作用机制进行阐述,提出今后在此研究基础上尚需进一步深入全面、系统的研究和阐述。