基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在动脉粥样硬化中的研究进展

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）是一类可降解细胞外基质的蛋白水解酶。其中,MMP-2和MMP-9与动脉粥样硬化的发生发展密切相关,在动脉粥样硬化相关疾病的诊断和预后中起重要作用。本文就MMP-2和MMP-9在动脉粥样硬化及其相关疾病中的最新研究进展作一综述,以期为动脉粥样硬化及其相关疾病的诊疗提供帮助。     

清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨清肺化痰通络方对博莱霉素A5（BLMA5）所致肺纤维化大鼠的干预作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组和干预组通过气管插管灌注BLMA5复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水气管灌注;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,干预组给予清肺化痰通络方药物灌胃。灌胃后3、7、14、28d分别处死大鼠,采用HE和Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9在肺组织的表达水平。结果清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况．减轻肺泡炎及肺纤维化的程度。干预组和模型组肺内MMP-2表达在第14天达到高峰,MMP-9的表达在第7天达到高峰,且两组同时期MMP-2、MMP-9的表达均高于对照组（P〈0．05）;干预组MMP-2、MMP-9表达低于同时期模型组（P〈0．01）。结论清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-2、MMP-9在肺内的表达,对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

基质金属蛋白酶2和9在寻常型银屑病中的表达及其意义

目的探讨寻常型银屑病中基质金属蛋白酶2、9（MMP-2,MMP-9）的表达水平及表达模式。方法用ABC免疫组化技术检测19例寻常型银屑病皮损、15例寻常型银屑病非皮损及15例正常人皮肤组织中MMP-2、MMP-9的表达水平及表达模式。结果MMP-2及MMP-9主要表达于表皮各层的角质形成细胞胞浆内。MMP-2及MMP-9在寻常型银屑病皮损表达阳性率分别为100％．72．100％,在寻常型银屑病非皮损表达阳性率分别为13．33％及25．00％,在正常皮肤表达阳性率分别为6．67％及0％。MMP-2及MMP-9在寻常型银屑病皮损、非皮损及正常皮肤组织中表达的阳性率的差异有非常显著的统计学意义（P〈O．01）。结论MMP-2及MMP～9的表达异常可能与寻常型银屑病的发病有关。     

基质金属蛋白酶2和9在实验性肝纤维化过程中的动态变化及表达

目的 :检测大鼠实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶 2(ＭＭＰ 2 )、基质金属蛋白酶 9(ＭＭＰ 9)在实验性肝纤维化发生发展过程中的表达量及动态变化 ,探讨ＭＭＰ 2、ＭＭＰ 9与肝纤维化的关系。方法 :用皮下注射ＣＣＬ4的方法复制大鼠化学性肝纤维化模型。于 4、8、12周末处死大鼠 ,模型组每次 7只 ,对照组每次 5只。肝组织病理检查用ＨＥ染色及胶原纤维特殊染色。免疫组织化学染色采用ＳＰ法 ,以肝脏细胞胞浆内有棕色颗粒为阳性。每张切片选取四周及中央 5个区域 ,取该区域中阳性反应最多的视野 ,10倍物镜下测定阳性反应面积比 (阳性面积 /…     

基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2在子宫剖宫产疤痕中的表达和相关性

目的研究基质金属蛋白酶9(MMPs-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2(TIMP-1,2)在子宫剖宫产疤痕愈合中的影响。方法收集2009年8月~2011年11月在我院收治的有严重并发症的疤痕子宫妊娠病人22例(子宫剖宫产疤痕早期8例妊娠(CSP)、因胎盘粘连或植入而行子宫切除术的疤痕子宫足月妊娠病例14例);选择同期孕期检查正常无并发症疤痕子宫足月妊娠病人38例作为对照1组;同期孕期检查正常、无任何并发症因社会因素要求剖宫产的足月妊娠病人32例作为对照2组。采用免疫组织化学EnVision二步法检测3组中MMPs-9和TIMP-1,2的表达,并对其表达进行相关性分析。结果 MMPs-9、TIMP-1在3组间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。TIMP-2在3组间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman等级相关分析显示,在疤痕组织中MMPs-9的表达随疤痕愈合不良呈正相关,相关系数分别是0.309、0.643。随着疤痕愈合不良程度加重,MMPs-9的表达逐渐增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论子宫疤痕愈合不良、CSP可能和损伤修复中MMPs-9、TIMP-1的表达失衡有关。     

白藜芦醇对纤维蛋白上调大鼠脑血管内皮细胞基质金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察白藜芦醇(resveratrol,Res)对纤维蛋白诱导的体外大鼠脑血管内皮细胞基质金属蛋白酶 9(ma-trix metalloproteinases9,MMP9)高表达的影响.方法 将大鼠脑血管内皮细胞分离后培养,培养液中加入1.0 mg/ml纤维蛋白和不同浓度的白藜芦醇,通过 RT-PCR 检测脑血管内皮细胞中 MMP9 转录水平,应用明胶酶谱法(gelatin zy-mography)定量检测培养液中的 MMP9 水平.结果 加入不同浓度(0、1、5、10、25和50μmol/L)的白藜芦醇 24 h后,25μmol/L和50μtmol/L 白藜芦醇组的培养液中 MMP9 水平显著降低(P<0.01);RT-PCR 结果显示,25μmol/L 和 50/μmol/L 白藜芦醇组的大鼠脑血管内皮细胞中的 MMP9 显著下调(P0.01).结论 白藜芦醇通过降低纤维蛋白导致的大鼠脑血管内皮细胞中 MMP9 的表达,在神经系统炎性病变中发挥抑制性保护作用.     

阿霉素肾病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在阿霉素肾病大鼠中的表达和意义。方法 25只Sprague-Dawlay(SD)雄性大鼠,随机分为对照组10只和观察组15只,观察组尾静脉内一次性注射阿霉素7.5 mg.kg-1(以生理盐水稀释至3 mL),对照组尾静脉内一次性注射等量生理盐水,对照组和观察组每日1次按10 mL.kg-1给予生理盐水灌胃,灌胃共8周。采用反转录聚合酶链式反应法检测肾组织MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果实验8周时与对照组比较,观察组的24 h尿蛋白定量、肌酐和尿素氮水平均显著上升(P<0.01),血白蛋白显著降低(P<0.01)。对照组大鼠肾皮质区肾小球毛细血管襻开放较好,无细胞外基质(ECM)聚集;观察组大鼠肾组织可见部分毛细血管腔变窄甚至完全闭塞,肾小囊扩张,囊壁增厚,球囊粘连。观察组MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达较对照组明显下降(P<0.01),观察组中MMP-2/TIMP-2 mRNA半定量比值较对照组明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2和TIMP-2在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中起到重要的作用;MMP-2/TIMP-2的比值失调使肾小球ECM降解减少,导致ECM过度积聚,参与肾小球硬化的发生发展。     

基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9在卵巢癌中表达及对肿瘤侵袭能力的影响

目的：分析基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢癌中的表达及对肿瘤侵袭能力的影响。方法：分别选取正常卵巢组织35例、卵巢良性肿瘤45例以及卵巢癌60例;选择免疫组化SABC三步法对MMP-2表达、MMP-9表达进行检测。结果：MMP-2及MMP-9一般在细胞浆内表达,表现为棕黄色或者明显黄色颗粒;卵巢癌组中的MMP-2阳性表达、MMP-9阳性表达均明显高于正常组、卵巢良性组(P<0.05);而正常组中的MMP-2阳性表达、MMP-9阳性表达与卵巢良性组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MMP-2、MMP-9表达与卵巢癌患者的临床分期存在显著相关性(P<0.05),与肿瘤直径、糖类抗原-125(Ca-125)值、组织分化、病理类型、年龄无关(P>0.05)。结论：在卵巢癌中MMP-2、MMP-9表现为高表达,对MMP-2、MMP-9表达进行早期联合筛查,不但能判断病情演变情况,而且还能评估患者预后。     

银屑病患者基质金属蛋白酶-2与基质金属蛋白酶-9的检测价值

目的:探讨银屑病患者血清和皮肤中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的临床意义。方法:寻常型银屑病患者22例,健康对照组15例。采用ELISA法检测两组血清MMP-2、MMP-9,皮肤MMP-2、MMP-9表达,采用免疫组化ABC法。结果:银屑病患者血清、皮肤中MMP-2、TIMP-9表达水平显著高于健康对照组(P0.05)。结论:MMP-2、MMP-9增高可能是银屑病的发病机制之一。     

MMP2和MMP9在HepG2肝癌细胞系及HCC组织中表达的比较研究

目的分析MMP2和MMP9在HepG2细胞系及肝细胞癌(HCC)组织中的表达,探讨不同的基质金属蛋白酶(MMPs)与肝细胞癌侵袭转移的特异相关性。方法免疫细胞化学检测HepG2细胞系中MMP2和MMP9的表达,免疫组织化学检测38例HCC肝癌组织中MMP2和MMP9的表达。结果MMP9在HepG2细胞系的表达高于MMP2的表达。MMP9和MMP2在HCC组织中均有所表达,但MMP9的表达率84.2%(32/38)明显高于MMP2的表达52.6%(20/38),二者有显著差异(P<0.05)。结论MMP2、MMP9的表达在体内外呈现出一致性,即MMP9在体内外的表达均高于MMP2,推测可能MMP9与HCC的侵袭转移关系更为密切。     

黑色素瘤细胞系基质金属蛋白酶9的表达与转移能力的研究

目的探讨三种不同的黑色素瘤细胞系的基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达情况与它们的侵袭转移潜能。方法黑色素瘤细胞系（WM35、WM983 a、WM451）,经细胞培养,利用western blot方法检测以上各细胞系MMP9表达情况,并利用细胞黏附实验和划痕实验检测各细胞系的转移能力。结果转移能力相对较高的细胞系WM451和WM983 a MMP9表达量、划痕愈合能力和黏附性明显高于WM35细胞系;WM451的MMP9表达高于WM983 a,但二者之间在划痕愈合及黏附性上无明显差异。结论黑色素肿瘤细胞系的侵袭转移潜能与其产生MMPs的能力密切相关。     

Id2和 MMP9的表达及其与食管鳞癌的临床病理特征关系研究

目的：观察细胞分化/DNA 结合抑制因子2(Id2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在食管鳞癌组织中的表达,探讨 Id2和 MMP9表达的意义及相关性。方法应用免疫组织化学方法检测70例食管鳞癌和30例正常食管上皮中 Id2和 MMP9的表达水平。结果食管鳞癌中 Id2和 MMP9的阳性表达率均显著高于正常食管上皮(P <0.01);Id2和 MMP9的表达水平均随食管鳞癌的浸润加深、临床 TNM 分期级别增高而升高,浸润深度在 T3+T4组的表达水平高于 T1+T2组(P <0.05),临床Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期的表达水平高于Ⅰ期(P <0.05),但 Id2和 MMP9的表达均与食管鳞癌的分化程度无显著相关(P >0.05)。淋巴结转移组中 MMP9的表达水平高于无淋巴结转移组(P <0.05);而 Id2的表达与淋巴结转移无显著相关(P >0.05);食管鳞癌组织中 Id2和 MMP9的表达水平呈正相关关系(P <0.05)。结论Id2和 MMP9在食管鳞癌的发生和浸润进展中存在协同促进作用,同时检测对于评估食管鳞癌的生物学行为和预后有重要意义。     

EP1受体介导PGE2对胆管细胞癌HuCCT1细胞MMP2表达和活性的影响

目的:探讨前列腺素E2(PGE2)对人胆管细胞癌HuCCT1细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达与酶活性的影响及与EP1受体的关系。方法:分别用PGE2、EP1受体激动剂或抑制剂、蛋白激酶C(PKC)抑制剂和钙离子螯合剂处理HuCCT1细胞,通过RT-PCR、明胶酶谱法检测MMP2的mRNA水平以及MMP2酶活性。结果:5μmol/L PGE2和5μmol/L EP1受体激动剂17-PT-PGE2处理组MMP2 mRNA的表达水平与对照组相比分别上升了89.14%(P<0.01)和163.89%(P<0.01);MMP2酶活性与对照组相比分别增强了69.11%(P<0.05)和117.65%(P<0.01);10μmol/L EP1受体抑制剂sc-51322处理后,MMP2 mRNA水平以及MMP2酶活性较PGE2处理组分别下降了47.74%(P<0.05)、84.58%(P<0.01);5μmol/L PGE2或5μmol/L 17-PT-PGE2处理稳定转染EP1R-pcDNA3的人胚肾细胞株HEK293细胞,MMP2的酶活性较对照组分别增强了36.07%(P<0.05)、61.59%(P<0.05)。...     

Notch信号通路经ROCK2对缺氧/复氧诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响

目的探讨Notch信号通路经ROCK2对大鼠心肌细胞缺氧/复氧诱导H9c2心肌细胞的凋亡影响。方法选择SD大鼠乳鼠180只,分为6组,检测Hes1的表达、心肌细胞活力、心肌细胞乳酸脱氢酶释放情况、心肌细胞凋亡情况以及NICD、Bcl2、Caspase3以及Hes1表达水平。结果 SI/R组OD值相比对照组明显下降(P0.05);Jagged1+SI/R组与SI/R组、对照组对比,存在明显差异(P0.05);Jagged+DAPT+SI/R组OD值与Jagged1+SI/R组对比,存在明显差异(P0.05);Jagged1组、DAPT组OD值与对照组对比,均未见显著差异(P0.05)。SI/R组、Jagged1+SI/R组、Jagged+DAPT+SI/R组的LDH释放率、细胞凋亡率相比对照组均有明显上升(P0.05);SI/R组、Jagged1+SI/R组、Jagged+DAPT+SI/R组经处理后的Notch1、Hes1、Bcl2均有显著下降,而Caspase3表达显著上升(P0.05)。结论 Notch信号通路在心肌缺血/再灌注的过程中发挥着重要调控作用,对诱导H9c2心肌细胞凋亡具有重要影响,且激活Notch信号通路能起到抗缺血/再灌注损伤的效果。     

乳腺癌患者MMP9和C-erbB-2的表达及意义

目的:探讨乳腺癌患者MMP9和C-erbB-2的表达与转移的之间的关系.方法:应用免疫组化法对48例乳腺癌患者MMP9和C-erbB-2阳性者进行检验分析.结果:48例中MMP9阳性过表达有34例,C-erbB-2阳性过表达31例,两者均阳性表达者26例.淋巴结转移中MMP9阳性过表达有17例(85%),C-erbB-2阳性过表达18例(90%),两者表达与转移密切相关.结论:在乳腺癌患者中MMP9和C-erbB-2表达提示转移几率增加,可以作为乳腺癌的预后指标.     

电针刺激对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围皮质ROCK1与ROCK2表达的影响

目的 观察电针刺激对局灶性脑梗死大鼠神经功能及梗死灶周围皮质ROCK1和ROCK2表达的影响,初步探讨其对大脑缺血组织的保护机制。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针穴位组,每组10只。用改良Longa法制作大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,在大鼠麻醉苏醒后90 min对电针穴位组大鼠进行电针刺激,每天1次,连续14 d。分别在术后1、3、7、14 d时对各组大鼠进行改良神经功能缺损评分（mNSS）。术后14 d时,用免疫组化和蛋白质印迹法检测缺血侧大脑皮质中ROCK1、ROCK2蛋白的表达情况。结果 正常组和假手术组未出现神经功能缺损表现。术后7、14 d,电针穴位组mNSS评分较模型组下降（P<0.05）。免疫组化和免疫印迹结果显示,模型组ROCK1和ROCK2蛋白表达上调,电针穴位组ROCK1和ROCK2蛋白表达较模型组减少（P<0.05）。结论 电针刺激促进局灶性脑梗死后大鼠神经功能恢复,可能与其下调ROCK1和ROCK2蛋白表达有关。     

ROCK2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的 研究Rho相关的蛋白激酶2(ROCK2)在食管鳞癌组织中的表达水平及其临床意义.方法 收集1990至2001年间在中国医学科学院肿瘤医院接受手术治疗的原发食管癌病例,免疫组织化学方法检测了组织芯片中118例食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常食管黏膜中ROCK2的表达水平.将病例按年龄、性别、肿瘤部位、吸烟与否、分化程度、T分期、淋巴结转移及TNM分期进行分组,比较不同组别中ROCK2表达水平的差异.结果 ROCK2在118例食管鳞癌组织中的高表达率为45.76%(54/118).在年龄＜61岁组,ROCK2高表达率为55.74%(34/61),高于年龄＞6l岁组的35.09%(20/57),两者差异具有统计学意义(x2=5.062,P=0.024).高分化病例组中ROCK2高表达率为58.70%(27/46),高于中、低分化病例组的37.50%(27/22),差异具有统计学意义(x2=5.080,P=0.024).结论 ROCK2在食管鳞癌组织中的表达升高与发病年龄及肿瘤的分化程度相关.

Abstract：

Objective To investigate the expression and relationship of Rho-associated protein kinase 2 (ROCK2) and clinical characteristics in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Methods Immunohistochemistry was performed to assay the expression of ROCK2 in tumor tissues and adjacent normal epithelium from 118 ESCC patients in tissue microarray. The relationship between ROCK2 level and clinicopathologic profiles such as age, gender, location, smoking, differentiation degree, T stage, lymph node metastasis and TNM stage were analyzed. Results The ROCK2 expression was up-regulated in 54 of 118 (45. 76% ) ESCC tissues. The up-regulated expression of ROCK2 was observed in 55.74% (34/61) ESCC tissues of patients under 61 years old. And it was significantly higher than that in 35.09% (20/57) of patients over 61 years old ( x2 = 5.062, P = 0. 024 ). In addition, the rate of up-regulation of ROCK2 was significantly higher in high-grade differentiation group (58. 70%, 27/46 ) than that in moderate-grade and low-grade differentiation group ( 37.50%, 27/72 ) ( x2 = 5.080, P = 0. 024 ). Conclusion The upregulated expression of ROCK2 is correlated with patient age and differentiation grade of ESCC.     

EphA2对结肠癌细胞株HCT116中VEGF和MMP9蛋白表达的影响

目的:探讨EphA2对结肠癌细胞株HCT116中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases 9, MMP9)蛋白表达的影响.方法:用Western 印迹验证选择高表达EphA2蛋白的结肠癌细胞株HCT116;脂质体转染法将EphA2反义寡核苷酸瞬时转染入HCT116细胞,Western 印迹检测反义寡核苷酸转染效率后, ELISA检测转染前后细胞上清液中VEGF蛋白的表达;明胶酶谱分析法检测转染前后细胞上清液中明胶酶的分泌.结果:EphA2 反义寡核苷酸成功抑制了EphA2总蛋白的表达, 降低了VEGF蛋白和MMP9蛋白的表达.结论:EphA2 反义寡核苷酸通过降低结肠癌细胞株HCT116中VEGF,MMP9蛋白的表达来抑制结肠癌细胞株HCT116的侵袭和转移.     

大肠腺癌中HSP27和MMP9的表达及意义

目的观察大肠腺癌中HSP27和MMP9的表达情况。方法选择手术切除结直肠腺癌标本62例,并取20例癌旁正常大肠黏膜组织标本作对照,采用SP免疫组化方法检测HSP27和MMP9的表达。观察大肠腺癌组和对照组中HSP27、MMP9的表达;大肠腺癌组中年龄、性别、肿瘤直径、组织学类型、淋巴结转移以及Dukes分期与HSP27、MMP9表达的关系。结果大肠腺癌组的HSP27、MMP9表达均显著高于对照组(P<0.01)。在中低分化腺癌和存在淋巴结转移患者的HSP27、MMP9表达显著高于高分化和无淋巴结转者(P<0.05或0.01);HSP27与MMP9在大肠腺癌中的表达无显著性差异(P>0.05)。结论 HSP27和MMP9在大肠腺癌的发生、分化、浸润、转移中起协同作用。