DNA甲基转移酶及DNA去甲基化酶在心血管疾病中的作用

<正>随着我国人口老龄化趋势发展,动脉粥样硬化、高血压、心力衰竭等心血管疾病的发病率呈上升的趋势,近年来心血管疾病发生、发展的表观遗传学机制受到了关注。表观遗传学是指与基因表达调控系统有关的现象,但不涉及DNA序列的变化或拷贝数的变化。表观遗传学现象包括DNA甲基化、翻译后组蛋白修饰以及非编码RNA(NcRNA),其中DNA甲基化是最重要而稳定的表观遗传修饰。     

DNA甲基转移酶1和CD11a基因在SLE患者中的表达

目的检测SLE患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中DNA甲基转移酶1(DNA methylatransferase1,DNMT1)和CD11a基因的表达水平,探讨DNMT1表达异常在SLE发病中的作用。方法提取8例SLE患者及12例正常人外周血单核细胞,以RT-PCR法检测DNMT1和CD11a基因的转录水平,采用两样本均数t检验比较分析SLE患者与正常人之间DNMT1与CD11a基因表达的差异;统计分析两种基因表达的相关性。结果正常人PBMC中DNMT1表达的均值为0.289±0.092,CD11a基因表达的均值为0.430±0.143;SLE患者PBMC中DNMT1表达均值为0.167±0.046,CD11a表达均值为0.875±0.331。SLE患者PBMC中DN-MT1表达水平明显低于正常人(T=3.479,P=0.003);CD11a基因表达水平明显高于正常人(T=4.196,P=0.001)。在正常人PBMC中,DNMT1与CD11a基因的表达没有相关性;在SLE患者PBMC中DNMT1与CD11a基因表达呈负相关性(r=-0.714 53,P=0.046 4),DNMT1表达下降与CD11a表达增加有相关性。结论SLE患者PBMC中DNMT1表达降低可能是造成DNA低甲基化的一个重要原因,因而与CD11a基因的过度表达有重要关系,进而导致SLE的发病。因此可以推测DNMT1可能是SLE发病机制中一个重要的内源性因素。     

DNA甲基转移酶1在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨DNA甲基转移酶1(DNMTl)在胃癌中的表达及其与胃癌临床分期、分化程度及淋巴结转移等的关系。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例原发性胃癌患者癌组织及癌旁正常组织中DNMT1 mRNA的表达,采用免疫组级化学方法检测DNMT1蛋白的表达情况。结果正常组织和胃癌组织中均表达DNMT1 mRNA,胃癌组织中的相对含量为0.76±0.11,显著高于正常组织的0.45±0.14(P<0.05)。高、中分化胃癌组织中的DNMT1 mRNA相对含量为0.58±0.14,显著低于低、未分化胃癌组织的0.94±0.16(P<0.05)。不同性别、有无淋巴结转移、不同临床分期、不同肿瘤大小的胃癌组织间DNMT1 mRNA相对含量的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。胃癌组织的DNMT1蛋白的表达程度显著高于正常组织(x~2= 7.760,P<0.01)。细胞分化程度低的癌组织DNMT1蛋白表达程度显著高于分化程度高的癌组织(x~2=4.500,P<0.05)。不同性别、有无淋巴结转移、不同临床分期、不同肿瘤大小的胃癌组织间DNMT1蛋白表达程度的差异均无统计学意义(x~2=0.09、1.270、1.830、0.30,P值均>0.05)。结论DNMT1的高表达是胃癌发生过程中的早期分子事件,是胃癌早期诊断及治疗的重要靶点。     

宫颈癌组织中DNA甲基转移酶1 mRNA的表达

目的:探讨DNA甲基转移酶1(DNMTI)在宫颈癌发生发展中的作用.方法:应用原位杂交技术检测52例宫颈癌、60例宫颈上皮内瘤变和20例正常宫颈组织DNMT1 mRNA的表达;分析DNMT1 mRNA的表达和宫颈癌患者临床病理指标的关系.结果:正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中DNMT1 mRNA的阳性率分别为10.0%(2/20)、63.3%(38/60)和78.8%(41/52),呈升高趋势(χ2=29.057,P<0.05),宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织DNMT1 mRNA的阳性率高于正常组织.不同宫颈癌的病理类型、临床分期、组织学分级及有无淋巴结转移组间DNMT1 mRNA阳性率差异无统计学意义.结论:DNMT1参与了宫颈癌的发生,并在宫颈上皮内瘤变时就已经起了重要作用.     

宫颈癌组织中DNA甲基转移酶1、3A和3B mRNA的表达

目的探讨DNA甲基转移酶1、3A和3B在宫颈癌发生发展中的作用。方法应用real-time PCR技术检测10例宫颈癌、10例宫颈上皮内瘤变和10例正常宫颈组织DNMT1、3A和3BmRNA的表达。结果宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 1mRNA对GAPDH mRNA的相对丰度值分别是0.30±0.1、0.26±0.12和0.10±0.04,宫颈癌组织组织中与正常宫颈中DNMT 1表达有显著差异（P〈0.05）;宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT3A mRNA对GAPDH mRNA的相对丰度值分别是0.94±0.27、0.51±0.24和0.13±0.04,三组相比较有显著性差异（P〈0.05）;宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 3B mRNA对GAPDH mR-NA的相对丰度值分别是0.30±0.09、0.28±0.11和0.11±0.04,宫颈癌组织组织中与正常宫颈中DNMT 3B表达有显著差异（P〈0.05）。结论 DNMT1、3A和3B参与了宫颈癌的发生,并在宫颈上皮内瘤变时就已经起了一定作用。     

DNA甲基转移酶3B在异常发育中作用的研究进展

正常的DNA甲基化模式对于哺乳动物细胞的生长和发育至关重要,其通过基因沉默、印迹清除和重建、X染色体失活等作用于胚胎发育期在细胞内建立特异的DNA甲基化模式,这种模式在胚胎发育和细胞增殖过程中能稳定传递,影响个体整个生长、发育过程。DNA甲基转移酶3B(DNA methyltransfe     

人DNA甲基转移酶家族与肿瘤发生发展关系的研究进展

DNA甲基化是由DNA甲基转移酶催化完成的,在高等真核生物中只发现了DNA-C5胞嘧啶的甲基化形式。在DNA甲基化过程中,胞嘧啶从DNA双螺旋中突出,进入与酶结合部位的裂隙,并通过DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DN-MT),把活性甲基从S-腺苷蛋氨酸(SAM)转移至C5胞嘧啶位上,形成5-     

杆状病毒介导的靶向DNA甲基转移酶1 siRNA表达载体的构建

目的:构建携带DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)RNAi基因的重组杆状病毒载体,以进一步研究DNMT1对胰腺癌相关基因的影响方法:首先将带有BglⅡ和Hind Ⅲ酶切黏性末端的60 bp正义和反义寡核苷酸退火,与用BglⅡ和Hind Ⅲ双酶切后的线性化载体pSUPER连接构...     

白花丹醌对白血病细胞DNA甲基转移酶的作用

目的 探讨中草药提取物白花丹醌对人白血病细胞系HL-60甲基化的影响,并对其相关机制做初步研究。方法MTS法确定不影响细胞生长的白花丹醌研究浓度;白花丹醌研究浓度作用于HL-60细胞不同时间,ELISA法测定其甲基化水平和DNA甲基转移酶(DNMT)活性;实时荧光定量PCR,评估DNMT酶类基因mRNA表达水平。结果 选定白花丹醌0.8μmol/L作为研究浓度,作用18h后,和对照组比较出现甲基化水平显著下降（P<0.05）, 经活性氧（ROS）阻滞剂的预处理,白花丹醌去甲基化作用被明显抑制,使得预处理组与对照组甲基化水平无明显统计学差异[(2.11±0.16)ng 对比(2.27±0.21)ng（P>0.05）];白花丹醌作用HL-60细胞12h后,出现DNMT酶总体活性的下降[（0.91±0.11）OD/h/μg对比对照组（1.24±0.91）OD/h/μg （P<0.05）],作用24h后下降更明显（P<0.01）;白花丹醌对DNMT1,DNMT3b基因的表达具有明显抑制作用（P<0.05）,对DNMT3a基因表达的作用无统计学意义。结论 低浓度白花丹醌以ROS为重要介质,能够诱导白血病细胞去甲基化,这种作用与抑制DNMT活性,抑制DNMT1和DNMT3b基因的表达有关。     

Histopathological changes in rat liver in hyper-and hypothyroidism are associated with DNA methyltransferase activity

【Objective】 There is evidence that thyroid hormones(TH) could affect on collagen development.Also there is some data that methylation play a significant role in fibrogenesis.That’s why the aim of the article was to find out if such pathomorphological changes in liver as fibrosis that were caused by TH could be associated with the changes of DNA methyltransferase activity.【Methods】 Experimental study was presented on 89 mature white rats.3 experimental groups were performed: 1-experimental hyperthyroidism,2-experimental hypothyroidism,3-control group.The thyroid profile for T3,T4,TTH and profile activity for DNA methyltransferase(DNMT) were determined.The weight of liver was examined.Microscopy and morphometry were performed.【Results】 In experimental hyperthyroidism and hypothyroidism the respective changes in TH concentrations occur with a normal level of TTH.It was revealed gender differences in TH levels under impaired thyroid status.In hypothyroidism a decrease of TH concentration occurs in females and males,but it is more expressed in males.In hyperthyroidism the increased concentrations of TH is observed in all rodents,but it is more significant in males.The weight of liver gain in hyperthyroid rodents and decreased of liver weight in hypothyroid rats.In experimentally hyperthyroidism the pathomorphological changed in liver were characterized as an acute vascular insufficiency,hypertension,inflammation,toxic effects of hormones,an initial stage of hepatitis with a high activity,traces of old hemorrhage and a marked fibrosis in the liver.Hypothyroidism also effects on the liver with the signs of acute vascular insufficiency,hypoxia,toxic effects of hormones,necrosis and mild fibrotic changes in the liver tissue.The enzymatic activity of DNMT was increased both in hyperthyroidism and in hypothyroidism.【Conclusions】 From results that were’ve obtained we could conclude that persistent shifts of TH cause pathomorphological changes in the liver.They were more expressed in hyperthyroidism.The significant correlation between the DNMT activity and fibrosis in hyperthyroidism was found out.     

皮肤老化分子机制及中药防治皮肤老化研究进展

衰老又称老化,皮肤作为人体最大的器官,其老化是人体衰老最直接具体的表现.皮肤衰老是内源性因素和外源性因素共同作用的结果,主要包括自然老化和光老化.两者在临床和组织学上存在明显差异,但具有相似的分子机制.中药具有安全可靠、不良反应小等特点,在防治皮肤老化方面有着积极的作用.本文重点综述了皮肤光老化的分子机制,总结了光老化...     

DNA甲基转移酶1基因在人肝外胆管癌组织和细胞中的表达及意义

目的:研究DNA甲基转移酶1(DNMT1)在人肝外胆管癌组织和人胆管癌细胞系QBC939中的表达,并分析DNMT1的表达与胆管癌临床病理因素之间的关系,探讨其在胆管癌发生发展过程中的作用.方法:用免疫组织化学法检测DNMT1在24例人肝外胆管癌组织和20例慢性胆管炎组织中的阳性细胞表达率,将二者进行对比并分析其与胆管癌...     

中药延缓皮肤老化作用的研究进展

皮肤老化分为两种,一种是由于遗传因素和不可抗力因素（如重力,机体内分泌及免疫功能随机体衰老的改变）引起的,称为固有性老化,或称自然老化;一种是由环境因素如紫外线、吸烟和接触化学物质等引起的外源性老化。日光中紫外线长期反复的照射是环境中影响皮肤老化的最重要因素,又称光老化。     

Screening of substrates of protein arginine methyltransferase 1 in glioma

To screen the asymmetric dimethyl arginines (ADMA)-containing proteins which could combine with protein arginine methyltransferase 1 (PRMT1).Methods Western blot was adopted to identify the expression...     

子宫内膜癌中DNA甲基转移酶3B的表达特点与临床意义

目的：探讨子宫内膜癌中DNA甲基转移酶3B（DNA methyltransferase 3B, DNMT3B）的表达特点、与雌激素受体（estrogen receptor,ER）和孕激素受体（progesterone receptor,PR）的相关性及意义。方法：免疫组织化学法检测DNMT3B、ER、PR在104例子宫内膜癌组织中的表达并与临床病理特点及预后相对照。结果：104例子宫内膜癌组织中DNMT3B阳性率为50%,Ⅰ型内膜癌（内膜样癌）中DNMT3B过表达率（54.8%）显著高于Ⅱ型内膜癌（30.0%,P=0.028）,且Ⅰ型内膜癌中,随肿瘤分化变差,DNMT3B阳性率增加（1级、2级、3级分别为43.3%、51.3%、86.7%）,差异有统计学意义（P=0.019）。DNMT3B在肌层侵犯程度重、存在脉管癌栓、淋巴结转移及分期晚的病例中过表达率更高,DNMT3B过表达的患者组预后更差,但差异未见统计学意义（P>0.05）。Ⅰ型内膜癌DNMT3B与ER、PR表达呈负相关,ER、PR阴性组DNMT3B过表达率（78.9%、86.7%）高于ER、PR阳性组DNMT3B过表达率（47.7%、47.8%）,差异有统计学意义（P=0.016,P=0.006）;ER、PR均阴性时,DNMT3B过表达率最高（92.9%）,差异有统计学意义（P=0.002）。Ⅱ型内膜癌中DNMT3B与ER、PR表达未见相关性（P>0.05）。序列分析显示,DNMT3B基因启动子区有多个ER、PR结合位点。结论：内膜样癌与非内膜样癌中DNMT3B表达特点不同,DNMT3B过表达有可能作为预后或预测因子而辅助病理诊断和生物学行为评估。Ⅰ/Ⅱ型子宫内膜癌的甲基化特点可能不同,Ⅰ型内膜癌中DNMT3B过表达与ER、PR表达呈负相关,Ⅱ型内膜癌中DNMT3B表达与ER、PR表达关系不大。     

人参皂甙抗皮肤衰老作用实验研究

目的：观察人参皂甙内服抗皮肤衰老作用。方法：昆明种小鼠每日颈背部皮下注注射D－半乳糖（1000mg/kg)造成小鼠衰老模型，同时灌胃人参皂甙100，50mg/(kg.d)，42d后，测定小鼠背部皮肤组织均浆中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化脂质代谢产物丙二醛（MDA）及皮肤羟脯氨酸含量，并测定全血中过氧化氢酶（CAT），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性。结果：人参皂甙（100mg/kg.d^-1)使D－半乳糖所致的衰老模型小鼠皮肤中SOD活力，羟脯氨酸含量明显升高，MDA含量显著降低，血中CAT，GSH－Px活力显著升高，差异均有显著性，而人参皂甙（50mg/kg.d^-1)组则上述作用不明显，结论：人参皂甙（100mg/kg.d^-1)灌胃对D－半乳糖所致衰老小鼠皮肤有明显的抗衰老作用。