循环microRNA-1268在肺癌血浆中检测分析及临床意义

目的:探讨循环microRNA-1268(miRNA-1268)在肺癌血浆中的表达情况,并分析其与临床病理特征的相关性及其在肺癌诊断及预后判断中的意义.方法:采用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-1268在39例肺癌患者和作为对照组的39例正常人血浆中的相对表达量,并评估其临床意义.结果:肺癌血浆中miRNA-1268的表达水平明显高于正常人,差异有统计学意义;血浆循环miRNA-1268相对表达量ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.680,95%CI为0.562-0.799,取临界值0.054时,血浆miRNA-1268表达诊断肺癌的灵敏度为74.4%,特异度为59.0%;miRNA-1268的表达水平与肿瘤TNM分期相关,而与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤大小、淋巴结转移、组织分型、CEA水平无相关性;Kaplan-Meier分析结果显示肺癌血浆中miR-1268高表达者生存时间明显低于低表达者,差异有统计学意义.结论:循环miRNA-1268在肺癌血浆中表达上调,对肺癌有一定的临床诊断及预后判断意义,可作为诊断肺癌和判断预后的一个新的标志物.     

循环microRNA-122a和microRNA-6086在肝癌诊断及预后中的作用

目的:检测肝癌患者血清中miR-122a、miR-6086含量,研究其在肝癌诊断及预后中的作用.方法:采用real-time PCR方法进一步检测血清中miR-122a和miR-6086的表达水平.结果:观察组血清中miRNA-122a的相对含量低于对照组;miR-6086的含量高于对照组,差异均有统计学意义;统计分析发现,在不同年龄、分期、分型、肿瘤大小及AFP水平、肝功能等,患者间相对表达量差异均无统计学意义;MiRNA-122a的AUC面积为0.842,大于miRNA-6086的0.782 AUC面积,且对原发性肝癌的诊断的敏感性高于miRNA-6086,特异度无明显区别;MiRNA-6086的表达量越高患者的生存时间越短,相反表达量越低生存时间越长;miRNA-122a的表达量较正常人下调,但是其生存曲线上低表达量生存时间长于高表达的生存时间.结论:MiRNA-6086、miRNA-122a的表达水平较正常人有显著差异,可以作为肝癌诊断及预后的新指标.     

结直肠癌患者血清miR-92a-1表达水平及其诊断意义

  目的  检测结直肠癌患者血清miR-92a-1表达水平并分析其临床意义,探究miR-92a-1单独或联合CEA,CA-199检测对结直肠癌的诊断价值。   方法  连续收集2018年5月—2019年12月河南省人民医院收治的131例结直肠癌患者、50例结直肠腺瘤患者及50例健康受试者血清,分别采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)和电化学发光(electrochemiluminescence,ECLIA)法检测并比较3组研究对象血清miR-92a-1、CEA和CA199的表达水平,分析血清miR-92a-1与结直肠癌患者临床病理特征的关系,构建受试者工作特征曲线(receiver operating curves,ROC),分析miR-92a-1及其联合使用CEA,CA-199检测对结直肠癌的诊断价值。   结果  血清miR-92a-1、CEA及CA-199在结直肠癌患者中的表达水平显著高于结直肠腺瘤患者和健康对照者,差异有统计学意义(均P < 0.05);结直肠癌患者血清miR-92a-1表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关(均P < 0.05),而与性别、年龄、肿瘤直径、发病部位无关(均P>0.05);miR-92a-1诊断结直肠癌的曲线下面积(area under ROC curve,AUC)为0.875(95% CI:0.833~0.918),诊断敏感性为72.5%,特异性为86%,miR-92a-1联合CEA、CA-199检测诊断结直肠癌的AUC为0.904(95% CI:0.865~0.943),诊断敏感性为80.2%,特异性为91%。   结论  miR-92a-1在结直肠癌中高表达并与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移相关,miR-92a-1联合常规肿瘤标志物检测对结直肠癌有较高的诊断价值。      

纳米磁分离实时荧光RT-PCR检测食管鳞状细胞癌患者血清miR-21表达的价值?

目的：建立食管鳞状细胞癌( ESCC)患者血清中miR-21纳米磁分离( MS)实时荧光RT-PCR检测方法,观察ESCC患者血清miR-21的表达。方法分别采用Trizol法和MS法提取60例ESCC患者及60例健康体检者血清总RNA,采用实时荧光RT-PCR检测miR-21的表达。利用Bland-Altman法检验Trizol法与MS法提取的血清中miR-21表达量的一致性,利用ROC曲线评价MS法提取的miR-21表达量筛查ESCC的效能。结果 MS法能够提取血清中miR-21,其灵敏度与Trizol方法相当,Bland-Altman法检验结果显示两种方法提取的miR-21表达量具有很好的一致性。 ESCC患者miR-21表达量明显高于健康体检者( P<0．05)。 ROC曲线下面积为0．878,最佳临界值为1．115,此时敏感度为85．00%,特异度为81．67%。 ESCC患者血清miR-21的表达与TNM分期以及淋巴结转移情况相关( P<0．05)。结论 MS实时荧光RT-PCR在血清miRNA检测中有着很大的应用价值,血清miR-21的表达水平有可能作为食管癌诊断一个新的分子生物学指标。     

结直肠癌患者血清miRNA-767-3p水平及其诊断意义

 目的   探讨微miRNA-767-3p水平对结直肠癌的诊断价值。方法   采用实时定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCT)技术,检测结直肠癌患者、结直肠腺瘤患者和健康对照者的血清miRNA-767-3p水平;采用化学发光免疫分析(chemiluminescent immunoassay,CLIA)方法,检测以上3组人群血清癌胚抗原(carcino embryonic antigen,CEA)浓度;构建受试者工作特征曲线(receiver operating curves,ROC),比较miRNA-767-3p及其联合使用CEA对结直肠癌的诊断效果。结果   miRNA-767-3p水平在结直肠癌组、结直肠腺瘤和健康对照组血清中呈依次递减趋势。ROC曲线显示miRNA-767-3p诊断结直肠癌的曲线下面积(area under ROC curve,AUC)达0.770 (95%CI:0.698～0.842),灵敏度为80%,特异度为68%;而miRNA-767-3p联合CEA的AUC可达0.862(95%CI:0.806～0.918),灵敏度为73%,特异度为84%。结论   miRNA-767-3p可成为结直肠癌的独立诊断标志物,miRNA-767-3p联合CEA有助于进一步提高结直肠癌的检出率。     

肝癌血清中miRNA-183的表达及临床意义

目的:比较肝癌及良性肝病患者血清中miRNA-183的表达并探讨其临床意义。方法:收集肝癌患者血清标本54例,肝硬化患者血清标本45例,肝炎患者血清标本30例及健康体检者血清标本45例,荧光定量PCR检测miRNA-183在各组中的表达量及分析肝癌组与临床病理特征之间的关系。结果:肝癌患者血清中miR-183表达量高于正常对照组,也高于肝炎组及肝硬化组（P <0.05）;肝硬化组血清miR-183表达量高于正常对照组（P <0.05）。肝癌患者的血清miR-183表达量与TNM分期有关,Ⅲ～Ⅳ期的表达水平高于Ⅰ～Ⅱ期（P <0.05）;低分化肝癌患者血清miR-183的表达水平高于高-中分化患者（P <0.05）;伴有肝硬化的肝癌患者其血清miR-183表达水平高于不伴肝硬化者（P <0.05）。ROC曲线下面积为0.699（95% CI 0.613～0.784）,最佳临界值为1.38,相应的敏感性为53.7%,特异性为83.3%,阳性预测值为60.1%,阴性预测值为76.9%。结论:血清miR-183可能作为诊断肝癌的新型肿瘤标志物,并可能预测肝癌预后。     

血清microRNA-33a-5p在结直肠癌患者中的表达及生存预后的关系研究

目的 检测结直肠癌(CRC)患者血清中microRNA-33a-5p(miR-33a-5p)的相对表达水平,探讨其辅助诊断价值及与生存预后的关系。方法 收集CRC 134例、结直肠息肉69例及同期匹配的健康对照69例血清标本,检测所有标本miR-33a-5p的相对含量及CRC患者术后miR-33a-5p的相对含量。分析CRC血清miR-33a-5p的相对表达水平在不同年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置和临床TNM分期的差异以及与CEA及CA199的相关性。利用二元Logistic回归和ROC曲线评估各项指标的诊断效能,评价其对CRC的辅助诊断价值。Kaplan-Meier及Cox回归分析其在预后中的临床价值。结果 CRC组miR-33a-5p的相对含量低于结直肠息肉组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001);CRC组患者手术前后相比较,差异有统计学意义(P<0.001)。CRC组患者miR-33a-5p的相对含量在肿瘤大小及临床TNM分期,差异有统计学意义(P<0.001)。CRC患者血清中miR-33a-5p的相对含量与CEA及CA199之间无相关性(P>0.05)。CRC组与健康对照组比较,曲线下面积(AUC)为0.805,三者联合AUC达0.831,敏感度达97.8%。miR-33a-5p低表达组的总生存时间明显低于miR-33a-5p高表达组(P<0.05)。单因素分析临床TNM分期及miR-33a-5p表达水平与患者预后相关(P<0.05),Cox回归多因素分析发现临床TNM分期和miR-33a-5p低表达是患者预后的独立危险因素。结论 miR-33a-5p在CRC患者血清中低表达,与临床TNM分期有关,其表达水平与CRC的进展与预后有关;miR-33a-5p联合CEA和CA199可提高诊断敏感度,其有望成为筛查CRC的生物学指标。     

血清miR-96、miR-182对肝细胞性肝癌的诊断价值及其比较分析

目的：分析miRNA-96、miRNA-182在肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断方面潜在的应用价值。方法：收集HCC、肝硬化(liver cirrhosis,LC)、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)及正常对照血清各60例。以逆转录定量PCR方法检测miR-96、miR-182在血清中的相对表达量,以受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)分析两者在HCC诊断中的应用价值并与血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)检测相比较。结果：HCC患者血清miR-96、miR-182相对表达量明显高于 LC、CHB 及正常对照组(FmiR-96=104.06,FmiR-182=318.23,均 P<0.001),血清miR-96、miR-182 ROC下面积分别为0.9015和0.9368;miR-96对HCC 诊断灵敏度和特异性分别为83.3%、80.8%, miR-182对HCC诊断灵敏度和特异性分别为85.0%、85.0%。两者诊断HCC灵敏度均优于血清AFP测定。结论：血清miR-96和miR-182是潜在的HCC诊断标志物。     

miR-92a-1联合血清CEA、CA-199检测对结直肠癌的诊断价值分析

目的：分析miR-92a-1联合血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原-199(CA-199)检测对结直肠癌(CRC)的诊断价值。方法：选择2020年4月—2022年3月于我院治疗的82例CRC患者作为CRC组，选取同期于我院治疗的80例结直肠息肉患者作为良性组。测定并比较两组miR-92a-1、CEA及CA-199水平，绘制ROC曲线并计算曲线下面积(AUC)值，分析miR-92a-1联合CEA、CA-199检测诊断CRC的价值。结果：CRC组的miR-92a-1、CEA、CA-199水平高于良性组，有统计学差异(P<0.05);ROC曲线分析显示，miR-92a-1、CEA、CA-199单项及联合诊断CRC的AUC分别为0.767、0.965、0.952、0.986;miR-92a-1+CEA+CA-199联合诊断CRC的敏感度与准确度最高，分别为96.30%、93.47%。结论：CRC患者的miR-92a-1、CEA及CA-199水平呈高表达，miR-92a-1、CEA及CA-199联合检测可提高CRC诊断效能，为临床诊治CRC提供参考信息。     

MiRNA-107在注意缺陷多动障碍儿童外周血中表达的初步研究

目的 探讨miRNA-107、miR-34c-3p在注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童中的表达意义。方法 选取2018年1月—2019年9月就诊于杭州市儿童医院儿童保健发育行为专科门诊的ADHD儿童共37名,设为ADHD组,74例杭州市儿童医院同期健康体检儿童设为健康对照组。用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测外周循环血中miRNA-107、miR-34c-3p相对表达量;根据ROC曲线分析miRNA-107在诊断ADHD中的灵敏度及特异度;分析miRNA-107表达量与ADHD核心症状之间的相关性。结果 ADHD儿童外周循环中miRNA-107的相对表达量降低,与健康对照组比较差异有统计学意义(4.06±1.57 vs. 4.62±1.30,t=1.994,P=0.049),miR-34c-3p相对表达量与健康对照组比较差异无统计学意义;miRNA-107的AUC为0.609,灵敏度为97.3%,特异度为67.6%;相关性分析显示,ADHD女童的miRNA-107表达水平与注意缺陷程度呈负相关关系(r=-0.861,P<0.05)。结论 MiRNA-107可能是潜在...     

非小细胞肺癌早期诊断的潜在生物标志物:血浆miRNA-23a和miRNA-451

目的研究血浆中miRNA23-a及miRNA-451 作为潜在生物标志物在非小细胞肺癌（NSCLC）中早期诊断的价值。方法 选取本院50例NSCLC病例和50例健康对照,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定组织和血浆中miRNA23-a及miRNA-451 的表达水平,分析miRNA23-a及miRNA-451在组织和血浆中的表达差异及相关性。同时使用受试者工作特征曲线（ROC曲 线）和线下面积（AUC）评估miRNA23-a、miRNA-451及CEA在NSCLC中的诊断能力。通过瞬时转染技术,在NSCLC细胞系 A549 中分别抑制miRNA-23a 和miRNA-451 的表达,使用qRT-PCR 检测SPRY2 mRNA及MIF mRNA的表达水平。结果 miRNA-23a及miRNA-451在NSCLC组织中的表达与吸烟状态、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期显著相关（P<0.05）。与对 照组相比,miRNA-23a在NSCLC患者的肿瘤组织和血浆中显著升高,而miRNA-451明显低于对照组。这2种miRNA的水平 在肿瘤组织与血浆中表现出相同的表达趋势,呈高度相关。ROC分析显示,miRNA-23a和miRNA-451较之传统的肿瘤标志物 CEA,AUCROC、灵敏度和特异度均显著高于后者（P<0.05）。当miRNA23-a及miRNA-451联合检测时,AUCROC/灵敏度/特异度均 得到改善,分别为0.900/78%/86%。在NSCLC细胞系A549中分别抑制miRNA-23a和miRNA-451的表达后,SPRY2 mRNA及 MIF mRNA表达水平显著升高。结论miRNA-23a和miRNA-451可用作NSCLC早期诊断的候选标志物,这2种标志物联合检 测对NSCLC诊断更有效。     

miR-146a和miR-185对恶性胸腔积液的诊断价值

［摘要］目的: 探讨胸腔积液中miR-146a、miR-185的表达水平对临床上恶性胸腔积液的诊断价值。方法: 采用实时荧光定量PCR技术检测40例恶性胸腔积液和41例良性胸腔积液中miR-146a、miR-185的相对表达量,构建受试者工作特征（ROC）曲线并与癌胚抗原和细胞角蛋白19片段（CYFRA 21-1）进行比较,评估两种miRNA的诊断价值。结果： miR-146a、miR-185在恶性胸腔积液中的表达量均明显低于良性胸腔积液（P均<0.01）。ROC曲线显示,两种miRNAs的曲线下面积（AUC）均低于癌胚抗原,但高于CYFRA 21-1。miR-146a诊断的敏感性均高于癌胚抗原及CYFRA 21-1,miR-185的诊断敏感性高于CYFRA 21-1低于癌胚抗原,但两类miRNA诊断的特异性均低于癌胚抗原及CYFRA 21-1。两种miRNAs联合诊断的AUC明显低于单独诊断的AUC,敏感性亦较单独诊断的敏感性降低,而特异性高于miR-146a,但低于miR-185。联合癌胚抗原能进一步提高两类miRNA诊断恶性胸腔积液的AUC。但两种miRNAs共同联合癌胚抗原诊断恶性胸腔积液的AUC较任一种miRNA联合癌胚抗原无明显上升。两种miRNA的表达量与临床参数无明显相关性（P＞0.05）。 结论： miR-146a、miR-185在恶性胸腔积液中的低表达使之有可能作为临床诊断恶性胸腔积液的标志物。     

miRNA-107在肺癌组织中的表达及临床意义*

目的：探讨miRNA-107（miR-107）在肺癌组织中的表达及临床意义。方法：收集52例肺癌患者组织标本,RT-PCR检测肺癌组织及癌旁组织中miR-107的表达水平,并分析其与临床病理特征之间的关系。绘制ROC曲线,评价miR-107表达水平对肺癌的诊断价值。结果：miR-107在肺癌组织中的表达明显低于癌旁组织（P<0.01）。miR-107表达量下调42例,表达量上调10例,其表达仅与性别和TNM分期有关（P<0.05）,而与年龄、吸烟史、病理类型、肿瘤大小、是否淋巴结转移及生存时间无关（P>0.05）。根据miR-107表达水平绘制ROC曲线,曲线下面积（Az）为0.736（95% CI：0.639-0.833）,临界值取4.4649时,miR-107诊断肺癌的灵敏度和特异性均为71.2%。结论：miR-107在肺癌组织中表达量下调,且可为肺癌诊断和治疗的提供参考依据。     

STC1、TWEAK、miR-183在COPD患者中的表达及相关性研究

目的 探讨斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)、肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子（tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK）、微小RNA(microRNA,miRNA)-183在慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者中的表达及相关性。方法 选取COPD患者114例为COPD组,根据气流受限程度分为重度组（n=23）、中度组（n=48）、轻度组（n=43）,并根据预后情况分为病死组（n=22）和存活组（n=92）,另选取同期体检健康者63例为对照组。检查受试者肺功能[第1秒用力呼气容积（forced expiratory volume in one second,FEV1）、FEV1/用力肺活量（forced vital capacity,FVC）],测定血清STC1、TWEAK、miR-183、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、白细胞介素（int...     

血清microRNA-184和microRNA-20a联合检测对胃癌的诊断价值

目的 探讨血清microRNA-184（miR-184）和microRNA-20a（miR-20a）联合检测对胃癌诊断的临床价值。方法 分别选取孝感中心医院332例及368例经病理确诊为慢性胃炎和胃癌的患者。采用荧光定量PCR检测所有患者血清miR-20a与miR-184的表达水平。绘制受试者工作特征（ROC）曲线,评价2种miRNA诊断胃癌的效能。根据ROC曲线确定这2种miRNA诊断胃癌的阈值,计算敏感性和特异性,并对比癌胚抗原（CEA）的测定结果。结果 慢性胃炎组患者血清miR-20a水平较胃癌组患者低（P <0.05）;慢性胃炎组患者血清miR-184水平较胃癌组患者高（P <0.05）。临床病理特征中,胃癌患者血清miR-20a表达水平与临床分期、淋巴结转移、饮酒史、年龄及性别差异无统计学意义（P >0.05）;胃癌患者血清miR-184表达水平与患者淋巴结转移、饮酒史、年龄及性别差异无统计学意义（P >0.05）,与肿瘤临床分期有差异（P <0.05）。Logistic回归分析结果显示,血清miR-20a［R=1.012（95% CI：1.697,6.875）］、miR-184［R=2.056（95% CI：0.417,0.722）］表达水平与胃癌的发生相关（P <0.05）。经ROC曲线分析表明,诊断胃癌采用血清miR-20a的临界值为4.24,曲线下面积（AUC）为0.762,特异性为71.7%,敏感性为79.4%;miR-184临界值为10.35,AUC为0.861,特异性为82.8%,敏感性为88.4%;CEA临界值为6 mg/ml,AUC为0.740,特异性为71.4%,敏感性为69.3%;血清miR-20a、miR-184联合诊断胃癌的AUC为0.908,特异性为87.6%,敏感性为84.7%。血清miR-184和miR-20a联合诊断胃癌的AUC、特异性及敏感性较3种单一检测方法大或高。结论 采用血清miR-20a和miR-184联合检测方法诊断胃癌,临床具有一定的应用价值。     

血清miR-148a检测作为肝癌标志物的临床价值研究

目的:探讨血清miR-148a作为肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)标志物的临床应用价值?方法:实时荧光定量PCR法(quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HCC患者血清miR-148a水平,并与良性肝病组以及健康对照组进行比较分析?结果:HCC患者血清miR-148a水平明显低于良性肝病组及健康体检组 (P < 0.001)?ROC曲线(receiver operating characteristic curve)结果显示HCC组 vs. 良性肝病组的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.666,95%置信区间(Confidence interval,CI)为0.581~0.744,诊断灵敏度为67.7%,特异性为59.2%(P < 0.001);HCC组 vs. 健康对照组的AUC为0.746,95%CI为0.663~0.818,诊断灵敏度为43.6%,特异性为96.1%(P < 0.001)?血清miR-148a与HCC患者肿瘤大小(P=0.011)及TNM分期(P < 0.001)有关,而与其他临床参数无明显相关性(P > 0.05)?HCC患者术后血清miR-148a水平与术前相比明显升高(P=0.023);而术后出现复发或转移的HCC患者其血清miR-148a水平明显下降,并且低于术前水平(P < 0.05)?生存曲线分析显示血清miR-148a低表达的HCC患者其总生存率明显低于血清miR-148a高表达的HCC患者(P < 0.001),Cox回归分析进一步显示血清miR-148a可作为HCC预后评估的一个独立决定因子?结论:HCC患者血清miR-148a明显降低,并与HCC病情?恶性进展及预后相关,可作为HCC诊断与鉴别诊断?病情评估?疗效观察及预后判断的指标?     

乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 的表达及临床意义

目的 研究血清miRNA 在乳腺癌（BC）患者及正常人群血清中的表达情况及临床诊断中的价 值。方法 收集BC 患者及健康体检者血清,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组miRNA-21、 miRNA-210、miRNA-1246 的表达情况。分析单个血清miRNA 及多个血清miRNA 联合检测对BC 的诊断价 值。结果 与健康体检者比较,BC 患者血清中miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 表达均增加（均P = 0.000）,且3 者在BC III 期患者或有淋巴结转移的患者中高表达（P <0.05）。血清miRN-A21、miRNA-210、 miRNA-1246 诊断BC 患者的受试者工作特征曲线下面积（AUC）分别为0.936（95%CI ：0.866,0.976）、 0.980（95%CI ：0.928,0.998）、0.737（95%CI ：0.638,0.822）,特异性为0.854（95%CI ：0.722,0.939）、0.917 （95%CI ：0.857,0.995）、0.583（95%CI ：0.432,0.724）。且miRNA-210 和miRNA-1246 联合检测,miRNA-21、 miRNA-210 和miRNA-1246 联合检测的诊断效能并不优于miRNA-210 单独检测。Fisher 判别分析建立BC 的最佳诊断模型,该模型排除非患者的能力较好,而发现患者的能力相对较弱（敏感性为62.5% ;特异性为 100.0%）。结论 miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 在BC 患者血清中高表达,miRNA-210 单独诊断效 能较好,血清miR-210 可能是一种理想的BC 诊断标志物。