熊胆及其潜在替代资源研究概况

对比分析天然熊胆与熊胆的人工制品以及其他动物胆汁在化学成分、药理作用、临床应用等方面的异同。研究发现,人工合成熊胆在结合型胆汁酸牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)的含量以及利胆、镇静、抗菌等药理作用方面在一定程度上已经达到天然熊胆的水平,可为寻找天然熊胆的替代资源提供参考。     

熊胆的化学成分研究

目的:系统研究中国传统名贵中药熊胆中的化学成分。方法:利用大孔树脂,Sephadex LH-20,ODS及正相硅胶柱等色谱手段进行分离,通过多种波谱学数据分析进行单体化合物的结构鉴定。结果:从熊胆中分离得到9个单体化合物,经结构鉴定分别为4′,7-二羟基异黄酮(1),4′,7-二羟基-6-甲氧基异黄酮(2),4′,5,7-三羟基异黄酮(3),4′-甲氧基-7-羟基异黄酮(4),牛磺熊去氧胆酸(5),牛磺鹅去氧胆酸(6),熊去氧胆酸(7),鹅去氧胆酸(8),胆固醇(9)。结论:化合物1～4为首次从熊胆中分离,也是从熊科动物中首次分离得到。     

熊胆药用特殊价值及其药效物质基础研究

近20年来熊胆的药效作用及药效物质基础研究取得了丰硕的成果,在肝胆系统,心脑血管系统及抗肿瘤、祛痰镇咳、清热明目等方面展示出良好的药效活性,具有独特的药用价值;熊胆的主要药效物质基础除以往认识的熊去氧胆酸及牛磺熊去氧胆酸等胆汁酸成分外,还有具有良好抗丙型肝炎活性的熊胆大分子成分-熊胆蛋白,以及多肽等,是人工能够合成的熊去氧胆酸类成分所不能替代的,为熊胆的药用不可替代性提供了依据。     

天然熊胆粉与人工合成熊胆粉的红外吸收特征比较

熊胆为中医药瑰宝,自古以来被视为中医药圣药,雄居各胆之首,为名贵中药.来源于熊科动物黑熊Selenarctos thibetanus Cuvier、棕熊 Ursus arctosL.的干燥胆或黑熊引流之胆汁(其干燥物称熊胆粉)[1].熊胆具有清热,平肝,明目之功效,临床用于惊风抽搐,咽喉肿痛.文献报道,熊胆的主要化学成分为牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)、牛磺胆酸(TCA)、少量的熊去氧胆酸(UDCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)、胆酸(CA)、去氧胆酸(DCA)、胆固醇(CS)、胆红素,以及各种氨基酸和微量的无机元素,其中TUDCA的量最高,是熊胆的特有成分[2].现代药理研究证实熊胆具有保肝利胆、溶解胆石、镇静、抗惊厥、解痉,抗炎、抑菌、解热,临床上广泛用于眼科、五官科、消化科、神经科[3].     

HPLC测定熊胆滴眼剂中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的：建立熊胆滴眼剂中牛磺熊去氧胆酸的测定方法。方法;采用ＨＰＬＣ测定熊胆滴眼剂中牛磺熊去氧胆酸的含量,以中性氧化铝吸附黄芩甙除干扰,达到了很好的分离效果。结果：平均回收率９７．２６％,ＲＳＤ１．４９％。结论：本和法简便、快速、准确、重复性好。     

人工引流熊胆与熊胆的薄层和纸层色谱比较

本文用薄层层析等方法对人工引流熊胆和熊胆的化学成分进行了比较,并用薄层扫描法测定了两者游离胆汁酸的含量,结果引流熊胆与熊胆中的胆汁酸及氨基酸类成分一致,而且前者熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸的含量高于后者。     

高效薄层色谱扫描法测定熊胆粉中结合胆汁酸的含量

本文报导用高效薄层色谱扫描法测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量,并与熊胆作了比较。样品经甲醇提取,点样在国产高效硅胶G板上,以氯仿-异丙醇-甲苯-冰醋酸-水(15:15:10:12:1)为展开剂,两次展开。     

牛黄中结合胆汁酸的薄层色谱定量

用薄层扫描法测定了牛黄中牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸和甘氨鹅去氧胆酸的含量.样品用甲醇提取,在国产高效硅胶板上用异辛烷-异丙醇-正丁醚-冰乙酸-水(10∶9∶5∶5∶1)为展开剂展开.     

复方熊胆眼用即型凝胶的制备和质量控制

目的：探讨复方熊胆眼用即型凝胶的制备和质量控制方法。方法：采用液相色谱法对其中的熊胆粉进行含量测定。结果：牛磺熊去氧胆酸含量在0．175～1．4mg之间呈良好的线性关系,Y=83．1902x-55．2683,r=0．9995。结论：复方熊胆眼用即型凝胶处方工艺成熟,质量稳定可控。     

HPLC测定复方熊胆胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的：鉴定并测定复方熊胆胶囊中人工熊胆的含量,以保证药品质量。方法：参考《中国药典》质量标准部分,采用HPLC鉴定并测定人工熊胆在每粒胶囊中的含量。结果：HPLC实验结果显示,样品与牛磺熊去氧胆酸对照品在相同时间出现对应色谱峰;复方熊胆胶囊中人工熊胆含量不低于10 mg/粒。结论：通过HPLC可以有效地鉴定复方熊胆胶囊中的人工熊胆,并且能精确地测定人工熊胆的含量。     

天然熊胆与饲养熊胆对大鼠肝功能的影响

以大鼠探讨了天然及饲养熊胆的利胆作用以及对肝损害的作用。使用中国产的天然及饲养熊胆,以HPLC分析其胆汁酸的组成。利胆作用:使用麻醉及非麻醉的大鼠,经十二指肠给予熊胆后,通过胆管插入的导管测定胆汁流量。肝损害抑制作用:对四氯化碳诱发肝损害的大鼠投与熊胆后,测定血中GOT,GPT. 结果,此次使用的天然熊胆是以牛熊去氧胆酸(TUDC)为主要胆汁酸,但在饲养熊胆中含有的牛磺鹅去氧胆酸的量几乎与     

从鹅鸭胆汁中提取鹅去氧胆酸

<正> 临床常用的动物胆酸有熊去氧胆酸,鹅去氧胆酸Chenodesoxycholic acid及猪去氧胆酸。其中熊去氧胆酸为熊胆的特殊成分,资源有限。熊胆中还含有鹅去氧胆酸,是熊去氧胆酸的α-差向异构体,它们都有较强的利胆作用。鹅去氧胆酸在家禽胆汁中含量较高,而家禽胆汁在加工厂属弃物,为扩大药用资源,提高药物利用度,因此我们做了以下实验。     

HPLC-ELSD法同时测定熊胆粉中4个胆汁酸成分含量

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)同时测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量。方法 采用Waters XSelect^?HSS T3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，柱温40℃，流速1.0 mL/min,ELSD漂移管温度80℃，氮气流量2.0 L/min。结果 牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的线性范围分别为1.012～5.060、0.808～4.040、0.068～0.340、0.176～0.880μg，相关系数r分别为0.999 5、0.999 7、0.999 6和0.999 8；平均加样回收率(n=6)分别为98.8%、99.7%、98.9%和98.7%。精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%(n=6)。熊胆粉样品中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的平均含量分别为(34.82±0.18)%、(27.95±0.19)%、(1.23±0.02)%和(3.77±0.06)%。结论 本方法简便、灵...     

薄层扫描法测定益肝康胶囊中熊去氧胆酸的含量

益肝康胶囊是由熊胆、黄芩、大黄等中药组成。熊胆中约含20％的牛磺熊去氧胆酸,是熊胆的主要成分,是表现其药理趋向性的活性成分,被水解生成牛磺酸与熊去氧胆酸,熊去氧胆酸是熊胆的特殊成分,为有效地控制产品质量,对制剂中熊去氧胆酸进行含量测定,分析方法与结果如下。     

基于1H-NMR结合LC-MS技术分析熊胆粉及常见胆类中药中的胆酸类成分

目的 建立基于核磁共振氢谱技术（¹H-NMR）结合液质联用技术（LC-MS）的分析方法,阐明熊胆粉中胆酸类成分组成,找出熊胆粉与其他常见胆类中药中的差异性成分。方法 利用¹H-NMR非靶标分析熊胆粉及其他常见胆类中药的化学成分组,通过信号归属表征熊胆粉中胆酸类成分组成,以¹H-NMR图谱分段积分后峰面积为变量进行多元统计分析。利用LC-MS对熊胆粉及其他常见胆类中药中10个胆酸类成分（胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨熊去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸）进行含量测定,并以含量为变量进行多元统计分析。结果 基于¹H-NMR图谱及多元统计分析发现胆酸类成分为胆类中药的主要成分,也是熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性成分。结合文献及对照品比对,从熊胆粉中初步鉴定出7个胆酸类成分。进一步结合LC-MS含量测定结果和多元统计分析验证熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性胆酸类成分为熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸。结论 熊胆粉与其他常见胆类中药的胆酸类成分存在显著差异。与其他胆类中药相比,熊胆粉中熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸及其牛磺型结合胆酸含量较高。¹H-NMR技术具有对化学成分组全面、快速分析的优势,可与LC-MS检测相互补充,共同应用于中药复杂体系成分分析和代谢组学的深入研究。     

熊胆粉不同极性部位HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的 建立熊胆Fel Ursi粉不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价熊胆粉的质量评价提供参考。方法 将熊胆粉分别用醋酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、无水乙醇、乙腈依次提取,浓缩干燥,用甲醇溶解,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果 10批熊胆粉醋酸乙酯部位共有模式共标记6个共有峰,三氯甲烷部位共有模式共标记8个共有峰,丙酮部位共有模式共标记8个共有峰,乙腈部位共有模式共标记10个共有峰,乙醇部位共有模式共标记16个共有峰,5种溶剂提取物均指认了4个共有指纹峰（牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸）。综合聚类分析和主成分分析（principal component analysis,PCA）结果,发现相同产地的熊胆粉,受不同厂家加工方法不同的影响,也存在一定的质量差异。通过正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares- discriminant analysis,OPLS-DA）,发现牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、乙醇部位10号峰、乙腈部位1、2号峰可能是熊胆粉质量差异的主要标志性成分。结论 所建立的HPLC指纹图谱可以反映熊胆粉的化学成分分布,为熊胆粉的整体质量评价提供参考,并为熊胆粉谱效关系研究提供一定依据。     

十种蛇胆胆汁酸成分薄层层析分析

本文通过应用薄层色谱法对蟒蛇,百花锦蛇,眼镜王蛇,眼镜蛇,金环蛇,银环蛇,三索线蛇,水律蛇,过树榕蛇,五步蛇等十种蛇胆的结合型胆甾酸及其水解产物的薄层层析分析,结果表明:十种蛇胆均含有牛磺胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺去氧胆酸以及石胆酸、胆固醇和游离的胆酸,可能含有甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸等,平均以牛磺胆酸斑点面积最大。除上述成分外,尚有待鉴定的其他成分斑点。     

鼻康片质量的研究

鼻康片是由熊胆粉、鱼腥草、苍耳子、黄芩、赤芍等１１味中药组成的复方制剂,具有清热解毒、祛风宣肺、通鼻窍的作用。方中熊胆粉为主药,含有熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸,为该制剂有效成分,用薄层扫描法测定样品中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量。用薄层色谱法对黄芩、赤芍、鱼腥草进行定性鉴别。１　仪器、试剂与样品日本岛津ＣＳ９３０薄层扫描仪。鼻康片及阴性样品（黑龙江中医药大学附属药厂）;对照品、对照药材（中国药品生物制品检定所）;硅胶Ｇ（青岛海洋化工厂）。所用试剂均为分析纯。２　薄层色谱法定性鉴别［１］２－１　熊胆…     

薄层扫描法测定复方熊胆乙肝胶囊中熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸的含量

该实验采用了薄层扫描方法对复方熊胆乙肝胶囊的提取物中的熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸的含量进行了测定，结果表明，以异辛烷：异戊醚：冰醋酸：正丁醇：水（１０：５：５：３．８：１）为展开剂，相对湿度控制在３２％，经２０％氢氧化钠水解５ｈ，测得含量最高（熊去氧胆酸２．５ｍｇ／粒，鹅去氧胆酸１．１１ｍｇ／粒），该方法回收率值分别为熊去氧胆酸９６. ６％，鹅去氧胆酸９６．３％。     

基于UPLC-MS对牛黄解毒片中胆酸类成分定量测定及化学模式识别研究

目的 建立超高效液相色谱串联四级杆-静电轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS)同时测定牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu Tablets,NJT)中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、7-酮基胆石酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸21种胆酸类成分含量的方法,并对不同批次的NJT进行质量评价。方法 采用Thermo Bremen Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以含0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min,柱温为40℃;质谱采用加热型电喷雾离子源(HESI),在负离子平行反应监测模式下进行含量测定,采用SIGMA 14.0软件对定量结果进行化学计量学分析。结果 21种胆酸成分在线性范围内呈良好的线性关系(r2≥0.998 9)...