测定谷胱甘肽-S-转硫酶动力学参数的变化表征其抑制剂

目的:测定谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferases,GST)动力学参数变化,建立表征其抑制剂的方法.方法:从猪肝经阴离子交换层析和亲和层析制备GST酸性同工酶,用还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和1-氯-2,4-二硝基苯(1,-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)合成S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)为候选抑制剂,以GSH与CDNB为底物测定GST在GS-DNB作用下的米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),从而确定GS-DNB对GST的抑制常数(Ki).结果:此GST被纯化146倍以上,活性总收率近30％.该GST对GSH和CDNB的Km分别为42 μmol/L和0.86 mmol/L,属于随机双底物动力学模型.GS-DNB对CDNB竞争性Ki为(21±1)μmol/L (n=2);对GSH竞争性Ki为(17±1)μmol/L (n=2).结论:产物GS-DNB是GST的高亲和力竞争性抑制剂;测定GST动力学参数随抑制剂浓度的变化可筛选其抑制剂.     

微粒体谷胱甘肽S-转移酶在移植性肿瘤生长过程中的变化

本文报道,在大鼠 AH-66移植性肝癌生长过程中,宿主肝脏微粒体、胞浆和血清中谷胱甘肽 S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)及 T-谷氨酰转肽酶(T-Glutamyltranspeptidase,γ-GT)活性的变化。在移植 AH-66的大鼠肝微粒体中,以1,2-二氯-4-硝基苯(1,2-Dichloro-4-nitrobenzene,DCNB)为底物的 B 组 GST 及 T-GT 活性显著增高;然而,以1-氯-2,4-二硝基苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)为底物的 A-C 组GST 活性无显著变化。虽然胞浆中 GST 活性变化较小,但是血清中 GST 和γ-GT活性随肿瘤生长呈直线型上升。肝微粒体 GST 可做为移植性肿瘤较敏感的标志酶。     

三氧化二砷对耐药MR_2细胞谷胱甘肽S转移酶作用的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对耐药急性早幼粒细胞白血病 (APL)MR2 细胞谷胱甘肽S转移酶的作用。　方法 :以耐维甲酸 (RA)早幼粒细胞白血病细胞株MR2 为研究对象 ,以非耐药早幼粒细胞白血病NB4 为对照组 ,用免疫组化法观察谷胱甘肽S转移酶 (GST)的表达。　结果 :MR2 细胞GSTπ表达 (6 0 .4± 4.0～ 6 6 .5± 4.4)较NB4 细胞(2 8.3± 5 .6～ 31.2± 5 .1)明显增强 (P <0 .0 5 )。 0 .5～ 2 .0 μmol/LAs2 O3 能显著降低MR2 细胞GSTπ表达 (P <0 .0 5 ) ,而对GSTα、GSTμ无影响。　 结论 :GSTπ表达的下调 ,可能是As2 O3 克服耐药的敏感性指标 ,而GSTα、GSTμ则否。全反式维甲酸 (ATRA)可能是GSTπ催化作用的底物。     

大鼠肝癌诱变过程中谷胱甘肽S—转移酶的动态变化

目的 :了解谷胱甘肽 S-转移酶 ( GST)在癌变过程中的作用及是否对肝癌的早期诊断有价值。方法 :以化学致癌剂 2 -乙酰氨基芴诱发大鼠肝癌 ,检测其癌变过程中组织和血清 GST活性的动态变化。结果 :大鼠摄入 2 -乙酰氨基芴 2周后 ,血清 GST活性比正常对照组升高 ;第 4周时 GST活性比正常对照组明显升高 ( P<0 .0 1) ;到第 6周时 ,GST活性达到最高 ,为正常对照组的 11倍之多 ,以后 GST活性逐步缓慢下降 ,到第 12周 GST活性趋于正常水平 ( P>0 .0 5 )。肝组织中 GST比活性上升幅度较快 ,第 4周时已达最高水平 ,而第 6周时恢复到正常对照组水平 ,随后逐步升高 ,到第 12周 ,与正常对照组比较 ,差异没有显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 :GST是癌变早期的标志酶 ,血清 GST活性检测对肝癌的早期诊断有一定价值     

线粒体和微粒体谷胱甘肽S-转移酶在大鼠肝脏癌前病变组织中的变化

本文报道在大鼠肝脏化学致癌过程中癌前病变组织的细胞浆、微粒体、线粒体及核膜等亚细胞组分内谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的变化。在大鼠肝脏癌前病变组织中,胞浆、线粒体及微粒体内,以1,2-二氯-4-硝基苯(1,2-dichloro4-nitrobenzene,DCNB)为底物的A-C组GST活性以及以1-氯-2,4-二硝基苯(1-chlo-ro-24-dinitroben-zene,CDNB)为底物的B组GST活性均显著增高然而在核膜中上述的两种分子形式的GST活性,均无明显变化。实验结果表明,GST不仅存在于胞浆中,而且在线粒体、微粒体及核膜中也固有。把二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)腹腔注射后给予2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluoren,FAA)并进行肝脏部分切除,以此制造大鼠肝脏癌前病变,这时组织中不仅是胞浆中的GST活性明显升高,而且微粒体和线粒体GST也有显著升高。因此,作者认为微粒体及线粒体GST也可做为肝脏肿瘤标志酶。     

卵巢癌中谷胱甘肽S-转移酶-π的表达与化疗反应的关系

目的 :了解卵巢癌中谷胱甘肽S 转移酶 π(GST π)的表达与化疗的关系。方法 :运用免疫组织化学技术对 74例术前未治疗的上皮性卵巢癌进行GST π检测。结果 :74例卵巢癌中GST π阳性 5 5例 ,阳性率为 74.3%。卵巢癌中GST π的表达与病理类型无相关性 (P >0 .0 5 )。对首次术后有残余癌的 2 7例患者行化疗反应评价 ,GST π阳性者与阴性者的化疗反应率为 13.3%及 83.3 % ,两者间差异有显著性 (P <0 .0 1)。GST π阳性对耐药的预测值为 86 .7% ,GST π阴性对化疗反应的预测值为 83.3%。结论 :未治疗卵巢癌中存在着由GST π介导的内在性耐药机制 ,GST π的表达能较好地预测化疗反应。     

肾癌组织中GST-π和p53的表达及其相关性研究

探讨胎盘型谷胱甘肽S -转移酶 (GST -π)和 p5 3蛋白在肾癌中表达的临床病理意义和相关性。方法 :应用LSAB免疫组化法对 43例肾癌GST -π和 p5 3蛋白的表达进行研究。结果 :肾癌中GST -π和p5 3蛋白的阳性率分别为 6 0 .47%和 32 .5 6 %。GST -π表达与肿瘤分化程度明显相关 ,高中分化肾癌阳性率明显高于低分化者(P <0 .0 5 )。GST -π与p5 3蛋白表达呈明显正相关 (r =0 .375 ,P <0 .0 5 ) ,p5 3蛋白阳性者中GST -π阳性率高于p5 3蛋白阴性者。结论 :GST -π异常表达可能与肾癌的发生、发展及其化疗耐药性有关。检测GST -π表达对预测肾癌多药耐药、化疗疗效有一定的价值。     

重组人穿孔素肽段的体外杀伤肝癌细胞活性

目的 :以肝癌细胞系SMMC 772 1作为靶细胞 ,观察重组人穿孔素 (PFP)N端肽段 (rhPFP N)及C端肽段 (rh PFP C)体外杀伤肿瘤细胞的活性。　方法 :用大肠杆菌表达PFP N和PFP C与谷胱甘肽转移酶 (GST)的融合蛋白 ,对表达产物进行纯化 ,将不同浓度的GST rhPFP C或GST rhPFP N加入体外培养的人肝癌细胞SMMC 772 1,2 4h后用镜检和MTT法检测细胞存活情况。　结果 :用GST rhPFP N或GST rhPFP C处理后 ,可见SMMC 772 1细胞膜溶解和细胞破裂。用MTT法检测 ,实验组A值显著低于对照组 (P <0 .0 0 1)。GST rhPFP C和GST rhPFP N浓度为 2 .5ml L时 ,其杀伤活性分别为 33.38%和 5 .90 %。　结论 :rhPFP C和rhPFP N对人肝癌细胞SMMC 772 1均有明显的杀伤活性 ,rhPFP C对SMMC 772 1的杀伤活性显著高于rhPFP N。     

燃煤污染型砷中毒患者GST基因多态性与GST酶活力的关系

目的:探讨燃煤污染型砷中毒患者谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因多态性与GST酶活力的关系,为深入了解砷中毒的致病机制提供实验依据.方法:选择130例燃煤污染型砷中毒患者和140例健康人作为研究对象,采用多重等位基因特异聚合酶链反应(多重PCR)检测GSTM1、GSTT1基因缺失;采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测GSTP1 Ile105Val、GSTO1 Ala140Asp、GSTO2 Asn142Asp基因多态性;采用化学比色法检测谷胱甘肽硫转移酶(GST)活力,并分析上述基因多态性与GST酶活力的关系.结果:GSTT1基因缺失基因璎、非缺失基因型以及GST02 Asn142Asp基因Asn/Asn、Asn/Asp、Asp/Asp基因型,在砷中毒组和对照组的分布差异有统计学意义(P<0.05);砷中毒患者GST酶活力增高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);砷中毒组和对照组GSTO1 Ala140Asp基因不同基因型间的GST酶活力有差异(砷中毒组P>0.05,对照组P<0.05);未发现GSTM1、GSTT1、GSTP1 lle105Val、GSTO2 Asn142Asp多态性与GST酶活力有关.结论:GS-T01 Ala140Asp基因多态性可能影响燃煤污染型砷中毒患者的GST酶活力,其原因尚需进一步研究.     

染料木素与17β雌二醇对去势大鼠生殖系统的影响

目的: 观察染料木素(GST)和17β雌二醇(E2)对生殖系统的不同影响. 方法: 选用成年雌性SD大鼠40只,随机分为假去势组(Sham)、去势组(OVX)、E2组(E2,400 μg/kg·d)、GST高剂量组[GST-h, 50 mg/(kg·d)]及GST低剂量组[GST-L, 25 mg/(kg·d)]. 用药6 wk后用放射免疫法测定各实验组大鼠血清雌二醇水平,巴氏染色观察阴道上皮角化细胞百分率,并测定大鼠体质量及子宫指数. 结果: E2替代能显著增加血清雌二醇水平、子宫指数及阴道上皮细胞百分率(P值均＜0.01 vs OVX﹚;GST低剂量替代能增加子宫指数及阴道上皮细胞百分率(P值均＜0.01 vs OVX﹚;GST高剂量组对子宫指数及阴道上皮细胞百分率与去势组比较无差异(P>0.05);GST高及低剂量两组对血清雌二醇值无影响. 结论: 低剂量GST表现出对生殖系统的弱雌激素样作用,但这种作用远低于雌激素的影响;高剂量则对生殖系统起抑制作用.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。