中脑导水管周围灰质和E-W核中SP和CCK样神经元至脊髓的投射——HRP与免疫细胞化学结合法研究

本研究用HRP逆行追踪和免疫细胞化学结合法,研究了大白鼠中脑导水管周围灰质(PAG)以及Edinger-Westphal(E-W)核至脊髓的SP能和CCK能神经投射。结果表明,PAG腹外侧区至脊髓颈、胸、腰段双侧均有少量投射,但以同侧为主。在这些下行投射神经元中,约有48％为SP样免疫反应阳性。E-W核至脊髓的颈、胸、腰段均有广泛投射,其中约有70％为SP样免疫反应阳性,73％为CCK样免疫反应阳性。提示至少有一部分E-W核的脊髓投射神经元含有SP和CCK两种神经递质。     

高血压大鼠中脑导水管周围灰质内nNOS样阳性神经元的变化

目的：观察高血压大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)样阳性神经元数量的变化。方法：用双肾双夹法建立高血压大鼠模型,ABC法显示PAG内nNOS样阳性神经元并进行定量分析。结果：nNOS样阳性神经元分布于PAG的背外侧区。PAG内nNOS样阳性神经元的数量、光密度在对照组各时期无明显变化;在高血压大鼠7d时的数量略减少,光密度略下降;而在30d、70d则数量、光密度逐渐减少,与对照组比较差异显著。结论：中脑PAG内nNOS样阳性神经元及阳性产物的减少可能与其对心血管功能活动、感觉信息传导的影响以及高血压的形成和发展有关。     

自发性高血压大鼠中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元的变化

目的观察自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensiverats,SHR)中脑导水管周围灰质内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)阳性神经元的变化。方法取SHR和京都种威斯特大鼠(Wistar-Koytorats,WKY)大鼠各30只,分别于3月(14周)龄,6月龄和12月龄测血压并处死,ABC免疫细胞化学方法显示nNOS阳性神经元。结果SHR血压随鼠龄的增长逐渐升高,于12～14周龄时血压在高位稳定,且均高于WKY大鼠(P<0.05)维持在[(20.8±1.1)～(26.3±1.0)]kPa(P<0.05);WKY大鼠各时期血压无明显差异,维持在[(13.7±1.6)～(15.1±1.7)]kPa。中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元以小细胞为主,突起有2-4个,许多朝中脑水管方向延伸。定量结果显示,SHR大鼠nNOS阳性神经元随着血压升高呈逐渐减少的趋势,12月龄与3月龄和6月龄相比均有显著差异(P<0.01),而各个时期WKY大鼠PAGnNOS阳性神经元均无明显变化。结论SHR中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元的减少可能通过影响延髓的血压调节中枢调控高血压的发生,并有可能与高血压的痛觉过敏有关。     

大鼠中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部的儿茶酚胺能投射

本文应用ＨＲＰ逆行追踪与酪氨酸羟化酶样免疫细胞化学结合法研究了大鼠中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部的儿茶酚胺能投射。在中脑导水管周围灰质内，ＨＲＰ逆标并呈酪氨酸羟化酶样阳性的双标记细胞分别占由中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部投射细胞的１８％和２０％，这些双标记细胞亘中脑导水管周围灰质全长存在于其腹外侧区和内侧区腹侧部。结合生理学研究的结果，讨论了这些儿茶酚胺能投射细胞的性质和机能。     

大鼠中脑导水管周围灰质向终纹床核投射的5—羟色胺能神经元…

本文将ＨＲＰ注入一侧终纹床核，又将Ｆｏｒｍａｌｉｎ导入胃内造成损伤，通过ＨＲＰ呈色、抗５－ＨＴ免疫组化染色，在中脑导水管周围灰质发现七种不同标记或免疫反应阳性细胞，即ＨＲＰ逆行标记、５－ＨＴ样阳性和ＦＯＳ样阳性细胞，ＨＲＰ－５ＨＴ、５－ＨＴ／ＦＯＳＨＲＰ／ＦＯＳ双重标记或免疫反应阳性细胞以及ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ三重标记或免疫反应阳性细胞。ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ细胞数量很少，出现于中脑导水管周     

大鼠丘脑束旁核和外侧缰核向中脑导水管周围灰质和中缝大核…

将Ｆａｓｔ Ｂｌｕｅ（ＦＢ）和Ｄｉａｍｉｄｉｎｏ Ｙｅｌｌｏｗ（ＤＹ）分别定向注入中脑导水管周围灰质和中缝大核，在丘脑束旁核和外侧缰核内侧部见到ＦＢ单标、ＤＹ单标及ＦＢ／ＤＹ双标神经元。在丘脑束旁核，双标神经元占该核三种标记神经元总数的１３．１％；在外侧缰核内侧部，双标神经元占三和中标记神经元总数的１８．６％。双标记神经元呈梭形、三角形和椭圆形，胞体的直径约为１５￣３０μｍ。     

延髓缝核SP神经元至脊髓背角的下行投射—HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法研究

将HRP分别注入18只大鼠的颈、胸、腰段脊髓背角内,应用HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法,对大鼠延髓缝核至脊髓背角的SP能下行投射进行了观察。至脊髓背角的SP能下行纤维主要来自大缝核(无明显定位关系),其次是隐缝核及苍白缝核。各缝核双标细胞占整个延髓缝核HRP标记细胞总数的百分比分别为:大缝核7.5％,隐缝核2.9％,苍白缝核1.4％。本文还讨论了延髓缝核SP能神经元至脊髓背角下行投射的机能意义。     

大鼠中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部的儿茶…

本文应用ＨＲＰ逆行追踪与酷氨酸羟化酶样免疫细胞化学结合法研究了大鼠中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部的儿茶酚胺能投射。在中脑导水管周围灰质内，ＨＲＰ逆标并呈酷氨酸羟化酶样阳性的双标记细胞分别占由中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部投射细胞的１８％和２０％，这些双标记细胞亘中脑导水管周围灰质全长存在于其腹外侧区和内侧区腹侧部。结合生理学研究的结果，讨论了这些儿茶酚胺能投射细胞的     

大鼠延髓和脊髓背角的PKCγ阳性神经元向中脑导水管周围灰质的投射

目的　观察延髓和脊髓背角内蛋白激酶Cγ亚单位 (PKCγ)样阳性神经元向中脑导水管周围灰质(PAG)的投射。　方法　荧光金 (FG)逆行追踪与PKCγ的免疫荧光组织化学染色相结合的双标记技术。　结果　PKCγ样阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背角的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层及脊髓的外侧脊核 ;将FG注入PAG后 ,在延髓和脊髓背角的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层及脊髓的外侧脊核内可见FG标记神经元 ;部分FG标记神经元呈PKCγ样阳性 ,FG PKCγ双标神经元也主要见于延髓和脊髓背角的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层及脊髓的外侧脊核。　结论　延髓和脊髓背角的PKCγ阳性神经元可能参与将伤害性刺激信息向PAG的传递。     

P物质和亮-脑啡肽样免疫反应神经元在鼠中脑中缝核的分布

本实验采用PAP免疫细胞化学技术,观察P物质和亮-脑啡肽样免疫反应神经元在鼠中脑中缝核的分布并作了计数。1.含P物质样免疫反应神经元胞体仅见于中缝背核最尾侧部,含P物质阳性胞体数平均167个/只;而亮-脑啡肽样免疫反应胞体几乎遍于中缝背核全长,其阳性胞体数平均132个/只。2.亮-脑啡肽样免疫反应胞体主要定位于中缝背核中线区;而P物质样免疫反应胞体除分布于中缝背核中线区以外,也定位在其两侧的延伸。3.亮-脑啡肽样免疫反应胞体恒定地出现在中缝正中核内,平均199个/只;而P物质样免疫反应胞体仅见于2例动物。4.中缝背核内有些含P物质样免疫反应阳性胞体或突起,紧邻血管壁排列,未观察到亮-脑啡肽样免疫反应神经元有类似现象。本实验观察到鼠中缝正中核内存在含P物质样免疫反应神经元胞体。     

小鼠中脑导水管周围灰质下行投射的SP能终末与中缝大核内SP受体阳性神经元的突触联系

P物质(SP)在中枢神经系统内具有镇痛作用,中脑导水管周围灰质(PAG)和中缝大核(NRM)是中枢内源性镇痛系统的关键结构。本研究采用顺行追踪与免疫组化双重染色相结合的三标方法,观察了起源于PAG的SP能阳性终末与NRM内SP受体(SPR)阳性神经元之间的突触联系。结果显示:将生物素化葡聚糖胺(BDA)注入小鼠PAG的腹外侧区后,BDA顺行标记终末可见于脑干的许多区域,但主要位于NRM。其中的部分BDA顺行标记终末呈SP阳性。NRM内可见到散在分布的SPR阳性神经元。在电镜下可见来自PAG的SP/BDA双标终末与NRM内的SPR阳性神经元的胞体和树突形成以非对称性为主的突触联系。本研究的结果提示起源于PAG的下行投射终末所释放的SP是激活中枢内源性镇痛系统并使之发挥镇痛作用的重要神经活性物质。     

大鼠中脑导水管周围灰质向终纹床核投射的5－羟色胺能神经元对内脏伤害性刺激的FOS表达

本文将ＨＲＰ注入一侧终纹床核，又将Ｆｏｒｍａｌｉｎ导入胃内造成损伤，通过ＨＲＰ呈色、抗ＦＯＳ、抗５－ＨＴ免疫组化染色，在中脑导水管周围灰质发现七种不同标记或免疫反应阳性细胞，即ＨＲＰ逆行标记、５－ＨＴ样阳性和ＦＯＳ样阳性细胞，ＨＲＰ／５－ＨＴ、５－ＨＴ／ＦＯＳ和ＨＲＰ／ＦＯＳ双重标记或免疫反应阳性细胞以及ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ三重标记或免疫反应阳性细胞．ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ细胞数量很少，出现于中脑导水管周围灰质腹外侧区。     

大鼠中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核通路的电镜研究

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴树突触。另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内其它神经元之间形成多种突触联系。本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行投射的终末与中缝大核内的神经元成分之间还形成比较复杂的突触联系，并对之进行了讨论。