胃癌发生发展中β-连环蛋白异常表达与Wnt传导通路激活的关系

目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)异常表达与Wnt传导通路激活在胃癌发生发展中的作用及关系.方法 选取62例胃癌患者的癌组织,并选取35例胃部距癌组织2～5 cm处的癌旁组织和22例切缘正常的胃黏膜组织作为对照,应用免疫组织化学方法 检测Wnt传导通路的信号蛋白(Wnt2)和β-catenin的表达情况;在上述标本中选取30例胃癌组织、15例癌旁组织和15例正常胃黏膜,应用流式细胞技术检测Wnt2和β-catenin的表达情况.结果 β-catenin在正常黏膜、癌旁组织及癌组织胞膜中的表达强度呈下降趋势,而在胞质中的表达强度呈增强趋势,3组间差异有统计学意义(H胞膜=45.60,P=0.000;H胞质=23.83,P=0.000);Wnt2在正常黏膜、癌旁组织及癌组织中的表达强度呈上升趋势,3组间差异有统计学意义(H=23.83,P=0.000).β-catenin在正常黏膜、癌旁组织及癌组织中的荧光指数(FI)分别为(1.00±0.06)、(0.97±0.05)、(0.88±0.07),3组的表达量间差异有统计学意义(H=26.66,P=0.000).Wnt2在正常黏膜、癌旁组织和癌组织中的FI分别为(1.00±0.11)、(1.08±0.65)、(4.95±1.54),3组的表达量间差异有统计学意义(H=44.30,P=0.000).结论 在胃黏膜癌变过程中Wnt信号通路处于激活状态,可能影响了β-catenin在细胞内的分布,二者共同影响胃癌的发生、发展进程.     

鼻咽癌组织DNA聚合酶β基因突变与EBV感染相关

目的: 研究探讨鼻咽癌中DNA聚合酶β(DNA polymerase β, polβ)的变异情况及与EBV感染有无相关关系. 方法: 采用RT-PCR法(逆转录-DNA聚合酶链反应)、PCR-SSCP(聚合酶链-单链构象多态性分析)、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织及癌旁组织标本进行polβ基因突变研究. 用特异性EBV引物PCR扩增法检测EB病毒,分析出现EBV-PCR阳性与polβ突变及鼻咽癌发生之间的相关性. 结果: polβ-SSCP结果显示癌旁组织标本中polβ无突变;26例鼻咽癌组织标本中存在polβ基因变异的有8例,突变率为30.8%. polβ基因变异的鼻咽癌标本测序结果显示:核苷酸序列有多种形式的改变. 提取DNA用EBV引物进行扩增,26例鼻咽癌标本中出现阳性的有24例,阳性率为92.3%. 结论: 首次发现在鼻咽癌中存在多种形式的polβ突变,有polβ突变的病例均有EBV感染.     

胃癌组织中PTEN基因突变的研究

目的:研究抑癌基因PTEN突变高发区外显子5穴exon5雪和外显子8穴exon8雪在胃癌组织中的突变频率,探讨其突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期的关系。方法:应用聚合酶链反应鄄单链构像多态性分析(PCR鄄SSCP)方法检测胃癌组织和相应癌旁正常组织中PTEN基因的突变,并对突变样本的PCR产物进行测序分析。结果:42例胃癌组织中检测到PTEN基因突变3例,其中exon5突变1例,exon8突变2例,突变率为7.14%(3/42);42例相应癌旁正常组织未检测到突变,二者差异无统计学意义(P>0.05)。对42例胃癌进行组织学分级,低分化腺癌突变率为12.00%(3/25),中、高分化腺癌突变率为0(0/17),二者差异无统计学意义(P>0.05)。对42例胃癌临床病理分期,Ⅰ、Ⅱ期突变率为5.88%(1/17)熏Ⅲ、Ⅳ期突变率为8.00%(2/25),二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃癌组织中存在PTEN基因突变;主要发生在低分化腺癌中;而PTEN基因突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期之间无明显相关性。     

子宫内膜样腺癌发生过程中β-catenin蛋白异常表达和基因突变的检测

目的:检测子宫内膜良性增生、子宫内膜上皮内瘤变(EIN)和子宫内膜样腺癌组织中β-catenin蛋白表达和第3外显子基因突变情况,探讨在子宫内膜样腺癌发生过程中β-catenin蛋白异常表达和基因突变的关系。方法:采用免疫组织化学(SP法)和DNA直接测序方法,对10例增殖期子宫内膜、59例良性子宫内膜增生、24例EIN及24例子宫内膜样腺癌组织中β-catenin蛋白表达和第3外显子基因突变进行检测。结果:①10例增殖期子宫内膜β-catenin蛋白均显示正常(膜)表达,无异常表达病例。59例良性子宫内膜增生中53例(89.8%)呈正常(膜)表达,仅6例(10.2%)呈异常表达。24例EIN病变中正常表达及异常表达病例各占12例(50.0%)。在24例子宫内膜样腺癌中,β-catenin蛋白正常表达者8例,占33.3%;异常表达者16例,高达66.7%。在β-catenin蛋白异常表达病例中均以膜/浆表达者为主。EIN和子宫内膜样腺癌中β-catenin蛋白异常表达率(50.0%,66.7%)均明显高于良性子宫内膜增生(10.2%)(P<0.01),但二者间的异常表达率则无显著性差异(P>0.05)。②PCR扩增及测序结果显示,良性子宫内膜增生、EIN及子宫内膜样腺癌病例中均未发现β-catenin基因第3外显子突变。结论:①β-catenin蛋白的异常表达可能是一种区别良性子宫内膜增生和EIN或子宫内膜样腺癌的有用免疫标记物。②β-catenin基因第3外显子突变可能不是导致子宫内膜样腺癌癌变和β-catenin蛋白异常表达的主要原因。     

大肠肿瘤组织中β-catenin与FXR的表达及其临床意义

目的:研究大肠肿瘤组织中β-catenin、FXR蛋白的表达和临床意义。方法:采用免疫组化法检测正常大肠黏膜20例、大肠腺瘤30例和大肠癌60例组织中β-catenin、FXR蛋白的表达情况。结果:正常大肠黏膜β-catenin蛋白表达定位于细胞膜,大肠癌组织中β-catenin的细胞浆和细胞核表达(异位表达)明显增加,细胞膜表达有不同程度的减少。大肠癌组织异位表达率为60.0%,细胞膜表达缺失率为70.0%。FXR定位于细胞膜,癌旁正常结直肠黏膜组织中FXR均为阳性表达,在腺瘤和腺癌组织中表达率逐渐减低。FXR在腺瘤和腺癌组织中阳性率分别为73.3%(22/30)、43.3%(26/60),腺癌组织中FXR的表达显著低于腺瘤,两组比较,差异有统计学意义(P=0.006)。大肠癌组织中FXR与β-catenin表达呈高度负相关(r=-0.562,P<0.001)。结论:在大肠腺瘤和腺癌组织中,FXR表达逐渐降低,β-catenin表达量逐渐升高,FXR与β-catenin呈负相关。FXR与β-catenin可以作为大肠癌诊断、监测和预后评估的分子生物学指标,并且为大肠癌的防治提供新靶点。     

Lgr5和β-catenin蛋白在胃癌组织中的表达

目的探究胃癌组织中Lgr5和β-catenin蛋白表达的差别及相关性。方法选择2012年1月～2017年12月间嘉兴市第一医院80例胃癌患者组织病理标本作为观察组,30例浅表性胃炎患者组织病理标本和30例萎缩性胃炎患者组织病理标本分别作为对照组,采用免疫组化法检测Lgr5和β-catenin蛋白的表达。结果 Lgr5和β-catenin蛋白在观察组中的表达率高于对照组,三者之间存在显著差异(χ2=12.937、13.654,P均0.05)。Lgr5蛋白在胃癌中的表达与患者的组织分化程度及患者的肿瘤TNM分期存在明显相关性(P均0.05);β-catenin蛋白在胃癌中的表达与患者是否存在淋巴结转移以及患者的肿瘤TNM分期存在明显相关性(P均0.05)。同时,在胃癌组织中,Lgr5和β-catenin蛋白的表达呈明显相关性(rp=0.226,P=0.038)。结论在胃癌的发生发展过程中,Lgr5和β-catenin蛋白发挥着重要作用,二者的检测对于胃癌的靶向诊疗意义重大。     

β-catenin、Biglycan蛋白在结肠癌中的表达及临床意义

目的观察β-链蛋白(β-catenin)、双糖链蛋白聚糖(Biglycan)蛋白在结肠癌中的表达特点及临床意义,探讨两项指标与结肠癌临床表现、病理特征的关系及β-catenin阳性表达率与微卫星状态的关系。方法选取2019年1月至2020年6月孝感市中心医院收治的80例结肠癌患者作为研究对象,收集其根治术后结肠癌标本及其癌旁正常肠组织,采用免疫组织化学染色方法检测β-catenin、Biglycan蛋白,以癌旁正常肠组织为对照,光镜下评估各项指标表达情况。采用PCR方法检测分析微卫星状态并分组。结果与癌旁正常组织相比,Biglycan蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率明显升高,Biglycan蛋白表达与结肠癌组织的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,表达率差异有统计学意义(P<0.05)。与癌旁正常组织相比,β-catenin蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率明显升高,β-catenin蛋白阳性表达与癌组织的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,表达率差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin阳性表达率升高与Biglycan蛋白阳性表达存在一定的相关性(r=0.922)。β-catenin蛋白阳性表达在结肠癌中MSI-H与MSI-L/MSS两组间无明显相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Biglycan与β-catenin在结肠癌组织中阳性表达率明显高于癌旁正常组织,二者表达与癌组织的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,可作为评估结肠癌预后指标,用于指导临床治疗,且二者表达相互间存在一定相关性,可能参与结肠癌的WNT信号通路激活。     

β-连环素和Axin的表达与胃癌发生及预后关系的研究

目的探讨β-连环素(β-catenin)和Axin(axis inhibition protein)在癌旁正常胃黏膜及胃癌组织中的表达及其与胃癌各临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测15例癌旁胃黏膜及60例胃癌石蜡切片中Axin和β-catenin的表达情况;分析癌旁及胃癌组织中二者的表达;二者表达分别与胃癌患者年龄、临床分期、肿瘤分型、分化程度和淋巴结转移的关系及二者表达的关系。以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照,以正常大肠黏膜组织作为阳性对照。结果β-catenin在癌旁胃黏膜组织中的表达率为93%,胃癌组织的表达率仅为28%(17/60),二者差异有统计学意义(P<0.01)。癌旁胃黏膜组织中Axin的阳性表达率为87%,胃癌组织中Axin的表达率为55%(33/60),二者差异有统计学意义(P<0.01)。72%(43/60)的胃癌组织中检测出β-catenin的细胞质和(或)核表达,视为细胞膜表达降低。高、中、低分化胃癌中,β-catenin的表达降低率分别为60%(12/20)、65%(13/20)和90%(18/20),差异有统计学意义(P<0.01)。低分化胃癌β-catenin的表达降低率显著高于高、中分化胃癌。有淋巴结转移和无淋巴结转移的胃癌中β-catenin表达降低率分别为81%(21/26)和65%(22/34),差异有统计学意义(P<0.05)。本实验中Axin的阳性表达率为55%(33/60)。Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期胃癌中,Axin的阳性表达率为80%(12/15)、53%(10/19)和42%(11/26),差异有统计学意义(P<0.05)。中晚期胃癌中Axin的阳性表达率显著低于早期胃癌。有淋巴结转移和无淋巴结转移的胃癌中Axin的阳性表达率分别为42%(11/26)和65%(22/34),差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin细胞核表达率为27%(16/60)。在β-catenin核表达阳性的病例中,Axin阳性表达率为20%(3/15),显著低于β-catenin核表达阴性病例的67%(30/45)(P<0.01)。结论β-catenin的膜表达降低与胃癌的低分化和淋巴结转移相关,Axin的表达与胃癌的临床分期和淋巴结转移相关,Axin的表达和β-catenin的细胞核蓄积呈负相关。     

胃癌中转化生长因子-βRⅡ、胰岛素样生长因子-ⅡR、Bax基因突变与微卫星不稳定性相关性研究

目的：检测胃癌组织中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGV-ⅡR)和Bax基因突变与微卫星不稳定性(MSI)发生情况，探讨其相关性以及MSI在胃癌发生发展中可能的作用机制。方法：胃镜下取36例胃癌标本，酚与氯仿法抽提基因组DNA，银染PCR-SSCP方法同时检测目的位点。结果：胃癌组织中TGF-βRⅡ、IGF-HR和Bax基因发生突变分别有7例、6例和6例，MSI发生率达58．3％，3种基因突变均见于MSI阳性的胃癌，尤其是MSI-H型胃癌。结论：MSI可通过引起靶基因突变，特别是部分抑癌基因突变，促进了部分胃癌的发生发展；     

Wnt信号通路组件在胃癌及慢性萎缩性胃炎中的表达分析

目的:探讨Wnt信号通路在胃癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组化方法检测胃癌、癌旁组织、慢性萎缩性胃炎组织Wnt2及β-catenin的表达并进行分析。结果:胃癌组织Wnt2表达显著高于癌旁组织和慢性萎缩性胃炎表达;癌旁组织Wnt2表达高于慢性萎缩性胃炎表达。癌旁组织及慢性萎缩性胃炎β-catenin均表达,胃癌组织β-catenin表达显著高于癌旁组织和慢性萎缩性胃炎。结论:Wnt2、β-catenin在胃癌中均高表达,β-catenin在慢性萎缩性胃炎表达明显,Wnt信号途径异常活化在胃癌的发生发展过程中有重要作用。     

β-catenin异常表达在结肠癌发生发展中的作用研究

目的:探讨β-catenin在原发性结肠癌中表达及临床意义。方法:应用免疫组化Envision法检测β-catenin蛋白在138例结肠癌(48例含癌旁组织)、37例结肠腺瘤组织及66例结肠正常黏膜中的表达;应用实时荧光定量PCR检测β-catenin基因在37例新鲜原发性结肠肿瘤标本及其配对37例正常结肠中表达;分析β-catenin蛋白及其基因表达与临床病理的关系。结果:β-catenin在正常结肠、结肠腺瘤、癌旁组织及结肠癌胞质中阳性率分别为42.4%,64.9%,72.9%和68.8%;β-catenin蛋白表达与淋巴结转移、Duke分期有关(P<0.05)。β-catenin mRNA在结肠肿瘤中平均表达是正常结肠中的1.946倍(P<0.05),表达水平与肿瘤部位及淋巴结转移有关。结论:β-catenin因子的异常表达与结肠癌的发生发展密切相关。     

胃癌组织SOX1和β-catenin的表达及其与临床病理特征、远期预后的相关性

目的 探讨胃癌组织性别决定区Y框蛋白1(SOX1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达及其与临床病理特征、远期预后的相关性.方法 收集2015年2月—2017年3月在西安市第四医院行胃癌根治术或姑息性切除术患者的胃癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学染色检测SOX-1、β-catenin的阳性表达;Western ...     

胃癌组织中DNA聚合酶β基因突变检测

目的:了解胃癌组织中DNA聚合酶β(polβ)基因的突变情况。方法:利用RT-PCR、单链构象多态性(SSCP)和序列分析对38例胃癌组织及其相应癌旁正常组织标本polβ基因进行检测。利用DNASIS、OMIGA等软件分析测序数据,Chou&Fasman算法推测polβ氨基酸序列二级结构。结果:38例胃癌组织标本中SSCP异常9例(23.7%);而对应的癌旁正常组织均未见异常。polβ在低分化胃癌中的突变率达57.1%(8/14),而在中、高度分化胃癌中的突变率为4.2%(1/24),差异有统计学意义(P<0.05)。突变分别为196位A→G(28位Asn→Ser),268位A→G(52位Lys→Arg),790位A→T(226位Asp→Val)。其中196位A→G突变可导致polβ酶蛋白的二级结构明显改变。结果:胃癌组织中的polβ基因突变可能与胃癌的发生、发展有关。     

β-Catenin的表达与胃癌组织分化程度及转移的关系

目的：通过研究β-连环蛋白(β-catenin)与胃癌组织分化程度及转移的关系,探讨β-catenin在胃癌发生及其转移的病理过程中的作用机理。方法应用Western Blot技术及免疫组化方法分析β-catenin在非恶性胃部组织、胃癌原发灶及转移灶组织中的表达,并对其进行比较。结果 Western Blot技术发现β-catenin在胃癌和非恶性胃部组织之间在表达的定量方面没有显著差异。免疫组化技术发现在163例原发性胃癌组织标本中,有79例β-catenin在细胞膜或者细胞浆阳性表达。β-catenin在低分化胃癌中表达水平显著降低(P<0.01)。41例转移性胃癌组织标本中有2例表达β-catenin,与原发性胃癌组织相比,表达水平显著降低(P<0.01)。结论β-catenin在部分原发性胃癌中表达缺失,在低分化胃癌及转移中表达缺失更为常见。     

nm23-H1基因突变及异常表达与大肠癌转移相关性的研究

目的：探讨nm23-H1基因突变及异常表达与大肠癌转移之间的关系。方法：（1）收集63例中国人大肠癌组织及癌旁组织，酚-氯仿-异戊醇法提取基因组DNA，同时收集整理患者的临床和病理资料；（2）应用PCR扩增nm23-H1基因全部编码序列第2-5位外显子后，经SSCP法初步筛查基因突变并对异常带型样本进行DNA测序分析；（3）应用流式细胞仪检测14例大鼠癌组织及癌旁组织nm23-H1蛋白的表达情况。结果：nm23-H1基因第2-4位外显子在63例大肠癌组织中（其中20例标本有淋巴结转移）未发现异常突变，仅有15例大肠癌组织nm23-H1基因第5外显子序列存在突变，其第360位碱基发生T-C置换（同义突变）；nm-23-H1基因蛋白在大肠粘膜组织中有表达，在部分大肠癌组织中的表达比其癌旁粘膜组织低，并与肿瘤转移有相关性，结论：nm23-H1基因突变的大肠癌组织中为小概率事件，大肠癌病类型，有无转移与nm23-H1基因突变无明显相关性；nm23-H1基因蛋白水平的表达下降与大肠癌的转移有相关性。     

不同胃疾病中β-catenin表达及其意义

目的探讨不同胃疾病组织β-catenin的表达及其在胃癌发生、分化中作用。方法应用免疫组织化学方法对300例不同胃疾病粘膜标本进行β-catenin的原位检测。结果 SG、AG、GC组织,β-catenin蛋白总表达率为SG〉GC〉AG;β-catenin蛋白细胞核表达率为SG、AG〈GC（P〈0.05）。GC组织β-catenin表达为肠型胃癌高于弥漫型胃癌（P〈0.05）。结论β-catenin的细胞膜缺失及细胞核的转位参与胃癌的发生,而且β-catenin主要参与向肠型胃癌分化。     

乳腺癌中β-catenin蛋白表达及细胞内定位与意义

目的分析β-连接素(β-catenin)蛋白在乳腺癌组织中的表达及其细胞内定位情况。方法以乳腺癌组织147例和癌旁正常组织15例为研究对象,采用IHC测定β-catenin蛋白的表达情况。结果 147例样本中β-catenin蛋白异常表达样本共有121例(异常表达率82.3%),其中包括细胞浆异常表达53例,细胞膜异常表达68例。β-catenin蛋白在有淋巴转移以及临床分期II期、III期的乳腺癌组织中的异常表达率明显偏高(P0.05);其中,存在淋巴转移和临床分期Ⅲ期的乳腺组织胞浆异常表达比率均明显高于胞膜的异常表达。结论β-catenin蛋白能够促进乳腺淋巴转移、乳腺癌细胞的浸润与侵袭以及肿瘤的发生。     

原癌基因和链蛋白在肝癌中的表达及临床意义

目的探讨原癌基因(c-myc)和β-链蛋白(β-catenin)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC,以下简称"肝癌")中的表达及意义。方法通过免疫组化En Vision法检测108例肝癌组织及癌旁组织中c-myc和β-catenin的表达,观察c-myc和β-catenin在肝癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系。结果 c-myc和β-catenin在肝癌组织中的表达率分别为42.59%(46/108)和40.74%(44/108),c-myc和β-catenin在癌旁组织中阳性率分别为14.81%(16/108)和4.63%(5/108),二者比较差异有统计学意义(P<0.001)。c-myc和β-catenin在癌组织中的表达与肿瘤分化程度相关(P<0.001),与年龄、性别、有无癌栓、肿瘤个数、肿瘤直径、癌旁组织是否有肝硬化均无统计学关联(P>0.05)。结论在肝癌组织中c-myc和β-catenin表达密切相关。     

β-catenin蛋白表达与大肠腺瘤癌变的关系

目的探讨β-catenin蛋白表达与大肠腺瘤癌变的关系.方法采用免疫组化法检测25例正常大肠粘膜(NCM)、42例大肠腺瘤(CA)和19例大肠腺瘤癌变(CAC)组织中β-catenin蛋白的表达.结果正常大肠粘膜β-catenin蛋白表达位于细胞膜,大肠腺瘤和大肠腺瘤癌变组织的β-catenin细胞膜表达有不同程度的缺失,而细胞浆和细胞核异位表达明显增加.大肠腺瘤癌变组织β-catenin异位表达率为89.5%,显著高于大肠腺瘤42.9%(P＜0.01).大肠腺瘤组织β-catenin细胞膜表达缺失率为33.3%,大肠腺瘤癌变组织为42.1%.结论β-catenin蛋白的异常表达可能是大肠腺瘤癌变的重要环节之一.     

Wnt通路新调控因子R-spondin家族在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨结直肠癌及癌旁组织中R-spondin家族的表达水平及其与患者临床病理分期之间的关系。 方法：收集中南大学湘雅医院2014年1月至2014年8月行根治性手术治疗后的64例结直肠癌新鲜组织及配对的癌旁组织 标本,利用实时荧光定量PCR及免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织中R-spondin 1~4及β-链蛋白(β-catenin)的mRNA 及蛋白表达情况;分析R-spondin 1~4表达水平与结直肠癌的临床病理因素之间的关系;探讨R-spondin 1~4与β-catenin 在结直肠癌中表达的相关性。结果：与癌旁组织相比较,R-spondin 1蛋白及mRNA在结直肠癌组织中呈高表达 (P<0.05);与正常组织比较,R-spondin 2~4在结直肠癌组织中呈高表达,但与癌旁组织的表达水平比较差异无统计学 意义(P>0.05);结直肠癌组织中R-spondin 1表达水平与β-catenin的细胞核表达水平呈正相关(r=0.6307,P<0.05)。结论： 与癌旁组织相比较,R-spondin 1在结直肠癌组织中呈高表达;R-spondin 1可能通过调控Wnt信号通路下游的β-catenin活 性而发挥促癌作用。