异氟醚预处理对心肌缺血再灌注大鼠心肌ERK1/ERK2、HIF-1α和VEGF水平的影响

目的探讨异氟醚预处理对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞外信号调节激酶（ERK1/ ERK2）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）水平的影响。方法雄性Wistar大鼠90只,体重270～390 g。腹腔注射硫代仲丁巴比妥钠150 mg/kg麻醉后,阻断左冠状动脉前降支30 min。再灌注2 h。取60只大鼠,随机分为6组（n=10）,于缺血前CON组静脉注射0.9%生理盐水;PD组经3 min静脉注射ERK1/ERK2上游激酶抑制剂PD98059 1.0 mg/kg;DMSO组经3 min静脉注射PD98059溶媒DMSO 0.2 ml;ISO组吸入异氟醚1.0 MAC 30 min后停止吸入15 min;PD＋ISO组和ISO＋ PD组分别在吸入异氟醚前即刻和吸入异氟醚后即刻经3 min静脉注射PD98059 1.0 mg/kg。再灌注2 h后采用氯化硝基四氮唑蓝染色法测定心肌梗死面积。取剩余的30只大鼠,随机分为5组（n=6）,CON组、PD组、ISO组和PD＋ISO组所有处理同前,ISO正常对照组吸入异氟醚30 min后停止吸入165 min。再灌注2 h后,采用Western blot法测定ERK1/ERK2、HIF-1α和VEGF水平。结果与CON组比较,ISO组和ISO＋PD组心肌梗死区面积降低,ISO组和ISO正常对照组ERK1/ERK2、HIF-1α和VEGF水平升高（P〈0.05）;ISO正常对照组ERK1/ERK2水平高于ISO组（P〈0.05）。结论异氟醚预处理可通过上调心肌ERKI/ERK2、HIF-1α及VEGF的水平减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

肢体缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注致心肌损伤的影响

目的 探讨单侧后肢缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注致心肌损伤的影响.方法 成年雄性Wistar大鼠72只,体重200～250 g,随机分为3组(n=24),假手术组(S组)仅暴露肝门;肝脏缺血再灌注组(IR组)肝脏缺血60min后恢复灌注;后肢缺血预处理组(LIP组)阻断右侧后肢动脉、静脉和肌间侧支血流10 min后恢复灌注,30 min后建立肝脏缺血再灌注模型.于肝脏再灌注即刻、1、6 h各处死8只大鼠,测定血清脑钠素(BNP)浓度和心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活性,观察心肌超微结构.结果 与S组比较,IR组和LIP组心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活性降低,血清BNP浓度升高(P＜0.05或0.01).与IR组比较,LIP组心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活性升高(P＜0.05),心肌病理损伤程度减轻.结论 单侧后肢缺血预处理可减轻大鼠肝脏缺血再灌注致心肌损伤的程度.     

细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1(HO-1)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠,体重220～280g,制备Langendorff离体心脏灌注模型,选取模型制备成功的离体心脏18个,随机分为3组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和PEP-1/HO-1处理+缺血再灌注组(HO-1组).IR组K-H液平衡灌注30 min后,采用停灌40 min再灌注50 min的方法制备缺血再灌注模型.HO-1组在停灌前用含50 μmol/L融合蛋白PEP-1/HO-1的K-H液平衡灌注15 min,S组采用K-H液持续灌注120 min.再灌注50 min时,收集冠脉流出液,测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;取心肌组织,采用Western blot法测定HO-1蛋白表达水平,采用硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性.结果 HO-1组心肌组织HO-1蛋白表达水平较IR组升高(P＜0.01).与S组比较,IR组和HO-1组冠脉流出液CK和LDH活性及心肌组织MDA含量升高,心肌组织SOD活性降低(P＜0.01);与IR组比较,HO-1组冠脉流出液CK和LDH活性及心肌组织MDA含量降低,心肌组织SOD活性升高(P＜0.01).结论细胞穿透肽PEP-1可将HO-1蛋白成功导入心肌组织,并减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

L-精氨酸对兔肺缺血再灌注时血红素氧合酶-1的影响

目的 探讨L-精氨酸对兔肺缺血再灌注时血红素氧合酶-1(HO-1)的影响.方法 健康日本大耳白兔20只,雌雄不拘,体重1.7～2.6 kg,随机分为2组,肺缺血再灌注组(IR组)和L-精氨酸治疗组(L-Arg组),每组10只.建立兔单肺原位缺血再灌注损伤模型,L-Arg组肺缺血前20 min耳缘静脉注射L-Arg溶液100 mg/kg.采用原位杂交方法测定兔肺组织HO-1的表达;计算肺组织湿/干重比(W/D)及损伤肺泡百分数(IAR);电镜下观察肺组织超微结构.结果 HO-1在两组肺血管内皮、部分血管平滑肌、外膜层及部分气道上皮均有表达;与IR组比较,L-Arg组HO-1水平升高,W/D及IAR降低(P＜0.05);L-Arg组肺组织形态学异常改变轻于IR组.结论 L-精氨酸可通过上调肺组织HO-1的表达,增强肺组织HO-1的活性,减轻兔肺缺血再灌注损伤.     

缺血预处理对大鼠肝细胞凋亡及HIF-1α和Survivin蛋白表达的影响

目的:观察缺血预处理(IP)对缺血再灌注(IR)损伤引起的肝细胞凋亡及对调控基因Survivin、HIF-1α蛋白表达的影响,探讨IP对鼠肝IR损伤保护作用的机制。方法:将90只SD大鼠分为假手术(SO)组10只、IR组和IP组各40只。SO组术中只牵拉分离肝十二指肠韧带,操作完成后关腹;IR组阻断十二指肠韧带,造成缺血30min;IP组缺血30min前持续5min缺血及5min再灌注。IR组及IP组分别于再灌注2、6、12和24h后各处死10只动物,取肝脏标本;SO组于术后2h取肝组织标本。检测细胞凋亡指数(AI)及Survivin、HIF-1α蛋白表达水平。结果:IR组、IP组AI较SO组明显增加(P<0.05),相同时相点IP组较IR组细胞AI明显降低(P<0.05)。IR组、IP组Survivin、HIF-1α蛋白表达先升后降,6h左右达高峰;HIF-1α(除24h时)和Survivin蛋白表达在相同时相点IP组较IR组高(P<0.05)。结论:IP对肝组织IR损伤的保护作用机制之一可能是通过上调HIF-1α、Survivin蛋白的表达抑制细胞凋亡,从而发挥肝脏保护作用。     

大鼠血红素加氧酶-1基因转染对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价重组腺相关病毒(rAAV)介导大鼠血红素加氧酶-1(rHO-1)基因转染在大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制.方法 健康雄性SD大鼠81只,体重220～280 g,随机分为4组:假手术组(SH组,n=9)、生理盐水组(NS组,n=24)、重组腺相关病毒-荧光蛋白组(rAAV-EGFP组,n=24)和重组腺相关病毒-HO-1组(rAAV-HO)-1组,n=24).NS组、rAAV-EGFP组和rAAV-HO-1组分别心肌注射600 μl生理盐水、rAAV-EGFP(1.5×1011 v.g.)或rAAV-HO-1(1.5×1011 v.g.).在基因转染后3个月,NS组、rAAV-EGFP组和rAAV-HO-1组各处死3只大鼠,取注射部位心肌,通过测定心肌细胞荧光蛋白的表达,计算转染率,并通过免疫组化染色和RT-PCR法检测HO-1蛋白和HO-1 mRNA的表达.采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注模型;再灌注120 min后,处死大鼠,测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,电镜下观察心肌细胞的超微结构.结果 心肌细胞转染率为(53.5±2.0)%.与NS组比较,rAAV-HO-1组HO-1蛋白及HO-1 mRNA表达增加(P＜0.01);与rAAV-EGFP组比较,rAAV-HO-1组HO-1蛋白及HO-1 mRNA表达增加(P＜0.01);与SH组比较,NS组和rAAV-EGFP组SOD活性下降,MDA含量升高(P＜0.01);与NS组和rAAV-EGFP组比较,rAAV-HO-1组SOD活性升高,MDA含量降低(P＜0.01).NS组及rAAV-EGFP组心肌细胞超微结构损伤较SH组和rAAV-HO-1组重.结论 腺相关病毒介导的血红素加氧酶-1基因转染大鼠心肌细胞后,可减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制与抗氧化有关.     

钴原卟啉诱导血红素氧合酶-1高表达减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨钴原卟啉(CoPP)诱导血红素氧合酶-1(HO-1)高表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机理.方法 以Wistar大鼠为实验对象,CoPP组分别于左肾血流阻断前48 h和24 h腹腔注射CoPP 2.5 mg/kg,然后阻断左肾血流47 min,恢复左肾血流的同时切取大鼠右肾,采用免疫组织化学染色和免疫印迹法检测其HO-1的表达.在再灌注24 h后,处死大鼠,取其下腔静脉血和左肾,测定血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度,观察肾组织学变化,检测肾组织中HO-1的表达.IRI组除不用CoPP处理外,其余同CoPP组.CoPP组和IRI组另有部分大鼠的血流阻断时间延长至80 min,恢复血流后不处死,观察14 d,记录其存活情况.结果 IRI组血清Cr及BUN分别为(134.37±24.26)μmol/L和(30.10±3.09)mmol/L,明显高于CoPP组的(48.92±12.92)μmol/L和(13.99±5.00)mmol/L(P＜0.05).IRI组肾小管细胞大片坏死,管型形成,与之相比,CoPP组肾小管坏死范围稍小,但肾小管病变范围仍较广泛,肾小管上皮细胞多处于水变性阶段,"缺血样"肾小球减少,管型形成较少.缺血前及再灌注24 h后,CoPP组的肾组织中HO-1均为高表达,主要位于肾间质的毛细血管处,IRI组再灌注24 h后也见肾组织中HO-1为高表达.术后14 d内,IRI组的6只大鼠中有4只死亡,而CoPP组的5只大鼠全部存活,两组大鼠存活率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缺血前使用CoPP可减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,该保护作用可能是通过CoPP诱导肾脏高表达HO-1来实现的.     

异丙酚预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的影响

目的 探讨异丙酚预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的影响.方法 成年雄性SD大鼠60只,体重250～300 g,随机分为5组(n=12):对照组(Con组)、缺血再灌注组(I/R)和不同浓度异丙酚组(P1组、P2组、P3组).采用Langendorpf离体心脏灌注模型,用K-H液平衡20 min后,Con组继续用K-H液灌注130 min;I/R组用K-H液灌注40 min,缺血30 min,再灌注60 min;P1组、P2组、P3组于缺血前分别用含50、100、150 μmol/L异丙酚的K-H液灌注10 min,再用K-H液冲洗10 min,该过程总共进行2次为预处理,预处理后各组处理均同I/R组.记录平衡20 min(基础值)、缺血前即刻、再灌注60 min的心率(HR)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室发展压(LVDP)、左心室压力上升及下降速率最大值(±dP/dtmax)、冠脉流量(CF).于再灌注60 min时测定心肌梗死面积以及线粒体电子传递链Ⅰ复合体活性.结果 与Con组比较,再灌注60 min时I/R组LVEDP升高,HR、LVDP、±dP/dtmax、CF均下降,P2组和P3组LVEDP升高,I/R组和P1组心肌梗死面积增大,I/R组、P1组、P2组和P3组线粒体电子传递链Ⅰ复合体活性降低(P＜0.05);与I/R组比较,P2组及P3组再灌注60 min时LVEDP降低,HR、LVDP、±dP/dtmax、CF均升高,P2组及P3组心肌梗死面积减小,P2组和P3组线粒体电子传递链复合体Ⅰ活性升高(P＜0.05).结论 100、150μmol/L异丙酚预处理通过增加心肌线粒体电子传递链复合体Ⅰ的活性,在一定程度上减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

缺血预处理和缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注时炎性反应影响的比较

目的 比较缺血预处理和缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注时炎性反应的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重290～320 g,随机分为4组(n=10),缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)和缺血后处理组(IPOC组)采用结扎左冠状动脉前降支30 min进行再灌注的方法制备心肌缺血再灌注模型,假手术组(S组)仅在左冠状动脉前降支下穿线.监测再灌注期间HR和MAP,并计算HR和MAP的乘积(心肌氧耗指数,RPP).分别于再灌注30和180 min时采集静脉血样,测定血清TNF-α、IL-6、高迁移率组蛋白1(HMGB1)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)的浓度.采集完血样,取心肌组织,测定心肌梗死体积.结果 与S组比较,I/R组MAP和RPP降低,血清cTnI和炎性细胞因子浓度升高,心肌梗死体积增大(P＜0.05);与I/R组比较,IPC组MAP升高,IPOC组MAP和RPP均升高,两组血清cTnI和炎性细胞因子浓度降低,心肌梗死体积缩小(P＜0.05);与IPC组比较,IPOC组血清炎性细胞因子浓度升高,心肌梗死体积增大(P＜0.05).结论缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注时炎性反应的作用强于缺血后处理,从而使心肌保护效应较好.     

大鼠血红素加氧酶-1基因转染对心肌缺血再灌注损伤大鼠炎性因子的影响

目的探讨重组腺相关病毒（rAAV）介导大鼠血红素加氧酶-1（HO-1）基因转染对心肌缺血再灌注损伤大鼠炎性因子的影响。方法雄性SD大鼠93只，体重225．275g，随机分为4组：假手术组（SH组，n=12）、生理盐水组（NS组，n=27）、重组腺相关病毒．荧光蛋白组（rAAv-EGFP组。n=27）及重组腺相关病毒．血红素加氧酶-1组（rAAV-rHO-1组，n=27）。NS组、rAAV-EGFP组和rAAV-rHO-1组分别于左心室前后壁共取4点注入600μl生理盐水、rAAV-EGFP或rAAV-HO-1病毒液。在基因转染后3个月，通过RT-PCR和Westernblot法检测HO-1mRNA和蛋白的表达，荧光显微镜下观察荧光蛋白的表达。采用结扎左冠状动脉前降支30min、再灌注120min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型，再灌注120min后，处死大鼠，测定心肌梗死面积及血清TNF-α、IL-6水平，电镜下观察心肌细胞的超微结构。结果rAAV-rHO-1组HO-1表达明显高于NS组和rAAV-EGFP组（P〈0．01），仅rAAV-EGFP组心肌观察到荧光蛋白的表达；与SH组比较，NS组、rAAV-EGFP组和rAAV-rHO-1组心肌梗死面积增加，血清TNF-α、IL-6水平明显升高（P〈0．05），心肌结构紊乱；与NS组和rAAV-EGFP组比较，rAAV-rHO-1组心肌梗死面积减少（P〈0．01），血清TNF-α、IL-6水平明显降低（P〈0．05），心肌结构破坏程度较轻。结论重组腺相关病毒介导大鼠血红素加氧酶-1基因转染大鼠心肌细胞后，降低炎性因子的产生，从而减轻心肌缺血再灌注损伤。     

缺血或药物预处理对大鼠供肝缺血再灌注损伤的抑制作用

目的　探讨缺血预处理 (IPC)或阿霉素预处理 (DPC ,模拟IPC)对大鼠供肝延迟性保护作用的发生机制。方法　将供鼠分为 3组。IPC组 :供鼠采用肝脏预先缺血 10min后再开放 ;DPC组 :供鼠经静脉注射阿霉素 (1mg/kg体重 ) ;对照组 :供鼠用等量生理盐水注射。观察各组预处理后血红素氧化酶 1(HO 1)和热休克蛋白 70 (HSP70 )含量 ;建立上述各组大鼠原位肝移植模型 ,并设假手术对照组 ,观察肝移植后各组对供肝缺血再灌注损伤的影响。结果　IPC组HO 1、HSP70含量分别于预处理 12h和 2 4h达到高峰 ;IPC和DPC组预处理 2 4h ,诱导的HSP70、HO 1含量差异无显著性 (P >0 .0 5 )。对照组肝移植后 6h ,肝组织中ICAM 1mRNA表达和内皮细胞ICAM 1分子表达明显增强 ,髓过氧化物酶 (MPO)活性增高 ,血清中天冬氨酸转氨酶 (AST)、丙氨酸转氨酶 (ALT)、乳酸脱氢酶 (LDH)及肝组织湿重 /干重 (W/D)水平明显升高 ,和假手术组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。IPC或DPC组肝移植后减弱了ICAM 1mRNA和蛋白表达及MPO活性 ,AST、ALT、LDH及W/D的水平亦明显降低 ,与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　IPC的延迟保护作用是通过降低中性粒细胞的粘附浸润来实现的 ,这与IPC诱导生成HSP70和HO 1有关。DPC可以模拟IPC的延迟性保护     

重组腺相关病毒介导血红素加氧酶-1基因转染对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤时炎性细胞因子的影响

目的 探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤时炎性细胞因子的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重220～280 g,随机分为3组:对照组(C组,n=6),生理盐水组(N组,n=12)和rAAV-HO-1组(H组,n=12).N组和H组分别心肌注射600μl生理盐水或rAAV-HO-1(1.5×10~(11)v.g.).基因转染后3个月,N组和H组各处死6只大鼠,取注射部位心肌组织,测定HO-1的表达.制备大鼠离体心脏缺血再灌注模型,于平衡灌注15 min,再灌注15、30、45 min时,记录左心室舒张末压(LVEDP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室收缩压最大上升速率(+dp/dt_(max))和左心室收缩压最大下降速率(-dp/dt_(max)),测定心肌组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量.结果 H组心肌组织HO-1表达较N组上调(P<0.01).与C组比较,N组和H组再灌注各时点LVEDP、心肌组织TNF-α和IL-6的含量升高,LVDP和±dp/dt_(max)均降低(P<0.05或0.01);与N组比较,H组LVEDP、心肌组织TNF-α和IL-6的含量降低,LVSP和±dp/dt_(max)均升高(P<0.05或0.01).结论 rAAV介导HO-1基因转染大鼠心肌后,可减轻离体心脏缺血再灌注损伤,其机制与抑制炎性细胞因子的生成有关.     

缺血预处理对肢体缺血再灌注损伤的影响

目的　观察缺血预处理 (IPC)对肢体缺血再灌注损伤的影响。方法　选择 2 0例需充气止血带止血进行手术的患者 ,随机分为对照组 (n =10 )和IPC组 (n =10 )。IPC组患者术前应用 3次 5min循环缺血 ,间隔 5min再灌注预处理后在止血带下进行手术 ;对照组直接在止血带下进行手术。在肢体缺血前和再灌注 30min、90min、180min分别取静脉血检测血清肌酸磷酸激酶 (CPK)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶 (LDH)、丙二醛 (MDA)和过氧化物歧化酶 (SOD)水平。结果　随着肢体缺血再灌注时间的延长 ,血中CPK、AST、LDH、MDA含量逐渐升高 ,而SOD活性逐渐降低。IPC组在缺血前及再灌注同时间 ,血中CPK、AST、LDH、MDA含量低于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;而SOD活性高于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　IPC能有效地减轻肢体缺血再灌注损伤程度 ,减轻脂质过氧化反应 ,提高肢体缺血耐受性     

缺血预处理对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响

目的研究缺血预处理（IPC）对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响。方法SD大鼠72只，随机分为4组（n=18）：对照组（CON组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IPC组）和5-羟葵酸（5-HD）拮抗IPC组（5-HD＋IPC组）。采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型，IPC组在全心停灌前，给予2次缺血预处理，每次缺血5min，间隔5min；5-HD＋IPC组预处理前灌注5-HD 10min。各组于平衡末、缺血前、再灌注30min各取6个心脏，分离心肌线粒体并测定线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（ADP／O2）、NADH氧化酶（NADH-OX）、琥珀酸氧化酶（SUC-OX）、细胞色素C氧化酶（CYTC-OX）的活性。结果与CON组比较，IR组、IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min RCR、ADP／O2、NADH-OX、SUC-OX和CYTC＋OX的活性降低（P〈0．05）；与IR组比较，IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标升高（P〈0．05）；与IPC组比较，5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标降低（P〈0．05）。结论缺血预处理可改善大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的功能，其机制与mitoKATP的激活有关。     

缺血预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的作用

目的 了解缺血预处理（ＩＰ）对小肠缺血的作用。方法 在不同缺血预处理的大鼠模型上，观察缺血再灌注后肠组织腺苷酸含量和肠粘膜损伤情况。结果 ＩＰ１组（预处理：１０分钟缺血１５分钟再灌注和ＩＰ２组（３分钟缺血５分钟再灌接以７分种１０分钟再灌）小肠的ＡＴＰ和总腺苷酸含量较对照组明显增高，肠粘膜损伤亦明显减轻（Ｐ〈０．０５）。．结论 ＩＰ１和ＩＰ２组的缺血预处理对小肠缺知再灌注损伤有一定的保护作用。     

细胞穿透肽PEP-1导入血红素加氧酶-1蛋白对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价细胞穿透肽PEP-1导入血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠18只,周龄7～9周,体重210 ～ 260 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=6):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和融合蛋白PEP-1/HO-1+肾缺血再灌注组(HO组).采用夹闭双侧肾动脉45 min恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注损伤模型.HO组于夹闭双侧肾动脉前30 min时静脉注射融合蛋白PEP-1/HO-1.于再灌注6h时取右侧颈总动脉血样,测定血清BUN和Cr浓度;取肾组织检测MDA含量和SOD活性;采用免疫组化法检测肾组织HO-1的表达.结果 与S组比较,I/R组和HO组肾组织MDA含量、血清BUN和Cr浓度升高,肾组织SOD活性降低,HO-1蛋白表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,HO组肾组织MDA含量、血清BUN和Cr浓度降低,肾组织SOD活性升高,HO-1蛋白表达上调(P＜0.05).结论 细胞穿透肽PEP-1将HO-1蛋白成功导入肾组织,导入的HO-1蛋白通过抑制脂质过氧化反应减轻肾缺血再灌注损伤.     

腺苷预处理对大鼠缺血-再灌注心肌NF-κB和TNF-α的影响

目的 通过研究腺苷预处理对大鼠缺血心肌核转录因子（NF）-κB活性和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平的影响，探讨腺苷对心肌缺血-再灌注损伤保护的分子机制。方法 18只健康成年SD大鼠(300～350g)随机分为三组，每组6只。C组为对照组；Ⅰ组为缺血心肌组，缺血30min再灌注2h；P组为腺苷预处理组，腺苷预处理加缺血30min再灌注2h。大鼠开胸阻断左冠状动脉前室间支建立心肌缺血模型，取心尖部心肌组织提取胞核蛋白质，用Western blotting法测定胞核中NF-κB的活性并进行灰度扫描；用ELISA法测定TNF-α水平。结果 腺苷预处理后30min再行缺血-再灌注，NF-κB活性和TNF-α的含量与未处理组相比有明显下降；与对照组相比较，仅有少许升高，无显著差异。结论 腺苷可抑制缺血大鼠心肌的NF-κB活性和TNF-α水平，并由此推测腺苷对缺血大鼠心肌NF-κB活性的抑制可能是使TNF-α水平下调的分子机制。     

重复高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注时低氧诱导因子-1α及促红细胞生成素表达的影响

目的 探讨重复高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注时低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和促红细胞生成素(EPO)表达的影响.方法 雄性SD大鼠48只,体重250～300g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=16):假手术组(S组)、脊髓缺血再灌注组(I/R组)和重复高压氧预处理(HOP组).HOP组实施高压氧预处理,参数为:氧浓度＞98%,氧含量1000ml/L,压力2.5 ATA,1 h/d,连续5 d,最后1 d处理后24 h,I/R组和HOP组采用夹闭腹主动脉20min再开放的方法制备脊髓缺血再灌注模型.再灌注48h时评价后肢运动功能,然后处死大鼠,取L5-7节段脊髓组织,测定HIF-1α、EPO的mRNA及其蛋白表达水平,光镜下观察病理学结果.结果 与S组比较,I/R组和HOP组后肢运动功能和脊髓前角正常运动神经元计数降低,脊髓组织HIF-1α、EPO的mRNA及其蛋白表达水平上调(P＜0.05);与I/R组比较,HOP组后肢运动功能和脊髓前角正常运动神经元计数升高,脊髓组织HIF-1α及EPO的mRNA及其蛋白表达水平上调(P＜0.05).HOP组脊髓组织病理学损伤程度轻于I/R 组.结论 重复高压氧预处理可上调HIF-1α及EPO表达,从而减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of repeated hyperbaric oxygen preconditioning (HOP) on the expression of hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-1a) and erythropoietin (EPO) following spinal ischemiareperfusion (I/R) in rats. Methods Forty-eight male SD rats weighing 250-300 g were randomly divided into 3 groups (n = 16 each): sham operation group (S group); I/R group and repeated HOP group (HOP group). The animals in HOP group were pretreated with O2 ( ＞ 98 % ) at 2.5 ATA I h/d for 5 consecutive days at 24 h before spinal cord I/R. The animals were anesthetized with intraperitoneal pentobarbital sodium 35 mg/kg. Spinal cord ischemia was produced by cross-clamping of abdominal aorta distal to renal artery for 20 min in I/R and HOP groups. Hind-limb motor function was assessed and scored st 48 h of reperfusion. The animals were then sacrificed and the L5-7 segment of the spinal cord was removed for determination of the expression of HIF-1 α and EPO mRNA and protein and microscopic examination. Results Compared with group S, the hind-limb motor function scores and the number of normal motor neurons in the anterior horn of the spinal cord were significantly decreased, and the expression of HIF-1α and EPO mRNA and protein was up-regulated in I/R and HOP groups ( P ＜ 0.05). Compared with group I/R, the hind-limb motor function scores and the number of normal motor neurons in the anterior horn of the spinal cord were significantly increased, and the expression of HIF-1α and EPO mRNA and protein was up-regulated in group HOP ( P ＜ 0.05). The spinal cord injury was attenuated in group HOP compared with group I/R. Conclusion Repeated HOP can reduce the spinal cord I/R injury though up-regulating the expression of HIF1α and EPO in rats.     

不同浓度神经生长因子β预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨不同浓度神经生长因子β(NGF-β)预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康SPF级雄性SD大鼠,8～ 10周龄,体重200 ～ 300 g,采用Langendorff装置制备离体心脏灌注模型.取模型制备成功的心脏32个,采用随机数字表法,将离体心脏随机分为4组(n=8):缺血再灌注组(I/R组)和不同浓度NGF-β组(N1组～N3组).I/R组用K-H液继续灌注30 min,停灌30 min,复灌120 min;N1组～N3组分别用含有0.1、0.2和0.4 ng/ml鼠源性NGF-β的K-H液继续灌注20 min,再用K-H液冲洗10 min,停灌30 min,复灌120 min.于平衡灌注末(T1)、停灌前即刻(T2)及再灌注5(T3)、30 (T4)、60(T5)、120 min(T6)时记录HR、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左心室内压最大上升速率(+ dp/dtmax).于T1、T3～T6时收集冠状动脉流出液,测定CK-MB、LDH的活性;T6时取心肌组织,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况,计算凋亡指数,并观察心肌病理学结果.结果 与T1时比较,各组T3～T6时LVDP、+dp/dtmax降低,LVEDP升高,LDH和CK-MB活性升高,I/R组、N2组和N3组HR降低,N1组HR升高(P＜0.05);与I/R组比较,N1组LVDP、+dp/dtmax 和HR升高,LVEDP降低,CK和LDH活性降低,凋亡指数降低,N2组HR、LVDP和+dp/dtmax 降低,CK和LDH活性升高(P＜0.05),LVEDP和凋亡指数差异无统计学意义(P＞0.05),N3组LVDP、HR和+dp/dtmax 降低,LVEDP、CK和LDH活性、凋亡指数升高(P＜0.05);与N1组比较,N2组和N3组LVDP、+dp/dtmax 和HR降低,LVEDP、CK和LDH活性、凋亡指数升高(P＜0.05);与N2组比较,N3组LVDP、+dp/dtmax 和HR降低,LVEDP、CK和LDH活性、凋亡指数升高(P＜0.05).N1组心肌病理学损伤较I/R组、N2组和N3组减轻.结论 适宜浓度的NGF-β预处理可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,而浓度过高则会加重损伤;NGF-β预处理心肌保护的机制与抑制心肌细胞凋亡有关.     

缺血预处理对肢体缺血-再灌注损伤影响的临床观察

198 6年Ｍｕｒｒｙ等[1] 应用缺血预处理 (ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ ,ＩＰＣ) ,即短时间重复缺血间断再灌注改善心肌缺血 再灌注损伤获得成功后 ,ＩＰＣ提高组织缺血耐受性的现象颇受关注[2 ] 。目前尚鲜见到骨骼肌ＩＰＣ的临床研究报道。为此 ,我们观察了ＩＰＣ改善肢体缺血 再灌注损伤的临床效果 ,现报道如下。一、对象与方法1.一般资料 :选择需气囊止血带下进行手术的患者 2 0例 ,其中男 13例 ,女7例 ,年龄 17～ 3 2岁 ,平均 2 3岁。尺桡骨骨折切开复位钢板内固定术 6例 ,半月板切除或修整术合并韧带修复术 3例…