高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞增殖的影响

为探讨高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞增殖的影响,采用体外培养人眼球后成纤维细胞,用ＭＴＴ比色法测定人眼球后成纤维细胞的增殖程度,并观察高三尖杉酯碱对ＨＲＯＦｂ生长和增殖的影响。结果显示：ＭＴＴ比色法能精确反映ＨＲＯＦｂ的增殖程度,所测光吸收值与细胞数目成正相关。高三尖杉酯碱可抑制ＨＯＲＦｂ的增殖,细胞抑制率与高三尖杉酯碱浓度呈显著正相关。     

生长抑素对人球后成纤维细胞增殖的影响

OBJECTIVE: To elucidate the possible mechanism of Somatostatin 14 in the treatment of Graves' ophthalmopathy, thus providing laboratory data with the intent to underpin therapeutic developments. METHODS: The human retro-ocular fibroblasts (HROFb) was cultured and MTT colorimetry assay was used to determine the proliferation of HROFb. RESULTS: MTT colorimetry assay could precisely reflect the proliferation of HROFb. The absorbance was directly proportional to the numbers of the cells (r = 0.996, P < 0.001). Somatostatin 14 could enhance the cell proliferation percentage at lower levels (< 25 nmol/L) and inhibit that at higher levels (> 25 nmol/L). The cell proliferation correlated positively to Somatostatin 14 levels significantly (r = -0.9054, P < 0.001). CONCLUSION: Somatostatin 14 has a dual effect on HROFb.     

高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞增殖的影响

为探讨高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞 (HROF) )增殖的影响 ,采用体外培养人眼球后成纤维细胞 ,用 MTT比色法测定人眼球后成纤维细胞的增殖程度 ,并观察高三尖杉酯碱对 HROFb生长和增殖的影响。结果显示 :MTT比色法能精确反映 HROFb的增殖程度 ,所测光吸收值与细胞数目成正相关 (r=0 .996 ,P<0 .0 0 1 )。高三尖杉酯碱可抑制 HROFb的增殖 ,细胞抑制率与高三尖杉酯碱浓度呈显著正相关 (r=0 .6 932 ,P<0 .0 0 1 )     

生长抑素对人球后成纤维细胞增殖的影响

目的　探讨生长抑素 1 4 (SS1 4 )治疗 Graves眼病的机理 ,为临床应用提供实验依据。方法　培养人球后成纤维细胞 (hum an retro- ocular fibroblast,HROFb) ,用 MTT比色法测定细胞增殖状况 ,并观察 SS1 4 对HROFb的生长、增殖的影响。结果　所测光吸收值与成纤维细胞的数目呈正相关 (r=0 .996,P<0 .0 0 1)。SS1 4 在低浓度下 (<0 .2 5 nmol/ L)可促进 HROFb 增殖 ,当浓度 >2 5 nm ol/ L 时则可抑制 HROFb的增殖 ,且具剂量效应关系。HROFb的增殖率与 SS1 4 浓度呈负相关 (r=- 0 .90 5 4,P<0 .0 0 1)。结论　生长抑素对人成纤维细胞增殖有双相作用。     

地塞米松及氨甲喋呤静脉冲击治疗Graves眼病的疗效观察

为改进Ｇｒａｖｅｓ眼病的疗效，作者对３５例病情较重或经常规治疗无效的患者，用地塞米松、氨甲喋呤静脉注射或点滴，每周１次，连续４周，并同服小剂量强的松（Ｐ）５日疗法／周，４周后加服硫唑嘌呤（Ａ）或６硫基嘌呤（６ＭＰ）。６周为一疗程，若病情需要，可重复１个疗程，然后用Ｐ＋Ａ巩固治疗并逐渐减量至第６月停药。结果：３３（９４．３％）例眼部症状改善，其眼球突度减少，与治前相比有显著性差异，突眼≤１年比＞１年者更明显。约半数闭目不全和复视者，以及５例暴露性角膜炎及２例溃疡穿孔者经治愈，仅留角膜云翳。未见严重毒副反应     

地塞米松对体外培养人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的：研究地塞米松（DEX）对体外培养人牙周膜成纤维（PDLF）细胞增殖的影响,寻找体外培养人PDLF(hPDLF)细胞的优化条件,为牙周组织再生的研究工作奠定基础。方法：体外分离培养的hPDLF细胞随机分为5组,分别用5种含10%胎牛血清的DMEM细胞培养基培养5～8代:①空白对照组（无DEX）;②含5 mg•L^-1DEX;③含10 mg•L^-1 DEX;④含20 mg•L^-1 DEX;⑤含50 mg•L^-1 DEX。以MTT法测定DEX对hPDLF细胞增殖率的影响;采用倒置相差显微镜观察hPDLF细胞在添加不同浓度DEX的胎牛血清培养基中培养后的细胞形态学改变。结果：将hPDLF细胞接种于24孔板后的第3天,细胞出现汇合现象。细胞在孔底呈鳞片状。采用DEX条件DMEM细胞培养液培养,可见 细胞逐渐变成多层,细胞形态变小,突起变钝。MTT法检测结果表明含不同浓度DEX的DMEM培养基中培养的hPDLF细胞数均高于对照组（P<0.05）;不同浓度的DEX对hPDLF细胞增殖均有影响(P<0.05）,且随着浓度增加,hPDLF细胞增殖能力逐渐增高。结论：DEX能使体外培养的hPDLF细胞表现很强的增殖活性。     

地塞米松对肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 探讨糖皮质激素在肾脏病治疗中可能的作用机理。方法 采用ＭＴＴ比色法和Ｌ－＾３Ｈ－脯氨酸掺入法,观察地塞米松对体外培养的肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。结果 一定浓度范围内地地塞米松抑制成纤维细胞的胶原合成,但未见其对细胞增殖有影响。结论 糖皮质激素可作用于肾间质成纤维细胞,抑制胶原的合成,从而可延缓肾间质纤维化的进程。     

地塞米松对肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的"探讨糖皮质激素在肾脏病治疗中可能的作用机理. 方法"采用MTT比色法和L-3H-脯氨酸掺入法,观察地塞米松对体外培养的肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响. 结果"一定浓度范围内的地塞米松抑制成纤维细胞的胶原合成,但未见其对细胞增殖有影响. 结论"糖皮质激素可作用于肾间质成纤维细胞,抑制胶原的合成,从而可延缓肾间质纤维化的进程.     

IL-1β对体外人Graves眼病球后成纤维细胞分泌RANTES的影响

目的:探讨IL-1β对人眼球后成纤维细胞(RF)产生趋化因子RANTES的影响及其对外周血淋巴细胞(PBL)的趋化作用。方法:取Graves眼病(GO)患者和斜视患者眼球后结缔组织,胶原酶消化法获得RF,分别以0μg/L、0.04μg/L、0.40μg/L、8.00μg/L、10.00μg/L的IL-1β在RPMI培养基中孵育24h,RT-PCR和ELISA法分别检测RANTESmRNA表达和RF培养上清中RANTES的含量,并观察活性核因子κB抑制剂CAPE对RANTES表达量的影响。采用96微孔板ChemoTXSystem进行趋化实验检测RF产生的RANTES对PBL的趋化作用,并观察鼠抗人RANTES抗体对PBL游走能力的影响。结果:RF在体外几乎不能产生RANTES,经IL-1β刺激之后,RANTES在mRNA和蛋白水平表达都升高,GO患者RF产生RANTES的量明显高于正常对照RF((182.9±14.1)μg/Lvs(77.9±3.8)μg/L,t=16.765,P<0.01),且在一定范围内具有浓度依赖性。CAPE可明显抑制IL1β对RF表达RANTES的诱导效应。经IL1β刺激的RF培养上清可增强PBL的游走能力,此效应可被鼠抗人RANTES抗体所抑制。结论:IL1β诱导RF表达的RANTES参与了GO眶后淋巴细胞浸润,且RANTES的表达可能与NF-κB的激活有关。     

地塞米松及氨甲喋呤静脉冲击治疗Graves眼病的疗效观察

为改进Ｇｒａｖｅｓ眼病的疗效，作者对35例病情较重或经常规治疗无效的患者，用地塞米松氨甲喋呤静脉注射或点滴，每周１次，连续４周。产肌服小剂量强的松（Ｐ）５日疗法／周，４周后加服硫唑嘌呤（Ａ）或６硫基嘌呤（６ＭＰ）。６周为一疗程，若病情需要，可重复１个疗程，然后用Ｐ＋Ａ巩固治疗并逐渐减量至第６月停药。结果：３３（９４．３％）例眼部症状改善，其眼球突度减少，与治前相比有显著性差异，突眼≤１年比，１年者更     

白细胞介素对Graves眼病患者眼眶成纤维细胞的作用

目的 观察白细胞介素对Graves眼病(GO)患者与正常入眼眶成纤维细胞(OFs)的作用。方法取5例GO患者与4例正常对照者眼眶结缔组织与眼外肌的OFs进行培养,分别在其中加入不同浓度的白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6),用四甲基偶氮唑盐(MTT)法与放射免疫法检测GO患者与正常人OFs的增殖及分泌透明质酸(HA)的情况。结果IL-1在5、50、500 U／ml时,均能刺激OFs的增殖和HA的分泌,且当为500 U／ml时,对GO患者OFs的刺激作用强度大于对正常人OFs;IL-2与IL-6在500 U／ml时能刺激OFs的增殖和HA的分泌。结论白细胞介素(IL-1、IL-2、IL-6)能刺激OFs的增殖和HA的分泌。白细胞介素的异常可能是GO的发病机制之一。     

平突散系列复方对CD40L刺激后人球后成纤维细胞的MMP和TIMP表达的影响

背景　尽管目前关于甲状腺相关性眼病（TAO）在基础和临床研究方面已取得了一些进展,同时积累了一定量的关于发病机制的材料和证据,但目前国内外关于TAO的研究仍然很少,临床仍缺少有效的治疗方法和药物。与此同时,在传统中医领域,中医药辨证治疗TAO疗效肯定、不良反应少且复发率低,但其作用机制不明确,药物作用靶点不明。目的　观察CD40L对人球后成纤维细胞（RFs）表面基质金属蛋白酶（MMP）-1、MMP-2、MMP组织抑制剂（TIMP）-1、TIMP-2表达的影响以及平突散系列中药复方的干预效果。方法　2016年9月选取35只SPF级SD雄性大鼠用于制备泻火平突散、活血平突散、养目平突散含药血清。实验中所用的人眼球后结缔组织来源于2例眼创伤患者（2014年取材于郑州大学第一附属医院眼科）,体外培养RFs成功后,随机分为7组,其中空白组：给予正常培养液;血清组：给予含10%正常大鼠血清的培养液;CD40L组：给予含100 ng/ml CD40L的培养液;CD40L+血清组的培养液：给予含100 ng/ml CD40L和10%正常大鼠血清的培养液;泻火平突散组：给予含有100 ng/ml CD40L和10%含药血清的培养液;活血平突散组：给予含有100 ng/ml CD40L与10%含药血清的培养液;养目平突散组：给予含有100 ng/ml CD40L与10%含药血清的培养液。免疫细胞化学染色法检测各组MMP-1、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。结果　CD40L组MMP-1、MMP-2活性低于空白组,CD40L+血清组MMP-1、MMP-2活性低于血清组（P<0.05）;泻火平突散、活血平突散、养目平突散组MMP-1、MMP-2活性高于CD40L+血清组（P<0.05）;养目平突散组MMP-1、MMP-2活性高于泻火平突散组、活血平突散组（P<0.05）。CD40L组TIMP-1、TIMP-2活性高于空白组,CD40L+血清组TIMP-1、TIMP-2活性高于血清组（P<0.05）;泻火平突散、活血平突散、养目平突散组TIMP-1、TIMP-2活性低于CD40L+血清组（P<0.05）;养目平突散组TIMP-1、TIMP-2活性低于泻火平突散组、活血平突散组（P<0.05）。CD40L组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2低于空白组,CD40L+血清组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2低于血清组（P<0.05）;泻火平突散、活血平突散、养目平突散组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2高于CD40L+血清组（P<0.05）;养目平突散组MMP-1/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2高于泻火平突散组、活血平突散组（P<0.05）。结论　平突散系列复方可能通过阻断CD40-CD40L共刺激信号通路导致MMP/TIMP的失衡,而达到治疗TAO的目的。     

硫酸软骨素A对NIH－3T3鼠成纤维细胞及人皮肤成纤维细胞增殖的影响

用ＭＴＴ法检测了硫酸软骨素Ａ（４－硫酸软骨素，ＣＳ－Ａ）对ＮＩＨ－３Ｔ３鼠成纤维细胞和人皮肤成纤维细胞存活与增殖的影响。发现所侧ＯＤ值随ＣＳ－Ａ浓度的增高而增大，两者呈正相关（３Ｔ３鼠成纤维细胞：ｒ＝０．８１５４，Ｐ＜０．０５；人皮肤成纤维细胞：ｒ＝０．９１５，Ｐ＜０．０１），表明ＣＳ－Ａ对这两类成纤维细胞的存活和增殖有促进作用。采用ＰＡＰ和ＡＢＣ免疫细胞化学染色，观察到两类细胞的胞膜上有ＣＳ分布，提示ＣＳ可能参与膜结构的组成，对细胞－细胞与细胞－基质之间的相互作用有重要意义；为进一步探讨硫酸软骨素在肝纤维化中的作用提供了可靠的实验依据。     

人眶后成纤维细胞和皮肤成纤维细胞超微结构的比较

目的：为解释甲状腺相关眼病的器官特异性,建立体外人眶后成纤维细胞（ＲＦ）和皮肤成纤维细胞（ＤＦ）的培养方法,并在形态和超微结构上比较两种细胞的差异。方法：采用扫描电镜和透射电镜技术进行观察比较。结果：ＲＦ除生长速度较慢,光镜下细胞多形性和胞浆富颗粒性与ＤＦ不同外,其在扫描电镜和透射电镜下的超微结构间未见明显差异。结论：不同组织来源的成纤维细胞具有不同的生物活性,推测可能与其不同的表现型有关。     

连续应力对体外培养成纤维细胞生长增殖的影响

目的模拟临床治疗中机械应力对细胞的作用方式,研究连续应力作用于成纤维细胞的生长增殖效应。方法实验采用细胞机械牵拉培养模型和体外培养的3~5代的成纤维细胞,分为对照组(未牵拉组)、连续牵拉组和重复连续牵拉组,各组分别进行牵拉后细胞计数和MTT比色法检测。结果连续牵拉组的细胞数量和活性较对照组明显增加,重复连续牵拉组的细胞数量和活性较连续牵拉组明显增加。结论连续应力可以促进体外培养成纤维细胞生长增殖和活性增加。     

成纤维细胞体外培养过程中超微结构改变的观察

目的 观察正常人成纤维细胞体外培养过程中超微结构的变化规律。方法 将正常人二倍体成纤维细胞进行传代培养，以不同代次的细胞为实验对象，通过倒置相差显微镜与透射电镜对各代细胞进行了观察。结果 45代以内的细胞生长较迅速，45代后的细胞生长逐渐缓慢，65代细胞几乎无增殖趋势。40代以内细胞的超微结构无明显变化，41—65代细胞出现核膜内折，细胞核／浆比例减小，细胞表面突起和微绒毛减少。结论 各代成纤维细胞超微结构改变程度不同。41代后变化明显。     

泛素-蛋白酶体抑制剂对大鼠肺成纤维细胞凋亡和增殖的影响

目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肺成纤维细胞凋亡和增殖的影响,并初步探索其机制.方法:18只SD大鼠随机分成模型组(n=9)与对照组(n=9),模型组气管内一次性注入博莱霉素(5 mg/kg),对照组气管内注入等量无菌生理盐水,分别于7,28,45 d每组处死动物3只,提取成纤维细胞进行培养并用相同浓度的...     

白黎芦醇对人皮肤成纤维细胞及兔耳增生性瘢痕的影响

目的了解白黎芦醇对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及兔耳增生性瘢痕的影响。方法用FCM法检测及建立兔耳增生性瘢痕动物模型，用不同浓度的白黎芦醇作用不同时间后，成纤维细胞的增殖指数及兔耳瘢痕增生指数进行了研究。结果①随着白黎芦醇浓度增大和作用时间延长而人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖指数呈下降趋势。②白黎芦醇在150μmol/L、300μmol/L、400μmol/L时能明显降低瘢痕增生指数，分别为对照组的78．8％、61．2％、47．0％。结论①白黎芦醇降低成纤维细胞增殖指数是其抑制瘢痕增生的途径之一，且呈剂量时间依赖性。②随着白黎芦醇浓度增大，兔耳瘢痕增生指数下降，与瘢痕的体外实验相吻合。