抗内皮细胞抗体与丙硫氧嘧啶引起的抗中性粒细胞胞浆抗体阳性小血管炎病变活动相关

目的:在丙硫氧嘧啶(propylthiouracil,PTU)引起的抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关小血管炎患者血清中检测抗内皮细胞抗体(anti-endothelial cell antibody,AECA),探讨其在该类疾病发病中的作用.方法:选取11例PTU引起的ANCA相关小血管炎患者及10例临床上使用PTU治疗甲亢,无系统性血管炎症状而ANCA阳性的患者,应用体外原代培养的脐静脉血管内皮细胞制备可溶性抗原,采用蛋白免疫印迹法检测其血清中的AECA.结果:PTU相关ANCA阳性小血管炎组患者疾病活动期共有10(91%,10/11)例病人血清可检出AECA,有6种不同的蛋白可以被识别.对以上10例AECA阳性患者同时测定了其缓解期血清的AECA,发现其中7例AECA转为阴性,3例出现的条带与活动期比较无差别.使用PTU治疗甲亢,无系统性血管炎症状而ANCA阳性患者组中未检出AECA.结论:PTU相关的ANCA阳性小血管炎中存在着不同分子质量大小的AECA,AECA在该类疾病的发病中可能具有比ANCA更为重要的意义.     

与Graves眼病有关的眼肌自身抗原抗体的分子免疫学研究

为探讨Ｇｒａｖｅｓ眼病（ＧＯ）的发病机理，我们对新近发现的眼肌自身抗原及存在于ＧＯ患者血清的眼肌抗体进行了研究。血清取自１８例正常人、１８例活动性ＧＯ、１０例无限征的Ｇｒａｖｅｓ甲亢（ＧＨ）和３例桥本甲状腺炎（ＨＴ）患者。人眼肌膜蛋白经ＧＯ患者混合ＩｇＧ亲和层析后进行ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳，显示分子量为４５、２８、５５和６４ｋＤ等蛋白条带。经正常人混合ＩｇＧ亲和层析未能显示上述结果。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交虽然未能证实仅与患者血清作用的独特的眼肌抗原的存在，但６４ｋＤ印迹存在于６１％的ＧＯ、３０％的ＧＨ、０％的ＨＴ患者，正常人仅２２％阳性。抗６４ｋＤ阳性率ＧＯ组明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。眼肌抗体（ＥＭＡｂ）特别是抗６４ｋＤ抗体对于ＧＯ发病机理的作用值得进一步研究。     

系统性血管炎中抗内皮细胞抗体的检测及其靶抗原研究

目的检测抗内皮细胞抗体（AECA）在系统性血管炎中阳性率,探讨其可能致病机制。方法实验组选取113例系统性血管炎患者,对照组为57例系统性红斑狼疮（SLE）、15例类风湿关节炎（RA）及20名正常人。提取EA-hy926内皮细胞株蛋白质,免疫印迹法检测以上各组患者血清中AECA阳性率,进而应用双向电泳结合免疫印迹法、液相色谱一电喷雾离子阱质谱（LC-ESI-MS／MS）分析,分离和鉴定AECA靶抗原。结果免疫印迹法检测结果显示,系统性血管炎、SLE患者AECA阳性率明显高于RA患者及正常对照组（P〈0．01）：系统性血管炎组AECA阳性率为69．0％（78／113）,SLE和RA患者AECA阳性率为分别66．7％（38／57）、6．7％（1／15）,20名正常人血清中均未检出AECA;系统性血管炎患者AECA主要识别的蛋白质相对分子质量为26000～125000,SLE患者主要识别的蛋白质相对分子质量为15000～97000。47000．AECA常见于AECA阳性的不同系统性血管炎和SLE患者血清中,经蛋白组学方法分离鉴定,其成分为Ⅸ一烯醇化酶。结论不同的系统性血管炎和SLE患者血清中均有较高的AECA阳性率,AECA为一组与内皮细胞多种蛋白相结合的异质性抗体;不同系统性血管炎和SLE患者的AECA可能存在有共同的靶抗原（47000内皮细胞蛋白质）,其成分为α-烯醇化酶。     

系统性红斑狼疮患者抗内皮细胞抗体和抗心磷脂抗体与临床的相关分析

目的探讨抗内皮细胞抗体(AECA)和抗心磷脂抗体(ACA)与系统性红斑狼疮(SLE)临床病变的关系。方法选取临床诊断SLE患者86例,用免疫荧光法与金标法分别检测AECA和ACA。结果AECA、ACA的阳性率与SLE病情的活动性无显著性差异。SLE伴有皮肤血管炎、肾脏损害的患者AECA阳性率显著高于不伴此临床表现者(P<0.05);SLE伴有血小板减少症的患者ACA阳性率显著高于不伴此临床表现者(P<0.05)。SLE伴有皮肤损害患者的ACEA和ACA无相关性。结论检测AECA对临床SLE合并皮肤及内脏血管炎的诊断和预后有一定的意义,而检测ACA可以提示SLE患者的血液系统损害,AECA、ACA可能是SLE血管损害的不同致病因素。     

抗-SSA/Ro抗体三种检测方法的比较

目的 比较酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫双扩散（ID）和免疫印迹（IB）3种方法检测抗-SSA/Ro抗体,评价3种方法的符合度,同时提高IB检测相对分子质量52 000条带的认识.方法 采用ELISA法、IB法及ID法检测以下3组对象的抗-SSA/Ro抗体水平：正常献血员血清122份;实验室常规检测血清7736份;诊断明确结缔组织病血清166份.结果 （1）正常献血员122份血清ELISA、ID和IB检测抗-SSA/Ro抗体全部阴性;（2）实验室常规检测的7736份血清,IB检测相对分子质量52 000阳性1085例,其中抗核抗体和其他抗-ENA抗体均阴性的有92份,该组病人经过ID和ELISA两种方法检测全部阴性;（3）结缔组织病组166例,ELISA、ID和IB检测抗-SSA/Ro抗体的阳性率分别是76.5%（127/166）,65.1%（108/166）,49.4%（82/166）;（4）结缔组织病166份血清中,ELISA和ID两种方法检测的符合率88.6%（147/166）,两种方法的比较,χ2=17.1,P＜0.001;ID和IB两种方法检测的符合率为75.9%（126/166）,两种方法的比较,χ2=15.6,P＜0.001;（5）ELISA和ID进行Spearman等级相关分析,相关系数为0.828,P＜0.001.结论 （1）ELISA和ID特异性优于IB.（2）IB特异性较差,但如果同时ANA和或抗-ENA其他条带阳性,特异性会显著提高.（3）ELISA敏感性优于ID,ID敏感性优于IB.（4）ELISA和ID结果在数值上存在显著的正相关关系.     

D-二聚体水平测定对结缔组织病相关肺动脉高压的诊断意义

目的 探讨外周血中D-二聚体水平的变化在结缔组织病相关肺动脉高压的临床诊断中的意义。方法 从465例结缔组织病(CTD)患者中筛选出伴有肺动脉高压(PAH)的患者95例,对其临床实验室检查特点及治疗转归进行回顾性分析,选取同时期未检出肺动脉高压的CTD患者65例为对照组,采用免疫比浊法测定两组患者的外周血中D-二聚体水平,并比较D-二聚体水平在结缔组织病患者肺动脉高压中的诊断价值。结果 结缔组织病合并的PAH的总发生率约为20.4%。其中系统性红斑狼疮合并肺动脉高压发生率最高,为42.1%,类风湿关节炎次之,为24.2%。CTD合并PAH患者外周血中D-二聚体水平明显高于对照组,差异有统计学意义(Z=-3.57,P<0.05)。其中系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、系统性硬化症及血管炎病继发PAH的患者D-二聚体的浓度显著高于未继发PAH患者(P<0.05),而在类风湿关节炎、炎性肌病、干燥综合征及未分化的结缔组织病患者中,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PAH与多种CTD密切相关,血清D-二聚体与结缔组织病患者并发PAH密切相关,但在不同种类CTD疾病患者中的临床诊断意义或存在差异。     

Dipstick法检测斯氏狸殖吸虫病血清抗体的建立及应用

目的 建立简便的斯氏狸殖吸虫病Dipstick快速诊断法。方法 以纯化的斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原22kD为诊断抗原，胶体金标记的羊抗人IgC为显色剂，建立Dipstick快速诊断方法；检测斯氏狸殖吸虫病患者血清58例，日本血吸虫病患者血清32例。华支睾吸虫病患者血清23例，健康者血清28例。结果 检测58例斯氏狸殖吸虫病患者血清IgG抗体．其阳性率为98、3％（57／58），分别检测健康者血清28例、日本血吸虫病患者血清32倒和华支睾吸虫病患者血清23例，前者均为阴性，后两者的交叉反应率分别为3.1％（1／32）和0％（0／23）。结论 斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原22kD Dipstick快速诊断法具有较高的敏感性和特异性，简便快捷，勿须特殊仪器设备，是一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IcG抗体较好的免疫诊断方法。     

结缔组织病相关的肺动脉高压79例临床分析

目的 了解结缔组织病相关的肺动脉高压(PAH)的发生率,评估临床特点与PAH发生的相关性、探讨早期诊断及治疗方法.方法 从1892例结缔组织病患者中筛选出伴有肺动脉高压的患者79例,对其临床实验室检查特点及治疗转归进行回顾性分析,找出并发PAH相关的危险因素,评价不同治疗、不同原发病对预后的影响.结果 结缔组织病合并的PAH的总发生率约为4.2%.其中系统性硬化症(SSc)合并肺动脉高压发生率最高,为18.18%.混合性结缔组织病(MCTD)次之12.00%,显著高于皮肌炎/多发性肌炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿关节炎、抗磷脂综合征等结缔组织病(P＜0.01).临床伴有雷诺现象者肺动脉压力显著高于无雷诺现象者(P＜0.01).高球蛋白血症、抗U1RNP(+)、ACA-IgG(+)、心包积液、肺问质病变的结缔组织病患者更易出现PAH,且与严重程度呈相关性(P＜0.05).结论 结缔组织病中PAH是较为常见的并发症,其中在SSc和MCTD发生率最高.雷诺现象、抗U1RNP阳性、ACA-IgG(+)提示结缔组织病患者有更易发生PAH的可能.     

系统性血管炎抗内皮细胞抗体的检测及其与病情活动的相关性

目的　研究抗内皮细胞抗体 (AECA)在系统性血管炎患者血清中的检出率 ,分析其与病情活动的相关性 ,比较两者差异有无显著意义 ,初探AECA的分类。方法　采用Cyto ELISA法 ,分别以EA hy92 6及HMEC 1为底物 ,检测 12 2例系统性血管炎患者血清中AECA ,与临床资料行相关性分析 ,并比较两种底物细胞所测AECA有无差异。结果　EA hy92 6为底物时系统性血管炎 ( 33 6 1% )及系统性红斑狼疮 (SLE)患者 ( 32 35 % ) ,AECA阳性率显著高于类风湿关节炎 (RA) ( 2 5 0 % )患者及正常人 ( 4 76 % ) ;HMEC 1为底物细胞时系统性血管炎患者 ( 37 70 % )显著高于RA患者 ( 7 5 % )及正常人( 9 5 2 % ) ,SLE患者的AECA阳性率 ( 6 1 75 % )显著高于其他各组。其他组间差异无显著意义。AECA与红细胞沉降率相关 ,与其他生化指标无相关性。伯明翰血管活动度评分 (BVAS)与AECAP/N成正相关。对两种底物细胞所测AECA值显著相关 ,符合率 92 6 2 %。结论　AECA在系统性血管炎有较高的检出率 ,可反映病情活动度 ;AECA在系统性血管炎可否分为针对大小血管内皮细胞两类 ,有待进一步研究     

冠状动脉粥样硬化患者血清抗HCMV抗体和抗血管内皮细胞抗体的检测及临床意义

目的：探讨冠状动脉粥样硬化患者的血清抗巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）抗体和抗内皮细胞抗体（ＡＥＣＡ）的水平及其与动脉粥样硬化（ＡＳ）的关系。方法：应用细胞酶联免疫反应（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）和ＥＬＩＳＡ技术检测４１例冠状动脉粥样硬化患者血清中ＡＥＣＡ和抗ＨＣＭＶ抗体（ＩｇＧ）。结果：４１例冠心病组抗ＨＣＭＶＩｇＧ抗体的阳性率为７３．２％,而对照组阳性率为３１．０％。冠心病组ＡＥＣＡ阳性率为３４．１％。结论：冠心     

中山地区不同类型肝炎患者SEN病毒的感染状况

目的了解中山地区不同类型的病毒性肝炎患者SEN病毒的感染情况。方法设计合成SEN病毒D型和H型的型特异性引物,对乙肝病毒携带者73例、慢性乙肝124例、重症乙型肝炎58例、乙肝肝硬化63例、非甲-戊型肝炎患者57例和对照组健康体检者60人的血清进行套式PCR扩增。结果通过基因克隆和测序证实了基因扩增产物的特异性。非甲-戊型肝炎SEN病毒阳性率(66.67%)明显高于健康献血者(26.67%)(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者(52.42%)、重症乙型肝炎患者(53.97%)、乙肝肝硬化患者(56.90%)和非甲-戊型肝炎患者(66.67%)SEN病毒阳性率之间无明显差异(P>0.05),但均显著高于乙肝病毒携带者(27.39%)和健康献血者(P<0.01)。乙肝病毒携带者SEN病毒阳性率与健康献血者之间无明显差异(P>0.05)。结论SEN病毒感染与非甲-戊型肝炎发病有一定的关系。SEN病毒感染可能与乙肝病毒感染的活动和加重有一定的关系。     

丙型肝炎病毒在供、受血者间传播的调查

采用市售第二代抗HCVELISA试剂对一组供、受血者血清抗HCV进行了抽查。结果表明，未经地方血站抗HCV筛选的献血员血清抗HCV阳性率为18．57％，经筛选后为1．03％～5．24％，正常人群为1．98％，同期受血者为7．59％，抗HCV阳性与阴性献血者HCVRNA检测阳性率分别为56．8％与20．0％。在9例接受抗HCV阳性血液的受血者中，1例患者受血前后抗HCV均为阳性，5例抗HCV及6例HCVRNA阳转，6例血清HCV感染标志阳转者中4例ALT明显较正常为高，其中3例因临床症状较重而再次住院治疗。研究还发现3例输血感染者所接受的血液中抗HCV呈低表达状态（采用ELISA检测，OD值0．22～0．39），并对此进行了讨论。     

抗内皮细胞抗体与抗中性粒细胞胞浆抗体联合检测在诊断血管炎中的应用

目的:探讨抗内皮细胞抗体(AECA)与抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)在诊断系统性血管炎中的作用.方法:用间接免疫荧光法(IIF)检测系统性血管炎患者血清中的ANCA和 AECA.结果:168例系统性血管炎中ANCA检出60例,阳性率为35.7%,AECA检出64例,阳性率为38.1%;ANCA与AECA联合检测,AN...     

斯氏肺吸虫成虫10—30KD抗原蛋白的分离及在免疫诊断中的应用

在酶免疫转移印渍技术（EITB）分析斯氏肺吸虫虫体成份，显示10～30KD抗原蛋白（主带22、24和26KD）对该病具免疫诊断价值的基础上，将SDS－PAGE和电洗脱技术相结合，分离并纯化出斯氏肺吸虫成虫的10～30KD蛋白组份，采用Dot－ELISA方法免疫诊断肺吸虫。10～30kD的斯氏肺吸虫成虫抗原与斯氏、卫氏肺吸虫病人血清均呈阳性反应，与其它吸虫病和健康人血清末产生反应。该结果进一步表明10～30KD斯氏肺吸虫成虫抗原的Dot－ELISA为肺吸虫病高度特异、敏感的免疫诊断方法。并为两种肺吸虫的共同抗原，可用于免疫诊断斯氏、卫氏肺吸虫病。     

重叠感染SEN病毒对乙肝后肝硬化发展的影响

目的：通过检测慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化患者SEN病毒（SENV）的感染情况，了解重叠感染SENV对乙肝后肝硬化发展的影响。方法：采用巢式聚合酶链反应（nPCR）对148例慢性乙型肝炎患者、119例乙肝肝硬化患者和80例健康体检者进行SENV—D／H亚型的检测，并对部分阳性血清的PCR产物进行测序。结果：SENV—H在乙肝肝硬化患者血清中的检出率（为37．8％）高于慢性乙型肝炎患者（为26．4％），两者差异有显著性（P〈0．05），而SENV—D的检出率分别为34．5％和30．4％，两者差异无显著性（P〉0.05）；健康体检者血清中，SENV—H和D的检出率分别为13．8％和16．3％，与上述两组患者相比差异有显著性（P〈0.05）；此外，在77例有输血史患者和190例无输血史患者血清中，SENV的总检出率分别为53．2％和55．8％，两者差异无显著性（P〉0.05）。结论：重叠SENV—H感染可能对乙肝后肝硬化发展具有一定的影响，并且SENV的主要传播方式除输血外可能还存在其他途径。     

结缔组织病并发肺动脉高压的临床特点研究

目的：探讨结缔组织病并发肺动脉高压（CTD—PAH）的临床特点。方法：112例诊断明确、资料完整的结缔组织病并发肺动脉高压的患者（CTD—PAH组）与97例结缔组织病未并发肺动脉高压患者（CTD组）进行对比,并对一些临床及实验指标进行分析。结果：雷诺现象、多关节炎、心包积液、胸腔积液、肺间质病变、血沉（ESR）、C3、C反应蛋白（CRP）、循环免疫复合物（CIC）、ANA、抗U1RNP抗体阳性在CTD—PAH组与CTD组的单因素分析中有意义（P〈0．05）,其中雷诺现象、肺间质病变、心包积液、抗U1RNP抗体阳性、CIC升高在两组多因素分析中有意义（P〈0．05）。结论：雷诺现象、心包积液、肺间质病变、抗U1RNP抗体阳性、CIC升高与CTD—PAH关系密切,可作为早期诊断的参考指标。     

Dot immunobinding assay in detection of IgE-type rheumatoid factor]

The sera from 86 patients with autoimmune diseases, 31 atopic and 65 healthy blood donors were detected for IgE type rheumatoid factor (IgE-RF) by using anti-human IgE monoclonal antibody and dot immunobinding assay. The positive frequency and mean value of IgE-RF in patients with autoimmune diseases were significantly higher than those in the other groups. IgE-RF was positive in 19/37 cases of rheumatoid arthritis (RA), 6/18 systemic lupus erythematosus and 13/31 primary Sjogren's syndrome, with mean values of 23.1, 12.1 and 26.9 ng/ml respectively. 75% RA patients with IgM-RF (+) had IgE-RF, with a mean value of 27.0 ng/ml, whereas 33% of those with IgM-RF (-) had IgE-RF with a mean value of 16.5 ng/ml. In contrast, only 2/31 atopic and 6/65 healthy blood donors had positive IgE-RF with mean values of 3.7 and 6.1 ng/ml respectively. Hence, IgE-RF is helpful not only in raising the sensitivity of RA diagnosis, but also in distinguishing autoimmune diseases from allergy.     

班氏丝虫宿主循环抗原的检测

应用兔抗牛丝虫抗体ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测安徽流行区人体班氏丝虫循环抗原。微丝蚴血症者血清总阳性率９６％（２４／２５），尿液总阳性率为６０％（１５／２５），４份乳汁阳性率均为１００％。１５份尿液阳性和４份乳汁阳性者与血清阳性结果的符合率分别为１００％（１５／１５）和７５％（３／４）。检测江苏非流行区正常人血清、尿液、乳汁共４３份，全部阴性。１１份肠道线虫感染者尿液全为阴性，血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。１０份肺吸虫感染者血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。结果表明，班氏丝虫循环抗原不仅存在于血清而且存在于尿液和乳汁中。     

抗内皮细胞抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中的意义

目的 探讨抗内皮细胞抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中的意义。方法 采用细胞酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）,对５８例狼疮性肾炎病人血清进行抗内皮细胞抗体检测,并以提取的内皮细胞蛋白为抗原,应用免疫印迹方法对抗内皮细胞抗体的抗原进行了分析。     

丝虫病循环抗原及抗体的检测

将抗马来丝虫微丝蚴抗原的单克隆抗体致敏羧化聚苯乙烯乳胶,检测班氏丝虫微丝蚴血症者119例,阳性109例,阳性率91.6%,健康输血员36例,阳性4例,阳性率11.11%,肠道蠕虫及原虫感染者12例和猪囊虫病患者14例全部为阴性。对其中103例微丝蚴血症者进行了血清抗体的测定,阳性93例,阳性率90.29%。结果表明,单抗乳胶凝集试验检测丝虫病循环抗原方法简便、经济,敏感性和特异性均较好,便于现场推广应用,尤其对丝虫病活动性感染和早期感染的诊断及流行病学监测有一定实用价值。