尿激酶联合透明质酸酶诱导兔眼玻璃体后脱离的实验研究

目的：研究尿激酶联合透明质酸酶玻璃体腔内注射诱导兔眼玻璃体后脱离（PVD）的效果，并评价其安全性。 方法：20只兔40眼随机分为A，B，C3组，分别为6，6，8只，均以右眼为实验眼，左眼对照。3组动物实验眼玻璃体腔内注射药物分别为：尿激酶1000U，透明质酸酶20U，尿激酶1000U＋透明质酸酶20U，对照眼内均注入BBS0．ImL。术后7d内行裂隙灯、检眼镜、光镜及扫描电镜等检查。 结果：术后7dA组部分性PVD发生率100％，B组为16．7％，两组均无完全性PVD发生；C组完全性PVD发生率100％，对照眼无PVD。病理学检查未发现视网膜毒性。 结论：尿激酶1000U联合透明质酸酶20U兔眼玻璃体腔内注射能诱导完全性PVD，且无眼内毒性。     

纤维蛋白溶酶联合透明质酸酶治疗玻璃体积血的实验研究

目的研究纤维蛋白溶酶联合透明质酸酶对玻璃体积血的治疗效果。设计实验性研究。研究对象40只兔（40眼）。方法将40只兔随机分为A、B、C、D组,每组10只,右眼作为实验眼。取自体耳缘静脉血0．1ml注射入玻璃体腔内形成玻璃体积血模型,24小时后A组玻璃体腔内注射纤维蛋白溶酶1u＋透明质酸酶20U（0．1m1）;B组纤维蛋白溶酶1U（0．1m1）;C组透明质酸酶20U（0．1m1）;D组BSS溶液0．1ml。术后7天内行间接检眼镜对眼底各象限透明度观察并分级,各象限分级数值总和为玻璃体积血指数,评价玻璃体积血吸收情况;行B超、扫描电镜检查玻璃体后脱离（PVD）发生情况。主要指标玻璃体积血指数、完全性玻璃体后脱离发生率。结果注射后7天各组玻璃体积血指数中位数及四分位间距分别为：A组4（2～5．25）;B组7（6～8）;C组10（10～11）;D组12（10～12）。各组玻璃体积血指数两两比较A组与B、C、D组的差异均有统计学意义（P均〈0.01）。B超显示各组完全性PVD发生率：A组10例（100％）,B组8例（80％）,C组及D组均未发生。结论1U纤维蛋白溶酶联合20U透明质酸酶玻璃体内联合注射可有效促进玻璃体内积血团块的分解,并可有效地液化玻璃体诱导PVD,加速血液的播散和吸收。     

纤溶酶和透明质酸酶诱导猪玻璃体后脱离的比较研究

目的：研究纤溶酶和透明质酸酶诱导猪玻璃体后脱离（PVD）的有效性和安全性,比较两种酶单独应用和联合应用的效果。 方法：小型猪15只随机分为A,B,C三组,每组5只,随机选取1只眼为实验眼,对侧眼为对照眼。三组实验眼玻璃体腔分别注射50U（0.1mL）透明质酸酶、0.5U（0.1mL）纤溶酶和0.5U（0.05mL）纤溶酶加50U（0.05mL）透明质酸酶,对照眼均注射平衡盐溶液（BSS）0.1ml。注药后进行裂隙灯、直、间接检眼镜、眼B超、视网膜电图（ERG）等检查,7d后摘除眼球进行光镜、透射电镜、扫描电镜检查。 结果：B超检查显示A组有1只实验眼、B组有两只实验眼于注药后1d观察到部分性PVD,C组有1只实验眼于注药后1h观察到部分性PVD。B超、光镜和扫描电镜检查显示注药后7dA组和B组实验眼均见部分性PVD,C组实验眼均见完全性PVD,对照眼未见PVD。实验及对照眼注药前、后ERGa波、b波波幅均无显著性差异,光镜及透射电镜检查未见视网膜损害。 结论：0.5U纤溶酶和50U透明质酸酶单独及联合应用均可快速、安全、有效地诱导猪眼玻璃体后脱离,且联合用药较单独用药诱导PVD更快速、更有效。     

纤维蛋白溶解酶联合透明质酸酶诱发玻璃体后脱离实验研究

目的研究纤维蛋白溶解酶(简称纤溶酶)联合透明质酸酶诱发玻璃体后脱离(PVD).方法 16只兔随机分为A、B、C三组各8、4、4只,均右眼为实验眼,左眼对照.A组实验眼玻璃体腔内注射纤溶酶1 U和透明质酸酶20 U,B组纤溶酶1 U,C组透明质酸酶20 U,对照眼均注射BSS液.术后7天内行B超、ERG、扫描及透射电镜等检查.结果扫描电镜确诊A组实验眼完全性PVD 100%,B组实验眼部分性PVD 75%,C组实验眼及对照眼无PVD.实验及对照眼ERG振幅无明显下降(P＞0.05),透射电镜等检查无眼内毒性.结论纤溶酶1 U联合透明质酸酶20 U兔玻璃体腔内注射能诱导出完全性PVD,且无眼内毒性.     

超微结构研究玻璃体后脱离

目的：通过纤维蛋白溶解酶(以下简称纤溶酶)和透明质酸酶兔玻璃体腔内注射，研究玻璃体视网膜超微结构改变，阐明玻璃体后脱离的发生机制。方法：16只新西兰白兔随机分为A、B、C三组各8、4、4只兔，均以右眼为实验眼，左眼为对照。A组实验眼玻璃体腔内注射0．1ml纤溶酶1U联合透明质酸酶20U，B组注射纤溶酶1U，C组注射透明质酸酶20U，所有对照眼注射0．1mlBSS液。术后7天摘除眼球做扫描电镜检查。结果：扫描电镜发现A组赤道后内界膜(ILM)表面较光滑，残留玻璃体皮质大部分位于直径2～15μm的小凹陷上方，其下为Mueller细胞足板。完全性PVDl00％。B组后极部ILM表面较光滑，残留玻璃体皮质较A组多，部分性PVD75％。C组直径l0～30nm的玻璃体胶原纤维网状支架塌陷，在赤道后平行排列于ILM表面，无PVD。所有对照眼无PVD。结论：药物诱发PVD的实质是解除后界膜与内界膜之间分子胶的粘附。诱发PVD的药物应既能解除玻璃体视网膜界面之间的粘连，又能液化玻璃体。纤溶酶1U联合透明质酸酶20U能诱发出完全性PVD。     

纤溶酶联合透明质酸酶最佳组合诱导玻璃体后脱离的研究

目的 探讨纤溶酶联合透明质酸酶诱导大鼠玻璃体后脱离(posterior vitreous detachment,PVD)的有效性和安全性,确定纤溶酶和透明质酸酶联合应用的最佳浓度,为下一步进行药物玻璃体溶解术后白内障动物模型的药物剂量选择提供依据.方法 健康SD大鼠18只随机分为A、B、c 3组,每组6只,右眼均为实验眼,左眼为对照眼.A组实验眼玻璃体内注射纤溶酶0.15 U+透明质酸酶5 U,B组注射纤溶酶0.25 U+透明质酸酶5 U,C组注射纤溶酶0.50 U+透明质酸酶5 U,左眼玻璃体内均注射眼用平衡盐液10 μL.注药前后常规行裂隙灯、直接眼底镜检查观察眼部一般情况,7 d后处死动物并摘取眼球标本做扫描电子显微镜检查和组织病理切片检查,观察玻璃体视网膜内界膜和视网膜组织结构的情况.结果 各组实验眼裂隙灯检查均未发现明显眼内炎症反应.扫描电子显微镜结果显示,各组实验眼均有不同程度PVD的发生,其中A组出现部分性PVD占5/6,完全性PVD占1/6;B组出现部分性PVD占1/3,完全性PVD占2/3;C组均出现完全性PVD,发生率为100%;对照眼均未见PVD发生.A、B、C 3组实验眼出现完全性PVD的总发生率为61.1%(11/18),与3组对照眼(0/18)相比,差异有显著统计学意义(P<0.001).C组实验眼出现完全性PVD的发生率为100%(6/6)与A组实验眼16.67%(1/6)比较,差异也有统计学意义(P=0.015).光学显微镜检查各组注射眼均未发现视网膜组织结构的异常改变.结论 玻璃体内联合注射0.50 U纤溶酶和5 U透明质酸酶诱导玻璃体液化和完全性PVD发生的效果最好,对眼内组织无明显的毒性作用.     

纤溶酶和透明质酸酶诱导猪玻璃体后脱离的实验研究

目的研究纤溶酶和透明质酸酶诱导猪玻璃体后脱离(PVD)的有效性和安全性,比较两种酶单独应用和联合应用的效果。方法15只小型猪随机分为A、B、C三组,每组5只,随机选取一只眼为实验眼,对侧眼为对照眼,A组实验眼玻璃体腔注射50U/0.1ml透明质酸酶,B组实验眼注射0.5U/0.1ml纤溶酶,C组实验眼注射0.5U/0.05ml纤溶酶和50U/0.05ml透明质酸酶,对照眼均注射平衡盐溶液(BSS)0.1ml。注药后进行裂隙灯、直、间接检眼镜、眼B超、视网膜电图(ERG)等检查,7d后摘除眼球进行光镜、透射电镜、扫描电镜检查。结果B超检查显示A组有一只实验眼、B组有两只实验眼于注药后1d观察到部分性PVD,C组有一只实验眼于注药后1h观察到部分性PVD。B超、光镜和扫描电镜检查显示注药后7dA组和B组实验眼均见部分性PVD,C组实验眼均见完全性PVD,对照眼未见PVD。实验及对照眼注药前、后ERGa波、b波波幅均无显著性差异,光镜及透射电镜检查未见视网膜损害。结论0.5U纤溶酶和50U透明质酸酶单独及联合应用均可快速、安全、有效地诱导猪眼玻璃体后脱离,且联合用药较单独用药诱导PVD更快速、更有效。     

药物性玻璃体后脱离对增生性玻璃体视网膜病变影响的实验研究

目的 观察药物性玻璃体后脱离（PVD）对增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的影响。方法 24只有色成年家兔,左眼为实验眼。兔自体富含血小板血浆玻璃体腔注射建立兔眼PVR模型,同时随机将实验兔分为A、B组及对照组,每组各8只眼。建模后3 h A组玻璃体腔内注入1 U纤溶酶（0.05 ml）+20 U透明质酸酶（0.05 ml）共0.1 ml、B组玻璃体腔内注入纤溶酶0.1 ml、对照组玻璃体腔内注入等量的平衡盐溶液。给药后1、7、28 d记录实验眼PVR级别,进行各组PVR等级评分,并行闪光视网膜电图（F-ERG）、眼部B型超声检查及视网膜组织病理学检查。结果 PVR模型成功建立,并在注药后7 d,A组发生完全性PVD 5只眼,不完全性PVD3只眼;B组不完全性PVD 5只眼,未见完全性PVD,另3只及对照组无PVD发生。A、B组在注药后28 d PVR等级评分均低于对照组,差异有统计学意义（D=75.6, 98.9;P=0.003,P=0.011）;注药后7、28 d,A、B 两组F-ERG b 波波幅均高于对照组;产生PVD的眼中PVR级别均较无PVD的眼级别低,其中完全性PVD眼中PVR级别仅为0～1级。结论 在兔眼PVR建模后3 h,纤溶酶与透明质酸酶联合玻璃体腔注射诱导的完全性PVD在一定程度上可以阻止兔眼PVR的发生和发展,纤溶酶单独或联合透明质酸酶玻璃体腔注射诱导的不完全 性PVD对PVR的发展有减缓作用。     

Dispase诱发兔眼玻璃体后脱离的效果和安全性评价

目的 采用Dispase在兔眼中诱导完全性PVD形成，评价其效果和安全性。方法 选择健康成年的青紫蓝兔30只，随机分成5组，采用玻璃体内注射，分别注射Dispase0.005U,0.0125U(2组），0.025U,0.05U/0.05ml,PBS0.05ml注射到另一只内作为对照。术前术后眼底镜，裂隙灯和VOLK 90D随访观察。并进行B超和视网膜电图（ERG）检查，最后取眼球对视网膜进行扫描电镜和透射电镜观察。结果 注射Dispase≥0.0125U可见玻璃体后脱离，部分伴有不同程度的眼底出血：B型超声检查见玻璃体混浊和后脱离；术后电生理检查，0.005U和0.0125U组ERG没有变化，≥0.025U，部分出现ERG振幅下降；对照组没有以上改变。结论 Dispase0.0125U可以在兔眼中成功，安全诱发完全性玻璃体后脱离（PVD），更大剂量同样有效。但是有一定毒性作用。     

纤溶酶和透明质酸酶诱导猪玻璃体后脱离的有效性和安全性研究

目的 研究纤溶酶和透明质酸酶诱导猪玻璃体后脱离(posterior vitreous detach-ment,PVD)的有效性和安全性,比较2种酶单独应用和联合应用的效果.方法 15头小型猪随机分为A、B、C3组,每组5头,随机选取1眼为实验眼,对侧眼为对照眼,A组实验眼玻璃体腔注射500×103U·L-1透明质酸酶0.1 mL,B组实验眼注射5 × 103U·L-1纤溶酶0.1 mL.C组实验眼注射10 x 103U·L-1纤溶酶0.05 mL和1 × 106U·L-1透明质酸酶0.05 mL,对照眼均注射平衡盐溶液0.1 mL.注药后进行裂隙灯、直/间接检眼镜、Schotz眼压计临床检查、眼B超、视网膜电图等检查,7 d后摘除眼球进行光镜、透射电镜、扫描电镜检查.结果 B超检查显示A组有1实验眼、B组有2实验眼于注药后1 d观察到部分性PVD,C组有1实验眼于注药后1 h观察到部分性PVD.B超、光镜和扫描电镜检查显示注药后7 d A组和B组实验眼均见部分性PVD,C组实验眼均见完全性PVD,对照眼未见PVD.7 d后3组实验眼及对照眼无明显眼内炎症反应,术前术后眼压变化差异无显著性.实验及对照眼注药前、后视网膜电图a波、b波波幅均无显著性差异.实验眼光镜观察角膜、虹膜组织结构无明显异常,电镜观察晶状体、睫状体上皮细胞形态规则.结构清晰,胞膜完整,边界清楚,连接紧密,对照眼光镜及电镜观察组织结构与实验眼无差异.光镜及透射电镜检查未见视网膜损害.结论 纤溶酶和透明质酸酶单独及联合应用均可快速、安全、有效地诱导猪眼玻璃体后脱离,且联合用药较单独用药诱导PVD更快速、更有效.     

PVD following plasmin but not hyaluronidase: implications for combination pharmacologic vitreolysis therapy

PURPOSE: To study whether intravitreal injection of plasmin + hyaluronidase safely induces posterior vitreous detachment (PVD). METHODS: Rabbits were randomized into three groups: (A) 20 rabbits, intravitreal injection of plasmin 1 U + hyaluronidase 20 U in balanced salt solution (BSS) 0.1 mL into one eye; (B) 12 rabbits, plasmin alone; (C) 12 rabbits, hyaluronidase alone. The fellow eye of each rabbit was injected BSS 0.1 mL. In Group A, scanning electron microscopy (SEM) was done in four rabbits at 0.5 hour and in four rabbits at 1 hour. After 7 days, all the remaining 36 rabbits received electroretinography, SEM was examined in eight of each group, and immunohistochemistry was done in four of each group. RESULTS: SEM disclosed the eyes of Group A had complete PVD (8/8), Group B partial PVD (7/8), and Group C (8/8) and all the control eyes (24/24) no PVD after 7 days. Partial PVD was found in 4/4 at 0.5 hour and complete PVD was seen in 3/4 at 1 hour in Group A. Immunohistochemistry showed that the amounts of laminin and fibronectin in the vitreoretinal interface were decreased in Group A and B versus the control eyes (P <0.001), but not in Group C versus the control eyes (P >0.05). Electroretinography showed no changes in any group (P >0.05). CONCLUSION: Vitreous injection of plasmin + hyaluronidase induced complete PVD with no obvious toxicity. Plasmin induced partial PVD, but hyaluronidase had no effects.     

纤维蛋白溶解酶诱导兔眼玻璃体后脱离

目的 研究纤维蛋白溶解酶分别联合透明质酸酶和气体六氟化硫(SF-6)诱导兔眼玻璃体后脱离（PVD）的效果。 方法 18只健康成年青紫兰兔随机分为A、B、C 3组，每组6只兔。右眼均为实验眼，左眼为对照眼。A、B、C 组实验眼玻璃体腔内分别注射纤溶酶1 U(浓度10 U/ml)、纤溶酶1 U和透明质酸酶20 U(浓度200 U/ml)、纤溶酶1 U和SF6 0.5 ml；对照眼玻璃体腔内注射眼用平衡盐溶液（BSS）0.1ml。注药前后行间接检眼镜、裂隙灯和VOLK+90D前置镜及B型超声和视网膜电图(ERG)检查。最后取所有兔眼行光学显微镜、扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察。 结果 扫描电子显微镜观察结果：A组实验眼中有2只眼后极部发生不完全性PVD，发生率为33.3%；B、C两组实验眼中分别各有4只眼发生完全性PVD，发生率为66.7%；B、C两组实验眼出现PVD的阳性发生率与A组比较，差异有统计学意义 (P<0.05)。3组实验眼注药后ERG振幅与手术前及对照眼比较差异均无统计学意义（P>0.05）。光学显微镜和透射电子显微镜观察结果显示，视网膜组织结构无明显异常改变。 结论 纤溶酶联合透明质酸酶或SF6较单独采用纤溶酶更能迅速有效的诱发完全性PVD且对视网膜无明显的毒性作用。 (中华眼底病杂志, 2005, 21: 388-390)     

糖尿病大鼠药物性玻璃体松解术的研究

目的 研究在糖尿病大鼠中能否采用药物性玻璃体松解术诱导完全性玻璃体后脱离(PVD).方法 实验研究.成年SD大鼠用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发糖尿病,4周后用视觉电生理、视网膜血管铺片、透射电镜观明确视网膜病变的发生.发病4周后将糖尿病大鼠分为4组:A组10只,右眼玻璃体内注射透明质酸酶5 U;B组10只,右眼玻璃体腔内注射纤溶酶0.5 U;C组10只,右眼玻璃体腔内注射纤溶酶0.5 U+透明质酸酶5 U;D组10只,右眼玻璃体注射BSS 2 μl.注射后一周内观察眼部一般情况并检查视觉电生理变化(F-ERG).一周时取各组大鼠视网膜做扫描电镜检查和组织切片,观察视网膜组织结构及玻璃体后脱离的发生情况.对数据采用t检验进行统计学分析.结果 糖尿病大鼠发病4周时已经有视觉电生理的改变,血管铺片显示周细胞的减少(t=6.1,P<0.01);Ops振幅降低、峰时延迟(t=2.8,3.4;P<0.05);透射电镜显示毛细血管周细胞水肿变性.玻璃体腔注射药物一周后,通过扫描电镜观察A组和D组无PVD发生(0/10);B组发生部分性PVD 6/10,完全性PVD 4/10;C组发生完全性PVD 10/10.视觉电生理检查各组与注射前相比差异均无统计学意义(P>0.05),组织切片检查未显示视网膜组织结构的异常改变.结论 STZ诱导糖尿病4周大鼠视网膜已经出现了病理改变,在其玻璃体腔中注射0.5 U的纤溶酶加5 U的透明质酸酶能够稳定地诱发出完全性PVD,而单独使用纤溶酶仅能诱发出部分性PVD,透明质酸酶不能诱发出PVD.各组未见药物对视网膜的结构和功能造成明显的毒性反应.     

Intravitreal injection of hyaluronidase cannot induce posterior vitreous detachment in the rabbit

PURPOSE: To investigate whether intravitreal injection of hyaluronidase can induce posterior vitreous detachment (PVD) in the rabbit. METHODS: One eye each of 12 New Zealand white rabbits received intravitreal injection via the pars plana of 20 IU of hyaluronidase (0.1 mL reconstituted in sterile balanced salt solution [BSS]) into the midvitreous cavity. The fellow eye of each rabbit received a vitreous injection of 0.1 mL of BSS. At 3 and 6 months after intravitreal injection, four and eight rabbits were killed, respectively, and the eyes were enucleated. After fixation, scanning electron microscopy was performed to study the vitreoretinal interface. RESULTS: At 3 and 6 months after injection, scanning electron microscopy showed that the retinal surfaces in eyes that received either hyaluronidase or BSS were covered with vitreous collagen fibers. No eyes, even those that received hyaluronidase over a period of 6 months, had the smooth retinal surface consistent with a bare internal limiting lamina that suggests the development of PVD. CONCLUSION: Hyaluronidase cannot induce PVD in the rabbit over a 6-month period after vitreous injection.     

纤维蛋白溶解酶和Dispase蛋白酶诱导兔眼玻璃体后脱离的实验研究

目的研究纤维蛋白溶解酶和dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离(PVD)的作用。方法24只健康成年的青紫兰兔随机分为4组,右眼均为实验眼,左眼为对照眼。A组实验眼玻璃体腔内注射纤溶酶1U,B组纤溶酶2 U,C组dispase蛋白酶0.0125U和D组dispase蛋白酶0.025U,对照眼均为眼用平衡盐BSS液0.1 ml。注药前后行眼底镜、裂隙灯和VOLK 90D前置镜以及B超和视网膜电图(ERG)检查,最后取眼球进行光镜、扫描电镜和透射电镜观察。结果电镜结果A组2只实验眼后极部发生不完全性PVD,发生率为33.3%;B、C两组实验眼中各有4只眼发生完全性PVD。发生率为66.7%;D组实验眼有5只眼发生完全性PVD,发生率为83.3%。纤溶酶各组实验眼注药后ERG振幅与术前及对照眼比较无显著性差异(P>0.05),光镜和透射电镜观察视网膜组织结构正常,均未发现明显异常改变。而Dispase蛋白酶各组透射电镜观察视网膜细胞和细胞器出现水肿和变性。ERG检测Dispase两组实验眼术后b波振幅较术前明显降低(P<0.01)。结论玻璃体腔注射纤溶酶2U较注射1U更能有效的诱导PVD且对视网膜无明显的毒性作用。而Dispase蛋白酶虽然可迅速有效的诱导PVD,但对视网膜有明显的毒性作用。     

酶学诱发PVD对视网膜细胞安全性的研究

目的 了解纤溶酶和透明质酸酶诱发玻璃体后脱离（PVD）对视网膜细胞的安全性.方法 新西兰白兔16只分4组,采用玻璃体腔内注药.A组：纤溶酶1 U＋透明质酸酶20 U;B组：纤溶酶2 U＋透明质酸酶20 U;C组：纤溶酶4 U＋透明质酸酶20 U;D组：BSS正常对照组.术后7 d摘除眼球,TUNEL法检测细胞凋亡、RT-PCR检测视网膜内c-fos基因.结果 TUNEL法检测A组视网膜标本内未发现凋亡细胞,B、C组及正常对照组视网膜内各发现1个凋亡细胞.RT-PCR检测A、B、C组及对照组视网膜内均未见c-fos基因mRNA的表达.结论 兔眼内注射纤溶酶1～4 U＋透明质酸酶20 U,在细胞和分子水平上没有加速视网膜细胞凋亡,进一步证实了该联合酶制剂眼内注射的安全性.     

组织型纤溶酶原激活物诱发玻璃体后脱离的实验研究

目的研究玻璃体内注射组织型纤溶酶原激活物(tPA)诱发玻璃体后脱离(posteriorvitreousdetachment,PVD)的效果及安全性。方法12只灰兔分为实验A、B、C3组,每组4只,正常对照组1只。tPA10U,15U,25U(0.1mL),分别注入实验A、B、C3组兔的左眼作为实验组,0.1mLBSS分别注入右眼作为实验对照组。实验后分别观察0.5h、1h、2h、1d、7d的情况。扫描电镜、眼底检查、超声波用于PVD观察,透射电镜和视网膜电图用于药物安全性判断。采用SPSS10.0进行统计学分析。结果眼底和超声波检查发现实验A、B、C3组PVD发生率分别为25%、50%、100%,实验组总PVD发生率为58.3%,对照组无PVD发生,差异有高度显著性(P=0.002)。扫描和透射电镜显示实验C组发生完全性PVD,A和B组内界膜表面有玻璃体胶原残留。透射电镜和光镜检查发现各实验组的视网膜组织细胞未见异常,用药前后的视网膜电图差异没有显著性(P>0.05)。结论tPA能诱发人工PVD,25U在兔眼能安全和有效地诱发完全性PVD。