碱性成纤维细胞生长因子对环磷酰胺致小鼠睾丸损伤修复的促进作用

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对环磷酰胺致小鼠睾丸损伤的促修复作用。方法:实验于2004-10-01/2005-01-05在泰山医学院形态学实验室完成。选用清洁级昆明种雄性小白鼠50只。以随机数字表法分为5组,即正常对照组、模型对照组、碱性成纤维细胞生长因子400,800,1200 IU/(kg·d)剂量组,每组10只。①建立环磷酰胺致睾丸损伤小鼠模型:腹腔注射5mg/(kg·d)环磷酰胺,正常对照组给予等体积的生理盐水,连续36 d。②给予碱性成纤维细胞生长因子治疗:从第37 d开始,对碱性成纤维细胞生长因子不同剂量组分别给予碱性成纤维细胞生长因子400,800,1200 IU/(kg·d)腹腔注射,连续36 d,模型对照组和正常对照组给予等体积的生理盐水。③末次给药后24h,麻醉下颈椎脱臼法处死小鼠,剥离双侧附睾尾,剪碎,过滤,制精子悬液。400倍光镜观察,检测精子数量、存活率、畸形率、精子活动力。睾丸组织行电镜、光镜观察。SP法检测睾丸组织增殖细胞核抗原的表达。结果:进入结果分析小鼠50只。①碱性成纤维细胞生长因子400,800,1200 IU/(kg·d)剂量组精子数量、存活率、活动力均高于模型对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01);精子畸形率低于模型对照组,差异有显著性意义(P<0.01);且上述指标碱性成纤维细胞生长因子800,1200 IU/(kg·d)剂量组与正常对照组比较差异无统计学意义[(65.37±1.39)×108/g,(7.03±1.94)%,(90.90±2.16)%,(80.95±1.96)%,P>0.05]。②碱性成纤维细胞生长因子400,800,1200 IU/(kg·d)剂量组睾丸组织结构、超微结构均较模型对照组有明显恢复,其中碱性成纤维细胞生长因子800,1200 IU/(kg·d)剂量组曲细精管管腔大小一致,结构规则,生精上皮层次增多,排列整齐,管腔内有较多精子,基本恢复正常。③碱性成纤维细胞生长因子400,800,1200 IU/(kg·d)剂量组增殖细胞核抗原阳性细胞数高于模型对照组[(35.9±6.2),(71.1±9.22),(71.3±10.4),(20.4±6.36)个,P<0.01],且800,1200 IU/(kg·d)剂量组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子对环磷酰胺致睾丸损伤有明显的促修复作用,可能与外源性碱性成纤维细胞生长因子促进生精细胞的分裂增殖等机制有关。     

基于PI3K/AKT信号通路探讨汉黄芩素对宫颈癌HeLa细胞移植瘤抑制作用影响

目的 探究汉黄芩素对宫颈癌HeLa细胞移植瘤的抑制作用及机制。方法 随机选取2018年1月—2020年12月常熟市中医院的50只Balb/c小鼠进行宫颈癌荷瘤模型造模,随机分为5组：模型对照组、阳性对照组、小剂量组、中剂量组及大剂量组。模型对照组不做特殊处理,阳性对照组腹腔注射25 mg/kg环磷酰胺,小剂量组、中剂量组、大剂量组小鼠灌胃25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg汉黄芩素。处死小鼠取出瘤体,比较各组肿瘤质量、体积,计算肿瘤生长抑制率;取出胸腺、脾脏并计算相关脏体指数。将小鼠肿瘤分为两份,一份采用伊红-美兰(HE)染色进行组织学观察;另一份采用免疫印迹法检测各组小鼠PI3K、AKT、p-AKT表达情况。结果 阳性对照组的肿瘤生长抑制率为69.63%,大剂量组、中剂量组、小剂量组的肿瘤生长抑制率分别为77.78%、54.81%和31.85%均高于模型对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。大剂量组肿瘤生长抑制率为77.78%高于阳性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫印迹法结果显示,与模型对照组比较,大剂量组、中剂量组与小剂量组PI3K、...     

罗汉果对雄性小鼠骨髓微核和精子形态的影响

背景：对罗汉果的遗传毒性进行研究,可为其安全使用提供实验依据。目的：观察罗汉果水提液对雄性小鼠骨髓细胞微核率和附睾精子畸形率的影响,了解其是否有遗传毒性。方法：按罗汉果水提液最大使用剂量（3g/mL）和最大灌胃容量（20mL/kg）灌胃小鼠,观察罗汉果水提液的急性毒性。将雄性昆明小鼠随机分为5组,分别灌胃给予30,15,7.5g/kg的罗汉果水煎液、蒸馏水,连续5d;或腹腔注射40mg/kg环磷酰胺。于灌胃第5天,采用骨髓嗜多染红细胞微核试验计算小鼠的骨髓微核率。于首次灌胃后第35天,观察小鼠精子畸形率。结果与结论：罗汉果水提液对昆明小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量大于120g/kg。罗汉果水提液30,15,7.5g/kg灌胃后,小鼠的骨髓微核率、精子畸形率与正常小鼠无差异（P〉0.05）,均明显低于环磷酰胺诱发的骨髓微核率和精子畸形率（P〈0.05）。说明罗汉果水提液对成年雄性小鼠无明显遗传毒性。     

N,O-羧甲基壳聚糖对小白鼠精子畸形的影响

目的:观察能明显促进禽类等动物的生长发育,改善肉质的新型饲料添加剂N,O-羧甲基壳聚糖对昆明种小白鼠精子畸形的影响,分析其应用在畜牧生产中的安全性。方法:实验于2005-06-22/2005-08-06于南京农业大学动物医学院药理组实验室完成。挑选体质量25～28g的小鼠50只,以随机数字表法分为生理盐水组、环磷酰胺组、N,O-羧甲基壳聚糖(南京龙源天然多酚合成厂提供,商品名为毕罗喜,质量浓度为105g/kg)2,4,8g/kg剂量组,每组10只。N,O-羧甲基壳聚糖2,4,8g/kg剂量组分别给予相应剂量的N,O-羧甲基壳聚糖,溶于1mL生理盐水,2,4g/kg剂量1次灌服,8g/kg剂量分2次灌服,每次间隔约3h;生理盐水组给予生理盐水1mL;环磷酰胺组给予环磷酰胺0.04g/kg,溶于1mL生理盐水。给药前禁食10h,不禁水。连续灌胃5d,给药后30d麻醉下处死,取两侧附睾按Wyrobek方法涂片,观察小白鼠精子畸形状况。评估标准参照农业部兽药评审委员会办公室编写的兽药试验技术规范汇编(2001年)。评估内容参照沈建忠主编的动物毒理学(中国农业出版社,2002年),包括各种畸形的精子形态:不定形、胖头、香蕉头、无钩、双头(多头)和双尾(多尾)等,及其分类计数。每组随机选取5只小鼠,计算总畸形率。精子畸形率(%)=畸形精子总数/检查精子总数×100。结果:最终25只小鼠进入结果分析,每组5只。①环磷酰胺组的精子畸形率远高于生理盐水组和N,O-羧甲基壳聚糖2,4,8g/kg剂量组(6.10%,2.48%,2.46%,2.64%,2.78%,P<0.01);N,O-羧甲基壳聚糖2,4,8g/kg剂量组与生理盐水组比较,差异无显著性意义(P>0.05),且各剂量组之间差异也没有显著性意义(P>0.05)。②各组精子畸形主要表现为头部或尾部异常。以无定形和胖头居多,占35.48%(292/823)和29.28%(241/823);其次是无钩形及香焦形多见,占19.68%(162/823)和13.49%(111/823);偶尔可见双头双尾形,只占2.07%。结论:N,O-羧甲基壳聚糖精子畸形试验结果呈阴性,说明其对雄性生殖细胞没有明显的遗传毒性。     

桂皮醛抗肿瘤活性及对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:观察传统中药肉桂挥发油中桂皮醛的细胞毒作用,并以小鼠S180移植性肿瘤为模型,进行其体内外抗肿瘤活性及对S180荷瘤小鼠免疫功能影响的实验。方法:实验于2005-03/06在解放军第四军医大学药学系药物研究所实验室完成。取BALB/c小鼠60只,雌雄各半,体质量18～22g。先设1组不接种瘤株的生理盐水正常对照组,10只,雌雄各半。余50只小鼠每只右腋皮下接种0.2mL,24h后随机分成5组,即生理盐水荷瘤对照组,卡铂阳性药对照组,桂皮醛25,50,100mg/kg3个剂量组,每组10只,雌雄各半。用四甲基偶氮唑蓝法观察桂皮醛对6种人癌细胞的体外抗肿瘤作用;对25,50,100mg/kg3个剂量组分别腹腔注射相应剂量用含0.5%土温80生理盐水溶解的桂皮醛(购自中国医药集团上海化学试剂公司),正常对照组和荷瘤空白对照组腹腔注射生理盐水,阳性药对照组腹腔注射卡铂5mg/kg。接种第2天开始全部腹腔注射给药,10mL/kg,每天1次,连续给药10d,于最后1次给药后次日处死动物,测定肿瘤抑制率、免疫器官质量、血常规、NK细胞活性、T淋巴细胞转化率,分析其对小鼠体内抗肿瘤作用及与免疫调节的关系。结果:参加实验的动物60只全部进入结果分析,没有脱失。①桂皮醛对体外培养的6种人肿瘤细胞有直接细胞毒作用,其IC50的范围为12.3～37.1mg/L。②桂皮醛50,100mg/kg剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,抑瘤率分别为33.08%和46.92%;同时能有效保护荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数。③桂皮醛25,50mg/kg剂量组可以升高白细胞,与生理盐水荷瘤对照组比差异有显著性意义(11.13±1.49,11.25±2.18,8.78±1.33,P<0.01)。④桂皮醛25,50mg/kg剂量组的T淋巴细胞增殖能力显著或非常显著高于生理盐水荷瘤对照组(P<0.05～0.01);桂皮醛50mg/kg剂量组NK细胞杀伤活性明显高于生理盐水荷瘤对照组(P<0.05)。⑤桂皮醛100mg/kg剂量组显著降低白细胞(P<0.01);抑制T淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性,与荷瘤空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论:桂皮醛对体外培养的肿瘤细胞增殖具有良好的抑制作用,在适当剂量范围内可以保护和恢复荷瘤小鼠的免疫功能。     

N,O-羧甲基壳聚糖对小白鼠精子畸形的影响

目的：观察能明显促进禽类等动物的生长发育。改善肉质的新型饲料添加剂N，O-羧甲基壳聚糖对昆明种小白鼠精子畸形的影响，分析其应用在畜牧生产中的安全性。 方法：实验于2005—06—22／2005—08—06于南京农业大学动物医学院药理组实验室完成。挑选体质量25～28g的小鼠50只，以随机数字表法分为生理盐水组、环磷酰胺组、N，O-羧甲基壳聚糖（南京龙源天然多酚合成厂提供，商品名为毕罗喜，质量浓度为105g／kg）2，4，8g／kg剂量组，每组10只。N，O-羧甲基壳聚糖2，4，8g／kg剂量组分别给予相应剂量的N，O-羧甲基壳聚糖，溶于1mL生理盐水，2，4g／kg剂量1次灌服，8g／kg剂量分2次灌服。每次间隔约3h；生理盐水组给予生理盐水1mL；环磷酰胺组给予环磷酰胺0．04g／kg，溶于1mL生理盐水。给药前禁食10h，不禁水。连续灌胃5d，给药后30d麻醉下处死，取两侧附睾按Wyrobek方法涂片。观察小白鼠精子畸形状况。评估标准参照农业部兽药评审委员会办公室编写的兽药试验技术规范汇编（2001年）。评估内容参照沈建忠主编的动物毒理学（中国农业出版社，2002年），包括各种畸形的精子形态：不定形、胖头、香蕉头、无钩、双头（多头）和双尾（多尾）等，及其分类计数。每组随机选取5只小鼠，计算总畸形率。精子畸形率（％）=畸形精子总数／检查精子总数&;#215;100。 结果：最终25只小鼠进入结果分析，每组5只。①环磷酰胺组的精子畸形率远高于生理盐水组和N，O-羧甲基壳聚糖2，4，8s／kg剂量组（6．10％，2．48％，2．46％，2．64％，2．78％，P〈0．01）；N，O-羧甲基壳聚糖2，4，8g／kg剂量组与生理盐水组比较，差异无显著性意义（P〉0．05），且各剂量组之间差异也没有显著性意义（P〉0．05）。②各组精子畸形主要表现为头部或尾部异常。以无定形和胖头居多，占35．48％（292／823）和29．28％（241／823）；其次是无钩形及香焦形多见，占19．68％（162／823）和13．49％（111／823）；偶尔可见双头双尾形，只占2.07％。 结论：N，O-羧甲基壳聚糖精子畸形试验结果呈阴性，说明其对雄性生殖细胞没有明显的遗传毒性。     

偏钒酸钠对雄性小鼠生殖功能影响的研究

雄性小鼠分别经腹腔注射每公斤体重0．33，1．00和3.00mg偏钒酸钠（NaVO3）。染毒后第2，4，6周末每组随机取5只小鼠观察精子数量、精子形态、精子存活率及精子活动能力的变化，结果：染毒后第2周末，Ⅳ（3．00mg/kg）组精子存活率和精子活动能力明显降低（P＜0．05），其它指标无明显改变；第4周末，精子畸形率增高（P＜0．05），精子活动能力进一步降低（P＜0．01），而Ⅲ（1．00mg／kg）组的精子活动能力也见下降（P＜0．05）；第6周末，Ⅳ组精子畸形率进一步增高（P＜0．01），精子计数量显著降低（P＜0．01），Ⅲ组的精子计数也下降（P＜0．05）。提示NaVO3可影响雄性小鼠精子的发生，其中精子存活率和精子活动能力的改变是NaVO3生殖毒性最敏感的指标，其次是精子畸形率的变化，而精子计数仅见于长期接触高浓度钒方可出现改变。     

姜黄素的抗抑郁作用

背景：从植物中尤其是传统中草药中寻找高效、低毒的抗抑郁药成为现代抗抑郁治疗的研究热点.目的：采用行为实验和神经化学方法探讨姜黄素的抗抑郁作用及其可能的作用途径.设计：随机分组设计,对照实验.单位：北京大学基础医学院药理学系.材料：实验于2003-11/2004-10在北京大学医学部药理学系实验室完成.选用雄性ICR小鼠240只.方法：共4个分实验.①拮抗利血平诱导小鼠体温下降实验：选用小鼠60只,随机分成6组：对照组,姜黄素1.25,2.50,5.00,10.00 mg/kg组,盐酸丙咪嗪组（10 mg/kg）.实验前先测定小鼠的正常体温,然后每组小鼠皮下注射利血平（2.5 mg/kg）.18 h后分别给予不同浓度的姜黄素（灌胃）、花生油（0.1 mL/10 g,灌胃）以及盐酸丙咪嗪（10 mg/kg,腹腔注射）,分别测定给药后60,90,120,150,180 min小鼠的直肠温度.②5-羟色胺酸诱导的小鼠甩头实验：小鼠分组同上,阳性对照药换为盐酸氟西汀.小鼠分别灌胃给予姜黄素4个剂量同前,花生油和氟西汀（10 mg/kg）,1 h后从小鼠尾静脉注射5-羟色胺酸（70 mg/kg）,观察并记录小鼠在给予5-羟色胺酸后5～10 min内的甩头次数.③高剂量阿扑吗啡诱导的小鼠体温下降实验：小鼠分组同上,阳性对照药为盐酸丙咪嗪.小鼠分别灌胃给予4个剂量同前的姜黄素,花生油和盐酸丙咪嗪,1 h后分别皮下注射高剂量的阿扑吗啡（16 mg/kg）,分别测定注射阿扑吗啡前及注射后30和60min的直肠温度.④测定小鼠脑内单胺和其代谢产物的含量：小鼠分组同上,阳性对照药为盐酸丙咪嗪.小鼠灌胃分别给予4个剂量同前的姜黄素,花生油和盐酸丙咪嗪.用高效液相电化学法测定小鼠脑内单胺及其代谢产物含量.⑤组间比较采用Dunnett＇st检验.主要观察指标：①在利血平诱导的小鼠体温下降实验中,给药前后体温的变化.②在5-羟色胺酸诱导小鼠甩头实验中,给药后甩头次数是否增加.③在阿扑吗啡诱导体温下降实验中,给药后体温的改变.④测定药物对单胺递质含量的影响.结果：小鼠240只均进入结果分析.①利血平诱导的小鼠体温下降实验结果：5.00mg/kg和10.00mg/kg姜黄素可以逆转利血平诱导的小鼠体温下降,结果与对照组差异明显（P＜0.05,0.01）.姜黄素在10.00mg/kg剂量下的作用与阳性对照药盐酸丙咪嗪相似.②5-羟色胺酸诱导的小鼠甩头实验结果：姜黄素（5,10 mg/kg）能显著增加5-羟色胺酸诱导的小鼠的甩头次数（P＜0.05,0.01）.③阿扑吗啡诱导体温下降实验结果：5.00 mg/kg和10.00 mg/kg姜黄素可以明显拮抗高剂量阿扑吗啡引起的小鼠体温下降,与对照组差异明显（P＜0.05,0.01）.④姜黄素在2.50,5.00和10.00 mg/kg剂量可以显著增加小鼠脑内5-羟色胺的含量,在10 mg/kg剂量可以显著增加小鼠脑内去甲肾上腺素、多巴胺的含量.与对照组差异明显（P＜0.05）.而姜黄素对其代谢产物5-羟基吲哚乙酸和3,4-二羟基苯乙酸的含量没有明显影响.阳性对照药盐酸丙咪嗪10 mg/kg可以显著增加小鼠脑内5-羟色胺和去甲肾上腺素含量（P＜0.05）.结论：姜黄素具有抗抑郁作用,其作用发挥可能与单胺神经系统有关.     

哌替啶类衍生物造模帕金森病小鼠的最佳剂量

目的:比较不同剂量哌替啶类衍生物1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyrindine,MPTP)建立的帕金森病小鼠模型对小鼠纹状体多巴胺含量的影响。方法:实验于2003-11/2004-07在北京宣武医院神经生物学实验室完成。选择C57BL/6L小鼠60只,采用不同剂量MPTP建立帕金森病小鼠模型,随机分6组,MPTP40mg/kg皮下注射1次组10只;MPTP20mg/kg腹腔注射,每2h1次,注射3次组10只;MPTP25mg/kg腹腔注射,每2h1次,注射3次组10只;MPTP45mg/kg皮下注射1次组10只;MPTP35mg/kg皮下注射1次组10只;正常对照组10只。采用Lowry法测定纹状体组织中多巴胺含量/蛋白质含量。结果:纳入动物60只,52只进入结果分析,其中8只均在处死前死亡。MPTP使小鼠纹状体多巴胺含量显著性下降。正常对照组多巴胺含量为(136.39±41.61)μg/g;MPTP35,40,45mg/kg皮下注射1次组分别为(107.97±26.92),(85.91±24.60),(74.13±12.49)μg/g,分别是正常对照组的79.16%,62.99%,54.35%;MPTP20,25mg/kg腹腔注射每2h1次,注射3次组分别为(44.90±18.41),(44.30±29.44)μg/g,分别是正常对照组的32.92%,32.48%。5个模型组与正常对照组比较差异均显著(P<0.01)。结论:MPTP20mg/kg腹腔注射每2h1次,注射3次和MPTP40mg/kg皮下注射1次两种模型是对帕金森病不同研究方向的理想模型。     

黄芪、鸡内金复方颗粒剂应用的安全性实验

目的：观察以黄芪、鸡内金、神曲等药物组成芪金颗粒剂喂饲大鼠后组织病理、血液生化的多项指标，以探讨芪金颗粒毒理学及安全性。 方法：实验于2005—03／2006—01在山西省疾控中心毒理实验室完成。选取清洁级Wistar离乳大鼠80只，随机分为4组，即3个剂量组和阴性对照组，每组20只。3个剂量组（将药物剂量按比例掺入饲料）分别为高剂量组10g／kg（含受试药物100g）、中剂量组5g／kg（含受试药物50g）、低剂量组1.67g／kg（含受试药物16．7g）。各组动物单笼饲养，连续喂养30d。观察和记录动物的一般表现、行为、中毒症状和死亡情况。记录每周体质量，食物摄入量，计算食物利用率。测定血液学指标。测定生化指标。观察肝、脾、肾、睾丸等脏器大体变化，并进行组织病理学切片观察。同时采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验等对其进行毒性及安全性评价。 结果：在实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。①实验期间各组动物活动正常，各剂量组在体质量增长、进食量和食物利用率方面与对照组比较差异无显著性意义。②各剂量组血液指标和生化指标检测结果与对照组比较差异均无显著性意义。③各剂量组病理组织学方面即肝、脾、肾、胃、肠、睾丸和卵巢均未见特异性病理改变。④Ames试验结果显示，直接作用（-S9）或经代谢活化作用（＋S9）均不引起自发回变数增加；未呈现致突变性；小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未发生改变，嗜多染红细胞与正染红细胞的比例大于0．1，未呈现有致突变性；各剂量组精予畸形率与阴性对照组比较差异均无显著性意义意义（P〉0．05），而阳性对照组精子畸形率与阴性对照组及各剂量组比较差异有高度显著性（P〈0．01），说明芪金颗粒在所设剂量范围内未引起小鼠精子畸形率增高。 结论：芪金颗粒对大鼠进食、食物利用率、血液学指标、生化指标、各脏器病理组织学及睾丸卵巢生殖系统等无不良影响，无毒性，具有安全性。     

罗汉果对雄性小鼠骨髓微核和精子形态的影响

背景:对罗汉果的遗传毒性进行研究,可为其安全使用提供实验依据.目的:观察罗汉果水提液对雄性小鼠骨髓细胞微核率和附睾精子畸形率的影响,了解其是否有遗传毒性.方法:按罗汉果水提液最大使用剂量(3 g/mL)和最大灌胃容量(20 mL/kg)灌胃小鼠,观察罗汉果水提液的急性毒性.将雄性昆明小鼠随机分为5组,分别灌胃给予30,15,7.5 g/kg的罗汉果水煎液、蒸馏水,连续5 d;或腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺.于灌胃第5天,采用骨髓嗜多染红细胞微核试验计算小鼠的骨髓微核率.于首次灌胃后第35天,观察小鼠精子畸形率.结果与结论:罗汉果水提液对昆明小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量大于120 g/kg.罗汉果水提液30,15,7.5 g/kg灌胃后,小鼠的骨髓微核率、精子畸形率与正常小鼠无差异(P > 0.05),均明显低于环磷酰胺诱发的骨髓微核率和精子畸形率(P < 0.05).说明罗汉果水提液对成年雄性小鼠无明显遗传毒性.     

脂多糖联合D-氨基半乳糖诱导急性重症肝炎小鼠模型的建立

目的：建立存活时间较长的急性重症肝炎小鼠模型。方法：将50只BALB／c小鼠平均分成5组,其中A、B、C、D4组为实验组,E组为对照组;实验组分别给予D氨基半乳糖（D-GaIN）和脂多糖（LPS）,剂量分别为800mg／kg和10μg／kg、500mg／kg和10μg／kg、500mg／kg和5μg／kg、300mg／kg和5,ug／kg,用生理盐水稀释至1mL,行腹腔注射;对照组E腹腔注射生理盐水2mL。以12h死亡率、24h死亡率及肝组织学改变为观察指标。结果：A、B、C、D及E组小鼠12h死亡率分别为80％％、30％、10％、0和0;24h死亡率分别为909,6、60％、30％、0和0;A和B组小鼠肝组织学均呈急性重症肝炎表现,C组中有5只小鼠肝组织学符合重症肝炎的表现,而该组其余小鼠及D组所有肝组织学虽有炎症改变,但达不到重症肝炎的程度,E组肝组织学表现正常。结论：LPS10ug／kg联合D～GaIN500mg／kg可成功建立12h存活率较高的急性重症肝炎小鼠模型。     

三羟异黄酮抑制前列腺增生作用的体外和动物研究

目的应用三羟异黄酮对BPH小鼠模型和体外培养的前列腺上皮细胞进行干预治疗,观察其对BPH治疗作用及对细胞的影响。方法选择32只雄性昆明小鼠,应用丙酸睾丸酮肌内注射制作小鼠BPH模型;然后分为4组,每组各8只小鼠。其中3组小鼠分别采用10、30、90 mg/（kg·d）三羟异黄酮剂治疗4周,余1组为对照组,不予任何治疗。4周后处死4组小鼠,取前列腺称重,计算前列腺指数。另外取BPH患者前列腺上皮细胞加入不同培养孔,每孔2×10^4个细胞,分别应用含0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0μmol/L三羟异黄酮的培养基培养10 d后收集各组细胞,染色并计数,比较6组细胞的活率。结果治疗4周后,3组实验组小鼠前列腺质量均低于对照组（P〈0.05）,中、高剂量组小鼠前列腺指数低于对照组（P〈0.05）。应用0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0μmol/L三羟异黄酮处理的前列腺上皮细胞数分别为（4.71±0.78）×10^4个、（4.46±1.15）×10^4个、（3.84±1.33）×10^4个、（2.01±0.31）×10^4个、（0.58±0.28）×10^4个、（0.20±0.12）×10^4个;台盼蓝染色提示各组前列腺上皮细胞活率分别为99.3%、98.7%、96.7%、93.3%、90.7%、88.7%,1.0、2.5、5.0μmol/L组上皮细胞数少于对照组,细胞活率亦明显低于对照组（P〈0.05或0.01）。结论三羟异黄酮可减轻BPH小鼠模型的前列腺质量,对前列腺上皮细胞增殖有抑制作用。     

维生素E对抗环磷酰胺致小鼠生精功能损害的作用

目的:维生素E有清除自由基、抗氧化作用,观察维生素E对环磷酰胺致小鼠生精功能损害的保护作用。方法:实验于2004-09/11在泰山医学院形态学实验室完成。选用健康昆明种雄性小白鼠24只,体质量23～28g。随机将其分成3组,每组8只,分别为正常对照组、环磷酰胺组、维生素E治疗组。环磷酰胺组、维生素E治疗组小鼠经口灌胃5mg/(kg·d)环磷酰胺;维生素E治疗组小鼠每天给予环磷酰胺处理后4h皮下注射50mg/(kg·d)维生素E;正常对照组小鼠经口灌胃等量生理盐水。各组均连续处理28d,于末次给药后24h,处死全部小鼠。结果评估:①按放免试剂盒说明书分别测定小鼠血清卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮。②400倍光镜观察小鼠精子悬液,计数精子,计算精子活率、畸形率、精子活力。③在冰浴条件下将小鼠睾丸组织制成睾丸匀浆测定小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性及丙二醛含量;睾丸组织光镜切片后苏木精-伊红染色观察睾丸组织结构。④光镜观察100个曲细精管的精子发生情况,按抗精子发生效应积分评定法(精子发生正常为0分,15%曲细精管有精子发生障碍为1分,15%～30%曲细精管有精子发生障碍为2分,30%～40%曲细精管有精子发生障碍为3分,40%～60%曲细精管有精子发生障碍为4分,60%～75%曲细精管有精子发生障碍为5分,75%～90%曲细精管有精子发生障碍为6分,90%以上曲细精管有精子发生障碍为7分,90%以上曲细精管有精子发生障碍,且仅有少量精原细胞为8分)评价环磷酰胺和维生素E的不同效应。结果:进入结果分析小鼠24只。①环磷酰胺组血清卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮、精子密度、活率、活动力及睾丸组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性均低于正常对照组(P<0.05～0.01),精子畸形率、睾丸组织丙二醛含量高于正常对照组(P<0.01),睾丸组织生精细胞层次减少,出现多核巨细胞、坏死等病变,抗精子效应评分高于正常对照犤(6.96±0.83),0分,P<0.01犦。②维生素E治疗组血清卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮、精子密度、活率、活动力、睾丸组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性分别高于环磷酰胺组(P<0.05～0.01),精子畸形率、睾丸组织丙二醛含量低于环磷酰胺组(P<0.01),睾丸组织结构较环磷酰胺组明显恢复,抗精子效应评分低于环磷酰胺组犤(0.70±0.55),(6.96±0.83)分,P<0.01犦。结论:维生素E对环磷酰胺致生精功能损害有明显的保护作用,该作用的发挥可能与维生素E清除氧自由基、抗氧化作用及促进垂体前叶促性腺激素的释放等有关。     

蒺藜总皂苷对动脉粥样硬化家兔细胞核因子κB及血清炎症标志物水平的影响

目的:观察蒺藜总皂苷对动脉粥样硬化家兔组织细胞核因子κB、血清炎症标志物水平的影响。方法:实验于2004-12/2005-05在中国中医研究院西苑医院心血管实验室完成。50只健康雄性日本大耳白兔,随机取10只作为正常对照组,喂普通饲料,其余40只给予高脂饮食喂养4周后,再随机分为4组:①模型组10只,继续喂高脂饲料。②小剂量组10只,喂以高脂饲料和蒺藜总皂苷6.3mg/(kg·d)。③大剂量组10只,喂高脂饲料和蒺藜总皂苷12.6mg/(kg·d)。④阳性药物对照组10只,喂以高脂饲料和辛伐他汀2.35mg/(kg·d)。2周后,测定血脂、组织中细胞核因子κB及ELISA法测定血清炎症标志物血清C-反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1水平。结果:50只家兔均进入结果分析。①与正常对照组相比,模型组、小剂量组、大剂量组、阳性药物对照组血清胆固醇及三酰甘油均升高[(1.03±0.50),(24.33±6.08),(17.10±1.94),(14.81±5.03),(16.81±2.73)mmol/L,P<0.01;(0.87±0.43),(5.27±0.06),(2.83±0.16),(1.84±0.40),(2.20±0.74)mmol/L,P<0.01];与模型组相比,小剂量组、大剂量组、阳性药物对照组血清胆固醇及三酰甘油水平均明显降低(P<0.05)。②正常对照组细胞核因子κB呈现低表达状态,阳性表达出现在胞浆中;模型组细胞核因子κB活化,表达增强,阳性颗粒出现在胞浆及胞核中,小剂量、大剂量组、阳性药物对照组细胞核因子κB表达的活性较模型组低[(15.47±6.32)%,(8.54±2.67)%,(4.36±3.65)%,(4.70±3.69)%,P<0.05],胞核阳性表达减少。小剂量、大剂量组比较差异不显著。③与模型组比较,小、大剂量组及阳性药物对照组C反应蛋白、血管细胞黏附分子1水平显著降低[(57.09±8.03),(40.07±4.65),(42.04±8.57),(26.07±5.15)ng/L,P<0.01;(51.74±9.29),(43.38±4.09),(36.04±2.57),(35.09±2.49)ng/L,P<0.01],大剂量组血清单核细胞趋化蛋白-1明显降低[(38.77±8.30),(29.47±10.25)ng/L,P<0.05),小剂量组及阳性药物对照组血清单核细胞趋化蛋白-1无明显变化。结论:蒺藜总皂苷能够降低血脂、减少动脉粥样硬化病灶中细胞核因子κB的激活,降低血清中C反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1的含量,蒺藜总皂苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

解脲脲原体和血清抗精子抗体对精液质量的影响

目的分析解脲脲原体（Uu）和血清抗精子抗体（AsAb）对精液质量的影响。方法选取62例男性不育患者,以Uu选择培养基对其分泌物培养鉴定,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其精浆和AsAb、IgM、IgG和IgA,以精液分析仪进行精子密度、存活率、a＋b级活力和畸形率分析;然后根据结果不同,分为Uu阴性和Uu阳性不育组、AsAb阴性和AsAb阳性不育组,分别加以比较。结果 Uu阳性不育组精子畸形率为（25.62±17.90）%,较Uu阴性不育组的（12.81±8.46）%明显增高（P〈0.05）,而两组间精子密度、精子存活率和精子活力差异无统计学意义（P〉0.05）;AsAb阳性不育组精子密度、精子存活率和精子活力分别为（37.21±42.95）×106/mL、（23.82±20.30）%、（11.79±12.62）%;AsAb阴性不育组分别为（90.01±83.52）×106/mL、（52.25±30.10）%、（35.28±23.46）%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,而两组间精子畸形率差异无统计学意义（P〉0.05）;AsAb各亚型间精子存活率和精子活力差异有统计学意义（P〈0.05）,而各亚型间精子畸形率和精子密度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Uu和AsAb严重影响精液质量,这对男性不育类型的鉴别诊断和选择治疗方案具有重要意义。     

中药复方一身清改善便秘小鼠的排便功能

目的:观察中药复方一身清对正常小鼠小肠运动和便秘小鼠排便功能的影响。方法:实验于2004-04/05在北京大学医学部基础医学院药理学系神经药理实验室完成。①选用ICR小鼠80只,雌雄各半,清洁级。②观察中药复方一身清对正常小鼠肠道炭粉推进率的影响:取40只小鼠,随机分为4组,每组10只:对照组(灌胃100g/L阿拉伯胶 50g/L的活性炭液配成的混悬液)和中药复方一身清小、中、大剂量组眼按0.5,1.0,2.0g/kg灌胃0.1mL/10g中药复方一身清混悬液(复方由壳聚糖、拟黑多刺蚁和黑木耳微粉3种成分按4∶3∶3的质量比组成,为灰黑色粉末,易吸水膨胀,不溶于水和有机溶剂。将中药复方一身清原料粉加上述100g/L阿拉伯胶,再加上50g/L的活性炭液按一定比例搅拌混匀,配成50,100,200g/L的中药复方一身清混悬液)演。灌胃20min后处死小鼠,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,将小肠拉成直线,测量肠管总长度和炭粉推进长度,计算炭粉推进率眼炭粉推进长度穴cm雪/小肠总长度穴cm雪×100%演。③观察中药复方一身清对便秘小鼠排便功能的影响:将其余40只ICR小鼠随机分为4组,每组10只:中药复方一身清小、中、大剂量组,模型组。将40只ICR小鼠灌胃复方地酚诺酯(10mg/kg)造成便秘模型。灌胃地酚诺酯1h后,中药复方一身清小、中、大剂量组:干预措施同“炭粉推进率观察”;模型组:只造模。记录给药后6h内小鼠首次排黑便时间、排黑便粒数,称其质量;将粪便干燥,计算粪便含水量(%)眼穴湿便质量-干便质量雪/湿便质量×100%演。④计量资料差异比较采用t检验。结果:进入结果分析小鼠80只,每组10只。①小鼠肠道炭粉推进率:中药复方一身清中剂量和大剂量组明显高于对照组眼穴78±8雪%,穴71±11雪%,(60±9)%,P<0.01,0.05演,以中剂量组作用最为明显;而中药复方一身清小剂量组与对照组相近眼(58±10)%,P>0.05演。②首次排黑便时间:中药复方一身清3个剂量组均明显短于模型组(P<0.01)。③粪便含水量:中药复方一身清3个剂量组明显大于模型组(P<0.05～0.01)。④排黑便粒数:中药复方一身清小、中剂量组明显多于模型组(P<0.01)。结论:中药复方一身清可促进正常小鼠肠蠕动,可促进便秘小鼠排便、增加其便量和粪便中的含水量,起到治疗便秘的作用。     

维生素E对抗环磷酰胺致小鼠生精功能损害的作用

目的：维生素E有清除自由基，抗氧化作用，观察维生素E对环磷酰胺致小鼠生精功能损害的保护作用。方法：实验于2004-09／11在泰山医学院形态学实验室完成。选用健康昆明种雄性小白鼠24只，体质量23-28g。随机将其分成3组，每组8只，分别为正常对照组、环磷酰胺组、维生素E治疗组。环磷酰胺组、维生素E治疗组小鼠经口灌胃5mg／（kg&;#183;d）环磷酰胺；维生素E治疗组小鼠每天给予环磷酰胺处理后4h皮下注射50mg／（kg&;#183;d）维生素E；正常对照组小鼠经口灌胃等量生理盐水。各组均连续处理28d，于末次给药后24h，处死全部小鼠。结果评估：①按放免试剂盒说明书分别测定小鼠血清卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮。②400倍光镜观察小鼠精子悬液，计数精子，计算精子活率、畸形率、精子活力。③在冰浴条件下将小鼠睾丸组织制成睾丸匀浆测定小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性及丙二醛含量；睾丸组织光镜切片后苏木精一伊红染色观察睾丸组织结构。④光镜观察100个曲细精管的精子发生情况，按抗精子发生效应积分评定法（精子发生正常为0分，15％曲细精管有精子发生障碍为1分，15％-30％曲细精管有精子发生障碍为2分，30％-40％曲细精管有精子发生障碍为3分，40％～60％曲细精管有精子发生障碍为4分，60％-75％曲细精管有精子发生障碍为5分，75％～90％曲细精管有精子发生障碍为6分，90％以上曲细精管有精子发生障碍为7分，90％以上曲细精管有精子发生障碍，且仅有少量精原细胞为8分）评价环磷酰胺和维生素E的不同效应。结果：进入结果分析小鼠24只。①环磷酰胺组血清卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮、精于密度、活率、活动力及睾丸组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性均低于正常对照组（P〈0．05～0．01），精子畸形率、睾丸组织丙二醛含量高于正常对照组（P〈0．01），睾丸组织生精细胞层次减少，出现多核巨细胞、坏死等病变，抗精子效应评分高于正常对照[（6．96&;#177;0．83），0分，P〈0．01]。②维生素E治疗组血清卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮、精子密度、活率、活动力、睾丸组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性分别高于环磷酰胺组（P〈0．05-0．01），精子畸形率、睾丸组织丙二醛含量低于环磷酰胺组（P〈0．01），睾丸组织结构较环磷酰胺组明显恢复，抗精子效应评分低于环磷酰胺组[（0．70&;#177;0．55），（6．96&;#177;0．83）分，P〈0．01]。结论：维生素E对环磷酰胺致生精功能损害有明显的保护作用，该作用的发挥可能与维生素E清除氧自由基、抗氧化作用及促进垂体前叶促性腺激素的释放等有关。     

微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用研究

目的探讨微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用。方法性成熟Wistar大鼠,雌性100只,雄性50只,按雌性：雄性=2：1合笼配对,每日清晨检查阴拴和精子,发现者定为受孕零天。孕鼠随机分为5组（每组20只）：给药组（设3个剂量组：给予微孔草子油2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg,ig）、环磷酰胺组（7mg/kg,sc）和菜子油组（给予等容积菜子油,ig）。受孕第7天开始,给药组、菜子油组每天给予受试物1次,连续10d。环磷酰胺组于受孕第11天给予环磷酰胺,每日1次,连续3d。受孕第20天处死孕鼠,观察受试物对孕鼠和胚胎的毒性及致畸作用。结果微孔草子油各剂量组孕鼠体重、活胎率明显高于环磷酰胺组（P〈0.01）,死胎率、吸收胎率显著低于环磷酰胺组（P〈0.01）,与菜子油组间无显著性差异（P〉0.05）;微孔草子油各剂量组胎鼠体重、身长、尾长与菜子油组无显著性差异（P〉0.05）,外观、内脏、骨骼未发现畸形;环磷酰胺组140只胎鼠中有112只出现畸形。结论微孔草子油在2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg剂量时对孕鼠和胚胎无明显的毒性和致畸作用。     

一种草药氯仿萃取水相提取物止血作用的实验研究

目的:观察一种促凝血草药氯仿萃取水相提取物HB的止血作用。方法:实验于2003-12/2004-12在解放军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所国家重点实验室完成。健康家兔18只,体质量2.5～3.0kg;健康雄性Wistar大鼠70只,体质量(250±10)g;雄性昆明种小鼠78只,体质量(25±5)g。制备HB氯仿萃取-水相提取物后给动物腹腔注射。①将70只大鼠随机分为空白对照组(n=10,30mg/kg腹腔注射生理盐水)、阳性对照组(n=10,云南白药按2mg/(kg·d)灌胃)、HB高剂量给药组(n=30,分别选取10只动物按5,10,20mg/kg剂量腹腔注射)、HB低剂量给药组(n=20,分别选取10只动物按0.5,1mg/kg剂量腹腔注射)。观察给药10d后实验动物的血生化指标(凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原含量、凝血酶时间)及血小板计数;②将39只小鼠随机分为空白对照组、云南白药对照组(云南白药0.5mg/(kg·d)灌胃)和用药组(HB0.5mg/kg),每组13只。观察给药10d后小鼠的出血时间、同样的分组和干预方法观察小鼠的凝血时间。③将待试药设氯仿萃取水相提取物用药组、云南白药阳性对照组、生理盐水阴性对照组。18只家兔各取6只分别用于观察体表、肝脏及股动脉创面的止血实验,观察局部创面(皮肤、肝脏、股动脉)止血时间。结果:纳入健康家兔18只、健康雄性Wistar大鼠70只、雄性昆明种小鼠78只,均进入结果分析。①氯仿萃取水相提取物对大鼠血凝四项及血小板计数的影响:与空白对照组相比,HB氯仿萃取水相提取物腹腔注射可显著提高大鼠的血小板计数;HB高剂量给药组大鼠的凝血酶原时间明显缩短。②对小鼠出血时间及凝血时间的影响:与云南白药对照组及空白对照组相比,HB氯仿萃取水相提取物可显著缩短小鼠的出血时间[(250.2±53.3),(234.5±61.3),(100.2±27.9)s,P<0.01]及凝血时间[(202.5±50.2),(255.5±27.8),(141.8±37.6)s,P<0.01]。③对家兔局部创面的止血作用:家兔创面止血时间显著短于生理盐水阴性对照组及云南白药阳性对照组[皮肤:(41.20±6.21),(84.10±5.32),(74.80±4.73)s;肝脏:(50.20±3.39),(87.60±6.24),(74.50±5.19)s;股动脉:(62.60±4.50),(103.60±4.35),(98.20±6.07)s;P<0.01)。结论:HB氯仿萃取水相提取物具有良好的体内、外促凝血及创面止血作用。