玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用

目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8％和82.9％,复苏胚胎完整率分别为96.8％和63.1％,胚胎种植率分别为32.0％和18.1％,临床妊娠率分别为53.9％和33.1％,两组数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.     

玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响

目的:探讨玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响.方法:对324个玻璃化冷冻人卵裂期胚胎复苏周期和146个程序化慢速冷冻胚胎复苏周期进行分析,比较2组冷冻胚胎复苏后的存活率、完整率、种植率、临床妊娠率、孕周、新生儿身高及体质量等指标.结果:玻璃化冷冻组的胚胎完整率、临床妊娠率均高于程序化慢速冷冻组(83.24％ vs...     

胚胎玻璃化冷冻技术在辅助生殖治疗中的应用

目的探讨人类卵裂期胚胎玻璃化冷冻在临床治疗中的应用效果。方法经患者知情同意后,将实施体外受精一胚胎移植术患者第3天移植后剩余的符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。如果新鲜周期妊娠失败,根据患者情况解冻胚胎,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻84个周期,解冻胚胎207枚,解冻后存活胚胎198枚,存活率为95．7％;完整存活胚胎187枚,完整存活胚胎率为90．3％;种植胚胎41枚,种植率为19．8％;临床妊娠28倒,临床妊娠率为33．3％。早期流产3例,足月分娩5例,20例继续妊娠。结论玻璃化冷冻法适于人类早期胚胎的冷冻保存,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

玻璃化与程序化两种不同胚胎冻融方法的临床应用效果比较

目的探讨玻璃化与程序化冻融胚胎的临床应用价值。方法回顾分析广西壮族自治区人口和计划生育研究中心的609个胚胎冷冻周期,其中366个程序化胚胎冻融周期与243个玻璃化冻融周期,比较两种不同冻融方法的胚胎复苏率、胚胎移植率、胚胎种植率、临床妊娠率等指标。结果玻璃化冷冻法与程序化冷冻法比较,其胚胎复苏率（94.75%,74.13%）、解冻移植率（97.94%,87.98%）、种植率（28.88%,16.94%）和临床妊娠率（42.86%,30.75%）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适于人类胚胎的冷冻保存。     

程序化与玻璃化冷冻保存人D2和D3胚胎的临床结局比较

目的比较程序化和玻璃化冷冻保存人D2和D3胚胎的临床结局,分析探讨不同冷冻方法对人D2和D3胚胎冷冻的影响。方法回顾性分析了本中心170个D2和D3胚胎复苏周期,比较程序化和玻璃化冷冻复苏后的存活率、卵裂球存活指数、完胚率、≥1完胚移植率、种植率、临床妊娠率、流产率等指标。结果程序化解冻移植周期47个,存活率73.60%,卵裂球存活指数65.88%,完胚率31.46%,≥1完胚移植率80.85%,胚胎种植率14.17%,临床妊娠率36.17%,流产率11.76%。玻璃化解冻移植周期120个,存活率92.96%,卵裂球存活指数86.49%,完胚率68.04%,≥1完胚移植率90.83%,胚胎种植率18.84%,临床妊娠率35.83%,流产率9.30%。玻璃化冷冻比程序冷冻能显著提高胚胎存活率、卵裂球存活指数和完胚率(P<0.05),但在≥1完胚移植率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率上无显著性差异。无论采用哪种冷冻方法,D2和D3胚胎在所有统计指标上差异均没有显著意义。结论玻璃化冷冻是一种有效的冷冻方法,其复苏存活率、卵裂球存活指数和完胚率均明显高于程序化冷冻,可作为传统程序化冷冻的替代方法。D3胚胎冷冻没有比D2胚胎更有优势,对于工作量较大的IVF实验室可选择D2胚胎冷冻移植。     

慢速程序冷冻-解冻后移植含有部分卵裂球受损的胚胎和移植完整存活胚胎的周期结局比较

目的 探讨解冻后移植含有部分卵裂球受损的胚胎和移植完整存活胚胎的周期结局有否区别.方法 取卵周期后符合冷冻条件的胚胎经过慢速冷冻后根据患者需要在自然周期或替代周期下快速解冻并移植1～3个胚胎.冻融移植周期分为两组:A组全部移植卵裂球完整存活的胚胎,B组移植的胚胎中含有1～2个其卵裂球有所受损的胚胎,比较两组的结局.结果 同一天解冻的同时含有胚胎损伤和无胚胎损伤并移植两种情况的移植周期共575个,A、B组的周期数分别是225个和350个.A组和B组的女方年龄、移植日子宫内膜厚度、移植周期平均移植胚胎个数以及替代周期占移植周期的比例差异均无统计学意义.A组平均解冻的胚胎数(2.7±0.8)个显著低于B组的(3.0±1.2)个,而解冻后胚胎复苏率(85.4％)和移植的优质胚胎数[(1.6±0.9)个]却明显高于B组的80.1％和(0.9±0.8)个(P＜0.05).解冻后移植周期中A组的临床妊娠率(41.3％)和种植率(23.6％)均高于移植含损伤胚胎的B组的32.3％和18.1％(P＜0.05),但是两组间的多胎妊娠率、流产率和异位妊娠率差异均无统计学意义.结论 慢速冷冻-快速解冻后移植含有部分卵裂球损伤的胚胎的周期临床妊娠率可达到30％.冻融后胚胎卵裂球越完整,其种植率和临床妊娠率越高.慢速冷冻-快速解冻技术是增加单个取卵周期的累计妊娠率的有效方法之一.     

两组冷冻保护剂对卵裂期胚胎玻璃化冷冻效果的研究

目的：评价两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎的冷冻效果。方法以体外受精-胚胎移植周期患者受精后第3天废弃胚胎为实验对象,共102枚胚胎入选,随机分为乙二醇＋丙二醇（EG＋PROH）组52枚,乙二醇＋二甲基亚砜（EG＋DMSO）组50枚。比较观察两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎冷冻解冻后胚胎的复苏效果。结果玻璃化冻融后两组在复苏率上无显著差异,但在完整胚胎复苏率和卵裂球复苏率上EG＋PROH组显著高于EG＋DMSO组（P＜0.05）。结论对于卵裂期胚胎的玻璃化冷冻,选用EG＋PROH作为冷冻保护剂可取得较好的效果。     

授精第三天4细胞及5细胞期胚胎的冷冻价值

目的 分析授精第3天为4细胞及5细胞期胚胎冻融及移植后对临床结局的影响,探讨其冷冻价值。方法 收集270个冻融胚胎移植（FET）周期,授精第3天胚胎采用程序化冷冻法冻存,快速解冻法复苏后移植,根据冷冻日胚胎所含细胞数比较各细胞数胚胎复苏存活率,并分为4、5细胞组与≥6细胞组,比较两组间的临床妊娠率、种植率及因胚胎因素取消周期率（简称周期取消率）。结果 （1）270个周期共解冻胚胎939枚,复苏存活率为65.3% (613/939);移植胚胎561枚,临床妊娠率27.2%(67/246),种植率15.2%（85/561）;（2）4、5细胞组周期取消率显著高于≥6细胞组（P＜0.01）,且移植胚胎数显著低于≥6细胞组（P＜0.05）,但胚胎复苏成功并移植后两组妊娠率、种植率及活产率均无显著性差异（P＞0.05）。结论 冻存4、5细胞期胚胎与≥6细胞期胚胎妊娠率无统计学差异,提示具有冷冻价值。     

玻璃化冷冻在卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻中的应用

目的比较慢速程序化冷冻法(慢速法)和玻璃化冷冻法(玻璃化法)对卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻分裂期胚胎发育潜能的影响。方法选择为避免过度刺激而行全胚胎冷冻的不孕患者162例,按其冷冻方法的不同,分成慢速程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,并对其随后进行首次解冻移植的胚胎复苏率、胚胎种植率、妊娠率和多胎妊娠率进行分析。结果玻璃化冷冻组72例胚胎解冻后,其溶解率、复苏率、种植率、妊娠率、多胎妊娠率分别为7.84%、96.08%、52.38%、69.44%和50.00%,慢速程序化冷冻组90例胚胎解冻后,上述指标分别为17.79%、90.38%、30.32%、52.22%和19.15%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冷冻法能够更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,更适合卵巢过度刺激综合征患者胚胎的冷冻保存。     

玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻中的应用价值

目的：观察采用玻璃化冷冻技术行全胚胎冷冻后解冻移植患者的临床结局,并与同期新鲜周期移植患者相比较,探讨玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻并行复苏移植中的应用价值。方法：全胚胎冷冻组为体外受精(IVF)未移植患者40个周期,新鲜周期组为同期体外受精及胚胎移植（IVF-ET）患者300例,对2组的平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度、雌二醇（E2）水平、临床妊娠率进行比较。结果：2组之间在平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度方面的差异均无统计学意义（P＞0.05）;新鲜周期组的E2水平明显高于全胚胎冷冻组（P<0.05）, 临床妊娠率明显低于全胚胎冷冻组（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻技术是一种简便、可靠、高效的胚胎冷冻技术;对于符合要求的患者,全胚胎冷冻并适时行冻胚移植是可行的胚胎移植策略,值得临床深入研究和推广。     

胚胎冷冻技术应用于抗菌肽转基因小鼠的保种传代

目的研究胚胎冷冻在抗菌肽转基因FVB小鼠保种传代中的应用。方法对6~8周正常雌性FVB小鼠进行超排分别与雄性杂合子抗菌肽转基因FVB小鼠交配，收集2-cell胚胎，进行胚胎冷冻。1周后进行胚胎复苏移植，通过PCR方法对仔代鉴定。结果冻存胚胎140枚，复苏获得存活胚胎98枚，移植85枚，产仔38只，获得阳性后代12只。结论通过胚胎冷冻技术保种及复苏移植技术可对抗菌肽转基因小鼠进行传代。     

小鼠胚胎玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻是继常规冷冻方法之后发展起来的一种冷冻方法,它操作简单且不需要高精度的冷冻仪。玻璃化冷冻的效果与玻璃化溶液的种类、冷冻方法及胚胎的不同品种及时期有关。本文综述了近年来有关胚胎玻璃化冷冻的研究进展。     

动物胚胎生物技术发展概况

本文概述了近30年来胚胎生物技术包括体外受精与显微受精、孤雌生殖、胚胎分割与嵌合、配 子与胚胎的冷冻保存、胚胎干细胞、转基因、克隆动物技术的发展及在实验动物上的应用前景。     

激光辅助孵化在前次IVF-ET失败患者中的应用

【目的】探讨激光辅助孵化（laser-assisted hatching，LAH）对前次体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization—embryo transfer，IVF-ET）失败患者的临床妊娠率和胚胎种植率的影响。【方法】对前次IVF-ET失败并排除子宫内膜、胚胎质量等因素的90例患者，根据是否采用激光辅助孵化分为LAH组和对照组，对LAH组患者的胚胎采用部分透明带薄化后进行移植。比较两组的临床妊娠率和胚胎种植率。【结果】LAH组和对照组的临床妊娠率分别为48．8％（20／41）和34．7％（17／49）（P〉0．05）；胚胎种植率分别为25．8％（30／116）和15．7％（22／140）（P〈0．05）；两组比较胚胎种植率有差异。【结论】激光辅助孵化可以提高前次IVF-ET失败患者的胚胎种植率。     

围植入期暴露二硫化碳对小鼠子宫组织白血病抑制因子表达的影响

目的 观察二硫化破(CS2)对孕鼠子宫组织白血病抑制因子(LIF)表达水平的影响,探讨CS2致胚胎毒性的作用机制.方法 健康昆明种孕鼠随机分为D3(孕第3天),D4,D5,D6染毒组和对照组,每组又根据各自的染毒时点分别设相应的现察终点(记为D4,D5,D6,D7,139).染毒组腹腔注射631.4 mg/kg剂童的C...     

Lats1基因敲除小鼠保种的研究

目的　以Lats1基因敲除小鼠为例 ,研究国家遗传工程小鼠资源库遗传小鼠的保种技术路线及方法。方法　采用了胚胎移植 ,目的基因检测 ,胚胎冷冻等技术。结果　在库内得到 2 4只Lats+ -小鼠 ,扩群后 ,冷冻保存 110枚胚胎。结论　上述方法能确保Lats1基因敲除小鼠资源库保种成功。     

165例胚胎胸腺组织学观察分析

本文对165例,8—40孕周的胎儿胸腺组织学变化进行了观察探讨。对其中99例测重量,全部材料均做印片和组织切片,光镜观察。综述了不同胎龄组正常组织、细胞结构变化与功能的关系。提出了16孕周以后为采用胚胎胸腺组织移植体或制备胸腺悬液的适当时期,胸腺在胚胎期的病理改变与其有关的因素。力求通过对胚胎胸腺组织观察探讨,为研究胸腺的免疫机制、胚后胸腺组织学发育和病理学改变,提供科学依据。     

不同级别胚胎玻璃化冷冻时长对复苏周期 临床结局的影响

目的 探讨不同级别胚胎玻璃化冷冻时长对复苏周期妊娠结局的影响。方法 回顾性分析2016年1月至2021年12月在中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院生殖中心行玻璃化冷冻胚胎复苏移植的2210个周期,按胚胎级别分为4类：卵裂期1级、2级、3级胚胎及囊胚期胚胎;按时间分为6组：第1组≤180d（1122个周期）,第2组180~<360d组（507个周期）,第3组360~<720d组（216个周期）,第4组720~<1080d（195个周期）,第5组≥1080d（170个周期）,比较各组患者的基本情况、临床结局。结果 解冻卵裂期1级胚胎妊娠率、种植率随冷冻时间延长降低,其中第1组最高,分别为68.3%和70.7%（P<0.05）;解冻卵裂期2级胚胎随冷冻时间延长妊娠率、种植率比较,差异有统计学意义（P<0.05）,其中1、4、5组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;解冻囊胚期胚胎妊娠率、种植率随冷冻时间延长降低,第1组最高,分别为66.7%和62.3%（P<0.05）;各组卵裂期及囊胚期胚胎活产率、流产率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 随着冷冻时间的延长,卵裂期优质胚胎及囊胚妊娠率、种植率有下降趋势;胚胎的短期冷冻（≤180d）可提高临床妊娠率;胚胎冷冻时间延长虽不影响活产率、流产率,但仍鼓励取卵后半年内择优移植。     

宫内缺血缺氧致胚鼠脑细胞损伤凋亡的实验研究

目的 采用胚鼠宫内窘迫的动物模型,观察胚鼠缺血缺氧性脑损伤后不同时间点脑细胞的病理变化及损伤凋亡的情况。方法 孕17d(孕中期)孕鼠,实验组钳夹子宫动脉30min后,恢复血供。缺血后24h、48h及72h取标本。对照组行同期开关腹术,但不钳夹子宫动脉。与实验组对应的相同时间取标本。用HE,尼氏染色,胆碱酯酶染色,TUNEL及电镜在镜下观察脑组织的病理改变。结果 胚鼠缺血缺氧30min,脑组织可见出血,神经细胞发生水肿、变性;尼氏体形态变化,溶解;胆碱酯酶活性减弱;缺血再灌注后24h即出现凋亡细胞,并随缺血再灌注时间的延长逐渐增多。结论 宫内窘迫所致胚鼠缺血缺氧可造成神经细胞的严重损伤和凋亡。     

白血病抑制因子调节胚胎发育与着床的研究进展

白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)是参与调节胚胎着床过程的重要的细胞因子之一,尽管如此,LIF及其受体在不同种属动物中的表达又不完全相同,孕酮和雌激素对其分泌的调节作用在不同种属动物之间、体内外之间,甚至于同种动物也都不完全一样。LIF调节着床机理的研究正日益受到广泛的重视。