APP17肽对D-半乳糖性脑老化模型小鼠学习、记忆功能和海马神经元NT-3、NGF表达的影响

目的与方法:用D-半乳糖(D-gal)复制脑老化模型,给模型小鼠皮下注射β-淀粉样肽前体蛋白319-335肽段(APP17p),8周后应用水迷宫实验、神经免疫组化法,观察APP17肽对D-gal脑老化模型小鼠学习、记忆功能及海马神经元中神经营养因子3(NT-3)、神经生长因子(NGF)表达的影响。结果:(1)水迷宫实验D-gal组小鼠游完全程时间及错误反应次数明显高于对照组;APP17肽组小鼠游完全程时间及错误反应次数明显低于对照组和D-gal组。(2)APP17肽组海马神经元NT-3、NGF表达高于C组和D-gal组(P＜0.01)。结论:D-半乳糖性脑老化模型小鼠存在学习、记忆功能障碍,其海马神经元NT-3、NGF表达降低;APP17肽有保护模型小鼠学习、记忆功能的作用,并能促进其海马神经元NT-3、NGF表达的增加。     

APP17肽对快速老化小鼠SAMP10学习、记忆功能和海马神经 细胞线粒体氧化应激水平的影响

目的：观察APP17肽(β-Amyloid precursop protein,APP,319-335肽段)对快速老化小鼠SAMP10（senescence accelerated mouse/pr one 10）学习、记忆功能及海马神经细胞线粒体氧化应激的影响。方法:4月龄的SAMP10小鼠随机分为模型组和APP17肽治疗组，正常对照组采用抗快速老化小鼠SAM R1(senescence accelerated mouse/resistance 1)。APP17肽治疗组给予皮下注射APP17肽 ，每只每次0.34 μg，每周3次；模型组和正常对照给予等量的生理盐水；28周后成模。应 用水迷宫试验观察小鼠学习、记忆功能的变化，应用羟胺法和硫代巴比妥酸（TBA）比色法 分析海马神经细胞线粒体氧化应激反应水平。结果:(1)水迷宫结果显示 ，模型组小鼠存在明显的学习和记忆功能障碍，其游完全程的时间和错误反应次数均较正常 对照组增多（P<0.05）;APP17肽治疗组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组，其上述 的水迷宫检测结果与正常对照组比较无显著差异。(2)模型组小鼠海马神经细胞线粒体SOD活 性明显低于正常对照组（P<0.01），MDA含量显著高于正常对照组（P<0.01）；A PP17肽治疗组检测结果与正常对照组接近，SOD活性高于模型组（P<0.05），而MDA含 量低于模型组（P<0.01）。结论:快速老化小鼠SAMP10存在学习和 记忆功能障碍；而且其海马神经细胞线粒体氧化应激反应明显加剧。APP17肽具有清除自由 基和抑制氧化应激反应的作用，从而提高脑组织的抗氧化能力，保护学习、记忆功能。     

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相关基因表达的影响

目的 研究APP17肽对D-半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 用D-半乳糖制备脑老化模型，皮下注射APPl7肽治疗D-半乳糖脑老化小鼠，3个月后取脑组织做Bcl-2、Bax、cREB、AKt、AIF免疫组织化学染色。结果 D-半乳糖脑病小鼠海马内Bax、AIF阳性反应神经元胞浆与突起深染，而正常小鼠及APPl7肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少，染色淡；D-半乳糖小鼠海马内Bcl-2、CREB、AKt阳性细胞数日少，染色淡；而正常小鼠及APP17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元胞浆与突起深染。结论 促进凋亡的Bax、AIF在D-半乳糖小鼠海马表达增加；抑制凋亡的Bcl-2、CREB、AKt在D-半乳糖小鼠海马表达降低。APP17肽能影响D-半乳糖脑病小鼠脑内Bcl-2、Bax、CREB、AKt、AIF的表达，使之接近正常。     

APP17肽对IRS-1在糖尿病小鼠脑内分布的影响

为了观察 APP17肽对糖尿病小鼠胰岛素受体底物 -1( IRS-1)的影响 ,本研究用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型 ,并皮下注射 APP17肽 ( β-淀粉样肽前体蛋白 3 19～ 3 3 5 )给予治疗 ,4周后取脑组织进行 IRS-1免疫组化染色。结果显示 ,糖尿病组IRS-1阳性反应细胞广泛分布于皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位 ,而正常对照组及 APP17肽治疗组仅在皮层、海马见有阳性反应细胞 ,且着色淡。以上结果表明 :糖尿病小鼠脑内多个区域的神经元存在较多的 IRS-1阳性细胞 ,APP17肽能使 IRS-1阳性反应细胞出现的部位和数量正常化 ,从而改善糖尿病小鼠海马神经元的退行性变     

APP17肽对AT-8在糖尿病小鼠脑内分布的影响

为了观察 APP17肽对糖尿病小鼠 Tau蛋白 Ser2 0 2 / Thr2 0 5磷酸化的影响 ,用链脲佐菌素 (选择性地破坏胰岛β-细胞 ,导致糖尿病 )诱发小鼠糖尿病模型 ,并皮下注射 APP17肽 ( β-淀粉样肽前体蛋白 3 19～ 3 3 5 )给予治疗。 4周后取脑组织进行 AT-8(抗 Ser2 0 2 / Thr2 0 5特异单抗 )免疫组化反应。结果证明 :糖尿病组 AT-8阳性反应细胞广泛分布于压后颗粒皮层、海马、丘脑、下丘脑等部位 ,而正常对照组及 APP17肽治疗组仅在压后颗粒皮层、海马可见阳性反应细胞 ,且着色淡。本研究提示 ,糖尿病脑内多个区域的神经元存在较多的 AT-8阳性细胞 ,而 APP17肽可使 AT-8阳性反应细胞出现的部位和数量正常化。     

APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马IRS—1、IGF—1R表达的影响

目的 通过对胰岛素受体底物－1（IRS－1）、胰岛素样生长因子－1受体（IGF－1R）在海马表达的观察,研究APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马神经元IRS－1、IGF－1R的影响。方法 用链脲佐菌素（STZ）诱发小鼠糖尿病模型,并皮下注射APP17肽对糖尿病小鼠进行治疗,4周后取脑组织做IRS－1、IGF－1R免疫组织化学染色。结果 糖尿病小鼠海马内IRS－1、IGF－1R阳性反应神经元胞浆与突起深染,而正常小鼠及APP17肽保护的糖尿病小鼠海马阳性细胞数目小,染色淡。结论 糖尿病小鼠海马IRS－1、IGF－1R广泛表达;APP17肽能影响糖尿病脑病小鼠脑内IRS－1,IGF－1R的表达,使之接近正常。     

记忆增强肽对去卵巢大鼠行为和海马神经元NT—3、NF表达的影响

研究记忆增强肽是否能提高去卵巢大鼠学习、记忆功能以及它对海马区神经营养素－3（NT－3）、神经丝蛋白（NF）神经元表达的影响。随机分三组,正常对照组,去卵巢对照组和去卵巢＋记忆增强肽防治组,进行水迷宫测试和NT－3、NF免疫组化染色。发现去卵巢＋记忆增强肽防治组游完全程的时间及错误反应次数均较去卵巢对照组少（P＜0．05）,海马区神经元NT－3、NF的表达与正常大鼠相似,阳性细胞计数显著高于去卵巢对照组,平均灰度（免疫组化染色深,平均灰度数值小）显著低于去卵巢对照组（P＜0．05）。均提示记忆增强肽具有防治神经元退变的作用。     

APP17肽和救脑益智胶囊水提液对D-半乳糖脑老化小鼠海马PP-1表达的影响

为探讨 APP17肽及救脑益智胶囊水提液对 D-半乳糖脑老化小鼠海马蛋白磷酸酯酶 -1( PP-1)表达的影响。本研究将昆明小鼠随机分为 5组 :正常对照组、D-半乳糖对照组、APP17肽治疗组、小剂量中药治疗组、大剂量中药治疗组 ,每组动物 8只。用 D-半乳糖制备脑老化模型 ,并皮下注射 APP17肽或救脑益智胶囊水提液灌胃对 D-半乳糖脑老化小鼠进行治疗 ,3个月后取脑组织做 PP-1免疫组织化学染色。结果显示 :D-半乳糖小鼠和大剂量救脑益智胶囊水提液治疗组小鼠海马 PP-1阳性细胞数目少 ,染色淡 ;而正常小鼠、APP17肽保护和救脑益智胶囊水提液小剂量治疗的 D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元数目多 ,胞浆与突起深染。结果提示 :抑制凋亡的 PP-1在 D-半乳糖小鼠海马表达降低。 APP17肽和小剂量救脑益智胶囊水提液治疗能影响 D-半乳糖脑病小鼠脑内 PP-1的表达 ,使之接近正常。而大剂量救脑益智胶囊水提液治疗无此作用     

二氢杨梅素对APP/PS1转基因小鼠学习记忆和脑内自噬的影响

目的:研究二氢杨梅素(DHM)能否通过影响自噬对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠发挥保护作用。方法:实验动物分为3组:7月龄的APP/PS1转基因痴呆模型小鼠随机分为AD组和DHM组,同月龄野生型(WT) C57BL/6J小鼠作为WT组,每组10只。DHM处理DHM组,同浓度DMSO稀释液处理AD组和WT组。采用Morris水迷宫实验检测各组学习记忆功能;免疫组织化学(IHC)、甲硫素S(ThS)染色以及ELISA法检测β-淀粉样蛋白(Aβ)的水平; Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62、Cathepsin D和LAMP1的表达水平;透射电镜检测脑内自噬结构微观变化。结果:与WT组相比,AD组小鼠在水迷宫检测中平均潜伏期、探索路径增长(P <0.01),穿越平台次数减少(P <0.01);脑内Aβ斑块增加(P <0.01),出现较严重的水肿,并发现了深染的晚期自噬体; LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低(P <0.01),p62、LAMP1和Cathepsin D表达增加(P <0.01); DHM处理后可以改善AD小鼠的学习记忆功能(...     

APP17肽对SAM鼠脑内Bcl-2和Caspase-3凋亡相关因子的影响

APP17肽是产生老年斑的主要成分β-淀粉样前体蛋白中具有促进神经轴突生长、突触形成作用的一个肽段。本课题组曾将APP17肽作用于D-半乳糖脑老化模型，结果发现其具有防止或逆转处于凋亡过程中的神经元恢复或接近正常状态的功能，对Aβ25-35诱导的神经细胞凋亡也有保护作用；将APP17肽直接作用于糖尿病大鼠，发现其可以改善末梢神经的脱髓鞘，抑制神经元胞质内钙离子浓度的升高，从而保护神经细胞免受钙离子中介谷氨酸的毒性。为进一步探讨APP17肽对神经细胞的保护作用，本实验利用尼氏染色和免疫组化方法，观察APP17肽治疗后，快速老化小鼠SAMP10脑内神经元数目的变化以及细胞凋亡执行因子Caspase-3和凋亡抑制基因Bcl-2表达的变化。