酸枣仁皂苷A对机械刺激剥夺果蝇睡眠节律变化的干预

目的 探讨酸枣仁皂苷A对机械刺激剥夺果蝇睡眠节律的干预作用.方法 实验选取2日龄果蝇作为研究对象,随机分为空白组、模型组和给药组3组,以睡眠时间和睡眠-觉醒节律为考察指标,利用果蝇活动监测仪连续监测48 h,考察酸枣仁皂苷A对果蝇的干预.结果 酸枣仁皂苷A能延长2、3日龄果蝇的夜晚睡眠时间(P＜0.01),缩短3日龄果蝇的白天睡眠时间(P＜0.01),改善在机械刺激剥夺下果蝇的睡眠-觉醒节律.结论 酸枣仁皂苷A对机械刺激剥夺果蝇睡眠节律变化具有干预作用.     

HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量

目的：采用HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量,并客观比较不同产地药材的质量。方法：用高效液相色谱法,使用Kromasil C18色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）;流动相：乙腈-水（30：70）,检测波长204nm,流速0．8mL/min,柱温25℃。结果：6个产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量为0．5372％-0．0731％,不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量有差异。结论：6个不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量均符合药典标准,其中陕西延安产区的酸枣仁药材质量较其他产地相比较好。     

酸枣仁提取物与酸枣仁皂苷A促进骨骼增高作用比较研究

目的:比较酸枣仁提取物和酸枣仁皂苷A促进骨骼增高的作用及其机制研究。方法:将酸枣仁皂苷A 0.016 mg·g~(-1)和含相同酸枣仁皂苷A含量的酸枣仁提取物0.320 mg·g~(-1)给予小白鼠灌胃,观察药物促进骨骼增高作用。同时给予大白鼠酸枣仁皂苷A 0.011 mg·g~(-1)和酸枣仁提取物0.220 mg·g~(-1)灌胃,检测脑组织5-羟色胺受体蛋白1A (5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR)含量和活性、生长激素分泌情况及对慢波睡眠时间的影响。结果:①酸枣仁提取物组、酸枣仁皂苷A组小白鼠体长明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),但两组药物比较作用相当;②用药组较对照组总睡眠时间明显延长,清醒时间减少,但两组药物比较作用相当;③药物可以明显促进大白鼠体内生长激素分泌,明显高于对照组(P<0.01),但两者比较作用相当;④药物可以显著促进脑组织5-HT1AR活性,酸枣仁提取物较酸枣仁皂苷A效果更好,但差异无统计学意义。结论:酸枣仁提取物可以替代酸枣仁皂苷A促进骨骼增长,降低治疗成本。     

酸枣仁提取物与酸枣仁皂苷A促进骨骼增高作用比较研究

目的:比较酸枣仁提取物和酸枣仁皂苷A促进骨骼增高的作用及其机制研究。方法:将酸枣仁皂苷A 0.016 mg·g~(-1)和含相同酸枣仁皂苷A含量的酸枣仁提取物0.320 mg·g~(-1)给予小白鼠灌胃,观察药物促进骨骼增高作用。同时给予大白鼠酸枣仁皂苷A 0.011 mg·g~(-1)和酸枣仁提取物0.220 mg·g~(-1)灌胃,检测脑组织5-羟色胺受体蛋白1A (5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR)含量和活性、生长激素分泌情况及对慢波睡眠时间的影响。结果:①酸枣仁提取物组、酸枣仁皂苷A组小白鼠体长明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.01),但两组药物比较作用相当;②用药组较对照组总睡眠时间明显延长,清醒时间减少,但两组药物比较作用相当;③药物可以明显促进大白鼠体内生长激素分泌,明显高于对照组(P0.01),但两者比较作用相当;④药物可以显著促进脑组织5-HT1AR活性,酸枣仁提取物较酸枣仁皂苷A效果更好,但差异无统计学意义。结论:酸枣仁提取物可以替代酸枣仁皂苷A促进骨骼增长,降低治疗成本。     

不同产地酸枣仁皂苷含量的测定

本实验采用HPLC法对10个不同产地的酸枣仁所含有的皂苷A、B进行了含量测定,不同产地的酸枣仁其皂苷A及B的含量有很大的差异,以陕西延安产的酸枣仁其皂苷含量最高。     

HPLC-ELSD法测定酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸

目的 建立酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸的测定方法。方法 应用超声提取和高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检测。Hypersil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-水(0.1％醋酸),梯度洗脱;体积流量：1.0 mL/min;柱温：30 ℃;进样量：20 μL;ELSD参数：雾化温度：45 ℃;气体流量：2.0 L／min。结果 制剂中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸达到基线分离且线性关系良好,线性范围分别为15.4～154 μg／mL,22.8～228 μg／mL、28.0～280 μg／mL,平均加样回收率分别为98.17％、99.21％、97.89％。结论 该方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于酸枣仁滴丸剂中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸的同时测定。     

HPLC法测定安神胶囊中酸枣仁皂苷A的含量

安神胶囊是我室自行研制开发的中药制剂，由酸枣仁、柴胡、甘草等多味中药组成，具有养心安神、镇静催眠之功效。酸枣仁皂苷A为酸枣仁镇静催眠的主要有效成分。酸枣仁皂苷A的含量测定方法有一阶导数分光光度法和薄层扫描法。本研究采用RP—HPLC法对安神胶囊中的酸枣仁皂苷A进     

酸枣仁合剂对失眠症夜间慢波睡眠影响的研究

目的　观察酸枣仁合剂对中老年失眠症的防治效果。方法　对无器质性病变 ,每天睡眠 2 4 0 - 30 0分钟为主症者 6 0例随机分为两组。服药组和对照组分别在 9:0 0、14 :0 0时饮 1- 2杯茶 (含 5g茶 )或咖啡 (含 5g咖啡 ) ,服药组在 19:0 0时服酸枣仁合剂 4 0ml,连服 10天。对照组在相同时间服同量红糖水。睡眠监测的数据包括非快动眼睡眠期、快动眼睡眠期、记录时间、睡眠时间、觉醒时间、睡眠比、觉醒比。结果　服药组与对照组患者治疗后相比 ,夜间睡眠Ⅰ、Ⅱ期减少 ,Ⅲ、Ⅳ期增加 ;夜间觉醒次数减少 ,总睡眠时间明显增加 ;SWS睡眠结构比改变 ,SWS睡眠的连续性好、周期性显著 ,明显优于对照组改变 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　酸枣仁合剂治疗中老年失眠症是一种有效方法。     

酸枣仁皂苷A对大鼠脑缺血海马区氨基酸递质水平及细胞凋亡的影响

目的：观察酸枣仁皂苷A对大鼠脑缺血海马区兴奋性氨基酸及细胞凋亡的影响,探讨酸枣仁皂苷A对脑缺血损伤保护的作用机制。方法：建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,将健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、尼莫地平组、酸枣仁皂苷A组,四组于脑缺血再灌注后12、24、48小时、4天、7天,各取6只大鼠断头取脑,测定大鼠缺血侧脑海马区氨基酸递质水平及细胞凋亡数。结果：除假手术组外,与模型组比较,尼莫地平组和酸枣仁皂苷A组各观察时间点缺血侧脑海马区谷氨酸（Glu）及细胞凋亡均明显降低（P〈0．05）,而γ-氨基丁酸（GABA）在各时间点均明显升高;与尼莫地平组比较,酸枣仁皂苷A组大鼠缺血侧海马区Glu降低（P〈0．05）,酸枣仁皂苷A组细胞凋亡数降低更显著（P〈0．05）,两组GABA比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：酸枣仁皂苷A能调节脑缺血损伤后海马区氨基酸水平的释放,抑制细胞凋亡。     

酸枣仁皂苷A对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:研究酸枣仁皂苷A对大鼠单个心室肌细胞膜L-型钙电流(ICa-L)通道的影响。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的酸枣仁皂苷A对ICa-L的作用。结果:①酸枣仁皂苷A对ICa-L呈浓度依赖性抑制。②100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-LI-V曲线明显上移。③100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-L稳态激活曲线右移,稳态失活曲线左移,还能增加失活后恢复的τ值。结论:提示酸枣仁皂苷A能够影响ICa-L通道的激活态和失活态抑制ICa-L。     

α-硫辛酸对果蝇生化指标的影响

目的　建立果蝇的半乳糖衰老模型 ,观察α 硫辛酸对果蝇生化指标的影响。方法　将未交配的果蝇按性别随机分为 4组 :对照组、半乳糖组、α 硫辛酸低剂量组、α 硫辛酸高剂量组。收集 40日龄果蝇 ,分别用化学发光法检测超氧化物歧化酶 (SOD)水平 ,用比色法检测丙二醛(MDA)和过氧化物酶 (GSH Px)水平。结果　α 硫辛酸低剂量组、高剂量组GSH Px及SOD含量比半乳糖组增加 (P <0 .0 5) ,MDA含量减小 (P <0 .0 5)。结论　α 硫辛酸能对抗D 半乳糖诱导的氧自由基作用     

霍山石斛胶囊延缓果蝇衰老的观察

目的:探讨霍山石斛胶囊(dendrobium huoshenese capsule,DHC)对延缓果蝇衰老的影响作用及其机制。方法:收集羽化8h内的黑腹果蝇,在普通培养基上饲喂20天后随机分为4组,分别以添加0.000%、0.056%、0.167%、0.500% DHC的培养基饲喂,用生存实验检测果蝇寿命;分别测定给药10、20、30日龄果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:0.056%、0.167%、0.500% DHC能显著延长雌雄果蝇的半数死亡时间、寿命及最高寿命(P<0.01),给药10、20、30日龄时雌雄蝇体内随着霍山石斛浓度增高,SOD活性升高、MDA含量降低(P<0.05)。结论:DHC具有抗氧化、延缓果蝇衰老的作用。     

西尼罗病毒前膜蛋白在果蝇细胞S2中的表达与鉴定

目的克隆西尼罗病毒(WNV)前膜蛋白(prM)基因,将其在果蝇细胞(S2)中表达,为制备研制诊断试剂所需的单克隆抗体奠定基础。方法以质粒WNV-CME为模板,PCR扩增获得prM基因,与T载体连接,测序正确后酶切,酶切产物与果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisC重组,重组质粒与pCoBlas共转染果蝇S2细胞,25μg/ml Blasticidin筛选获得抗性细胞,500μmol/L CuSO4溶液诱导表达,72h后收集细胞与细胞上清进行Western blot鉴定。结果酶切与测序结果表明成功构建重组表达载体WNV-prM-pMT,Western blot显示目的蛋白在果蝇细胞S2内稳定表达。结论在果蝇S2细胞内成功地稳定表达WNV prM蛋白,为下一步WNV单克隆抗体的制备奠定了实验基础。     

直链烷基苯磺酸钠对黑腹果蝇生殖能力及寿命的影响

目的:探讨直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate,LAS)对果蝇生殖能力及寿命的影响.方法:采用乙醚麻醉的方法,收集8 h内羽化而未交配的野生型黑腹果蝇,选择个体大小相近及外观行为正常的果蝇进入实验,雌雄各半.在培养基中加入LAS并按不同浓度分组(低剂量组:150 mg/kg,中剂量...     

直链烷基苯磺酸钠对果蝇生殖能力的影响及大豆异黄酮的干扰作用

目的:探讨直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate,LAS)对果蝇生殖功能的影响,以及大豆异黄酮对这种影响的干扰作用。方法:测定培养基中LAS低剂量(150mg/kg)、中剂量(300mg/kg)和高剂量(600mg/kg)时果蝇繁殖能力;采用析因设计方差分析检测大豆异黄酮对LAS的干扰作用及两者的交互作用。结果:低剂量组、中剂量组、高剂量组果蝇的子代数量与对照组差异均有统计学意义(P<0.01),分别为对照组的85.07%、84.59%和71.88%;大豆异黄酮的主效应具有统计学意义(P=0.01),即大豆异黄酮对LAS导致的损伤有保护作用,但LAS的主效应不具有统计学意义(P>0.05),且大豆异黄酮与LAS之间无交互作用(P>0.05)。结论:LAS可引发果蝇生殖能力降低,而大豆异黄酮对这种影响有干扰作用。     

酶处理急性分离技术用于研究果蝇成虫中枢神经细胞钾电流

目的 建立急性分离果蝇成虫中枢神经细胞技术,并记录分析其钾电流。方法 取S、R或H品系果蝇成虫3—5只,分离出果蝇脑组织。胶原酶消化处理后,加入10％的胎牛血清果蝇培养基终止酶反应。巴氏吸管吹打,细胞悬液静置1h后用于电生理实验。全细胞电压钳记录并分析其外向钾电流。结果 酶消化法成功急性分离出果蝇成虫中枢神经细胞。85％以上为Ⅱ型神经细胞,少部分为Ⅰ型和Ⅲ型神经细胞。记录到快失活与持续复合型、慢失活型、快失活和持续型四种全细胞钾电流。结论 本技术可成功急性分离三品系果蝇成虫中枢神经细胞,并记录到四种钾电流。     

昼夜节律与睡眠质量的链式中介模型:焦虑特质和睡眠信念态度的作用

目的：探究在大学生群体中昼夜节律类型与睡眠质量之间的关系,并明确焦虑特质和睡眠信念态度在其中所起的中介作用。方法：对某医学院大学生进行线上调查,使用清晨型与夜晚型量表-5项（MEQ-5）特质焦虑量表（STAI-T）、简易睡眠信念和态度量表（DBAS- 16）、匹兹堡睡眠量表指数（PSQI）分别评估大学生的昼夜节律类型、焦虑特质水平、睡眠信念态度以及睡眠质量。采用Pearson相关分析和中介效应分析昼夜节律类型、焦虑特质水平、睡眠信念态度以及睡眠质量之间的关系。结果：共回收问卷238份,有效问卷233份,有效率97.90%。Pearson相关分析指出昼夜节律类型、焦虑特质水平、睡眠信念态度以及睡眠质量四个变量得分两两之间呈显著相关（P<0.01）。以昼夜节律类型为自变量,睡眠质量为因变量,焦虑特质水平、睡眠信念态度为中介变量进行中介效应分析。焦虑特质水平的中介效应量（MEQ → STAI-T → PSQI）占总效应的 30.48%（r=-0.128,95% CI：-0.211至-0.066）,睡眠信念态度得分的中介效应量（MEQ → DBAS → PSQI）占总效应的12.62%（r=-0.053,95% CI：-0.106 至-0.014）;2个中介变量的链式中介效应量（MEQ → STAI → DBAS → PSQI）占总效应的11.19%（r = -0.047,95% CI：-0.085 至-0.022）。结论：大学生的昼夜节律类型能够负向预测其睡眠质量,并且焦虑特质水平与睡眠信念态度在其中起链式中介作用。     

阻塞性睡眠呼吸暂停患者血清淀粉样蛋白A水平研究

目的 检测阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者血清淀粉样蛋白A(SAA)水平,探讨OSAS患者并发心血管疾病的机制.方法 选取经多导睡眠仪监测诊断的80例OSAS患者,分为轻度OSAS组(n=22)、中度OSAS组(n=23),重度OSAS组(n=35).选取20名健康者为正常对照组.用酶联免疫法检测各组间SAA水平并进行相关性分析.结果 轻度、中度及重度OSAS组血清SAA水平分别为(1.66±0.73)、(2.72±1.12)、(4.08±1.85)μg/ml,均高于正常对照组的(0.66±0.59)μg/ml(P<0.05).不同程度OSAS患者组间SAA水平差异具有显著性(P<0.01),且SAA水平随OSAS程度加重而增高.0SAS患者SAA水平与呼吸暂停低通气指数、夜间血氧饱和度低于90%时间呈正相关,与夜间最低血氧饱和度呈负相关.20例重度OSAS患者经3个月经鼻持续气道正压通气(nCpAP)治疗后血清SAA水平明显降低(4.13±2.27vs 5.14±2.30 μg/ml)(P<0.01).结论 OSAS患者血清SAA水平明显升高且与OSAS严重程度相关,可能是OSAS患者易患心血管疾病的原因之一.nCPAP治疗可能有助于降低OSAS患者并发心血管疾病的危险性.

Abstract：

Objective To detect the levels of serum amyloid A (SAA) and explore the pathogenesis of cardiovascular diseases in patients with obstructive sleep apnea syndrome (OSAS). Methods Polysomnography was performed in 80 patients with OSAS and 20 control subjects matched for age and body mass index. The patients with OSAS were divided into mild OSAS group (n=22), moderate OSAS group (n=23) and severe OSAS group (n=35) according to the apnea hypopnea index (AHI).Serum amyloid A levels were measured in all the subjects by enzyme-linked immunosorbent assay for correlation analysis.Results Serum amyloid A levels in mild OSAS group (1.66±0.73 μg/ml), moderate OSAS group (2.72±1.12 μg/ml) and severe OSAS group (4.08±1.85 μg/ml) were significantly higher than those in the control group (0.66±0.59 μg/ml) (P<0.05).SAA levels also differed significantly between the 3 OSAS groups (P<0.01), increasing with the severity of OSAS. Correlation analysis indicated that SAA level was positively correlated to AHI (r=0.649, P<0.01) and TSaO_2<90% 0=0.491, P<0.01), but inversely yo miniSaO_2 (r=-0.499, P<0.01). After 3 months of nCPAP therapy, SAA levels were significantly decreased in the 20 patients with severe OSAS (4.13±2.27 μg/ml vs 5.14±2.30 μg/ml, P<0.01). Conclusion SAA levels are elevated in OSAS patients in close correlation to the severity of OSAS, which may contribute to the vulnerability of the patients to cardiovascular diseases. nCPAP therapy help reduce the risk for cardiovascular diseases in OSAS patients.     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清S100A12水平的研究

目的 探讨S100A12与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的相关性及意义.方法 选择OSAHS患者53例为OSAHS组,选择体检的健康志愿者46例为对照组,比较两组血清S100A12及hs-CRP水平,并分别与epworth嗜睡评分(ESS)、呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低血氧饱和度(L-SpO2)进行相关性分析.结果 两组ESS评分、BMI、AHI、L-SpO2、hs-CRP、S100A12比较差异均有统计学意义(P＜0.05);重度OSAHS组hs-CRP值明显高于轻度OSAHS组,差异有统计学意义(P＜0.05).中度OSAHS组hs-CRP值与轻度组、重度组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);重度组S100A12值明显高于中度组及轻度组,中度组S100A12高于轻度组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).hs-CRP与ESS、AHI呈正相关(r=0.822、0.787,P＜0.01),与L-SpO2呈负相关(r=-0.740,P＜0.01);S100A12与ESS、AHI呈正相关(r=0.707、0.807,P＜0.01),与L-SpO2呈负相关(r=-0.670,P＜0.01).结论 S100A12与OSAHS具有相关性,OSAHS越严重S100A12值越高,S100A12可作为新的预测OSAHS患者心血管疾病风险的指标.