表儿茶素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的干预作用

目的 研究表儿茶素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法 将80只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）、表儿茶素高剂量组（100 mg/kg）、表儿茶素低剂量组（25 mg/kg）。除正常对照组腹腔注射橄榄油外,其余各组均腹腔注射四氯化碳（CCl4） 建立肝纤维化模型。复制模型的同时开始给药,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃等容积生理盐水,每日1次,连续6周。末次给药后,称取肝湿质量,计算肝脏指数;采用微板法检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT)水平;苏木精-伊红染色和Masson胶原染色观察肝脏病理学变化;Western blot法检测肝脏中平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,collα1)蛋白的表达水平。结果 与模型组相比,表儿茶素能显著降低大鼠的肝脏指数和血清ALT、AST的含量;显著降低肝组织中α-SMA、collα1蛋白的表达;肝组织病理学指标明显改善。结论 表儿茶素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有一定的保护作用,其机制可能与抑制α-SMA、collα1的表达有关。     

吗替麦考酚酯减轻四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化

目的：肝纤维化是由慢性肝病导致的严重病理后果,并最终发展为肝硬化。吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)是器官移植术后常用的免疫抑制剂,与肝纤维化的关系尚不明确。本研究旨在探讨MMF对小鼠肝纤维化的影响及其机制。方法：选用雄性8周龄C57BL/6小鼠24只,将其随机分为空白对照组、MMF组、四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl₄)组、CCl₄+MMF组(每组均n=6)。小鼠处死后,取血清检测丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)及天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST);肝组织行Masson染色评估纤维化程度,采用免疫组织化学染色评估I型胶原蛋白(collagen I,COL1)表达水平;然后采用蛋白质印迹法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白质表达水平;最后利用real...     

四氯化碳诱导大鼠肝纤维化过程中肝内细胞骨架蛋白表达的变化

探讨肝纤维化发生过程中，细胞骨架蛋白—结蛋白（Ｄｍ）和α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）阳性细胞动态变化的规律以及这些阳性细胞之间的关系。方法用四氯化碳辅以低胆碱饲料诱导大鼠肝纤维化，应用免疫组化、电镜技术和图像分析方法对肝纤维化过程中出现的Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞进行定位和定量研究。结果α－ＳＭＡ阳性细胞的变化几乎与Ｄｍ阳性细胞同步，两者于实验早期均有增生，但前者少于后者，至纤维间隔大量形成时（１２周），两者增生均达到最高峰，但前者多于后者，以后两者均逐步下降；从形态分析，Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞主要为贮脂细胞（ＦＳＣ），部分卵圆细胞和新生胆管上皮细胞也表达此两种骨架蛋白。结论除了ＦＳＣ以外，α－ＳＭＡ和Ｄｍ阳性卵圆细胞也可能在肝纤维化发生发展中起重要作用。     

茵陈草水提物对四氯化碳所致肝纤维化大鼠的干预作用

目的: 研究茵陈草水提物对四氯化碳所致肝纤维化大鼠干预作用的影响。方法：通过向SD大鼠腹腔注射四氯化碳与花生油混合溶液所诱导建立肝纤维化大鼠模型。将肝纤维化模型的大鼠随机分为5组：模型组、阳性药水飞蓟素40mg.kg_^-1组、茵陈草水提物2.5、5、10 g.kg_^-1组,每组10只。连续灌胃给药56天,每日1次。另设10只SD大鼠为空白组。模型组、空白组每日灌胃等体积生理盐水。末次给药4 h后,3%苯巴比妥钠腹腔注射麻醉后,腹主动脉取血,离心提取血清。拨离肝脏,HE染色法及Masson染色法观察大鼠肝脏的病理学变化和纤维化程度。试剂盒检测大鼠血清中谷草转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)的含量, ELISA法检测肝组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的含量。试剂盒法检测肝脏中透明质酸(HA),III型前胶原(PCIII),层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(IV-C)的含量。结果: 与模型相比,茵陈草水提物可降低肝纤维化大鼠血清AST、ALT的水平以及炎症因子TNF-α、IL-1β的含量(P<0.05),肝脏胶原HA、PCIII、LN、IV-C的含量降低(P<0.05)。结论: 茵陈草水提物对四氯化碳所致肝纤维化大鼠肝脏有一定保护作用,其作用机制可能与调节肝组织中炎症因子TNF-α、IL-1β和胶原HA、PCIII、LN、IV-C含量有关。     

葛根素对大鼠酒精性肝纤维化的干预作用以及对肝星状细胞增殖活化的影响

[目的]研究葛根素对大鼠酒精性肝纤维化的干预作用以及对肝星状细胞增殖活化的影响。[方法]Wistar雄性大鼠85只被随机分为正常对照、模型、葛根素低、中、高剂量和阳性药(易善复)对照6组。除正常对照组之外,其余给予大鼠灌胃白酒辅以玉米油、吡唑的混合食料制备酒精性肝纤维化模型,12周后采用苏木精-伊红(HE)、Masson染色观察大鼠肝脏组织纤维化状况。采用免疫组化法检测大鼠肝组织内增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,根据PCNA的表达,计算肝细胞的增殖指数。[结果]模型组和各给药组肝纤维化程度显著高于正常对照组,各给药组肝纤维化程度要轻于模型组,但低剂量组肝纤维化程度重于其他各给药组。模型组肝细胞增殖指数明显高于其他各组,各给药组肝细胞增殖指数高于正常组。模型组α-SMA的表达高于其他各组,葛根素中、高剂量组和阳性药组α-SMA的表达低于模型组,葛根素低剂量组α-SMA的表达与模型组没有显著性差异,但从数据趋势上看低于模型组。[结论]葛根素能通过抑制肝星状细胞的增殖活化从而达到防治酒精性肝纤维化的功效,以中、高剂量效果更明显。     

大黄蛰虫丸对肝纤维化大鼠肝α-SMA表达的动态观察

目的观察大黄蜇虫丸对免疫性肝纤维化大鼠肝脏α-SMA表达的动态变化,探讨大黄蜇虫丸抗肝纤维化的作用机制。方法将120只健康雄性SD大鼠随机分为6组,即正常对照组,模型组,大黄蜇虫丸低、中、高剂量组,秋水仙碱组各20只。除正常对照组外其他各组均采用注射人血清白蛋白制作免疫性肝纤维化大鼠模型,模型制作完成后,各组采用相应的药物干预,连续4周,分别于药物治疗后1,2,3,4周末随机处死5只大鼠,用免疫组化技术检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化。结果①模型组随着周次的延长肝脏组织中α-SMA表达及胶原纤维含量同步增高,有统计学意义（P〈0.01）;②大黄蜇虫丸低、中、高剂量组随着周次的延长肝脏组织中α-SMA表达及胶原纤维含量同步降低,有统计学意义（P〈0.01）,但大黄蜇虫丸中剂量组优于其他2组（P〈0.01）;③大黄蜇虫丸有明显的抑制肝纤维化模型大鼠肝组织α-SMA的表达作用,且抑制作用要优于秋水仙碱（P〈0.01）。结论大黄蜇虫丸可有效防治大鼠免疫性肝纤维化,其作用机制可能是通过抑制肝纤维化组织α-SMA的表达来实现的。     

白三烯受体拮抗剂对阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的干预作用及其机制研究

目的探讨白三烯受体拮抗剂孟鲁司特（Montelukast,MON）对阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的干预作用及其可能机制。方法将制成阿霉素肾病模型的27只SD大鼠随机分为模型组、高剂量和低剂量MON干预组、强的松干预组,并设正常对照组,分别观察各组24h尿蛋白排泄量、血肌酐（Scr）、内生肌酐清除率（Ccr）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）和肾脏病理变化;同时采用免疫组化、免疫印迹和RT-PCR法检测肾间质中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白质和基因表达水平。结果模型组大鼠24h尿蛋白排泄量和尿NAG均较正常组增高（P〈0.05）,肾组织病理形态可见肾小球病变轻微,但肾间质纤维化相对面积和肾间质α-SMA蛋白、基因表达水平均高于正常组（P〈0.05）;各治疗组大鼠肾间质α-SMA蛋白、基因表达水平和肾间质纤维化相对面积均较模型组下降（P〈0.05）;实验第6周时低剂量和高剂量MON组Scr、Ccr水平与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,且MON高剂量组Scr和Ccr水平优于模型组（P〈0.05）。结论MON可改善阿霉素诱导肾病大鼠肾小管间质病变,减轻肾间质纤维化程度;其机制可能与通过抑制肾间质α-SMA过度表达有关。     

祛瘀化痰汤对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白表达、分布的影响的实验研究

目的 :观察、研究祛瘀化痰汤对肝纤维化大鼠肝组织α—平滑肌肌动蛋白 (α -SMA)表达、分布的影响 ,以进一步探讨其防治大鼠肝纤维化的作用机制。方法 :实验动物分组为 :正常对照组 ;中药预防组 ;模型对照组 ;中药治疗组 ;模型自然恢复组。采用四氯化碳 (CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型 ,以免疫组织化学染色法观察各组大鼠肝组织α -SMA表达、分布情况。结果 :中药祛瘀化痰汤能显著减少中药预防组及中药治疗组大鼠肝组织α -SMA表达、分布 ,中药预防组及中药治疗组大鼠肝组织α -SMA表达、分布分别较模型对照组及模型自然恢复组明显减少 ,染色明显减淡 ,中药预防组与模型对照组、中药治疗组与模型自然恢复组之间比较 ,肝组织α -SMA表达、分布半定量分析及评分均存在显著性差异。结论 :祛瘀化痰汤能够通过抑制大鼠肝星状细胞的活化增殖 ,进而抑制胶原纤维合成而达到较显著的抗大鼠肝纤维化作用。     

柔木丹颗粒对四氯化碳诱导小鼠肝纤维化的治疗作用

目的探讨柔木丹颗粒对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化的治疗作用。方法将30只成年昆明小鼠随机分为对照组、肝纤维化组和柔木丹组,每组10只。肝纤维化组和柔木丹组小鼠腹腔注射含体积分数20%CCl4的橄榄油混合液5 m L·kg~(-1),对照组小鼠腹腔注射相同体积的橄榄油,每周2次,连续8周;第3周起,柔木丹组小鼠灌胃柔木丹颗粒4 g·kg~(-1),每日1次,共6周;肝纤维化组和对照组小鼠灌胃相同体积的生理盐水。实验前和末次给药后24 h(实验后)分别称各组小鼠的体质量,观察各组小鼠体质量的变化;并于取材时称小鼠肝质量,计算各组小鼠肝体比;取小鼠肝组织,进行苏木精-伊红染色和Masson染色,观察小鼠肝组织病理学变化;免疫组织化学法检测小鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的定位及表达;实时聚合酶链反应检测小鼠肝组织中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白A1(COL1A1)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA的表达; Western blot法检测小鼠肝组织中α-SMA、TGF-β1蛋白的表达。结果实验前3组小鼠体质量比较差异无统计学意义(F=2. 312,P> 0. 05)。肝纤维化组和柔木丹组小鼠体质量增加显著小于对照组(P <0. 01),柔木丹组小鼠体质量增加显著大于肝纤维化组(P <0. 01)。肝纤维化组小鼠肝体比显著大于对照组和柔木丹组(P <0. 01),对照组与柔木丹组小鼠肝体比比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。肝纤维化组小鼠肝组织中α-SMA蛋白及mRNA相对表达量显著高于对照组(P <0. 01),柔木丹组小鼠肝组织中α-SMA蛋白及mRNA相对表达量显著低于肝纤维化组(P <0. 01),柔木丹组与对照组小鼠肝组织中α-SMA蛋白及mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。肝纤维化组小鼠肝组织中COL1A1和TIMP-1 mRNA相对表达量显著高于对照组(P <0. 01),柔木丹组小鼠肝组织中COL1A1和TIMP-1 mRNA相对表达量显著低于肝纤维化组(P <0. 01),柔木丹组小鼠肝组织中COL1A1和TIMP-1 mRNA相对表达量显著高于对照组(P <0. 01)。肝纤维化组小鼠肝组织中TGF-β1蛋白及mRNA相对表达量显著高于对照组(P <0. 01),柔木丹组小鼠肝组织中TGF-β1蛋白及mRNA相对表达量显著低于肝纤维化组(P <0. 01),柔木丹组小鼠肝组织中TGF-β1蛋白及mRNA相对表达量显著高于对照组(P <0. 01)。结论柔木丹颗粒可通过降低肝组织中α-SMA、COL1A1、TIMP-1及TGF-β1的表达而改善CCl4诱导的小鼠肝纤维化。     

干扰素-α对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的：观察干扰素-α（interferonα,IFN-α）对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制。方法：45只Wistar大鼠随机分为正常组（n=15）、模型组（n=15）、IFN-α治疗组（n=15）。正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN-α治疗组大鼠予以50%CCl4 2 mL/kg腹腔注射造模,每周注射2次,共8周;IFN-α治疗组于第9周予以IFN-α每日10万U/只,皮下注射,共治疗3周。11周末处死所有大鼠。取肝组织进行炎症活动度半定量评分、纤维化半定量评分,检测羟脯氨酸含量,Ⅰ型和Ⅲ型胶原、转化生长因子-β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）及组织金属蛋白酶抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）mRNA表达量,以及MMP-9和TIMP-1蛋白表达量。结果：与模型组比较,IFN-α治疗组肝组织炎症活动度半定量评分、纤维化半定量评分显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;羟脯氨酸含量及Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达量显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;TGF-β1,CTGF,α-SMA,TIMP-1 mRNA表达量及TIMP-1蛋白表达量显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9蛋白及mRNA表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：IFN-α可明显减轻CCl4诱导的大鼠肝纤维化及肝脏炎症反应,其作用机制可能为下调促肝纤维化因子TGF-β1和CTGF的表达,抑制肝星状细胞的活化,减少细胞外基质的合成;抑制肝纤维化降解因子TIMP-1的表达,调节细胞外基质的降解。     

丹参滴丸对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响及其作用机制

目的 观察丹参滴丸对CCl₄致大鼠肝纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法 除对照组外,其余各组大鼠用CCl₄复合因素法诱导肝纤维化大鼠模型,丹参滴丸各组同时ig给予丹参滴丸700、350、175 mg/kg,阳性对照组给予扶正化瘀胶囊1 500 mg/kg,每天给药1次,连续给药7周,正常大鼠给予蒸馏水作为对照组。测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性及总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、IV型胶原的水平;测定肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和羟脯氨酸（Hyp）的量;HE和Masson染色观察肝组织病理形态学改变;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 丹参滴丸能明显抑制肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、NAG活性的升高,降低IV型胶原的量,增加TP和ALB的量;降低肝组织中Hyp和MDA的量,提高SOD的活性,抑制胶原纤维的增加,亦能降低α-SMA的表达。结论 丹参滴丸有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制与其抗脂质过氧化、抑制胶原纤维的增加及降低α-SMA的表达等密切相关。     

肝纤维化大鼠模型整合素αV表达的动态观察

目的观察整合素（integrin）αV在实验性大鼠肝纤维化过程中表达的动态变化,初步探讨integrinαV在肝纤维化发病机制中的作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分为模型组和正常对照组,采用腹腔内注射四氯化碳（CCl4）溶液,制造大鼠肝纤维化模型。分别在第2、4、6、8周肝纤维化发展不同阶段取肝组织,采用HE染色确定模型建立情况,Masson三色染色检测胶原沉积情况,应用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）技术及Western blot检测integrinαV mRNA和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA mRNA）及其蛋白在肝纤维化不同时期肝组织中含量的动态变化。结果①Masson三色染色显示随着肝纤维化的发展,模型组2、4、6、8周大鼠肝组织内胶原纤维逐渐增多,均显著高于正常对照组;②RT-PCR结果显示正常大鼠肝组织中有integrinαV mRNA的表达,随着造模时间延长,纤维化程度的加重,integrinαVmRNA表达逐渐增加,α-SMAmRNA的表达也有类似变化,二者呈明显正相关关系;③Western blot检测显示随造模时间的延长integrinαV及α-SMA蛋白表达均增强。结论Integr...     

黄连素对小鼠肝纤维化的影响

目的 探讨黄连素防治肝纤维化的机制。方法 将C57BL/6小鼠分为正常组、模型组、黄连素组,腹腔注射四氯化碳诱导纤维化动物模型,同时给予黄连素治疗。6周后测定丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate transaminase,AST）活性,并观察肝脏病理形态学改变,测定羟脯氨酸含量,同时用Western blot和实时PCR检测肝脏中α平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α- SMA）、Ⅰ型胶原α1（collagen,type Ⅰ,alpha 1,Col1α1）和基质金属蛋白酶组织抑制剂- 1（tissue inhibitors of matrix metalloproteinase 1,TIMP- 1）的含量。结果 与肝纤维化组相比,黄连素干预后,肝脏损伤和纤维化程度明显减轻,胶原合成和沉积减少,炎性反应减轻,ALT和AST活性下降,α- SMA、Col1α1和TIMP- 1合成减少。结论 黄连素通过抑制炎性反应和胶原沉积,改善小鼠肝纤维化。     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝组织α-SMA和MMP-2表达的影响

目的观察膈下逐瘀汤对肝纤维化大鼠肝脏组织α-SMA和MMP-2表达的影响。方法SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组和膈下逐瘀汤组共3组,每组20只,用40%四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）复制大鼠肝纤维化模型,膈下逐瘀汤干预12周后处死大鼠,采用免疫组化染色法检测α-SMAt和MMP-2表达。结果模型组α-SMA和MMP-2积分光密度（IOD）值分别为（21.97±1.68和14.12±0.68）,显著高于正常对照组（8.88±1.26和5.90±0.70）（P〈0.05）,表明模型组α-SMA和MMP-2表达上调。与模型组比较,膈下逐瘀汤组α-SMAt和MMP-2 IOD值分别为（14.44±0.83和8.47±0.68）显著降低（P〈0.05）,表明α-SMA和MMP-2表达下调。结论膈下逐瘀汤可能通过下调肝组织中α-SMA和MMP-2的表达,调控细胞外基质合成与降解,从发挥抗肝纤维化作用。     

维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的 探讨维甲酸（at-RA）对单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）肾间质纤维化的影响.方法将26只大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,结扎单侧输尿管造成梗阻性肾病模型.术后9天处死大鼠,取梗阻侧肾做组织学检查,HE染色,用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）.结果维甲酸显著减轻肾小管间质损害,治疗组肾间质炎细胞浸润和肾间质CTGF、α-SMA表达显著低于对照组.结论维甲酸减轻UUO模型大鼠肾小管间质损害和炎细胞浸润,降低CTGF表达,抑制α-SMA表达,从而减轻肾间质纤维化.     

卡托普利抗肝纤维化实验研究

目的 :建立大鼠肝纤维化模型 ,探讨卡托普利抗大鼠肝纤维化作用及机制。方法 :Wistar大鼠 4 0只随机分为正常对照组、实验对照组A、实验对照组B、卡托普利预防组、卡托普利治疗组 ,采用混合损害因素构建肝纤维化模型 ;行HE染色和VG胶原染色 ,判断炎症和肝纤维化程度。免疫组化检测各组肝组织TGF - β1、α-SMA的表达。结果 :卡托普利预防组、治疗组的大鼠肝细胞坏死、脂肪变性、炎性细胞漫润及纤维结缔组织增生等较实验对照组明显减轻 ;实验对照组A平均肝纤维化积分值为 2 .17± 0 .75、卡托普利预防组为 1.33±0 .5 2 ;实验对照组B为 2 .86± 0 .6 9、治疗组为 1.6 7± 0 .82 ,两者比较均P <0 .0 5。实验对照组A、卡托普利预防组α-SMA阳性表达细胞数分别为 72± 8.1/视野、31± 5 .5 /视野 ;实验对照组B、治疗组分别为 110± 8.6 /视野、6 7± 4 .3/视野 ,两者比较均P <0 .0 0 1。实验对照组A、卡托普利预防组TGF - β1阳性表达面积比分别为 3.15± 0 .5 3%、2 .2 4± 0 .2 6 % ,两者比较P <0 .0 5 ;实验对照组B、治疗组分别为 4 .77± 0 .4 4 %、3.5 8±0 .4 9% ,两者比较P <0 .0 0 1。各组大鼠肝组织中α -SM阳性细胞数与TGF - β1阳性表达面积比呈正相关 (r=0 .86 7,P =0 .0 0 7)。结论 :各组大鼠     

乙醛刺激大鼠肝星状细胞活化的动力学分析

目的:从动力学角度分析乙醛刺激大鼠肝星状细胞活化的时间变化,以确定大鼠肝星状细胞活化的最佳时间,从而为后续肝纤维化的相关研究提供实验数据。方法:培养大鼠肝星状细胞,同步化处理12h,随机分为乙醛刺激组和对照组。其中乙醛刺激组细胞加入乙醛(终浓度200μmol/L)分别刺激12h、24h和36h,每12h补加一次乙醛;对照组加入等量培养基。采用MTT法测定各组细胞增殖;ELISA法检测Ⅰ型胶原蛋白、纤维黏连素;Western blotting检测α-SMA的表达。结果:加入乙醛后,细胞的增殖活性随时间的延长而增强,24h细胞增殖活性达最高峰;ELISA测定结果显示,乙醛刺激组较对照组有明显上调;Western blotting检测结果,乙醛刺激组明显促进α-SMA表达量上调,且在24h达高峰。结论:乙醛可激活大鼠肝星状细胞且活化的最佳作用时间为24h。     

"抗肝纤268方"对肝纤维化的治疗作用

目的探讨"抗肝纤268方"对肝纤维化的影响及机理.方法制备肝纤维化模型鼠,采用"抗肝纤268方"高、低剂量治疗3周,对照组用秋水仙碱治疗,Masson染色后光镜下统计肝内纤维成分的数量(IOD值),免疫组化染色后统计肝内TGF-β1、α-SMA 、FN、LN、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原等的数量(IOD值).结果模型组大鼠FN、LN、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、α-SMA,以及肝内纤维成分等的IOD值与正常组比较均增高,差异有显著性(P<0.05或P＜0.01)."抗肝纤268方"低、高剂量以及秋水仙碱治疗3周后,以上指标的IOD值与模型组比较,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).低剂量组与高剂量组、对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论 "抗肝纤268方"可调节TGF-β1的数量、进而影响α-SMA的数量、从而减少细胞外基质(ECM)数量,是其抗肝纤维化的机理.