氨茶碱及地塞米松对小鼠淋巴细胞凋亡的调节作用

目的：观察氨茶碱和地塞米松对小鼠脾淋巴细胞凋亡的调节作用。方法：采用流式细胞技术对比了它们对正常鼠及卵蛋白致敏小鼠脾淋巴细胞凋亡的作用。结果：氨茶碱及地塞米松可忸体外培养的正常小鼠淋巴细胞凋亡，明显抑制体外培养的致敏鼠淋巴细胞的凋亡。致敏鼠洒巴细胞的凋亡明显多于对照鼠，在体应用氨茶碱使致淋巴细胞凋亡进一步增加，而在体应用地塞米松明显抑帛蛭和敏鼠淋巴细胞的凋亡。氨茶碱体外对在体应用氨茶碱处理的鼠淋巴     

雌二醇对小鼠正常淋巴细胞和致敏淋巴细胞活化的调节

为探讨雌二醇(E2)对正常和致敏淋巴细胞活化的调节作用,并分析了E2对ConA活化的小鼠正常和致敏淋巴细胞增值、抗体产生及TGF-β生成的影响。结果显示生理水平尤其是相当于小鼠动情间期水平的E2对致敏脾淋巴细胞增殖具有明显促进作用;对初始脾淋巴细胞增殖没有影响。较高水平E2诱导活化的脾细胞生成TGF-β,促进免疫鼠脾细胞生成特异性抗体;较低水平E2抑制特异性抗体生成,且抑制程度与脾细胞活化状态相关。     

RhIL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用

目的探讨重组人白细胞介素18(rhIL-18)对核辐射所致小鼠脾细胞凋亡的抑制作用及其对免疫功能的调节调节。方法对32只C57小鼠分4组进行核辐射损伤,2周后取小鼠脾淋巴细胞体外培养,用细胞死亡ELISA试剂盒测定胞浆中核小体含量,用DAN琼脂糖电泳检测凋亡细胞DNA片段,用淋巴细胞转化实验测定rhIL-18对脾细胞免疫功能的调节作用。结果与对照组比较,rhIL-18能够明显降低核辐射所致的小鼠脾细胞凋亡;提高核辐射损伤后小鼠的脾细胞细胞转化能力。结论rhIL-18可能通过抑制核辐射诱导的细胞凋亡而增强小鼠脾细胞功能。     

血小板活化因子拮抗剂对抗原引起气道嗜酸性粒细胞浸润的影响

为探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）拮抗剂消除哮喘气道炎症的价值，应用鸡卵清蛋白致敏和刺激小鼠复制过敏性气道炎症模型，研究ＰＡＦ拮抗剂对于抗原引起气道嗜酸性粒细胞（ＥＯＳ）浸润的影响。体内实验结果表明，正常小鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中未见到ＥＯＳ；致敏小鼠给予抗原多次反复吸入刺激后，ＢＡＬＦ中ＥＯＳ急剧增多。在ＰＡＦ一种选择性拮抗剂ＹＭ－２６４治疗各组中，ＹＭ－２６４的不同剂量０．１ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ及１０ｍｇ／ｋｇ分别导致ＥＯＳ数下降２７．０％，４８．２％及６７．９％。还发现ＹＭ－２６４抑制ＥＯＳ对气道的浸润还伴随着脾脏细胞培养上清液中白细胞介素５（ＩＬ－５）水平的明显降低。体外实验结果表明，ＰＡＦ另一种选择性拮抗剂ＯＮＯ－６２４０于体外培养时能抑制淋巴细胞产生ＩＬ－５并呈明显的剂量相关性，而这种抑制作用至少可以维持７２小时。这些结果提示ＰＡＦ拮抗剂通过抑制ＩＬ－５的产生从而抑制了ＥＯＳ在气道的聚集。认为ＰＡＦ拮抗剂用于临床治疗支气管哮喘患者理应取得较好的疗效。     

苯二氮Zuo类药物对细胞免疫功能的影响

苯二氮Ｚｕｏ类药物（安定）能促进小鼠腺细胞增殖，这种作用以安定５ｍｇ／ｋｇ腹腔注射，每天一次连续给药５ｄ的作用最强，安定对小鼠脾脏细胞增殖，自然杀伤（ＮＫ）细胞毒活性，脾细胞初次抗体产生以及对体外培养胸腺细胞增殖等均无明显影响，安定对截肢应激所致小鼠胸腺，脾脏细胞免疫抑制有拮抗作用，并可有效地拮抗应激导致的不鼠胸腺重量减轻。     

纳曲酮对移植排异反应的抑制作用

以小鼠心肌组织异位移植和混合淋巴细胞反应为整体和离体模型，观察了阿片受体阻断剂纳曲酮对移植排异反应的影响。结果显示：给动物从术前开始腹腔注射纳曲酮共１０天（每日二次，每次５ｍｇ／ｋｇ）可明显延长移植心肌组织的存活时间；加入纳曲酮（１０－４～１０－８ｍｏｌ／Ｌ）对混合淋巴细胞反应有抑制作用并呈量效关系。同时还观察到，给正常小鼠腹腔注射纳曲酮３天以上，可引起动物脾细胞由ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞转化反应受抑制。以上结果说明纳曲酮可抑制移植排异反应，此作用有可能是通过阻断内源性阿片肽所致。     

哮喘小鼠T细胞周期和bcι-2基因表达的测定及其意义

目的：观察哮喘小鼠T细胞周期和bcι-2基因表达的变化及地塞米松对它们的影响。方法：复制小鼠过敏性哮喘动物模型，应用流式细胞术观察脾及肺泡灌洗液(BALF)中T细胞数、T细胞周期和bcι-2基因表达的变化。结果：哮喘组脾和BALF中淋巴细胞CD3表达率显著高于对照组；哮喘 地塞米松组BALF淋巴细胞中CD3表达降低，但脾淋巴细胞中CD3表达增高；哮喘组S期及C2 M期细胞数明显多于对照组，同时凋亡率也高于对照组；哮喘 地塞米松组S期及C2 M期细胞数减少，凋亡增多；哮喘组T细胞bcι-2基因表达率显著高于对照组，哮喘 地塞米松对bcι-2基因表达与哮喘组比较无明显变化。结论：哮喘发病时，T细胞增多，脾T细胞活化增殖增加，凋亡增加，同时，bcι-2基因表达率明显增加。地塞米松对哮喘的治疗作用可能并非通过抑制T细胞bcι-2基因表达的途径。     

免疫反应对糖皮质激素受体的影响和意义

本文采用绵羊红细胞腹腔注入C_(57)BL小鼠产生抗绵羊红细胞的免疫反应。观察小鼠在免疫反应过程中,其脾脏淋巴细胞糖皮质激素受体(GCR)数的变化。发现在绵羊红细胞致敏后第五天小鼠脾淋巴细胞GCR数明显高于对照组(P<0.005),第七天达高峰,第十一天恢复至正常。用Dex抑制由植物血凝素(PHA)诱导的小鼠脾脏淋巴细胞的转化探讨致敏鼠脾淋巴细胞GCR变化的意义。结果提示Dex对淋转抑制程度可能与淋巴细胞GCR数有关。本文还用上述方法研究了妊娠小鼠,发现妊娠母体内脾淋巴细胞GCR数明显高于未孕小鼠(P<0.005),这在调节母胎免疫反应中有一定意义。     

雷公藤抑制致敏小鼠T细胞IL-5 mRNA的表达及核因子NFAT活性

目的：探讨雷公藤内酯醇（TP）对致敏小鼠T淋巴细胞IL－5 mRNA表达的影响及其机制。方法：采用卵蛋白（OVA）致敏的方法建立模型;运用原位杂交染色法（ISH）观察TP对T淋巴细胞IL－5 mRNA表达的影响;通过凝胶电泳迁移率实验（EMSA）对CD4^ T淋巴细胞核转录因子NFAT的DNA结合活性进行检测,同时就TP的作用与地塞米松（DM）相比较。结果：致敏小鼠T淋巴细胞IL－5 mRNA表达显著高于正常对照组（P＜0．01）,经TP、DM处理后,其IL－5 mRNA表达显著低于致敏组（P＜0．01）。致敏小鼠CD4^ T淋巴细胞体外经刀豆蛋白A（ConA）刺激后,NFAT的DNA结合活性与正常对照组比较显著增强,并呈时间依赖关系,经TP、DM处理后,NFAT的DNA结合活性显著减弱。结论：TP抑制IL－5基因转录的分子机制可能与其抑制DFAT的DNA结合活性有关。     

苄普地尔对小鼠的致畸作用

苄普地尔分５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ三个剂量。小鼠分着床期试验组和器官形成期试验组。结果显示：着床期试验组孕鼠体重增长，着床数，活胎数，吸收胎数，死胎数无明显改变。     

GITRL在内毒素诱导的Kupffer细胞凋亡中的作用研究

目的:探讨糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子相关蛋白配体(GITRL)在脂多糖(LPS)诱导的Kupffer细胞(KCs)凋亡中的作用。方法:分离BALB/c小鼠的KCs,转染对照siR-NA或者GITRL siRNA 24 h后,分四组培养,分别为对照(Control)组:仅加入培养液;地塞米松(Dex)组:加入Dex10μmol/L;LPS组:加入LPS 1 mg/L;LPS+Dex组:加入LPS 1 mg/L和Dex 10μmol/L。24 h后用免疫细胞化学法检测GITRL蛋白的表达,应用Annexin V/PI双染标记和流式细胞术检测KCs的凋亡率。结果:LPS刺激增加了KCs GITRL的表达(P<0.05),然而地塞米松处理降低了LPS诱导的GITRL表达。LPS刺激诱导了KCs的凋亡,但是沉默GITRL基因或者地塞米松处理抑制了LPS诱导的凋亡(P<0.05)。结论:LPS可以诱导小鼠KCs的凋亡,其作用可能依赖于GITRL信号的转导。     

褪黑素体内外对小鼠前胃癌细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用

目的 探讨褪黑素(MLT)在体内外对小鼠前胃癌(MFC)细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用.方法 体内实验:建立荷胃癌小鼠模型,随机分为5组:A.正常对照组;B.荷瘤空白对照组:每日注射生理盐水100 mg/kg;C.小剂量褪黑素组:荷瘤成功后(接种第6天起)每日腹腔注射MLT 25 mg/kg;D.中剂量MLT组:每日腹腔...     

芹菜素对小鼠T淋巴细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的:研究芹菜素(AP)对小鼠T 细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响.方法:无菌分离小鼠淋巴结和胸腺细胞,MTT 法检测不同浓度(25、50、100、150、200 μmol/L)的AP 对多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导的T 细胞增殖的影响,PI 染色结合流式细胞术(FCM)分析细胞周期的分布,Annexin V-FITC/PI 双染色结合FCM 检测AP 对T细胞凋亡的影响,以及AP与地塞米松(DEX)共同作用下T 细胞凋亡的变化,并用MTT 法检测该药物浓度对T细胞的毒性作用.结果:25～200 μmol/L AP对T细胞无药物毒性作用,并明显抑制ConA诱导的T 细胞增殖(P<0.01),使细胞周期停滞在G0/G1期,且呈剂量依赖关系;各浓度AP对T细胞凋亡均具有抑制作用,并明显抑制DEX诱导的T细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量依赖关系.结论:在一定浓度范围内,AP 明显抑制ConA诱导的小鼠T细胞体外增殖,使细胞周期停滞G0/G1期,并明显抑制T 细胞凋亡.     

茴香霉素对小鼠同种异基因皮肤移植的影响

目的: 阐明茴香霉素对淋巴细胞反应性的影响以及在皮肤移植中抑制排斥反应的作用.方法: 用MTT法检测茴香霉素刺激下淋巴细胞在单向或双向混合淋巴细胞反应中的反应性.C57BL/6小鼠作为供体, BALB/c小鼠作为受体.手术前3 d分别给3组BALB/c小鼠皮下注射生理盐水、环胞霉素A以及茴香霉素, 手术当天继续注射至术后第7天.环胞霉素A及茴香霉素的注射剂量分别为: 20 mg/kg、 12.5 mg/kg.结果: 在剂量10.0 μg/L时, 茴香霉素能抑制单向或双向混合淋巴细胞反应中淋巴细胞的反应性(P均＜0.01); 茴香霉素组移植皮肤的存活时间明显高于环胞霉素A组以及对照组.结论: 茴香霉素能明显抑制淋巴细胞的反应性; 并且能明显延长受体对皮肤移植物的耐受时间, 可能为移植免疫排斥的治疗提供新的途径.     

Inhibition of T lymphocyte heparanase by heparin prevents T cell migration and T cell-mediated immunity

Previously we reported that activated T lymphocytes express a heparanase enzyme that degrades the heparan sulfate moiety of the proteoglycan of the extracellular matrix (ECM). Expression of the heparanase enzyme was found to be associated with the ability of activated T lymphocytes to penetrate blood vessel walls and accumulate in target organs. We recently found that relatively low doses of heparin administered to mice or rats inhibited T cell-mediated immune reactions. In the present study we investigated the effects in vitro and in vivo of the heparanase inhibitor, heparin, on the expression of T lymphocyte heparanase and on the ability of T lymphocytes to mediate a delayed-type hypersensitivity (DTH) reaction. We found that heparanase was induced by immunizing mice with antigen in vivo or by activating T lymphocytes with concanavalin A in vitro. Relatively low doses of heparin administered once daily in vivo (5 micrograms) or present in vitro (0.1 microgram/ml) inhibited the expression of heparanase induced by immunization or by concanavalin A incubation. Higher or lower doses of heparin did not have these effects. The same doses of heparin that inhibited expression of heparanase also inhibited the ability of the lymph node cells to migrate to a site of antigen and adoptively produce a DTH reaction. These findings suggest that modulation of cell-mediated immune reactions may be achieved by relatively low doses of heparin which inhibit expression of T lymphocyte heparanase.     

Immunological effects of refolded human soluble BAFF synthesized in Escherichia coli on murine B lymphocytes in vitro and in vivo

The B cell activating factor of the TNF family (BAFF, also known as BLyS, TALL-1, THANK, and zTNF4) is an important survival factor for B lymphocytes. Our previous study has demonstrated that the final purified material of human soluble BAFF (refolded hsBAFF) synthesized in Escherichia coli is biologically active in a validated induced human B lymphocyte proliferation bioassay. In this study, the administration of refolded hsBAFF to isolated mouse B lymphocytes and mice was carried out to study the immunological effects of hsBAFF on in vitro and in vivo B lymphocytes. The results showed that splenic B lymphocyte proliferation significantly increased after hsBAFF administration (in vitro 1, 2, 3, 5 microg/ml and in vivo 0.01, 0.5, 1.0 mg/kg body mass). An oppositely elevated immune response of B lymphocyte to LPS stimulation after hsBAFF administration (1, 2.5, 5 microg/ml) and a significantly elevated change after treatment with hsBAFF and costimulation with anti-IgM (2.5 microg/ml) was observed in vitro, respectively. A similar change existed also in hsBAFF-treated mice on the 8th postexperiment day, but the value with anti-IgM alone didn't increase compared to normal control in vitro. We found that the treatment of mice with hsBAFF resulted in a developmental maturation of T1 B lymphocytes to T2 and mature B lymphocytes by detecting distributions of splenic CD21(lo) with CD45R/B220(+) and CD21(hi) with CD45R/B220(+) subsets. These results suggest that the refolded hsBAFF synthesized in Escherichia coli may enhance immune responses in the body by regulating the proliferation, differentiation, and immune response of B lymphocytes.     

抗Thy－1单克隆抗体的免疫抑制作用

从体内、体外研究了抗Ｔｈｙ－１单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫抑制作用。结果表明：（１）体外抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞，无补体时能抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；（２）在体内，可以抑制小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖、但不影响ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖反应。结果说明：抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ的免疫抑制作用可能包括补体依赖性细胞毒作用和通过Ｔｈｙ－１分子对Ｔ淋巴细胞功能的抑制。     

雷公藤内酯醇对致敏大鼠淋巴细胞凋亡的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇（TP）体内外对致敏大鼠淋巴细胞淋巴细胞凋亡的影响。方法 采用卵蛋白（OVA）致敏并反复刺激建立过敏性气道炎症模型,24只SD大鼠随机分为正常组、阳性对照组和TP处理组,每组8只。用TUNEL原位末端标记法,DNA电泳及电镜等方法,观察体内外TP对致敏大鼠淋巴细胞凋亡的影响及机制。结果 致敏大鼠BALF中嗜酸性粒细胞（Eos)、淋巴细胞均较正常组明显增高（P＜0．05）。体内应用TP可减少致敏大鼠BALF中Eos、淋巴细胞数目,同时可增加其BALF中淋巴细胞凋亡百分率。体外实际显示,不同剂量TP呈剂量依赖性（10^-7-10^5g/ml）的促进OVA抗原刺激的脾淋巴细胞凋亡,该效应随作用时间凋亡,可能是其抗炎机制之一,并可能是通过Fas/FasL途径发挥作用;同时TP可明显增加DXM的促淋细胞凋亡作用。为阐明TP对抗哮喘气道炎症的作用机制和探讨激素依赖性哮喘治疗的新途径提供了有意义的实验资料。     

双硫仑联合铜离子对人骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响

文题释义： 双硫仑：是一种广泛用于治疗慢性酒精上瘾以及古柯碱的戒断药物，其为二硫代氨基甲酸盐，水溶性极差。早在20世纪中期，Jacobsen等发现双硫仑可有效抑制乙醛脱氢酶的活性，造成乙醛的饱和氧化反应，其本身和代谢产物可引起体内相关蛋白失活，使人体产生不适反应，从而达到抗酗酒目的。 二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate，DDTC)：白色至无色片状结晶，有吸湿性，易溶于水，溶于乙醇、甲醇、丙酮，不溶于乙醚和苯。水溶液呈碱性并逐渐分解，遇酸能分离出二硫化碳而使溶液混浊，熔点 94-102 ℃。最大吸收波长(乙醇中)257、290 nm(摩尔吸光系数1 200、13 000)。低毒，半数致死量(大鼠，经口)2 830 mg/kg。研究显示，双硫仑在进入人体后会迅速转化为体内代谢物DDTC，Cu可与DDTC结合形成较稳定的DDTC-Cu复合物。 背景：研究表明双硫仑本身具有抗肿瘤活性，可联合铜(Cu)离子在体内外水平对多种肿瘤发挥抑癌作用，但关于双硫仑对骨肉瘤细胞增殖和凋亡作用的影响尚未阐明。 目的：探讨双硫仑-Cu在体内外水平对骨肉瘤增殖与凋亡能力的影响以及可能的作用机制。 方法：实验方案经山西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号为2017LL077)。①体外实验：配置双硫仑在进入人体后的转换物二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate，DDTC)和Cu离子的复合物DDTC-Cu(0.5，1，2，3和5 μmol/L)，设置DDTC单药(5 μmol/L)、Cu单药(5 μmol/L)和空白对照组。药物处理人骨肉瘤细胞Saos-2细胞和MG-63细胞，CCK8法检测不同浓度DDTC-Cu对Saos-2细胞和MG-63细胞的增殖抑制作用；采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测DDTC-Cu对Saos-2细胞凋亡水平变化；②体内实验：取4周龄BALB/c-nu/nu雌性裸鼠共10只，随机分为DDTC-Cu组和对照组。采用异位移植方法，在裸鼠右侧背部皮下注射Saos-2细胞和Matrigel混悬液(1∶1混合)，注射量400 μL/只；接种2周后，对照组裸鼠腹腔注射地塞米松(0.5 mg/kg，隔日1次)，DDTC-Cu组裸鼠腹腔注射地塞米松(0.5 mg/kg，隔日1次)和DDTC-Cu复合物(10 nmol/g，隔日1次)；观察两组荷瘤小鼠移植瘤生长情况，绘制瘤体生长曲线。接种5周后麻醉下处死动物，完整取出瘤体，免疫组织化学检测瘤体石蜡切片组织中ki67蛋白的表达水平，Western blot检测瘤体组织中细胞增殖和凋亡蛋白的表达及JNK通路蛋白表达的变化。 结果与结论：①体外实验结果：DDTC-Cu组对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用明显高于其他3组；CCK-8实验结果显示DDTC-Cu对骨肉瘤细胞增殖抑制呈剂量依赖性，两株细胞的24 h药物半抑制浓度分别为0.337 μmol/L和0.487 μmol/L；流式细胞学检测结果显示DDTC-Cu可呈剂量依赖性促进Saos-2细胞的凋亡；②体内实验结果：DDTC-Cu组裸鼠移植瘤的体积和质量均小于对照组；免疫组织化学结果显示，DDTC-Cu组的瘤体中ki-67蛋白表达水平较对照组降低；Western blot检测结果显示，DDTC-Cu组瘤体蛋白中p-JNK和c-jun的表达水平均上调。结果提示，双硫仑联合Cu离子在体内外水平抑制人骨肉瘤细胞增殖并促进骨肉瘤细胞凋亡，其作用机制可能与JNK通路活化有关。 ORCID: 0000-0003-4818-901X(徐朝健) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程     

清胰汤Ⅱ号冲剂对急性胰腺炎小鼠的保护作用及机制

目的:探讨清胰汤Ⅱ号冲剂(QYT)对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)小鼠的保护作用及机制。方法:成年C57BL/6小鼠24只,雌雄各半,随机均分为3组。AP组和AP+QYT组首先经腹腔注射雨蛙肽(50μg/kg)及脂多糖(10 mg/kg)复制重症AP模型,AP组小鼠给予饮用水灌胃,AP+QYT组给予QYT灌胃;正常对照组小鼠给予等量生理盐水注射及饮用水灌胃。于末次注药后3 h麻醉处死动物。检测和分析胰腺组织的病理改变、肠道细菌总数和分类、Peyer’s结T淋巴细胞亚群的变化、血浆淀粉酶、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平以及胰腺和肺脏组织髓过氧化物酶(MPO)活性等。结果:与对照组相比,AP小鼠的胰腺组织病理学评分、肠道细菌数量、血浆淀粉酶活性、IL-6及MCP-1水平、胰和肺组织的MPO活性都有明显升高(P0.05);QYT可在一定程度上逆转AP时相关指标的变化(P0.05)。小肠Peyer’s结数量在各组无明显差异,但AP组的CD3+T淋巴细胞百分比较对照组明显降低(P0.05),而且,AP组和AP+QYT组,尤其是后者CD4+T淋巴细胞百分比和CD4+/CD8+比值较对照组明显升高(P0.05)。结论:清胰汤II号冲剂对雨蛙肽和脂多糖诱导的小鼠急性胰腺炎具有明显的拮抗作用,其机制可能与其抑制炎症反应、促进肠内细菌的清除和调节肠道T淋巴细胞功能有关。