贵州荔波汉族与雷山苗族MTHFR基因多态性分布的比较

目的比较贵州汉族、苗族亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)多态性的分布情况,获取 MTHFR C677T和A1298C位点的群体遗传学数据.方法应用PCR-RLFP技术调查了贵州荔波汉族及雷山苗族MTHFR基因型的分布.结果汉族MTHFR 677位T等位基因频率为22.7%低于中国北方汉族,与苗族(10.64%)差异有显著性.苗族1298位C等位基因频率为48.66%高于有文献报道的种族和民族,与汉族(28.85%)差异有显著性.677TT/1298CC双杂合子的分布频率分别是16.66%,11.11%.在苗族还发现一例677TT/1298CC双纯合子.结论 MTHFR两个位点多态性在贵州汉族和苗族有民族差异;苗族A1298C位点C等位基因频率是有文献报道最高的民族.     

贵州三个民族亚甲基四氢叶酸还原酶基因的遗传多态性

目的研究贵州汉族、布依族、苗族亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)基因多态性，为贵州少数民族基因多态性数据库的建立提供相关数据。方法应用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性检测贵州荔波汉族、布依族、雷山苗族MTHFR基因两个单核苷酸(677及1298位)多态位点的基因频率及基因型频率。结果汉族、布依族、苗族MTHFR677位T等位基因的分布频率分别是22．8％，16．1％，10．6％，MTHFR1298位C等位基因的分布频率分别是28．9％，39．1％，48．7％，677CT／1298AC双杂合子的分布频率分别是16．66％，22．7％，11．1％。在苗族还发现1例677TT／1298CC双纯合子。结论．MTHFR C677T和A1298C多态性存在群体差异；贵州雷山苗族、荔波布依族．MTHFR 1298位有较高的C等位基因频率，贵州雷山苗族MTHFR 1298位C等位基因频率是目前文献报道最高的民族。     

MTHFR和CBS基因多态性与低出生体重的关系研究

目的探讨母亲亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T、胱硫醚β-合酶（CBS）基因T833C与子代低出生体重发生之间的关系。方法运用聚合酶链反应（PCR）-限制性片段长度多态性与PCR-扩增阻滞突变体系技术分别检测母亲的MTHFR、CBS基因型,对MTHFR基因型、CBS基因型、基因型的交互作用与低出生体重的关系进行分析。结果MTHFR基因突变型、CBS基因突变型对低出生体重影响无统计学意义（P〉0．05）,但MTHFR基因突变型与CBS基因突变型对低出生体重的影响存在交互作用（OR=3．155,95％CI：1．229—8．528）。结论母亲MTHFR基因C677T、CBS基因T833C,与子代低出生体重发生无关,但MTHFR基因突变型与CBS基因突变型存在交互作用,其能增加子代低出生体重发生的危险。     

PCR-荧光探针法检测汾阳地区女性亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性分析

目的运用PCR-荧光探针法技术对汾阳地区女性进行亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)分型检测,以指导临床个体补充叶酸提供科学依据,并为了解汾阳地区人群MTHFR基因分型遗传构成提供基础数据。方法 EDTA抗凝管收集医院就诊女性的外周血2ml,提取其中的DNA并结合荧光定量聚合酶链式反应,运用探针检测MTHFR基因677C/T多态性位点的基因型,对本地女性群体该位点碱基C/T的分布频率进行统计学分析。结果汾阳地区女性群体中携带CC、CT、TT基因型频率为16.2%,47.9%和35.9%;C和T等位基因频率分别为40.1%和59.9%。结论本研究说明,PCR-探针法是一种快速的,多样本检测方法,利用探针的特异性对亚甲基四氢叶酸还原酶基因位点进行特异性检测。     

贵州少数民族胱硫醚-β-合酶基因C699T的分布

目的 对中国贵州雷山苗族和三都水族群体胱硫醚-β-合酶基因C699T进行多态性分析,计算其基因频率,获取相应的遗传信息.方法 采用nest-PCR和变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术寻找突变基因,对突变基因的PCR产物进行基因直接测序,并与文献报道的各种人群的相应数据进行比较.结果 雷山苗族和三都水族群体的胱硫醚-β-合酶基因699T等位基因频率分别为5.1%和5.4%.结论 雷山苗族和三都水族两个群体间胱硫醚-β-合酶基因699T等位基因差异无统计学意义,但它们均显著低于黑种人和白种人群体.     

叶酸代谢酶基因多态性与反复自然性流产易感性的研究

目的探讨叶酸代谢相关酶基因多态性在不明原因反复自然流产遗传易感性中的作用地位。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR—RFLP）检测蛋氨酸合成酶还原酶（MTRR）A66G,蛋氨酸合成酶（MS）A2756G,N5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T,胱硫醚β-合成酶（CBβS）844ins68基因多态性。结果不明原因反复自然流产患者MTHFR的T等位基因突变频率较正常对照组明显升高。而MS、MTRR和CBβS突变频率在病例组与对照组之间无显著差异。结论MTHFR C677T基因突变多态性可作为不明原因反复自然流产预后的检测指标。     

重型抑郁症患者亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性检测

目的 探讨北方汉族人群5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与重型抑郁症的关系。方法 采用病例-对照研究。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测MTHFR C677T及 A1298C基因多态性。结果 （1）对照组677TT基因型频率及T等位基因频率分别为为13.16％和39.80%;1298CC基因型和C等位基因频率分别为1.32%和12.83％;（2）抑郁症组MTHFR 677TT基因型频率（35.53％）明显高于正常对照组（13.16％）（P＜0.001）,677 T等位基因频率（57.24%）明显高于对照组（39.80%）（P＜0.001）。（3）Ligistic回归分析, C677T基因型与疾病的发生有关（P<0.001）。结论MTHFR C677T基因变异与本组重症抑郁症发病有关,是其发病的危险因素;MTHFR A1298C基因变异与本组重症抑郁症发病无关联。     

青岛地区汉族育龄妇女亚甲基四氢叶酸还原酶基因667位点多态性分布研究

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因667位点多态性在青岛市汉族育龄妇女中的分布状况。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测98份育龄妇女外周血MTHFR C667T基因型分布。结果本研究人群MTHFR 677位点基因的CC、CT、TT基因型频率分别为24.5%、53.1%、22.4%,T等位基因频率为0.49。结论青岛市汉族育龄妇女MTHFR基因667位点多态性与其他地区有较大不同,调查可以为相关研究提供相应的分子生物学依据。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与青海汉族妊娠期高血压疾病的相关性

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因-677C/T（rs1801133）多态性与青海汉族妇女妊娠期高血压疾病（HDP）的相关性。 方法 选择青海省HDP患者 139 例（HDP组）,正常妊娠孕妇 145 例（对照组）,应用限制性内切酶片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）方法,检测HDP组和对照组MTHFR-677C/T多态性分型并测序验证。 结果 HDP组和对照组MTHFR基因CC、CT、TT基因型频率分别为54.68%、35.25%、10.07% 和69.66%、22.06%、8.28%,CC基因型频率HDP组54.68%低于对照组69.66%（P<0.05）,CT基因型频率HDP组35.25%高于对照组22.06%（P<0.05）,而TT基因型频率HDP组和对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）;HDP组和对照组MTHFR-677C/T多态性C和T等位基因频率分布有差异（P<0.05）,HDP组T等位基因频率高于对照组（χ²=5.568,P<0.05）。 结论 MTHFR基因-677C/T多态性与青海汉族HDP相关,MTHFR基因-677C/T多态性中T等位基因可能是HDP的易感基因,CT基因型为HDP的易感基因型。     

广东汉族人甲基四氢叶酸还原酶基因的多态性

目的　了解广东汉族人甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因的分布特点 ,并与其它地区人群进行比较。方法　应用聚合酶链反应技术对正常人甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因进行扩增以HinfI进行限制性酶切图谱分析。结果　广东汉族人MTHFR基因中 ,表现型T/T频率是 3% ,表现型T/C是 36 5 % ,表现型C/C是 6 0 5 %。MTHFR基因T频率是 0 196 ,基因C频率是 0 80 4。结论　广东汉族人MTHFR基因的分布与其它地区及人种有不同。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因突变与不明原因复发性流产的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因C677T和A1298C突变与不明原因复发性流产（unexplained recurrent miscarriage,u RM）的关系。方法利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphisms,RFLP）方法,检测52例u RM患者（u RM组）和16例可孕妇女（对照组）MTHFR C677T和MTHFR A1298C位点多态性。结果 u RM组中MTHFR 677C/T（26.9%vs 25.0%,P=1.00）和677T/T（17.3%vs 6.3%,P=0.43）基因型频率以及T等位基因频率（30.8%vs 18.8%,P=0.19）高于对照组但无显著性差异;u RM组中MTHFR 1298 A/C（23.1%vs 18.8%,P=0.98）和1298 C/C（13.5%vs 12.5%,P=0.73）基因型频率以及C等位基因频率（25.0%vs 15.6%,P=0.27）高于对照组亦无显著性差异。结论我们的研究结果表明MTHFR C677T和A1298C基因位点突变可能与u RM无关。     

MTHFR基因C677T多态性与神经管缺损的相关性研究

目的探讨5,10-甲基四氢叶酸还原酶（5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因C677T突变与神经管缺损（neuraltube defectes,NTD）发病的相关性。方法应用PCR—RFLP法,对67名正常儿童和48例NTD患儿（NTD组）（其中无脑儿16例,脊柱裂32例）进行MTHFR基因C677T突变分析。结果NTD组胎儿MTHFR基因TT基因型频率（68．7％）和T等位基因频率（0．820）均显著高正常对照组儿童（31．3％和0．54）（x^2=15．71,P〈0．01和x^2=17．18,P〈0．01）。与MTHFR基因CC基因型相比,携带TT基因型的胎儿发生NTD的相对风险增加6．28倍（95％CI：2．01～19．62）。结论MTHFR基因C677T多态性与潍坊地区人胎儿NTD发病有关联。     

亚甲基四氢叶酸还原酶单核苷酸多态性与老年类风湿关节炎合并高血压病相关性研究

目的检测我国南方汉族老年人类风湿关节炎（RA）合并高血压病（HT）者的亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）677C/T和1298A/C2个单核苷酸多态性的表达,并分析两个单核苷酸多态性（SNP）位点与HT、RA及RA合并HT的关系。方法研究对象共169人,其中对照91人,RA患者78人,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测基因型和等位基因的分布频率,群体数理遗传学方法分析MTHFR SNP的遗传平衡吻合度和相互间连锁不平衡关系。结果经Hardy-Weinberg检验,所研究的2个SNP位点各基因频率达到遗传平衡。677CC、CT、TT基因型在高血压病组中分别占59.2%、33.8%和6.9%,在非高血压病组中分别为79.5%、17.9%和2.6%,两组总的频率分布无显著性差异（χ^2=5.402,P〉0.05）,但将少见T等位基因携带者CT与TT合为一组后两组比较有统计学差异,（χ^2=5.337,P〈0.05）说明携带677T等位基因与高血压病可能存在相关关系。OR为1.579（95%CI：1.066～2.339,P=0.029）,进一步比较RA合并高血压病与对照者高血压病组,两组总的频率分布及将CT与TT合为一组后比较均无显著性差异（χ^2=3.606,P〉0.05）说明677C/T与RA及RA合并高血压病均无关联。1298A/C位点在高血压病组中分别占54.6%、40.8%和4.6%,在非高血压病组中分别为51.3%、43.6%和5.1%,两组总的频率分布无显著性差异（χ^2=0.136,P〉0.05）,将AC与CC合为一组后比较亦无统计学差异。1298A/C位点在RA合并高血压病与对照者高血压病组,两组总的频率分布及将AC与CC合为一组后均无统计学差异,说明1298A/C位点与高血压病及RA合并高血压病均无关系。结论MTHFR677CT、TT基因型与高血压病存在相关关系,可能是高血压病的危险易感因子,1298A/C与HT无关联。合并RA高血压病组与不合并RA高血压病组研究结果基本一致。677C/T和1298A/C与RA无明显关联。老年RA患者中高血压病患病率高。     

Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR): the incidence of mutations C677T and A1298C in the Ashkenazi Jewish population.

The polymorphic mutation C677T in the gene of MTHFR is considered a risk mutation for spina bifida and vascular disease. Another common mutation on the MTHFR gene, A1298C, has also been described as another risk mutation. We studied the frequencies of these two mutations on DNA samples from healthy Jewish individuals and compared them to the frequency of these mutations in DNA samples obtained from healthy individuals in South Texas. The presence of the C677T allele was determined by PCR and Hinf I digestion, and mutation A1298C by PCR and Mbo II digestion. A total of 310 alleles was examined for C677T in the Ashkenazi samples and 400 alleles in the non-Jewish samples. The rate of C677T among the Ashkenazi Jewish alleles was 47.7% as compared to 28.7% among the alleles from the non-Jewish population. The difference is statistically significant, P < 0.0005. Mutation A1298C was examined in 298 alleles of Jewish individuals and 374 alleles of non-Jewish counterparts from Texas. The rate of the A1298C mutation in the Jewish samples was 27.2% whereas in the non-Jewish was 35%. This was also statistically significant, P < 0.031. No individuals were homozygous for both mutations or were found to be homozygous for one mutation with heterozygosity of the other mutation, and that the C677T and the A1298C alleles did not occur in cis position. This study shows a unique distribution of C677T and the A1298C alleles among the Ashkenazi Jews. In spite of high frequency of C677T mutation, spina bifida is less common among Ashkenazi Jews. Further studies are needed to establish whether the C677T and the A1298C mutations have an impact on vascular disease in the Ashkenazi Jewish population.     

Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR): The incidence of mutations C677T and A1298C in the Ashkenazi Jewish population

The polymorphic mutation C677T in the gene of MTHFR is considered a risk mutation for spina bifida and vascular disease. Another common mutation on the MTHFR gene, A1298C, has also been described as another risk mutation. We studied the frequencies of these two mutations on DNA samples from healthy Jewish individuals and compared them to the frequency of these mutations in DNA samples obtained from healthy individuals in South Texas. The presence of the C677T allele was determined by PCR and Hinf I digestion, and mutation A1298C by PCR and Mbo II digestion. A total of 310 alleles was examined for C677T in the Ashkenazi samples and 400 alleles in the non-Jewish samples. The rate of C677T among the Ashkenazi Jewish alleles was 47.7% as compared to 28.7% among the alleles from the non-Jewish population. The difference is statistically significant, P < 0.0005. Mutation A1298C was examined in 298 alleles of Jewish individuals and 374 alleles of non-Jewish counterparts from Texas. The rate of the A1298C mutation in the Jewish samples was 27.2% whereas in the non-Jewish was 35%. This was also statistically significant, P < 0.031. No individuals were homozygous for both mutations or were found to be homozygous for one mutation with heterozygosity of the other mutation, and that the C677T and the A1298C alleles did not occur in cis position. This study shows a unique distribution of C677T and the A1298C alleles among the Ashkenazi Jews. In spite of high frequency of C677T mutation, spina bifida is less common among Ashkenazi Jews. Further studies are needed to establish whether the C677T and the A1298C mutations have an impact on vascular disease in the Ashkenazi Jewish population. Am. J. Med. Genet. 86:380–384, 1999. © 1999 Wiley-Liss, Inc.     

TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性方法的建立

目的建立TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性的方法。方法设计一对MTHFR基因C677T多态位点的引物及TaqMan探针,采用TaqMan探针实时PCR扩增SNP分型方法检测唇腭裂患者及其父母共100人的MTHFR基因C677T多态性,与常规PCR-RFLP方法进行一致率比较,并对其特异性、敏感性和重复性以及成本-效益等进行评价,同时对部分实时PCR产物样本进行测序验证。结果运用TaqMan探针实时荧光PCR技术对MTHFR基因C677T多态性检测结果准确,特异性好,与常规PCR-RFLP方法结果具有高度一致性,Kappa=0.922>0.75(P=0.000);检测灵敏度可达2×103拷贝;重复性好、高通量、无污染、安全性好;随机样品TaqMan探针分型结果与测序结果完全一致。结论成功建立了TaqMan探针实时PCR检测人MTHFR基因C677T多态性的方法;此方法是常规临床诊断及大规模群体研究的良好平台。