薯蓣皂苷元通过调控miR-34a及其靶基因发挥抗胃癌作用

目的探讨薯蓣皂苷元对人胃癌细胞AGS的增殖、克隆形成、迁移及侵袭的抑制作用及可能机制。方法采用细胞增殖抑制率法检测薯蓣皂苷元对胃癌细胞AGS的增殖抑制率,平板克隆形成实验检测其对AGS细胞克隆形成能力的影响,划痕实验观察薯蓣皂苷元对胃癌细胞迁移作用的影响,细胞侵袭实验检测其对AGS细胞侵袭作用的影响。采用小分子核糖核酸(miRNAs)靶基因预测方法预测miRNA-34a(miR-34a)靶基因,实时定量聚合酶链反应(qPCR)方法观察薯蓣皂苷元对AGS细胞miR-34a及其靶基因转录因子E2F1、E2F3、细胞周期蛋白D1(CCND1)表达水平的影响,并分析其与胃癌患者预后。结果 24、30、36、42μmol/L及48μmol/L浓度的薯蓣皂苷元均可显著抑制胃癌AGS细胞增殖,其作用与时间及浓度呈正相关;克隆形成实验显示24、30、36、42μmol/L及48μmol/L浓度的薯蓣皂苷元可抑制AGS细胞克隆形成能力(P<0.01);24、30、36、42μmol/L及48μmol/L浓度的薯蓣皂苷元处理后的胃癌细胞迁移及侵袭能力均显著降低(P<0.01),且其作用与时间、浓度呈正相关。36μmol/L浓度的薯蓣皂苷元作用于AGS细胞后,可显著提高miR-34a表达水平,并降低miR-34a靶基因E2F1、E2F3及CCND1表达水平;E2F1、E2F3及CCND1基因表达与胃癌患者预后呈显著负相关。结论薯蓣皂苷元可能通过调控miR-34a,下调E2F1、E2F3及CCND1基因表达,发挥抑制胃癌AGS细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭功能。     

甘草次酸通过Wnt/β-catenin通路抑制黑色素瘤恶性生物学行为的机制研究

目的 探讨甘草次酸通过Wnt/β-连环素(β-catenin)通路抑制黑色素瘤恶性生物学行为的可能机制。方法 以黑色素瘤细胞B16-F10为研究对象,MTT法进行浓度梯度试验选择0、1、2、4μmol/L为细胞处理浓度,并以顺铂0.01 mmol/L干预为阳性对照。采用Transwell小室法检测细胞侵袭及迁移能力;免疫印迹试验(Western blot)实验检测B16-F10细胞中Wnt/β-catenin通路蛋白和侵袭迁移相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达水平。构建裸鼠移植瘤模型,实验分为对照组(无药物处理)、甘草次酸组(40 mg/kg),观察移植瘤小鼠的肿瘤组织生长情况及肿瘤组织中Wnt/β-catenin通路蛋白和侵袭迁移相关蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,甘草次酸以浓度依赖性方式抑制B16-F10细胞增殖,当甘草次酸浓度≥2μmol//L时,其对B16-F10细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.05);Transwell小室实验结果显示,与对照组相比,甘草次酸2、4μmol/L浓度处理后,B16-F10细胞的侵袭、迁移能力明显下降(P<0...     

芦荟大黄素对体外胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的:探讨芦荟大黄素(Aloe emodin,AE)在体外对胶质瘤SHG44细胞增殖、细胞周期、黏附、迁移和侵袭能力的影响。方法:将体外人脑胶质瘤细胞分为两组,实验组经AE处理(AE浓度分别为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L和160μmol/L),同时设对照组(未经药物处理)。采用CCK-8法检测AE处理后SHG44细胞的增殖情况;流式细胞仪分析细胞周期变化;细胞黏附实验检测细胞黏附能力,通过Transwell小室方法检测AE对SHG44细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:与对照组相比,AE处理胶质瘤SHG44细胞后,CCK-8法及流式细胞仪分析结果显示AE能抑制SHG44细胞增殖,并呈剂量依赖和时间依赖效应关系;对于细胞周期的影响主要变现为引起细胞发生S期阻滞;AE处理后能降低SHG44细胞的粘附能力;Transwell小室实验表明AE处理后的SHG44细胞迁移和侵袭能力明显降低。结论:AE能通过阻滞细胞周期于S期而抑制胶质瘤SHG44细胞的增殖,并且下调胶质瘤细胞的黏附能力,降低细胞体外迁移及侵袭能力。     

知母皂苷AⅢ通过调节Notch信号通路调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的机制

目的 探讨知母皂苷AⅢ（TSAⅢ）对骨肉瘤细胞（HOS）增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化（EMT）等的影响及其潜在机制。方法 用10μmol/L及20μmol/L的TSAⅢ处理人HOS细胞,另设阴性对照组（Ctrl组）与γ分泌酶抑制剂（DAPT）阳性药物对照组,CCK8、平板克隆、划痕实验与Transwelll来评估TSAⅢ对HOS细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测TSAⅢ对EMT相关蛋白E-钙黏蛋白（E-cad）、细胞间紧密连接蛋白1(CLDN1)、N-钙黏附蛋白（N-cad）及波形蛋白（Vimentin）表达影响;流式细胞术检测TSAⅢ对骨肉瘤HOS细胞凋亡影响,Western blot检测TSAⅢ对抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2 (BCL-2)蛋白及促凋亡蛋白BCL-2相关X蛋白（BAX）表达影响。构建HOS细胞小鼠模型,分为Ctrl组、DAPT组、TSAⅢ10μmol/L组及TSAⅢ20μmol/L组,21 d后比较各组小鼠肿瘤体积变化,肿瘤组织免疫组化染色比较各组Ki67、凋亡标志物半胱天冬氨酸酶-3剪切体（Cleaved Caspase3）及Vi...     

太白楤木皂苷下调sirtuin 1表达对HEC-1B细胞侵袭和迁移的影响

目的 太白楤木皂苷(SAT)具有明显的抗肿瘤功能,本研究通过探究SAT对子宫内膜癌细胞HEC-1B增殖、迁移、侵袭的影响,以期为子宫内膜癌的治疗提供理论依据。 方法 实验分为对照组(未加药物)、阳性对照组(30μmol/L环磷酰胺)、SAT 10μmol/L组、SAT 20μmol/L组、SAT 30μmol/L组。以不同浓度SAT及环磷酰胺处理HEC-1B细胞后,采用CCK8法检测HEC-1B细胞增殖情况,平板细胞克隆形成实验检测菌落形成;Transwell小室试验检测SAT对HEC-1B细胞迁移、侵袭能力的影响,实时荧光定量(qRT-PCR)法检测去沉默调控蛋白-1(sirtuin 1) mRNA相对表达量,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测sirtuin 1蛋白、金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)表达。 结果 与对照组相比,阳性对照组、SAT处理组细胞增殖、侵袭、迁移数量显著降低(均P<0.05),且呈剂量依赖;与阳性对照组相比,SAT 20μmol/L组、30μmol/L组细胞增殖、侵袭、迁移数量显著降低(均P<0.05);与对照组相比,阳性对照组、SAT处理组MMP-2、MMP-9、sirtuin 1 mRNA、sirtuin 1蛋白水平显著降低(均P<0.05),且随SAT浓度升高而下降;与阳性对照组相比,SAT 20μmol/L组、SAT 30μmol/L组MMP-2、MMP-9、sirtuin 1 mRNA、sirtuin 1蛋白水平显著降低(均P<0.05)。 结论 太白楤木皂苷可抑制子宫内膜癌细胞HEC-1B细胞迁移、侵袭,可能与下调sirtuin 1表达有关,能为子宫内膜癌的治疗提供新可能。      

莱菔硫烷对人肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)对人肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,并将其分为4组：空白对照组、SFN低浓度组(5μmol/L)、SFN中浓度组(10μmol/L)、SFN高浓度组(20μmol/L),用CCK-8检测肾癌细胞786-O增殖活化的情况；分别用细胞划痕、Transwell迁移实验观察SFN对肾癌细胞786-O迁移能力的影响；用Transwell侵袭实验观察SFN对肾癌细胞786-O侵袭能力的影响；运用Western blot和qRT-PCR方法检测SFN对上皮间质转化(EMT)相关蛋白和mRNA表达的影响；用Western blot检测SFN对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果 SFN处理24、48、72 h后，肾癌细胞786-O的增殖活性随着SFN浓度的升高而下降；与对照组相比，SFN处理组的肾癌细胞迁移和侵袭能力均显著降低；此外，随着SFN浓度的升高，肾癌细胞786-O中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平逐渐升高，而N-cadherin、Vimentin的mRNA及蛋白表达水平随之降低；NF-κB信号通路相...     

细胞外ATP对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的作用

目的观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响;以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100μmol/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响;用时间显微镜动态观察100μmol/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况。结果高浓度(5 000μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000μmol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为(163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P<0.01);迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81)μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27)μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 100μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用。     

苯噻啶对人肺腺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

目的 观察不同浓度苯噻啶(Pizotifen)对人肺腺癌A549和PC9细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,并初步探究其机制。方法 取对数生长期的A549和PC9细胞,分为对照组(细胞对照组为培养基直接作用于细胞,溶剂对照组为含有0.1%DMSO的培养基作用于细胞)和实验组(浓度分别为10、20、30、40μmol/L的苯噻啶作用于细胞)。CCK-8法检测人肺腺癌细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell迁移实验检测其迁移能力,Transwell侵袭实验检测其侵袭能力,ELISA法检测Wnt3a/β-catenin信号通路蛋白、上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果 与溶剂对照组相比：CCK-8结果显示,实验组A549和PC9细胞活力降低,出现不同程度的增殖抑制现象,在20、30、40μmol/L浓度组有一定的时间依赖性(P<0.05);划痕实验结果表明,实验组划痕愈合率小于对照组,苯噻啶浓度越高,划痕愈合率越低(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验结果显示,实验组穿过小室的肺腺癌细胞数量明显低...     

鱼藤素对结肠腺癌HCT116细胞ACL表达、上皮间质化及生物学行为的影响

目的 探讨鱼藤素对结肠腺癌HCT116细胞ACL表达、上皮间质化及增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 选未加药NCM460细胞作为空白组,通过药物毒性实验检测鱼藤素对人正常结肠NCM460细胞无毒性作用的最大浓度(TC₀),将TC₀稀释为3个梯度浓度作用于结肠腺癌HCT116细胞为鱼藤素组,设置正常培养HCT116细胞为对照组,另培养HCT116细胞予以白杨素8μmol/L培养设为阳性对照组。通过噻唑蓝(MTT)法、平板细胞克隆形成实验、划痕实验及Transwell小室检测各组细胞增殖能力、克隆能力、迁移能力及侵袭能力;Western blot检测各组细胞中ACL、N钙黏蛋白(N-cadherin)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Snail蛋白表达。结果 鱼藤素对人正常结肠NCM460细胞TC₀为40μmol/L,以鱼藤素40μmol/L为最高浓度,梯度递减为10、20、40μmol/L作用于HCT116细胞。与对照组比较,鱼藤素组(10、20、40μmol/L)及阳性对照组细胞增殖抑制...     

大叶茜草素诱导黑色素瘤B16F10凋亡

目的 研究大叶茜草素对黑色素瘤B16F10细胞的作用机制。方法 使用MTT法(其中大叶茜草素浓度为0、40、80、160和320μmol/L)、平板克隆(其中大叶茜草素浓度为0、10、20和40μmol/L)来检测B16F10的增殖能力,用划痕实验(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10的迁移能力,使用凋亡与坏死检测试剂盒(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测大叶茜草素是否诱导B16F10凋亡,使用蛋白免疫印迹法(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10细胞中MTA1基因蛋白水平的表达。结果 大叶茜草素可剂量依赖性抑制B16F10细胞的增殖和迁移,诱导B16F10凋亡;经大叶茜草素处理后B16F10细胞中MTA1具有下调趋势,且呈剂量依赖性。结论 大叶茜草素可以通过下调MTA1来抑制B16F10细胞的增殖、迁移并诱导凋亡。     

橄榄苦苷对人前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移侵袭及凋亡的影响

目的 探讨橄榄苦苷对人前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及可能机制.方法 以不同浓度橄榄苦苷(0、20、40、80、160、320μmol/L)处理PC-3细胞,采用MTT实验检测PC-3细胞的增殖活性、划痕实验检测细胞迁移、Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,以及Western blot检测PC-...     

槲皮素通过STAT3信号通路抑制肺癌A549细胞迁移和侵袭

目的 观察槲皮素通过抑制信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 体外培养A549细胞,以不同浓度(0、7.5、15、30、60、120μmol/L)槲皮素处理24、48和72 h,采用CCK-8检测槲皮素对A549细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50).A549细胞随机分为4组:分别以0(空白对照组)、15和30μmol/L槲皮素和3μg/ml顺铂(阳性对照组)处理24 h.采用细胞黏附实验、划痕修复实验、Transwell小室体外侵袭实验观察A549细胞黏附、迁移、侵袭能力,Western印迹法检测STAT3、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达的变化.结果 槲皮素剂量依赖性地抑制A549细胞增殖.与空白对照组相比,槲皮素显著抑制A549细胞黏附率、迁移率、侵袭细胞数(P<0.05或P<0.01);与空白对照组相比,槲皮素显著降低A549细胞STAT3和p-STAT3蛋白表达(P<0.05或P<0.01).结论 槲皮素具有明显的抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关.     

海参提取物TBL-12对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的探讨海参提取物TBL-12在体外对人胃癌HGC-27细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡功能的影响。方法用不同浓度TBL-12(0、15、30、45、60、75μg/m L)处理胃癌细胞后,分别用Cell Counting Kit-8法(CCK-8法)、划痕实验、侵袭实验、流式双染法检测TBL-12对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。结果 CCK-8实验表明,TBL-12能显著抑制胃癌HGC-27细胞增殖(P0.05);划痕和侵袭实验表明,与对照组比较,TBL-12能够明显抑制胃癌HGC-27细胞的迁移和侵袭能力(P0.05);细胞周期分析实验表明,TBL-12(30、45、60、75μg/m L)可诱导胃癌HGC-27细胞凋亡,凋亡率从2.42%分别提升到4.10%、4.55%、5.24%、7.22%(P0.05)。结论 TBL-12在体外能够显著抑制胃癌HGC-27细胞体外的增殖、迁移和侵袭能力,并且能诱导细胞凋亡,具有体外抗肿瘤效应,具有潜在的临床应用价值。     

全反式维甲酸对小鼠黑色素瘤B16F10细胞生物学行为的影响

目的 探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外增殖、迁移、凋亡、致瘤性的影响及其初步作用机制.方法 采用MTT法检测ATRA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10和小鼠成纤维细胞L929增殖能力的影响.显微镜下观察给药后两种细胞的形态变化,应用划痕实验和Transwell实验检测ATRA对B16F10细胞迁移能力的影响,分别采用DAPI染色和Annexin V-FITC/PI染色观察B16F10细胞凋亡情况,JC-1染色实验检测B16F10细胞线粒体膜电位,荧光分光光度计检测B16F10细胞中Caspase-9、Caspase-3的活化情况,利用体内成瘤实验观察ATRA对B16F10细胞致瘤性的影响.结果 MTT结果显示ATRA呈浓度依赖性地抑制B16F10细胞和L929细胞增殖,但B16F10细胞的存活率明显低于L929细胞的存活率(P＜0.05);分别以低、中、高3个浓度(6.25、16、40 μmol/L)的ATRA处理细胞24 h后,显微镜下可见B16F10细胞在中浓度时呈凋亡样改变,高浓度时细胞基本死亡,丧失正常形态;而L929细胞形态仅在高浓度时发生显著变化;划痕实验和Transwell实验提示B16F10细胞的体外迁移能力在中浓度即受到明显抑制(P＜0.05);继续以中浓度(16 μmol/L)的ATRA作用B16F10细胞24 h,DAPI染色可见细胞核裂解,甚至可见凋亡小体;AnnexinV-FITC/PI染色结合流式细胞仪测得细胞凋亡率为(37.27±4.42)％;JC-1染色实验提示线粒体膜电位明显降低;荧光分光光度计测得给药后Caspase-9、Caspase-3显著被活化,活性分别增加了(1.54±0.00)、(3.09 ±0.01)倍(P＜0.05);成瘤实验结果显示ATRA处理后的B16F10细胞致瘤性显著降低(P＜0.01),甚至消失.结论 ATRA能显著抑制B16F10细胞体外增殖、迁移能力,并能通过降低线粒体膜电位,活化Caspase-9、Caspase-3蛋白诱导细胞凋亡,进而抑制B16F10致瘤性.     

基于线粒体凋亡通路探讨防己诺林碱对前列腺癌PC3细胞的生物学行为的影响

目的 基于线粒体凋亡通路探究防己诺林碱（fangchinoline, FAN）对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法 将前列腺癌PC3细胞按照FAN处理浓度分为4组,分别为FAN 0μmol/L组、FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组,各组依次采用FAN 0μmol/L (DMSO替代)、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L进行处理,孵育48 h后进行实验。CCK-8法检测PC3细胞增殖,平板克隆法检测PC3细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测PC3细胞凋亡,Transwell实验检测PC3细胞侵袭,划痕实验检测PC3细胞迁移,Western blot检测PC3细胞自噬相关蛋白和线粒体凋亡通路蛋白。结果 与FAN 0μmol/L组相比,FAN 5μmol/L组、FAN 10μmol/L组和FAN 20μmol/L组的PC3细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭和迁移能力明显降低（P<0.001）,凋亡率明显升高（P<0.001）;与FAN 5μmol/L组和FAN 10μmol/L组相比,FAN 20μmol/L组的PC3...     

槲皮素对口腔癌Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭的影响及PI3K/AKT信号通路的调控作用

目的 研究槲皮素对Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及PI3K/AKT通路的调控作用.方法 体外培养Tca-8113细胞,将细胞分为对照组和槲皮素(50μmol/L)处理组.采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;Transwell(添加基质胶)检测细胞迁移(侵袭)情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测...     

DMDD与索拉非尼联合应用协同抑制肝癌细胞恶性生物学行为的实验研究

目的：探讨中药杨桃根提取物DMDD单体（2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2,5-diene-1,4-dione与索拉非尼联合应用对人肝癌Huh7细胞恶性生物学行为的影响及可能的机制。方法：实验分4组：Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组及DMDD与索拉非尼联合应用组（简称联合应用组）。CCK-8法检测Huh7细胞活力，以金氏公式判定协同效应；平板克隆实验检测Huh7细胞的集落形成能力；划痕实验、Transwell迁移实验和侵袭实验检测Huh7细胞的迁移能力和侵袭能力；流式细胞术检测Huh7细胞周期；RT-qPCR和Western blot检测丝氨酸合成通路中的PHGDH mRNA转录水平和蛋白表达水平。结果：平板克隆实验、划痕实验和Transwell迁移实验结果显示，与Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组比较，DMDD和索拉非尼联合应用组对Huh7细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用显著增强（均P<0.05），经金氏公式计算，2、4、8μmol/L DMDD分别联合1、2、4μmol/L索拉非尼具有协同作用（Q>1.15）,6、10μmo...     

哌立福新抑制肝癌HepG2细胞增殖的机制研究

目的探讨哌立福新对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法以不同浓度(0、7.5、15和30μmol/L)的哌立福新处理肝癌HepG2细胞后,MTT法和集落形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕愈合实验检测细胞的迁移能力,葡萄糖和ATP检测试剂盒检测HepG2细胞内葡萄糖和ATP含量变化,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、Akt和mTOR蛋白的表达。结果哌立福新能够呈浓度-时间依赖性抑制肝癌HepG2细胞增殖。随着哌立福新浓度的增加,HepG2细胞的侵袭和迁移能力逐渐减弱,细胞内葡萄糖和ATP含量逐渐减少,PCNA、MMP-9、GLUT1、Akt和m TOR蛋白的表达逐渐降低,与对照组(0μmol/L)相比,差异均有统计学意义(P0.05)。结论哌立福新能够抑制肝癌HepG2细胞的增殖,其作用机制可能与抑制Akt/mTOR途径减弱糖代谢过程有关。     

油酸激活Src基因诱导Hela细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨油酸是否能够通过激活Src基因,从而诱导宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移和侵袭.方法 给予不同浓度的油酸(0、5、10μmol/L)处理人宫颈癌Hela细胞,使用CCK-8、平板克隆、EdU及Tran-swell等方法分别检测不同浓度油酸负荷下Hela细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化情况;Western blot检测油酸处理前后Src和p-Src蛋白表达水平变化;使用Src激酶特异性抑制剂SU6656处理细胞后,观察Hela细胞增殖率及穿膜细胞数等指标变化.结果 不同浓度油酸处理Hela细胞后,其体外增殖、迁移和侵袭能力均明显增加(P<0.05),且存在浓度依赖性.与NC组比较,油酸组p-Src蛋白表达水平升高(P<0.05).应用Src特异性抑制剂SU6656处理后,油酸引起的Hela细胞的增殖、迁移及侵袭力的增强均受到抑制.结论 油酸激活Src基因促进Hela细胞增殖、迁移和侵袭.     

PTPRO通过减少STAT3磷酸化抑制黑色素瘤的恶性行为

目的 探讨酪氨酸磷酸酶O型变体(PTPRO)对黑色素瘤恶性行为的抑制作用及可能机制。方法 应用针对人PTPRO基因启动子区的小激活RNA过表达黑色素瘤B16-F10细胞中的PTPRO,利用CCK8、平板克隆形成实验、划痕愈合实验、Trannswell小室迁移和侵袭实验分别检测激活PTPRO后黑色素瘤B16-F10细胞的存活、增殖、迁移和侵袭能力的改变。并用Western blot检测STAT3和磷酸化的STAT3的表达变化。结果 PTPRO-saRNA组显著抑制黑色素瘤B16-F10细胞的活力(P<0.01)、克隆形成能力(P<0.01)、划痕愈合能力(P<0.01)、迁移和侵袭能力(P<0.01);而且,过表达PTPRO减少STAT3蛋白的磷酸化。结论 过表达PTPRO通过减少STAT3的磷酸化抑制皮肤黑色素瘤的恶性行为。