细胞周期抑制因子p27与头颈部肿瘤

细胞周期调控机制紊乱是肿瘤细胞最常见的改变 ,这一改变使细胞无限制的增殖 ,导致肿瘤的发生、发展和临床不良预后。细胞周期蛋白依赖性激酶 (ＣＤＫ)的时相性激活是细胞周期调控机制的核心 ,相应的ＣＤＫ与细胞周期蛋白 (Ｃｙｃｌｉｎ)结合后 ,其激活与否受到几种复杂机制的严格调控〔1〕。ＣＤＫ抑制物 (ＣＤＫＩｓ)机制是其主要的负性调节机制 ,它的破坏将促使细胞癌变 ,因此在肿瘤研究中具有重要意义〔1〕。根据其结构和功能的不同 ,可以将ＣＤＫＩｓ分为ＩＮＫ4家族与Ｃｉｐ/Ｋｉｐ家族两类。ＩＮＫ4家族包括ｐ1 5、ｐ1 6、ｐ1 8和 ｐ…     

喉鳞癌组织中CDK4cyclin,D1,P^16蛋白表达

目的：细胞周期中Ｇ１／Ｓ转换受到Ｇ１期的细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖激酶（ＣＤＫＳ）和它们的抑制剂的调节，ｃｙｃｌｉｎＤ１／ＣＤＫ４复合物磷酸化（ＰＲＢ）基因产物，Ｐ＾１６与ｃｙｃｌｉｎＤ１竞争性地抑制ＣＤＫ４，这些蛋白质的不正常表达就使细胞增殖失控，进而导致肿瘤的形态和发展。本研究从细胞周期调控的角度来探讨喉鳞状细胞癌的发生、发展与ＣＤＫ４、ｃｙｃｌｉｎＤ１及Ｐ１６的关系，方法：用ＳＰ免疫组织     

喉鳞状细胞癌中p27和血管内皮生长因子与肿瘤血管形成的关系

我们采用流式免疫荧光技术对 45例喉鳞状细胞癌组织中的抑癌基因ｐ2 7和血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)表达蛋白进行过检测[1,2 ] ,现再用ＦⅧ因子抗体标记肿瘤组织血管内皮细胞 ,计算肿瘤内微血管密度 (ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ ,ＩＭＶＤ) ,以了解其相互关系。一、材料与方法1 临床资料 :采用河北医科大学第四医院暨省肿瘤医院 1994年 3月～ 1995年 12月经病理证实为喉鳞状细胞癌的所有术前未接受过放射治疗和化学治疗的住院患者 45…     

靶向逆转KB细胞多药抗性时c-myc基因表达的改变

哺乳动物细胞接触某种治疗药物后可获得对其它非相关药物的广泛耐药性 ,这种现象称为多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)。近期研究发现ｃ ｍｙｃ与多药耐药基因ＭＤＲ1密切相关[1] 。ＭＤＲ特性的出现与ＭＤＲ1基因的过度表达及其基因产物Ｐ糖蛋白有关。本研究通过监测人口咽腔表皮样癌细胞株 (ｈｕｍａｎｏｒａｌｃａｖｉｔｙｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃａｒｃｉｎｏｍａＫＢｃｅｌｌｌｉｎｅ ,ＫＢ细胞 )在逆转ＭＤＲ表型前后ｃ ｍｙｃ表达的改变 ,以了解ｃ ｍｙｃ基因是否影响了细胞内ＭＤＲ1基因调控水平以及细胞…     

c—myc异常表达与KB细胞多药耐药性的关系及其意义

目的 了解ｃ－ｍｙｃ基因异常表达与ＫＢ细胞多药耐药性（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）的关系。方法 将含Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因的真核细胞表达克隆转染ＫＢ细胞,应用免疫组织化学方法及流式细胞术检测经抗ｍｄｒｌ－ｒｉｂｏｚｙｍｅ处理前后ＫＢ细胞中ｃ－ｍｙｃ基因产物Ｍｙｃ蛋白及多药耐药基因ｍｄｒｌ产物Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐ－ｇｐ）表达的改变。结果 耐药株ＫＢｖ和敏感株ＫＢ均有Ｍｙｃ蛋白表达,但ＫＢｖ强于ＫＢ,经抗ｍｄｒ１－ｒｉｂｏｚｙｍｅ部分逆转ＭＤＲ表型后,ＫＢｖ／５ｍＲ３及５ｍＲ３ Ｍｙｃ蛋白表达减弱;耐药株逆转前后Ｐ－ｇｐ表达有明显变化,而敏感株则无明显改变。结论 在ＭＤＲ状态下,Ｍｙｃ蛋白表达增高与肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性有关,ｃ－ｍｙｃ参与了ｍｄｒ１的调控。Ｍｙｃ蛋白     

喉癌组织中人乳头状瘤病毒感染与p15和p16蛋白的表达

人乳头状瘤病毒 (ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｖｕｓ ,ＨＰＶ)与喉鳞状细胞癌 (简称喉鳞癌 )的发生有相关性已被肯定。我们采用原位杂交方法与免疫组化方法 ,分析ＨＰＶ感染与ｐ15、ｐ16蛋白表达之间的相关性 ,以进一步明确喉鳞癌的病因及发病机制。一、材料与方法1.标本来源 :6 2例喉鳞癌组织系我科 1997年 1月～ 1999年 9月间手术的肿瘤组织标本 ,男 5 5例 ,女 7例 ;年龄 33～ 78岁 ,平均 5 5 8岁。声门上型 36例 ,声门型 2 5例 ,声门下型 1例。病理分级 :低分化 12例 ,中分化 35例 ,高分化15例。ＴＮＭ分期 (ＵＩＣＣ 1987) :Ｉ期…     

应用原位多原酶链反应检测喉癌及喉上皮增生性病变中HPV DNA

人乳头状瘤病毒 (ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ,ＨＰＶ)被认为是引起喉乳头状瘤的主要原因 ,而ＨＰＶ与喉的其他增生性病变及喉癌的关系还有争议。原位ＰＣＲ (ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,ＩＳＨ ,ＰＣＲ ＩＳＨ)是最近发展的一种新技术 ,综合了ＰＣＲ敏感性和ＩＳＨ特异性[1] 。我们对 2 1例ＨＰＶ阳性喉良、恶性增生性病变 ,应用ＰＣＲ ＩＳＨ及ＩＳＨ进行ＨＰＶＤＮＡ检测 ,对比观察两种方法的结果 ,探讨ＨＰＶ感染的生物学特性 ,与喉组织病理学的关系及临床…     

水杨酸钠对豚鼠单离外毛细胞外向钾电流和静息电位及膜电容影响

目的　探讨水杨酸钠对豚鼠单离外毛细胞（ｏｕｔｅｒｈａｉｒｃｅｌｌ,ＯＨＣ） 钾电流（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｃｕｒｒｅｎｔ,ＩＫ）、静息电位（ｒｅｓｔｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ,ＲＰ） 和膜电容（ｍｅｍｂｒａｎｅ ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｃａｐａｃｉｔａｎｃｅ,ＭＥＣ） 的影响,分析水杨酸钠影响毛细胞功能的细胞电生理机制。方法　应用膜片钳全细胞记录技术,测试０．１ 和１ ．０ ｍｍｏｌ／Ｌ水杨酸钠用药前后ＯＨＣ的ＩＫ、ＲＰ和ＭＥＣ 变化。结果　水杨酸钠对ＩＫ 的影响具有时效和量效关系,即用药后有ＩＫ 先增加后降低的双相作用,而高浓度水杨酸钠无论是对ＩＫ 的增加作用还是降低作用都比低浓度时明显。ＲＰ平均约为－６０ ｍＶ,ＭＥＣ 平均约为３９ ｐＦ。水杨酸钠有降低ＲＰ和ＭＥＣ的作用,且均存在着量效关系,即高浓度时的作用大于低浓度时。水杨酸钠对ＲＰ和ＭＥＣ影响的时效关系不明显。结论　水杨酸钠具有影响ＯＨＣ两侧膜的Ｋ＋ 电导和细胞内外Ｋ＋ 分布的作用,并通过对ＩＫ、ＲＰ和ＭＥＣ的影响改变ＯＨＣ的兴奋性和机械活动特性,可能是水杨酸影响毛细胞功能的耳蜗机制之一。     

喉癌P53基因表达与放疗效果的关系

应用抗ｐ５３基因单克隆抗体，以免疫组织化学ＤＡＣＯＣＳＡＳｙｓｔｅｍ法染色技术，对７３例喉鳞癌组织标本进行检测。结果显示，Ｐ５３基因表达分为强度，中度表达及阴性表达。因此认为，可以把ｐ５３基因表达作为判定喉癌放疗预后及指导临床治疗的可靠指标。     

实验性自身免疫性内耳病耳蜗热休克蛋白70的表达

目的 探讨自身免疫性内耳病模型动物耳蜗热休克蛋白的表达。方法 利用同种异体内耳抗原免疫豚鼠,以建立自身免疫性内耳病（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｉｎｎｅｒ ｅａｒ ｄｉｓｅａｓｅ,ＡＩＥＤ）动物模型,并应用免疫组织化学及原位杂位技术,研究热休克蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｍｔｅｉｎ,ｈｓｐ）７０在正常对照组及ＡＩＥＤ模型动物实验组耳蜗中的表达情况。结果 对照组豚鼠螺旋神经节细胞中存在ｈｓｐ７０样蛋白基     

CD44蛋白在人喉癌中的表达及其临床意义

目的：ＣＤ４４基因是一各肿瘤转移相关基因。研究检测ＣＤ４４ｖ６蛋白拓喉癌中的表达及其临床意义。方法：用ＣＤ４４ｖ６单克隆抗体,通过免疫组化Ｓ－Ｐ法,对６９例喉鳞状细胞癌蜡块标本和１０例正常喉粘膜标本进行研究,并结合资料进行预后分析。结果：６９例喉鳞状细胞癌、１０例正常喉粘腊中ＣＤ４４ｖ６蛋白阳性表达率分别为５２．２％（３６／３９）和０．０％（０／１０）。ＣＤ４４ｖ６蛋白阳性表达与肿瘤发生部位、病理     

两种免疫调节剂辅助LAK细胞杀伤喉癌细胞的体外研究

为探讨如何提高白细胞介素－２（ＩＬ－２）／ＬＡＫ细胞过继免疫治疗的抗肿瘤作用，应用免疫调节剂分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）或ＣＤ３单克隆抗体协同ＩＬ－２诱导的健康人外周血淋巴细胞来源的ＬＡＫ细胞在体外扩增，测定其对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性。实验结果：①不同免疫调节剂对ＬＡＫ细胞扩增的影响：实验组三组细胞于体外扩增均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＭＰＳ组或ＣＤ３组细胞的扩增倍数比单纯应用ＩＬ－２组为高（Ｐ＜０．０１）；其中扩增倍数最高者为ＭＰＳ组，与ＣＤ３组相比，Ｐ＜０．０５。②不同免疫调节剂诱导的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性比较：在培养一周时，实验组三组对ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性均高于对照组，以ＣＤ３组及ＭＰＳ组杀伤活性最高，其杀伤活性均为５５．５％；于培养第二周，ＣＤ３组杀伤ＨＥＰ－２细胞活性仍较高，其他实验组细胞杀伤活性均明显下降。结论：免疫调节剂ＭＰＳ和ＣＤ３单克隆抗体均可通过增强ＬＡＫ细胞体外增殖和杀瘤活性而提高肿瘤过继免疫治疗效果。     

阻鼾器治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征

阻鼾器 (ｓｎｏｒｅｇｕａｒｄ ,ＳＧ)为预制的口腔矫正器 ,我们采用ＳＧ治疗 2 4例阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 (ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｓｌｅｅｐａｐｎｅａｈｙｐｏｐｎｅａｓｙｎ ｄｒｏｍｅ,ＯＳＡＨＳ)患者 ,并用多导睡眠描记法(Ｐｏｌｙｓｏｍｎｏｇｒａｐｈｙ ,ＰＳＧ) (国产ＧＫＤ 40 5Ａ六导睡眠图 )评价其疗效。报告如下。1　材料和方法1 .1 　 临床资料2 4例ＯＳＡＨＳ患者 ,男 2 1例 ,女 3例 ;年龄 3 6～ 6 5岁 ,平均 5 2岁。平均体重 75 .6ｋｇ ,平均身高1 6 6 .7ｃｍ。均排除严重牙周病、颞下颌关节病、严重小颏畸形、…     

制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离与纯化豚鼠内耳抗原

粗制内耳抗原 (ｃｒｕｄｅｉｎｎｅｒｅａｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＣＩＥＡｇ)广泛用于自身免疫性内耳病 (ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｉｎｎｅｒｅａｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＩＥＤ)的研究 ,包括建立动物模型和作为抗原检测ＡＩＥＤ患者血清自身抗体[1,2 ] 。但ＣＩＥＡｇ成分复杂 ,其中何种亚组份起关键作用尚不清楚。我们通过制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅｐｏｌｙａｃｒｙ ｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,简称制备性ＰＡＧＥ)分离纯化豚鼠ＣＩＥＡｇ的主要亚组份 ,为深入研究ＡＩＥＤ的发病机制和寻找内耳特异…     

喉癌中抗凋亡基因bcl-2和p53的表达及其与Epstein-Barr病毒的关系

肿瘤的发生不仅与细胞过度增殖相关 ,也与细胞凋亡减少有关。Ｂｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ/ｌｅｕｋｅｍｉａｇｅｎｅ 2 (ｂｃｌ 2 )基因是近年来发现的一种抑制凋亡基因。有作者注意到Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒ病毒 (ＥＢ病毒 )与ｂｃｌ 2基因具有同源性[1] 。ｐ5 3抑癌基因与恶性肿瘤发生的关系日益受到重视 ,ｐ5 3基因定位于人类第 17条染色体短臂 (17ｐ13) ,其基因的丢失或突变与人体多种肿瘤的发生、发展有密切关系。有研究表明 ,静止的Ｂ细胞几乎不表达ｐ5 3,而在被ＥＢ病毒感染的Ｂ细胞ｐ5 3表达明显增强。Ｎｉｅｍｈｏｍ等[2 ] 证明在…     

P物质对变应性鼻炎动物模型鼻粘膜上皮短路电流的影响

目的观察Ｐ物质（ＳＰ）作用于变应性鼻炎动物模型鼻粘膜引起的离子分泌改变导致的上皮表面短路电流（Ｓｈｏｒｔ－ｃｉｒｃｕｉｔｃｕｒｒｅｎｔ，Ｉｓｃ）的变化。方法以鸡蛋清蛋白致敏大鼠后，用Ｕｓｓ－ｉｎｇ室技术测定鼻粘膜上皮表面短路电流。并观察神经激肽受体（ＮＫ１）拮抗剂ＣＰ９６３４５、组胺Ｈ１受体拮抗剂吡拉明、Ｈ２受体拮抗剂雷尼替丁和河豚毒素对ＳＰ的阻断作用。结果经ＳＰ刺激，致敏大鼠鼻粘膜表面Ｉｓｃ显著增高。经四种物质预处理均能显著阻断ＳＰ引起的Ｉｓｃ变化。结论ＳＰ经感觉神经末梢释放后，可引起上皮表面离子电位变化、上皮通透性增高等一系列鼻粘膜病理变化。     

ORIGINAL ARTICLE CONTENTS OF 2001,VOL 7

Ｓｕｂｊｅｃｔ Ｔｉｔｔｌｅ Ａｕｔｈｏｒ Ｉｓｓｕｅ,ＰａｇｅＥＡＲＥｆｆｅｃｔｏｆＣａｌｐａｉｎｉｎｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎｉｎｄｕｃｅｄＴｙｐｅⅠａｆｆｅｒｅｎｔｎｅｕｒｏｎｌｅｓｉｏｎｉｎｔｈｅｃｏｃｈｌｅａＤＩＮＧＤａ ｌｉａｎ 1,1ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅａｕｄｉｔｏｒｙｂｒａｉｎｓｔｅｍｒｅｓｐｏｎｓｅａｎｄｂｒａｉｎｓｔｅｍｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎａｐｎｅａＺＨＡＮＧＲｏｎｇ 1,4ＡＥＯＡＥｏｆｎｏｒｍａｌｈｅａｒｉｎｇｙｏｕｔｈｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｎｖｉｒｏｎｍｅ…     

喉癌中p16基因突变和甲基化的研究

目的 探讨ｐ１６基因在喉癌发生发展中的作用和在喉癌中的失活机制。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙ－ｓｉｓ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染方法和ＰＣＲ甲基化敏感内匹酶方法检测３２例喉癌和相应癌旁组织的ｐ１６基因第１,第２外显子突变和甲基化热点区域部分内切酶     

用直接喉镜和尿道硬式内窥镜多方向观察喉腔

在全麻下，显微直接喉镜（显微喉镜）是观察喉的最佳方法。虽然此法在声带上面及其游离缘可显示清晰图像，但是并不能观察喉室、声带下面及声门下的病变。为了解决显微喉镜观察喉腔时所产生的盲区，该文作者介绍一种内窥镜技术，即在应用直接喉镜的同时使用尿道硬式内窥镜进行喉腔多方向观察。使用仪器为Ｎａｇａｓｈｉｍａ直接喉镜，德国ＫａｒｌＳｔｏｒｚ尿道硬式内窥镜（０°、３０°、７０°、１２０°，直径４ｍｍ，有效长度３０ｃｍ）ＫａｒｌＳｔｏｒｚ卤素光源（２５０Ｗ），Ｓｔｒｓｔｅｒ７８２型彩色摄像头（３ＣＣＤ）和高分辨…     

正常鼻咽上皮和鼻咽癌中FHIT基因变化的初步研究

以往研究表明 ,鼻咽癌频发染色体3ｐ14的缺失 ,故推测该缺失区存在与鼻咽癌发生发展密切相关的抑癌基因[1 ] 。脆性组氨酸三联体 (ｆｒａｇｉｌｅｈｉｓｔｉｄｉｎｅｔｒｉａｄ ,ＦＨＩＴ)基因是 1996年由Ｏｈｔａ等[2 ] 克隆的一个位于 3ｐ14 2区域的候选抑癌基因。其编码蛋白与二腺苷四磷酸 (Ａｐ4Ａ)不对称水解酶有 6 9%的同源性 ,具有Ａｐ4Ａ水解酶活性 ,主要参与细胞生长与生长抑制信号的调控[3 ] 。我们用巢式ＲＴ ＰＣＲ及自动测序法对鼻咽癌组织和正常鼻咽上皮组织中ＦＨＩＴ基因的改变情况进行了研究。一、材料与方法1.标本 :2 8例…