丹参多酚酸盐对老年不稳定型心绞痛患者血清细胞因子水平的影响

目的研究丹参多酚酸盐治疗对老年不稳定型心绞痛(UAP)患者血清细胞因子水平的影响。方法将72例UAP患者随机分为常规治疗组及丹参多酚酸盐治疗组(丹参多酚酸盐组),观察治疗前后血清白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素1(IL-1)以及可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平的变化,并与18名正常对照组作比较。结果UAP患者血清IL-18、IL-1、sICAM-1水平较正常对照组明显升高(P0.01),常规治疗组治疗后血清IL-18、IL-1较治疗前降低(P0.05或P0.01),而在丹参多酚酸盐组IL-18、IL-1、sICAM-1均较治疗前明显降低(P0.01),且丹参多酚酸盐组治疗后较常规治疗组下降明显(P0.05或P0.01)。结论IL-18、IL-1和sICAM-1可能不同程度参与老年不稳定型心绞痛的病理生理进程。丹参多酚酸盐对UAP患者的心血管保护作用与其显著降低IL-18、IL-1以及sICAM-1水平,从而抑制冠脉局部的炎症级联反应有关。     

增强型体外反搏联合丹参多酚酸盐治疗顽固性心绞痛的疗效及对炎性因子、血管内皮功能影响观察

目的 探讨增强型体外反搏(EECP)联合丹参多酚酸盐治疗顽固性心绞痛的疗效及对炎性因子、血管内皮功能的影响。方法 选取宝鸡高新人民医院2018年4月至2020年5月收治的126例顽固性心绞痛患者,按照随机数字表法分成EECP组、丹参多酚酸盐组、联合应用组,各42例。所有患者均给予常规西药治疗,在此基础上EECP组采用EECP治疗,丹参多酚酸盐组采用丹参多酚酸盐治疗,联合应用组则采用EECP联合丹参多酚酸盐治疗。比较三组临床疗效、血清金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)水平及血管内皮功能。结果 联合应用组总有效率较EECP组、丹参多酚酸盐组高(χ2=7.372、5.126,P 0.05);治疗后,三组血清MMP-9、TNF-α、CRP、内皮素-1(ET-1)水平与治疗前相比均降低(P 0.05),且联合应用组明显较同期EECP组、丹参多酚酸盐组低(P 0.05);三组血清一氧化氮(NO)与治疗前相比升高(P 0.05),且联合应用组明显较同期EECP、丹参多酚酸盐组高(P 0.05)。结论对顽固性心绞痛患者实施EECP联合丹参多酚酸盐治疗,可获得良好的疗效,能使患者心绞痛症状明显减轻,使血清炎性因子有效下调,且可显著改善血管内皮功能。     

强化胰岛素治疗对体外循环炎症反应的影响

目的探讨强化胰岛素治疗对体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换术炎性反应的影响。方法 30例CPB下行心脏瓣膜置换术患者随机分为强化胰岛素组(强化组,n=15)和对照组(n=15)。强化组术中血糖控制在3.9~10.0 mmol/L,术后控制在4.4~8.3 mmol/L;对照组血糖11.1 mmol/L时给予胰岛素治疗。分别于麻醉诱导后(T0)、CPB开始(T1)、CPB结束即刻(T2)、6 h(T3)、24 h(T4)和48 h(T5)时点测定血浆白细胞介素(IL)-6、肿瘤细胞坏死因子(TNF)-α浓度,并记录术后临床情况。结果两组TNF-α、IL-6浓度在T2、T3、T4时点均明显高于T0时点(P0.05);在T2、T3、T4时点,强化组TNF-α、IL-6浓度明显低于对照组(P0.05);强化组呼吸机支持时间明显短于对照组(P0.05)。结论强化胰岛素治疗能降低TNF-α、IL-6浓度表达,缩短呼吸机支持时间,减弱CPB引起的炎性反应。     

抑肽酶对体外循环中细胞因子的作用及影响

目的研究体外循环(CPB)心脏直视手术中细胞因子如肿瘤坏死因子TNF-α、白介素IL-6、白介素IL-8的变化,观察抑肽酶对体外循环炎性反应的抑制作用。方法20例心脏瓣膜手术患者随机分为抑肽酶组(A组)和对照组(C组),每组10例:对照组不给药,抑肽酶组给抑肽酶总量300万KIU,其中50万KIU为麻醉诱导前给予,250万KIU预充体外循环机内。分别于CPB前(T1)、升主动脉阻断半小时(T2)、CPB结束(T3)、停CPB后2h(T4)各时间点抽取静脉血,采用酶联免疫试剂盒测定TNF-α、IL-6和IL-8的水平。结果两组患者血浆TNF-α、IL-6、IL-8水平有明显增加(P<0.05或P<0.01),但与对照组相比,抑肽酶组血清中TNF-α、IL-6、IL-8的浓度明显受到抑制(P<0.01),升高的幅度明显低于对照组。结论在CPB过程中,抑肽酶可能通过降低TNF-α、IL-6、IL-8等细胞因子水平,从而减轻炎性反应达到减轻缺血再灌注损伤的目的。     

TLR4介导小鼠小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制研究

目的研究TLR4介导小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制。方法从C57BL/6J小鼠中提取分离原代小胶质细胞,分组1中,A组:小胶质细胞;B组:小胶质细胞+阴性siRNA转染;应用C组:小胶质细胞+TLR4-siRNA转染。应用Q-PCR和Western Blot检测分组1中TLR4的表达。分组2中,D组:小胶质细胞+等量的对照溶剂(0.9%NaCl);E组:小胶质细胞+自噬抑制剂(3-MA);F组:小胶质细胞+control-siRNA+3-MA;G组:小胶质细胞+TLR4-siRNA+等量的对照溶剂(0.9%NaCl);H组:小胶质细胞+TLR4-siRNA+3-MA。Western Blot检测LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TLR4、MyD88和核转录因子(NF-κB)蛋白表达。ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 (1)A组和B组TLR4 mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);与B组相比,C组TLR4 mRNA和蛋白表达水平下调(P <0.05)。(2)D组、E组和F组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平无明显变化(P>0.05);与D组相比,G组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平下调(P <0.05);与F组相比,H组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平下调(P <0.05)。E组和F组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平无明显变化(P>0.05);与F组相比,H组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降(P <0.05);与G组相比,H组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降(P <0.05)。结论 TLR4-siRNA可抑制TLR4介导的小胶质细胞自噬,从而减轻自噬引起的脑出血炎症损伤。     

慢性心力衰竭患者促炎性和抗炎性细胞因子的变化及临床干预研究

目的 探讨慢性心力衰竭(CHF)患者炎性细胞因子变化对心功能的影响及临床干预后的效果.方法 选 择100例CHF患者(心衰组)及50例无心脏病的健康体检者(对照组),取静脉血6 ml,采用CBA蛋白分析系统检测白细胞介素-8(IL 8)、TNF-α、白细胞介素-10(IL-10)水平,并做心脏超声检测.心衰组中随机选择68例分为 西拉普利组和常规治疗组治疗,两组分别25例和20例完成随访12周.治疗12周时检测血清IL-8、IL-10和TNF-α水平及心脏超声.结果 心衰组患者血清中IL-8、TNF-α、IL-10水平均明显高于对照组(P<0.01);IL-8、TNF- α及IL-10三者间互呈正相关(P<0.05);IL-8/IL-10及TNF-α/IL-10比值随CHF的加重而升高(P<0.05);西拉普利组治疗后较治疗前血清IL-8、TNF-α水平显著下降(P<0.05),IL-10水平呈上升趋势,心脏超声除左心室舒 张末期内径外,各项指标均有显著改善;常规治疗组治疗后较治疗前仅LVEF和缩短分数有所改善,细胞因子水平 无显著变化.结论 CHF时各种炎性细胞因子分泌异常,抗炎性细胞治疗有望成为治疗CHF的新方法.     

乌司他丁对心脏瓣膜置换术患者CPB中血浆TNF-α、IL-8、IL-10水平的影响

目的观察乌司他丁对体外循环（CPB）患者血浆中TNF-α、IL-8、IL-10水平的影响。方法选取心脏瓣膜置换手术患者50例,随机分为对照组和实验组,各25例。实验组在麻醉诱导后开始恒速静注乌司他丁6000U／kg（30min内输完）,然后以1000U／（kg·h）的速度持续静滴至手术结束;对照组不给予乌司他丁。分别于麻醉诱导前（T1）、CPB开始后1h（T2）及CPB停止后1（T3）、24（T4）h抽取动脉血,用ELISA法检测血浆TNF-α、IL-8、IL-10水平。结果T2-T4时两组血浆TNF-α、IL-8和IL-10水平与CPB前比较,P均〈0．05;T2-T4时实验组血浆TNF-α和IL-8水平明显低于对照组（P〈0．05）,IL-10水平明显高于对照组（P〈0．05）。结论乌司他丁能抑制CPB过程中TNF-α和IL-8释放,促进IL-10的释放,有效降低由CPB引发的炎症反应。     

心力衰竭患者血清中TNF-α,IL-1及IL-6的变化及培哚普利对其影响

目的 :探讨心力衰竭 （CHF）患者血清中 TNF-α,IL-1及 IL -6的变化及培哚普利对其水平的影响。方法 :采用放射免疫方法检测 42例服用培哚普利的 CHF患者、42例常规治疗 CHF患者治疗前后及 3 0例健康人血清中TNF-α,IL-1及 IL-6的水平。结果 :184例 CHF患者较健康人血清中 TNF-α,IL-1及 IL-6显著增高 （P<0 .0 1） ,且随着心功能损害程度加重而升高。 2培哚普利组与常规治疗组治疗前后血清中 TNF-α,IL -1及 IL -6水平有显著性差异 （P<0 .0 1） ,且培哚普利组较常规治疗组治疗后血清中 TNF-α,IL -1及 IL -6降低更为明显。结论 :CHF患者TNF-α,IL-1及 IL-6水平与心功能状态密切相关。培哚普利比常规治疗具有较明显降低 TNF-α,IL-1及 IL-6的水平的作用 ,可减缓心脏损伤的进程 ,达到保护和改善 CHF患者的心功能     

丹参多酚酸盐对不稳定性心绞痛患者的纤溶活性的影响

目的观察丹参多酚酸盐对不稳定性心绞痛患者的血浆纤溶活性的影响。方法选取2014年1月~2015年3月在我院心内科住院的不稳定性心绞痛患者60例,随机分为常规治疗组30例与丹参多酚酸盐治疗组30例,另设正常对照组20例;治疗前检测各组纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI-1)、纤溶酶原激活剂(t PA),治疗2周后复查上述检查项目,观察其变化及疗效。结果丹参多酚酸盐治疗组临床有效率为90%,常规治疗组为60%,丹参多酚酸盐治疗组疗效优于常规治疗组(P0.05);丹参多酚酸盐治疗组心电图改善率为90%,常规治疗组为66.6%,丹参多酚酸盐治疗组心电图改善率优于常规治疗组(P0.05)。不稳定性心绞痛患者PAI-1水平高于正常组,而tPA水平低于正常组;丹参多酚酸盐治疗组较常规治疗组PAI-1水平下降较为明显,tPA水平升高较为明显。结论丹参多酚酸盐能改善不稳定性心绞痛患者纤溶活性,稳定冠脉斑块,缓解症状,有效治疗不稳定性心绞痛。     

DPC4基因通过mTOR信号通路诱导胰腺癌细胞自噬

目的验证过表达DPC4基因对胰腺癌细胞增殖侵袭的抑制作用,探讨mTOR信号通路对其激活自噬的调控作用。方法构建DPC4过表达载体,转染胰腺癌JF305细胞,CCK-8、Transwell检测其对胰腺癌JF305细胞的增殖侵袭能力,透射电镜观察自噬小体,Western blotting法检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、mTOR、p-mTOR、4EBP1、p-4EBP1的表达。结果过表达DPC4可以抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭;激活自噬,电镜下DPC4过表达细胞中自噬颗粒明显增多;自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ在过表达DPC4的JF305细胞中表达升高,同时下调p-mTOR和p-4EBP1的表达水平。结论 DPC4基因可以抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力,其作用机制与抑制mTOR信号通路、激活自噬相关。     

心脏瓣膜置换术患者围术期细胞因子浓度变化以及脑苷肌肽的影响

目的探讨体外循环（CPB）下心脏瓣膜置换术患者围术期血清细胞因子浓度的变化以及脑苷肌肽对其影响。方法40例CPB下心脏瓣膜置换术患者，随机分为脑苷肌肽组（A组）和对照组（B组），每组20例。A组于麻醉诱导后静脉注射脑苷肌肽20ml（每毫升含神经节苷脂50pg、多肽3．2mg），B组给等容积生理盐水。分别于给药前（T1）、CPB结束（12）及结束后2h（T3）、6h（T4）、24h（T5）各时间点采集颈内静脉球部血，测定细胞因子白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。结果两组IL-6、IL-8和TNF-α浓度在CPB后均显著升高，组间比较显示B组IL-6和IL-8浓度在T3、T4和髑时间点均显著高于A组（P〈0．05），B组TNF-α浓度在12、T3、T4和T5时间点均显著高于A组（P〈0．05）。结论脑苷肌肽可以减少体外循环心脏瓣膜置换手术中炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α的释放。     

低温肺保护液肺动脉灌注在体外循环中的肺保护作用

目的研究低温肺保护液在体外循环（CPB）心脏直视手术中对肺损伤的保护作用。方法选择30例重度肺动脉高压先心病患者,随机分为对照组和肺保护组,每组15例。肺保护组CPB术中一次性从肺动脉灌注低温肺保护液,对照组未行肺动脉灌注。分别于麻醉诱导前（T1）,阻断升主动脉30min（T2）,CPB结束后1h（T3）、24h（T4）、36h（T5）取桡动脉血标本动态检测两组患者各时间点的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）;在T1、T3、T4、T5各时间点对比观察两组术后肺泡一动脉血氧分压差（A—aDO2）和呼吸指数（RI）。结果两组一般资料差异无统计学意义（P〉0．05）;CPB开始后,两组桡动脉血TNF-α、IL-10进行性增高。TNF-α于CPB结束后1h达到最高[对照组（148．42±23．10）ng／L,保护组（103．29±32．15）ng／L],后逐渐下降,但仍高于CPB前,对照组增高更显著（P〈0．01）。IL-10于CPB结束后24h达到最高[对照组（66．75±25．82）ng／L,保护组（85．12±20．68）ng／L],后逐渐下降,但仍高于CPB前,肺保护组增高更显著（P〈0．05）。CPB开始后,两组A—aD02和RI进行性增加（A—aD02对照组195．8±72．5,保护组161．3±33．2;RI对照组0．72±0．05,保护组0．56±0．08）;对照组T3、T4、T5的A—aDO2及RI明显高于肺保护组（P〈0．01）。结论CPB术后存在肺损伤,低温肺保护液可以抑制炎症因子TNF-α的产生,上调抗炎因子IL-10的释放,减轻肺损伤,改善术后肺功能。     

大鼠心脏自噬昼夜节律的老年化改变研究

目的探讨大鼠心脏自噬昼夜节律的老年化改变及可能机制。方法随机选取健康雄性SD大鼠48只,其中6月龄大鼠24只(青年组)和26月龄大鼠24只(老年组)。观察大鼠昼夜活动习性,分别在03:00,06:00,09:00,12:00,15:00,18:00,21:00,24:00各时间点收集心脏样本,运用冷冻切片免疫荧光染色结合激光扫描共聚焦成像技术、亚细胞结构细胞核-细胞质分离技术和免疫印迹技术检测心脏自噬规律及可能调控机制。结果青年组大鼠昼伏夜出,自噬昼夜节律曲线明显,其中18:00 LC3-Ⅰ转化LC3-Ⅱ明显高于12:00,而在15:00细胞核C/EBPβ表达明显高于18:00(P<0.05);而老年组大鼠夜间及昼间均嗜睡,LC3-Ⅰ转化LC3-Ⅱ和细胞核C/EBPβ昼夜无节律性变化。结论衰老改变心脏自噬的昼夜节律,核转录因子C/EBPβ参与其调控。     

降钙素原在体外循环心脏术后早期并发症中的预测价值研究

目的:评价血降钙素原(PCT)在体外循环心脏术后早期并发症中的预测价值。方法:126例体外循环心脏术后患者,于术后24 h检测血PCT、C反应蛋白(CRP)、IL-6、IL-8、TNF-α,并进行急性生理学与慢性健康状况(APACHEⅡ)评分及SOFA评分。按是否出现并发症分为并发症组与对照组,比较2组间各项指标是否存在差异,并将各项炎性指标与APACHEⅡ评分及SOFA评分行相关性分析。结果:并发症组56例,对照组70例。并发症组手术时间[(281±49)min vs(237±51)min]、体外循环时间[(138±35)min vs(116±39)min)]及主动脉阻断时间[(83±22)min vs(62±18)min]均显著长于对照组。并发症组PCT、IL-6、IL-8、TNF-α、APACHEⅡ评分均显著高于对照组(均P0.05),而CRP无明显差异。PCT、IL-6、IL-8、TNF-α与APACHEⅡ评分、SOFA评分均呈明显正相关,其中PCT与APACHEⅡ评分及SOFA评分相关性最高(r=0.87、0.92,P0.05)。CRP与APACHEⅡ评分及SOFA评分无相关性。结论:PCT值可作为评价体外循环心脏术后早期病情严重程度及预后的参考指标。     

α-硫辛酸通过mTOR通路抑制缺血再灌注诱导的PC12细胞自噬性凋亡

目的研究α-硫辛酸(LA)对PC12细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制。方法传代培养PC12细胞,PC12细胞缺氧/复氧(氧糖剥夺4 h,复氧18 h)模拟缺血再灌注损伤模型。实验分为正常组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+α-LA、缺氧/复氧+自噬抑制剂巴弗洛霉素(Baf)A1组。CCK8筛选α-LA的有效作用浓度;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Western印迹检测细胞促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、酶切caspase-3、自噬标志分子SQSTM-1/P62、LC3-Ⅱ/Ⅰ及mTOR通路的表达变化。结果缺氧/复氧显著降低PC12细胞的存活率(P<0.05),Western印迹结果显示Bax、酶切caspase-3、LC3-Ⅱ/Ⅰ的表达水平均显著升高(P<0.05),P62和p-mTOR的表达水平降低(P<0.05);与缺氧/复氧组比较,给予α-LA和Baf A1均能显著降低缺氧/复氧诱导的凋亡水平(P<0.05)。结论α-LA通过抑制缺氧/复氧诱导的过度自噬进而减少过度自噬诱导的细胞凋亡。     

美托洛尔对大鼠冠状动脉微栓塞心肌中炎性细胞因子表达及心功能的影响

目的探讨美托洛尔对大鼠冠状动脉微栓塞心肌组织中炎性细胞因子表达及心功能的影响。方法雄性SD大鼠162只,经左心室注射42μm微栓塞球,建立大鼠冠状动脉微栓塞模型,将存活的100只大鼠随机分为微栓塞组(CME组,50只)、关托洛尔组(CME-M组,50只),另以左心室注射等量生理盐水为假手术组(S组,50只),各组按注射后3、6、12、24 h、4周共5个时间点,每个时间点各10只,观察炎性细胞因子在心肌组织中表达水平及对心功能的影响。结果与S组比较,CME组在微栓塞后3、6、12、24 h时间点TNF-α、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),LVEF显著下降(P<0.05),4周两组比较,无统计学差异。与CMF组比较,CME-M组3、6、12、24 h时间点TNF-α、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),IL-10的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),4周两组比较,无统计学差异。与CME组比较,CME-M组12、24 h和4周LVEF显著升高(P<0.05)。结论美托洛尔可以明显改善冠状动脉微栓塞后心功能损伤,其作用机制可能与心肌炎性细胞因子表达有关。     

缬沙坦联合卡维地洛治疗对心力衰竭患者炎性因子及血管紧张素Ⅱ水平的影响

目的探讨缬沙坦对老年慢性心力衰竭患者血浆TNF-α、白细胞介素6(IL-6)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响。方法将95例老年慢性心力衰竭患者随机分为缬沙坦治疗组(对照组,48例)和缬沙坦联合卡维地洛组(联合治疗组,47例)。采用放射免疫法测定患者治疗前和治疗后3个月血浆TNF-α、IL-6和AngⅡ水平的变化。结果与治疗前比较,对照组、联合治疗组治疗3个月后血浆TNF-α、IL-6水平均有明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,联合治疗组TNF-α和IL-6下降更为显著,差异有统计学意义(P<0.05);两组AngⅡ水平在治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论单用缬沙坦或缬沙坦联合卡维地洛治疗慢性心力衰竭均能降低TNF-α、IL-6水平,心功能得到改善;缬沙坦联合卡维地洛治疗在降低TNF-α、IL-6水平和改善心功能方面优于单用缬沙坦。     

肺动脉灌注在体外循环中对血氧合指数及支气管灌洗液细胞因子的影响

目的观察低温肺保护液肺动脉灌注在体外循环心脏直视手术中对血氧合指数及支气管肺泡灌洗液细胞因子的影响,探讨肺动脉灌注对减轻肺损伤的生物学机制。方法选择30例重度肺动脉高压先心病患者,随机分为对照组和肺保护组,每组15例。肺保护组,体外循环术中一次性从肺动脉灌注低温肺保护液,对照组未行肺动脉灌注。分别于麻醉诱导前（T1）、体外循环结束（T2）、手术结束（T3）和术后6h（T4）测算氧合指数（PaO2／FiO2）。收集手术结束时支气管肺泡灌洗液,检测其中肿瘤坏死因子-d（TNF—α）和白细胞介素-6（IL-6）。结果两组一般资料差异无统计学意义（P〉0．05）;肺保护组患者体外循环结束、手术结柬、术后6h的氧合指数分别为（421±31）、（382±41）和（370±39）mmHg,明显高于对照组的（340±33）、（321±38）和（315±41）mmHg（P〈0．05）。支气管肺泡灌洗液的TNF—α和IL-6水平肺保护组分别为（0．985±0．378）、（156．736±52．485）μg／L,低于对照组的（15．589±6．385）、（735．967±83．485）μg／L（P〈0．01）。结论肺动脉灌注低温肺保护液不仅可以改善氧合,同时抑制支气管肺泡灌洗液中的TNF—α和IL-6的释放,减轻肺损伤,改善术后肺功能。     

辛伐他汀对哮喘小鼠细胞自噬和炎症的影响及其机制的实验研究

目的观察不同剂量辛伐他汀对哮喘小鼠自噬和炎症的影响及机制。方法32只小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、低剂量辛伐他汀组(C组40 mg/Kg)、高剂量辛伐他汀组(D组60 mg/Kg),每组8只。B、C、D三组采用卵清蛋白+氢氧化铝造模,C、D组同时给予辛伐他汀40 mg/kg、60 mg/kg灌胃。采用H.E染色观察肺组织,Western blot法检测LC3Ⅱ/Ⅰ、mTOR、p-mTOR,RT-PCR法检测Atg5和Beclin1 mRNA。结果A组支气管未见炎症细胞浸润,管腔规则、黏膜上皮正常;B组可见大量炎症细胞浸润,管壁增厚,气道黏膜增生;C、D组上述表现较B组减轻,且D组改善更明显。与A组比较,B组LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5 mRNA、Beclin1mRNA增加,p-mTOR/mTOR降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D两组LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA增加,p-mTOR/mTOR降低,D组上述指标变化更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠自噬水平增加,p-mTOR/mTOR信号通路蛋白降低;辛伐他汀可能通过阻断mTOR信号通路进一步提高LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5 mRNA、Beclin1mRNA水平,从而缓解气道炎症。     

谷氨酸诱导大鼠结肠 Cajal 间质细胞构建自噬模型

目的通过谷氨酸诱导离体大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)构建细胞自噬模型。方法使用不同浓度的谷氨酸不同时间点作用于原代培养的大鼠结肠ICC,免疫荧光鉴定大鼠结肠ICC细胞;CCK-8法检测谷氨酸对ICCs活力的影响;Western印迹检测不同浓度谷氨酸在不同作用时点对大鼠结肠ICC自噬蛋白微管相关蛋白轻链(LC)3表达水平的影响;透射电镜观察谷氨酸干预后细胞内自噬体和超微结构的变化。结果与空白组相比,谷氨酸(5 mmol/L)24 h显著降低大鼠结肠ICC活力(P<0.01)。谷氨酸(5 mmol/L)作用6 h、24 h均可显著提高自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值(P<0.05),其中以5 mmol/L谷氨酸作用24 h的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值最高(P<0.01)。透射电镜检测5 mmol/L谷氨酸干预大鼠结肠ICC 24 h发现,细胞内自噬空泡和自噬体数量明显增加。结论谷氨酸诱导大鼠结肠ICC自噬模型的最佳浓度和时间为5 mmol/L和24 h。