改良Heron法的同种异体心脏移植模型建立

背景:啮齿类动物心脏移植模型分为工作模型和非工作模型,非工作模型相对于工作模型,手术时间短、成功率高,其中以Heron法最为显著。目的:对Heron法建立大鼠心脏移植模型的手术方法进行改良,建立更合理、符合实验需要的心脏移植模型,以利于后续实验研究。方法:对Heron法进行改良,将受体右颈外静脉套管插入供心右肺动脉,右颈总动脉套管插入供心主动脉,环扎固定,供心左肺动脉结扎,从而快速、高效地建立改良的心脏移植模型。观察大鼠移植成功率、并发症、总手术时间、受体血管套管准备时间,供心摘取时间,颈部移植时间及供心冷缺血时间。结果与结论:单人操作连续进行正式实验25次,移植成功24次,成功率96%。全组无吻合口漏血、血液回流障碍,术后受体无死亡。每例手术总时间需50～60min;受体血管套管准备时间为(18±3)min;供心摘取时间为(10±1)min;颈部移植时间为(6±1)min;冷缺血时间为(16±1)min。结果表明,改良Heron法建立心脏移植模型,无需显微外科操作,是一种冷缺血时间短,更合理、实用、稳定可靠和易于复制的器官移植研究动物模型。     

改进的大鼠心脏异位移植模型的应用

目的 以0no建立的大鼠心脏异位移植术为基础，并对其进行简化和改进。方法 供体为SD大鼠，受体为Wistar大鼠，将供心升主动脉和肺动脉分别与受体的腹主动脉和下腔静脉吻合。结果 50次正式实验成功率达到85％，手术时间和从心缺血时间缩短，心肌保护良好，移植心存活时间2－14d。结论 该方法方便、简单，是研究器官移植排斥反应以及筛选免疫抑制药物的一种较为理想动物模型，值得进一步推广。     

建立小鼠腹腔心脏移植模型的方法改进

背景:小鼠心脏移植模型目前有颈部移植和腹腔移植。由于颈部空间狭窄,颈总动脉相对细小,移植心脏易于周围组织粘连,限制移植心脏搏动,不利于移植物长期观察。腹主动脉相对较粗,易于吻合,且长期血管通常率高,能够对移植心脏长期观察进行慢性移植物血管病变研究。目的:对小鼠腹部心脏移植的技术方法进行改进,为进行移植免疫学研究提供动物模型。方法:采用供心主动脉与受体腹主动脉、供心肺动脉与受体下腔静脉端侧吻合方法对小鼠进行腹部心脏移植,按随机数字表法将小鼠分为3组,同系移植组为同种同基因C57→C57,同种移植组为同种异基因Babl/c→C57,抗CD45RB mAb组为抗CD45RB mAb 200μg腹腔注射Babl/c→C57。以供心搏动有力,且小鼠存活72h以上视为移植成功。设移植后40d为观察终点。结果与结论:共实施手术36例次,受体存活30只,成功率为83.3%。其中受体准备时间为(15±2)min,供心摘取时间为(8±1)min,血管吻合时间为(33±2)min。抗CD45RB mAb腹腔注射组小鼠移植心脏存活时间较同种移植组明显延长(P=0.001)。提示所建立的小鼠心脏移植模型稳定可靠,可用于移植免疫学方面的研究。抗CD45RB mAb可明显延长移植心脏存活时间。     

大鼠腹腔心脏移植技术的改良

目的 探讨大鼠腹腔心脏移植手术技术的改良。方法 采用Ono创建的大鼠异位心脏移植模型，即将供体心脏主动脉和肺动脉分别与受体腹主动脉和下腔静脉吻合，对手术方法作了部分改进，缩短手术时间和移植心脏缺血时间。结果 50次实验手术成功率88％。结论 新技术的采用降低了大鼠腹腔心脏移植模型的制作难度，手术失败的主要原因是吻合口出血，减少术中出血是保证手术成功的关键，吻合血管时应遵守“宁慢勿漏”的原则。     

袖套法建立大鼠肺移植模型的手术技巧

背景:建立大鼠肺移植动物模型是研究肺移植后病理生理过程及其治疗的基础和关键,但因其需要精细外科技术,难度较大,限制了这一模型的应用。目的:探讨袖套法建立稳定的大鼠肺移植模型的手术操作技巧。方法:纳入60只大鼠,采用改良的三袖套技术建立大鼠左肺原位移植模型30例。供肺植入血管、支气管套接吻合的技巧:受体肺静脉采用90°角分布的"4针悬吊法",使塌陷的静脉血管开口完全张开且方向固定,减少受体静脉干短拙或强行套入导致血管壁撕裂的可能。受体肺动脉采用120°角分布的"3针悬吊"兜开,套接时应注意供肺套管的方向。最后支气管采用内支架吻合。计算各阶段手术时间及移植成功率。结果与结论:30例大鼠肺移植手术成功率为90%,移植后存活率100%,左供肺摘取需时(3±1)min,供肺完成体外套管时间分别为:肺动脉(2.0±0.5)min、肺静脉(3±1)min、支气管(2.0±0.5)min,供受体动静脉和支气管套管吻合时间分别为:肺动脉(4±1)min、肺静脉(8±3)min、支气管(2.0±0.5)min,总手术时间(55±10)min。提示改良的三袖套技术建立大鼠肺移植模型操作简便,手术成功率高,可为大鼠肺移植缺血再灌注损伤研究提供稳定可靠的动物模型。     

大鼠肺移植模型的改良

背景：建立大鼠原位肺移植模型是研究肺移植后慢性排异反应的关键,但因其需要精细外科技术,难度较大,限制了这一模型的应用。 目的：改良麻醉和肺移植过程,建立快速、安全、具有可重复性的大鼠肺移植模型。 方法：共完成42只大鼠动物实验,供体受体各21只。采用胸骨正中切口解剖供体左肺并置入套管(用静脉留置针套管剪取1.5 mm长制成)获取大鼠供肺。大鼠受体经左侧开胸,利用套管技术吻合完成供肺植入。记录并计算手术时间及移植成功率。 结果与结论：移植后大鼠均存活,大鼠供肺获取时间平均为(35.3±5.1) min;供肺套管时间平均为(12.5±    4.6) min;大鼠受体肺移植时间平均为(50.2±3.3) min;吻合时间平均为(27.7±6.2) min。开放肺动、静脉血流后,全肺迅速变红,血流灌注充分,静脉回流通畅;恢复机械通气后,所有移植肺膨胀良好。结果证实,改良后的麻醉和肺移植技术可为大鼠肺移植的免疫与排异研究提供稳定、可靠、可重复的动物模型。     

大鼠异位心脏移植模型的改进及组织学研究

目的:在Ono模型基础上,建立简单、可靠的大鼠腹腔异位心脏移植模型。方法:以Wister大鼠为供体,SD大鼠为受体,改良建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为3组:正常Wister大鼠作为对照组;移植后亚急性排斥反应组(术后2周);移植后慢性排斥反应组(术后8周)。分组喂养后按规定时间收获心脏标本进行组织形态学观察。结果:手术成功率为87.5%。其中麻醉过深死亡2例,疑青霉素过敏死亡1例,术中出血过多死亡4例。供心移植吻合时间(24.3±7.6)min,供心冷缺血时间(34.5±8.2)min,腹部触诊移植心脏搏动时间(16.8±7.4)d。组织形态学观察示:移植心脏心肌组织内有大量粒细胞浸润;随着移植后时间延长,CAV逐渐加重,冠脉数量减少,心肌萎缩并心肌纤维化发生。结论:改良Ono模型建立的心脏移植模型具有简单、可靠的优点。收获的移植心脏标本在组织形态学上反映了CAV和心肌纤维化发生、发展的过程,为研究心脏移植后相关疾病提供理想的组织标本。     

大鼠"二袖套"法双重灌注全血供肝移植模型的建立

目的：建立一个供肝灌注良好受体无肝期明显缩短及移植肝全血供稳定的肝移植动物模型。方法：“二袖套”法在Kamada吻合血管基础上改良,供肝分别经腹主动脉和门静脉双重全肝脏灌注;受体肝脏分步切除,肝上下腔静脉采用缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉分别用袖套法吻合。移植肝脏动脉重建采用单纯血管套入式吻合或血管缝合的方法,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果：共施行全血供大鼠原位肝脏移植76例（不包括预试验）,手术成功率93．406,1周存活率86．8％。结论：娴熟的显微外科技术、有效改良措施和注重手术细节是手术成功的保障,良好的灌注、受体无肝期的缩短及重建移植肝脏动脉血供能有效提高动物模型的稳定性。     

改良法构建大鼠减体积肝移植模型

背景:目前有关活体肝移植后肝脏再生的研究较少。在大鼠肝移植实验中不断改进手术方法和技术,提高肝移植成功率是进行大鼠肝移植研究和获得可靠实验数据的基础。目的:验证以改良方法构建减体积肝移植大鼠模型的有效性。方法:选用健康SD大鼠,70对制备减体积肝移植改良前模型,100对制备减体积肝移植改良后模型。供体为雌性,受体为雄性,供体体质量比受体轻10g左右。改良前方案采用取下全肝后在修肝盆中进行减体积肝移植。改良后方案如下:供体采用单人裸眼操作,在取肝的过程中即进行减体积操作;修肝时将套管柄置于门静脉和肝下下腔静脉的正前方,将幽门静脉结扎点外翻于套管外并置于套管柄的左侧,即肝脏的左侧;将右肾静脉结扎点外翻于套管外并置于套管柄的右侧,即肝脏的右侧;供肝套管完成后用灌注液对门静脉和肝下下腔静脉进行冲洗;然后以左膈静脉为标识点进行7/0无损伤血管缝线吊线;受体采用双人裸眼配合操作,肝上下腔静脉吻合时,左右固定位点采用"8"字形外翻缝合,后壁和前壁分别采用连续吻合,门静脉和肝下下腔静脉采用改良的双袖套法,胆管支撑管法建立大鼠减体积的稳定模型。结果与结论:改良后供体手术时间为(32±2)min,修肝时间为(6±2)min,受体手术时间为(40±3)min,无肝期时间为(14±3)min。移植成功率为92%,移植后3d生存率为85%,移植后2周生存率83%。与改良前比较,移植后并发症发生率降低(P0.05),供肝的冷保存时间缩短(P0.05)。提示改良后的大鼠减体积肝移植模型比较稳定、可靠,移植成功率较高,移植后并发症发生率较低,为研究减体积肝移植后肝脏再生提供了有效的改良手段。     

改良三套管法建立大鼠左肺原位移植模型

背景:肺移植是治疗终末期肺部疾病的惟一方法。建立肺移植动物模型是肺移植基础研究的首要条件。目的:建立一种简便、稳定和有效的同种大鼠异体左肺原位移植模型。方法:50只雄性SD大鼠随机分为供体以及受体,采用改良三套管法进行大鼠左肺原位移植。首先完成供肺制备,并将供肺置于受体原左肺上方并保持供肺于4℃LPD液环境中。按照左肺动脉-左肺静脉-左肺支气管的顺序依次完成供肺与受体相应结构的吻合。然后依次开放左肺静脉-肺动脉,调整潮气量,离断受体原左肺。观察手术成功率、手术时间,5周后对受体行血气分析。结果与结论:手术成功率92%,手术时间为(55±3)min,术后存活均达5周。5周后阻断右肺门15min前、后左肺静脉取血,血气分析差异无显著性意义(P0.05)。提示新改良的三套管法是一种简便稳定有效的大鼠原位左肺移植模型。     

Establishment of simultaneous pancreas and kidney transplantation (SPK) model with cuff technique and portal venous drainage in rats

Objective: To establish a simultaneous pancreas and kidney transplantation (SPK) model in the rat. Methods: SD rats served as donors and recipients. The donor portal vein and the recipient superior mesenteric vein were anastomosed and the donor renal veins and recipient renal veins were anastomosed by cuff method. Arterial reconstruction was carried out by end to side anastomosis of the donor abdominal aorta to the recipient abdominal aorta. Enteric drainage was performed by side to side anastomosis between donors' duodenum and recipients' jejunum. The donor ureter -bladder valve was anastomosed to the bladder of recipients.Results: Out of 30 cases of SPK transplantation, 24 had normal serum glucose and serum creatinine after operation. The successful rate was 80 %. Conclusion: This model of SPK in rats is stable and reliable, which could be applied for further scientific research.     

肠造瘘式异基因型大鼠胰十二指肠移植模型的建立

背景：大鼠胰腺移植模型是进行胰腺移植病理生理及移植免疫研究的主要动物模型,但大鼠胰腺模型存在手术难度大、成功率低等缺点,而采用肠造瘘的大鼠胰腺移植能简化操作过程、提高造模成功率。 目的：通过显微外科技术建立一种简单、稳定的异基因大鼠胰腺移植模型。 方法：将供、受体腹腔动脉端侧吻合,供体门静脉与受体左肾静脉以自制导管行袖套吻合,移植十二指肠近端结扎,远端行腹壁造瘘,建立SD→Wistar的糖尿病大鼠胰腺移植模型。 结果与结论：共完成大鼠胰腺移植手术40例,其中34只大鼠术后血糖正常且存活超过3 d,移植成功率为85%。受体大鼠平均存活(8.97±2.05) d,移植后7~10 d为死亡高峰期,移植物呈急性排斥反应病理改变。该模型操作相对简单、成功率高,能够用于胰腺移植中诸如免疫排斥等方面的研究。     

Research of combined liver-kidney transplantation model in rats

Objective: To set up a simple and reliable rat model of combined liver-kidney transplantation. Methods: SD rats served as both donors and recipients. 4℃ sodium lactate Ringer's was infused from portal veins to donated livers,and from abdominal aorta to donated kidneys, respectively. Anastomosis of the portal vein and the inferior vena cava (IVC) inferior to the right kidney between the graft and the recipient was performed by a double cuff method, then the superior hepatic vena cava with suture. A patch of donated renal artery was anastomosed to the recipient abdominal aorta. The urethra and bile duct were reconstructed with a simple inside bracket. Results: Among 65 cases of combined liver-kidney transplantation, the success rate in the late 40 cases was 77.5%. The function of the grafted liver and kidney remained normal. Conclusion: This rat model of combined liver-kidney transplantation can be established in common laboratory conditions with high success rate and meet the needs of renal transplantation experiment.     

大鼠腹腔心脏异位移植模型的改进

目的改进传统大鼠腹腔心脏异位移植模型,提高成功率。方法完全摘取供体心肺,离体供心灌注停跳;在松弛的状态下结扎静脉系统,端侧吻合采取间断+连续的缝合方法;先开放远心端再开放近心端,同时按摩心脏。结果传统方法组(n=20)成功14只,动脉吻合口出血2只、心脏复跳失败2只、吻合口狭窄2只;改进方法组(n=20)成功18只,2只死于吻合口出血。传统方法组手术成功率为70%,改进方法组为90%(P>0.05)。结论①快速摘取心肺,离体心脏灌注保护,操作简单,热缺血时间短,效果肯定,对供心的保护效果好。②松弛的状态下结扎静脉系统,对心房、冠脉影响非常小。③采取间断+连续的缝合方法,因吻合口狭窄造成手术失败的可能性很低,④合理定位,避免吻合完毕供心动脉扭曲,从而影响复跳。⑤注意受体鼠的保温、消毒及血容量丧失非常关键。⑥利用心外膜起搏导线获得了供心的动态心电图。     

改进的小鼠颈部心脏移植模型的制作

目的 探制小鼠颈部心脏移植模型手术技术的改进。方法 采用供心主动脉与受体颈总动脉侧壁长度相近的切口行端一侧连续吻合的方法进行４０次小鼠颈部心脏移植。结果 应用该方法使供心总缺血时间缩短至３０分钟；７天存活率提高到９７％。结论 新技术的采用降低了小鼠颈部心脏移植模型制作的难度，是一种简单实用的新方法。     

大鼠原位肝移植模型的建立*☆

背景：“二袖套法”原位肝移植模型的建立缩短了无肝期的时间,并且显著提高了老鼠肝移植后的存活率。 目的：在“二袖套法”的基础上,结合一些相关文献,建立稳定大鼠原位肝移植模型。 方法：用改进的二袖套法对75对SD大鼠行原位肝移植,移植中门静脉、肝下下腔静脉用袖套法进行吻合,肝上下腔静脉用缝合法吻合,胆道采用支架法进行胆道重建。 结果与结论：受体大鼠移植后一般状况良好,50例正式实验移植后1 d存活率94%,1周存活率为90%。供肝热缺血时间均接近0,供体手术时间(34.44±3.25) min,受体手术时间(49.07±4.93) min,无肝期(17.26±2.51) min,下腔静脉平均阻断时间约为20 min。说明只有熟练地掌握手术技巧,细致耐心的操作,最大程度减少各种并发症的发生,才能获得稳定的原位肝移植模型。