祛瘀生肌中药对糖尿病模型创面转化生长因子TGF-β1、TGF-β3水平的动态影响

目的：探讨祛瘀生肌中药对糖尿病大鼠愈创模型创面TGF—β1、TGF-β3水平的动态影响。方法：72只SD大鼠分另1造成正常创面模型和糖尿病模型，随机分为生肌化瘀方组、化瘀方组和糖尿病创面生理盐水组。分另4于不同干预时段（3d、7d、11d）取材，EnVision二步法免疫组化测定，并行图像扫描定量分析TGF—β1、TGF-β3水平变化。结果：生肌化瘀方及化瘀方组各时段（3d、7d、11d）TGF—β1及TGF-β3水平均高于糖尿病创面生理盐水组（P〈0．05）。化瘀方TGF-β1均低于生肌化瘀方组（P〈0．05），但TGF—β3各组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：生肌化瘀方促进创面TGF—β1及TGF-β3分泌，有利于创面愈合，同时减少瘢痕形成。     

VEGF165-胰岛素复合凝胶对糖尿病大鼠局部深Ⅱ度烫伤创面MVD及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的:制备外用VEGF165-胰岛素复合凝胶并观察其对糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的作用。方法:以新型凝胶卡波姆980为基质,分别加入VEGF165、胰岛素,分别配制成胰岛素凝胶、VEGF165凝胶、VEGF165-胰岛素复合凝胶和空白对照凝胶。观察各组凝胶性状,检测其p H值。75只SPF级雄性Wistar大鼠,体重190~290g,随机分为正常对照组、糖尿病对照组、胰岛素凝胶组、VEGF165凝胶组、VEGF165-胰岛素复合凝胶组,每组15只。各组大鼠禁食12h后,除正常对照组外,其余各组一次性腹腔注射链脲佐菌素(55 mg/kg)制备1型糖尿病模型,正常对照组大鼠注射相同剂量柠檬酸钠缓冲液。1型糖尿病大鼠造模成功后,采用恒温水浴箱80℃,制备深Ⅱ度烫伤模型。正常对照组、糖尿病对照组创面外敷空白凝胶基质,其余各组外敷对应凝胶制剂,每天换药1次。深Ⅱ度烫伤造模成功后观察各组大鼠存活情况,于3、7、11、15、21天时点观察糖尿病大鼠创面愈合情况并计算创面愈合率,在各时点随机处死每组3只大鼠取烫伤皮肤全层留取标本,行组织学切片及免疫组化染色观察各时点炎性细胞,微血管形成及胶原蛋白。结果:制备的各组凝胶透明,保湿性极佳,黏附性良好,便于涂抹及清洗,无组织毒性。各组大鼠无感染及死亡发生。3天后烫伤各组创面无明显缩小,7、11、15、21天时,VEGF165-胰岛素复合凝胶组创面愈合率最高,糖尿病组最低。VEGF165-胰岛素复合凝胶组愈合率与其余各组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。病理切片观察示各时点VEGF165-胰岛素复合凝胶组肉芽组织形成及上皮化均优于其余各组。免疫组化染色示各组微血管数量、Ⅰ型胶原蛋白阳性率均于3天开始表达,且随时间阳性细胞增多明显;各时间点VEGF165-胰岛素复合凝胶组微血管密度及Ⅰ型胶原蛋白最高,糖尿病组最低,与其余各组比较以及VEGF165-胰岛素复合凝胶组、糖尿病组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:糖尿病大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤外用VEGF165-胰岛素复合凝胶对创面愈合有明显的促进作用     

体外震波治疗对糖尿病大鼠慢性创面愈合及组织学影响

目的体外震波(extracorporeal shock wave,ESW)可促进血管新生和组织修复,通过观察低能量ESW治疗糖尿病大鼠慢性创面的效果,探讨其促进糖尿病慢性创面愈合的机制。方法 6～8周龄雄性SD大鼠96只,体重(220±20)g,随机分为3组(糖尿病对照组、ESW治疗组及正常对照组),每组32只。取糖尿病对照组、ESW治疗组大鼠,腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型后,于背部制备1个直径1.8 cm的圆形皮肤全层创面,建立糖尿病大鼠慢性创面模型。正常对照组大鼠同法制备创面。创面制备后1 d ESW治疗组采用0.11 mJ/mm2、1.5 Hz的ESW对创面干预500脉冲;糖尿病对照组及正常对照组创面未行ESW治疗。观察创面愈合情况;于3、7、14 d取创面组织行HE及Masson染色,观察创面组织学变化;行CD31和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组织化学染色,观察创面细胞增殖及血管化程度。结果糖尿病对照组创面闭合率低于正常对照组,创面闭合时间延长(P<0.05),治疗后3、7、14 d,创面组织炎性细胞浸润明显,胶原纤维相对面积密度、创面微血管密度、PCNA阳性细胞相对密度均低于正常对照组(P<0.05)。ESW治疗组与糖尿病对照组相比,创面愈合时间缩短,创面闭合率提高(P<0.05),各时间点炎性细胞计数减少,肉芽组织生长良好,创面内胶原纤维相对面积密度、微血管密度和PCNA阳性细胞相对密度增加,差异有统计学意义(P<0.05);ESW治疗组与正常对照组相比,微血管密度和PCNA阳性细胞相对密度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论低能量ESW治疗可以抑制糖尿病大鼠慢性创面内局部炎性反应,提高创面内修复细胞增殖能力,增加微血管形成和胶原沉积,使肉芽组织形成增加,最终促进创面愈合。     

局部联合应用NGF及胰岛素对糖尿病大鼠烫伤创面血管形成及Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨局部应用NGF联合胰岛素对糖尿病大鼠烫伤创面血管中凋亡相关因子Bcl-2、Bax表达的影响及创面愈合的机制。方法取75只清洁级雄性Wistar大鼠,体重200～220 g,随机分为正常对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、胰岛素治疗组(C组)、NGF治疗组(D组)、NGF联合胰岛素治疗组(E组),每组15只。B、C、D、E组大鼠采用两步给药法腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病模型,STZ剂量分别为第1天10 mg/kg,第3天50 mg/kg;A组给予相同剂量柠檬酸缓冲液。模型制备后1个月,采用水蒸气烫伤法于各组大鼠背部制备2个深Ⅱ度烫伤创面。烫伤模型制备后,A、B组创面外敷3层生理盐水纱布;C组创面外敷3层浸润5 U胰岛素诺和灵30R的纱布,并每日腹部皮下注射诺和灵30R 4～6 U/kg;D组创面外敷3层浸润5 mL NGF溶液(25 U/mL)的纱布;E组联合C、D组方法处理。观察大鼠一般情况,伤后7、11、15、21 d大体观察各组创面愈合情况并计算创面愈合率,伤后3、7、11、15、21 d取创面组织行组织学及免疫组织化学染色观察,检测创面Bcl-2、Bax、CD34的表达并计算微血管密度。结果各组大鼠均存活至实验完成。随时间延长,各组创面逐渐缩小,其中E组创面愈合速度、皮肤角化、毛发生长及肉芽组织和胶原纤维生长均优于其余各组。伤后各时间点E组创面愈合率均高于其余各组,差异有统计学意义(P<0.05)。伤后随时间延长,各组CD34、Bcl-2表达逐渐增强,至15 d达高峰,21 d表达减弱;E组各时间点表达均强于其他各组(P<0.05)。伤后3 d各组均未见Bax表达,7 d后开始见新生血管内皮细胞Bax表达,且随时间延长表达逐渐增强,其中E组表达强度均低于其余各组(P<0.05)。结论局部联合应用NGF和胰岛素可通过抑制创面血管内皮细胞凋亡、增加创面血管生成,促进糖尿病大鼠创面愈合。     

中药油膏对肛瘘术后创面愈合及相关生长因子表达水平影响的研究进展

中药油膏是祖国医药学中的一个重要组成部分,膏药疗法更是祖国医学中一种独特的中医外治疗法。中药油膏具有均匀、细腻、软滑,稠度适宜、易于涂布、性质稳定、无刺激等特点。临床实践证明,中药油膏在促进肛瘘术后创面愈合方面疗效显著。本文就中药油膏对肛瘘术后创面愈合的栅制和相关生长因子表达水平影响的研究进展作一概述。     

改性聚乳酸-Ⅰ型胶原荷载骨髓间充质干细胞对糖尿病大鼠创面愈合的影响

目的 观察改性聚乳酸-Ⅰ型胶原荷载骨髓间充质干细胞(BMSCs)对糖尿病大鼠创面愈合的影响.方法 36只糖尿病大鼠,随机分为3组:A组:改性聚乳酸-Ⅰ型胶原+BMSCs实验组;B组:改性聚乳酸-Ⅰ型胶原支架对照组;C组:空白对照组,观察创面愈合及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)阳性细胞角蛋白的表达.结果 A组第3、5、7、14天的创面愈合率分别为(18.20±2.68)％、(30.60±5.50)％、(57.63±9.13)％、(87.35±5.83)％,明显快于B、C组(P＜0.05),A组新生表皮较厚,新生血管及皮肤附属器多于B、C组,免疫组织化学法检测5 -BrdU阳性细胞角蛋白的表达.结论 改性聚乳酸-Ⅰ型胶原荷载BMSCs能促进糖尿病创面的愈合.     

SD大鼠糖尿病创面与正常创面中TGF-β1、TGF-β3的表达差异

目的:通过观察大鼠正常创面与糖尿病模型创面肉芽组织中TGF-β1、TGF-β3不同时段表达水平的差异,探求糖尿病创面“难愈”的可能机制。方法:采用SD大鼠实验性正常创面及糖尿病创面背部全层皮肤缺损模型,分别于不同时段(3天、7天、11天)取材,EnVision二步法免疫组化测定,并行图像扫描定量分析TGF-β1、TGF-β3水平变化。结果:创伤后3天、7天和11天,正常创面模型组TGF-β1表达分别为(25.56±6.86)、(24.79±5.62)和(28.57±6.39),TGF-β3表达分别为(39.69±5.46)、(23.20±2.45)、(13.69±3.63)。而糖尿病溃疡模型组TGF-β1表达分别为(7.10±3.74)、(9.47±1.72)和(7.87±2.53),TGF-β3表达分别为(14.99±1.87)、(18.72±5.01)和(8.68±3.39)。糖尿病性创面肉芽组织中各时段(3天、7天和11天)TGF-β1及TGF-β3表达水平均低于正常创面组(P<0.05)。结论:SD大鼠糖尿病创面TGF-β1及TGF-β3的低水平表达,可能是创面愈合迟缓的原因之一。     

皮肤源祖细胞-透明质酸复合物对糖尿病大鼠创面愈合的影响

目的研究皮肤源祖细胞（SKP）-透明质酸（HA）复合物的构建方法，观察其对糖尿病（DM）大鼠创面愈合的影响。方法分离培养SD大鼠SKP，以HA为载体构建复合物，观察复合物中SKP的分化特性。选取60只SD大鼠腹腔注射链脲菌素诱导成DM模型．背部对称制作2个直径1cm全层皮肤缺损创面，随机分为SKP-HA组，创面涂布100μl SKP-HA；HA组，创面涂布100μl HA；对照组，创面涂布DMEM／F12培养基。每组20只。各组大鼠于伤后1、2、3、4周检测创面愈合率，留取创面组织标本检测羟脯氨酸（Hyp）含量，并观察SKP在创面愈合过程中的迁移。结果大鼠SKP与HA共培养后生长良好，复合物中的SKP可保持其特性：向神经元细胞、神经胶质细胞、脂肪细胞分化。伤后2周SKP-HA组、HA组的创面愈合率分别为（72．1±2．8）％、（53．7±2．9）％，均明显高于对照组的（42．5±1．5）％（P＜0．05）；伤后3周SKP—HA组高于HA组及对照组（P＜0．05或0．01）；伤后4周SKP—HA组、HA组创面完全愈合，与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0．01）。伤后1周各组Hyp含量差异无统计学意义（P＞0．05）；伤后2～4周，SKP-HA组、HA组Hyp含量均高于对照组（P＜0．01）；伤后3、4周SKP-HA组高于HA组（P＜0．01）。SKP在创面得以成活并随时间的延长逐渐向真皮层迁移。结论SKP-HA复合物可促进DM大鼠创面愈合。     

IFN-γ对大鼠创面愈合中Smad7表达的影响

目的：将干扰素γ（IFN-γ）应用于大鼠创面,观察创面肉芽组织的生长、成纤维细胞数目,分析IFN—γ对Smad7的影响。方法：选取成年SD大鼠127只,建立大鼠创伤模型。实验分成A、B、C、D、E共5组,每组25只。A组为生理盐水溶剂对照组,B组为IFN—γ 500U／ml溶剂剂量组,C组为IFN—γ 1000U／ml溶剂剂量组,D组为2000U／ml溶剂剂量组,E组为空白组,正常对照组2只,为未损伤的正常大鼠。分别于创伤第3、7、10、14、21日随机选取各组5只大鼠采用过量麻醉处死,剪取创面肉芽组织,分别行HE常规染色,在光学显微镜下观察新生肉芽组织厚度、计数成纤维细胞数。行免疫组化染色,在光学显微镜下观察肉芽组织中Smad7的表达情况。结果：各时间点A、B组肉芽组织厚度较C、D组致密且厚（P〈0．001）,E组肉芽组织厚度介于A、B组和C、D组之间,（P〈0．05）;200倍光镜下,目测计数成纤维细胞,伤后第3、21天,各组别成纤维细胞数量无差异（P〉0．05）,伤后第7、10、14天,A、B组成纤维细胞数量比C、D、E组明显增多（P〈0．001）;通过图像分析检测Smad7平均灰度和平均光密度。Smad7在伤后第3天、第14天表达较强,在C、D组中各时相的表达强于A、B、E组（P〈0．001）,但c组和D组、A组和B组组间比较无差异（P〉0．05）。结论：干扰素γ（IFN—γ）可使新生肉芽组织生长缓慢、成纤维细胞数量减少,延长创面愈合时间,并可使大鼠皮肤创面中Smad7表达增强。     

糖基化终末产物对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响

目的 了解糖基化终末产物(AGE)蓄积对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响. 方法 将75只SD大鼠按完全随机化方法 分为对照组、糖尿病组及氨基胍干预组,每组25只.将大鼠造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)后,后2组制作成糖尿病模型,氨基胍干预组给予管饲氨基胍100 mg·kg~(-1)·d~(-1).于伤后0(伤后当天)、3、7、14、21 d处死大鼠.描取创面形状,并取全层皮肤组织待测.同时取大鼠背部表皮行KC培养及鉴定.观察各组创面愈合率及皮肤组织糖含量,创面组织形态学变化,皮肤组织中AGE分布.观察不同浓度AGE对KC增殖,凋亡的影响,以仅加表皮细胞培养液的KC为对照组. 结果 伤后7、14、21 d糖尿病组创面愈合率显著低于对照组(P<0.01),而氨基胍干预组却明显高于前2组(P<0.01).糖尿病组皮肤组织含糖量为(2.62±0.19)mmol/g,氨基胍干预组为(2.58±0.07)mmol/g,均高于对照组(1.04±0.09)mmol/g(P<0.01).对照组大鼠创面炎性细胞浸润强烈而局限,坏死组织形成、脱落及时,创面愈合无明显延迟;糖尿病组大鼠炎性细胞浸润缓慢、弥散而持久,坏死组织形成、脱落较迟,创面愈合明显延迟;氨基胍干预组大鼠炎性细胞浸润及时、强烈,坏死组织形成、脱落以及创面愈合时间较糖尿病组早.对照组中有少量散在的AGE沉积,糖尿病组AGE蓄积显著增加,而氨基胍干预组AGE含量显著降低.AGE作用48 h后,KC的增殖显著降低,呈现浓度依赖性,各剂量AGE干预组的吸光度值均低于对照组(P<0.01).100μg/mLAGE干预组KC早期凋亡连接素V阳性细胞比例为(15.1±2.3)%,明显高于对照组[(11.2±1.2)%,P<0.05];终未期凋亡双阳性细胞比例为(14.3±3.5)%,与对照组(15.2±2.4)%比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 高血糖可能是通过AGE蓄积,抑制KC等修复细胞增殖导致创面难愈;减少AGE蓄积,可改善糖尿病创面愈合延迟现象.     

生肌玉红膏纱条换药对低位单纯性肛瘘术后创面愈合的影响

低位肛瘘瘘管只穿过内括约肌,外口常只有一个,距肛缘较近（3～5cm）,临床最为常见。由于低位肛瘘常规手术创口分级为Ⅱ类切口,手术中常不予以缝合,故术后创口愈合时间较长,常伴随有创面疼痛、瘙痒、渗液过多等临床症状。为减轻低位单纯性肛瘘患者术后痛苦,缩短创面愈合时间,我们应用生肌玉红膏纱条对低位单纯性肛瘘术后患者换药,经观察发现,其可促进创面愈合,总结报道如下。     

血竭壳聚糖药膜对大鼠糖尿病创面Wnt/β-catenin信号的影响

【摘要】〓目的〓观察血竭壳聚糖药膜对糖尿病大鼠创伤愈合和创面组织Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法〓采用链脲佐菌素(STZ)注射法建立大鼠糖尿病创面模型,实验组给与血竭壳聚糖药膜治疗,对照组采用常规换药治疗,观察两组创面愈合等情况。采用Western blot及qRT-PCR检测创面β-catenin、VEGF及CyclinD1 蛋白和mRNA的表达。结果〓血竭壳聚糖药膜能够明显促进糖尿病大鼠创伤的愈合,实验组创面愈合情况较对照组显著提高,差异具有统计学意义(P<0.01)。实验组创面组织β-catenin、VEGF及CyclinD1蛋白和mRNA的表达较对照组明显增加(P<0.01)。结论〓血竭壳聚糖药膜治疗大鼠糖尿病创面效果良好,其机制可能与活化Wnt/β-catenin信号有关。     

活血化瘀中药对糖尿病创面肉芽组织细胞周期变化的影响

目的:探讨活血化瘀中药对糖尿病创面肉芽组织中细胞周期的影响,探求辨证用药规律。方法:36只SD大鼠创面造模,随机分成糖尿病创面中药治疗组、糖尿病创面对照组和正常创面对照组。分别于创面修复3d、11d取材,流式细胞仪检测创面肉芽组织中细胞周期变化。结果:创伤后早期3d,糖尿病创面中药治疗组S期明显高于糖尿病创面对照组(P<0.05),但低于正常创面对照组(P<0.05)。创伤后11d比较,糖尿病创面中药治疗组新生肉芽组织中S期高于糖尿病创面对照组(P<0.05),与正常创面组无差异(P>0.05)。而G2~M期比较,3组无统计学差异(P>0.05)。结论:活血化瘀中药在创伤早期促使细胞增殖进入S、G2~M期,"祛瘀利于生肌",有利于创面修复。创面愈合晚期,活血化瘀中药虽能促使细胞DNA合成,但细胞增殖能力已减弱,对防止创面瘢痕过度生成有利。     

生肌膏对糖尿病足患者的疗效及对其创面愈合相关指标及预后的影响分析研究

目的:探究生肌膏对糖尿病足患者的疗效及对创面愈合相关指标和预后的影响。方法:选取我科收治的120例糖尿病足患者,根据治疗方式的不同,分为研究组及对照组两组(各60例),其中对照组采用常规治疗,研究组在常规治疗基础上联合生肌膏治疗,比较两组患者的临床疗效、中医证候积分、相关血清指标及生活质量评分等差异。结果:治疗后,研究组患者的创面相关愈合指标均较对照组明显改善(P<0.05);治疗后研究组患者患足的中医证候积分均较对照组明显改善(P<0.05);治疗后研究组患者的血小板衍生生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)均较对照组明显改善(P<0.05);1个月后,研究组患者的生活质量评分显著高于对照组患者(P<0.05)。结论:生肌膏对糖尿病足患者的疗效较佳,不仅可促进创面愈合,还可提高患者的生活质量,值得临床推广应用。     

缬沙坦和螺内酯对高血压大鼠心肌生长因子和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

本研究旨在观察盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯对自发性高血压大鼠 (SHR)心肌中生长因子和Ⅰ型胶原的影响 ,探讨螺内酯改善心肌重塑和心力衰竭患者预后的作用机制。一、材料和方法1.实验动物及分组 :选用 6周龄雄性SHR18只 ,体重 ( 82 .67± 11.3 7) g ,随机分为 3组 ,每组各 6只 ,分别设为SHR阳性对照组、缬沙坦治疗组、螺内酯治疗组 ,6只WKY大鼠作为正常对照组。2 .药物及给药方法 :两治疗组分别给予缬沙坦 (诺华公司 ) 3 0mg·kg-1·d-1、螺内酯 (江苏盐城制药厂 ) 2 0mg·kg-1·d-1溶于饮水灌胃 ,每天 1次 ,连续治疗 13周 ;两对照组不…     

丹银海绵对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响

目的:探讨丹银海绵对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为8组。除空白对照组外,其余7组大鼠,通过手术在其背部形成一10mm×10mm相同大小,深达肌层的溃疡,分别给予抗生素、生长因子凝胶、纳米银、丹黄散,以及不同浓度的丹银海绵处理溃疡面。给药28d后处死大鼠,取溃疡部位新生肉芽组织,HE染色观察组织形态的变化;WesternBlot检测大鼠创面组织中AGEs、hs-CRP、IL-1、IL-6、bFGF、PDGF、VEGF表达水平。结果:病理切片观察显示适宜浓度的丹银海绵可以促进血管新生并伴扩张,同时生成大量新生成纤维细胞。WesternBlot检测显示高浓度的丹银海绵可以显著上调创面组织中生长因子表达(P<0.05),降低AGEs水平及炎症因子表达(P<0.05)。结论:适宜浓度的丹银海绵对于糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合有明显的促进作用,提高治疗效果。     

生肌象皮膏对糖尿病大鼠伴肌腱损伤溃疡创面的修复作用

目的：比较外用生肌象皮膏与贝复济对糖尿病大鼠伴肌腱损伤溃疡创面的修复作用。方法：20只健康Wistar大鼠以链脲佐霉素溶液腹腔注射制备糖尿病大鼠模型,于大鼠腰背部脊柱两侧制作2个伴肌腱损伤的圆形溃疡创面,随机分2组,分别应用生肌象皮膏和贝复济对创面进行换药。结果：经生肌象皮膏换药治疗的大鼠,其溃疡创面面积及创面愈合率在换药后期与贝复济组相比较有明显统计学意义（P〈0.05）。结论：生肌象皮膏比贝复济更能够有效促进糖尿病溃疡创面的愈合,尤其在用药后期效果更为显著。     

P物质与表皮干细胞联用对糖尿病大鼠创面愈合与神经再生的影响

目的 观察感觉神经肽P物质与表皮干细胞(ESC)联合应用对糖尿病大鼠创面愈合与神经再生的作用. 方法 分离培养SD大鼠ESC(经鉴定),接种于羊膜滋养层上构建羊膜-ESC备用.选择48只糖尿病模型大鼠,每只背部制作4个全层皮肤缺损创面.按随机抽签法将此192个创面分为ESC+P物质组、ESC组、P物质组、对照组,每组48个创面.ESC+P物质组和ESC组创面均移植羊膜-ESC,P物质组、对照组创面移植羊膜.移植后,ESC+P物质组、P物质组在创周及创面中央注射1×10-7 mol/L的P物质250μL,ESC组、对照组在创周及创面中央注射PBS 250μL作对照,各组每日注射2次,连用4d.于大鼠伤后4、7、10、14、17、23 d,观察并计算创面愈合率(每时相点8个创面),HE染色观察创面组织结构改变.伤后4、7、10 d,行Masson染色观察创面组织总胶原分布,免疫组织化学染色观察Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积量.伤后14、23 d,用免疫组织化学染色法观察创面组织中蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)及P物质阳性神经纤维分布情况.对数据行单因素方差分析和t检验. 结果(1)ESC+P物质组伤后14 d创面愈合率达100.0％,明显早于ESC组、P物质组、对照组完全愈合时间(伤后17、17、23 d).HE染色显示ESC+P物质组创面愈合质量明显优于其余3组.(2)伤后10 d,ESC+P物质组与P物质组创面组织中胶原着色深、面积广;其余2组胶原染色较浅、面积较小.随着伤后时间推移,各组创面Ⅰ型胶原沉积量逐渐升高,Ⅲ型胶原沉积量逐渐下降.伤后4、7、10 d,ESC+P物质组Ⅰ型胶原沉积量明显高于ESC组(t值分别为32.72、118.21、26.71,P值均小于0.01)和对照组(t值分别为44.37、22 76、30.32,P值均小于0.01);ESC+P物质组与P物质组水平相对接近.伤后4、7、10d,ESC+P物质组创面Ⅲ型胶原沉积量明显高于ESC组(t值分别为32.27、28 68、14.51,P值均小于0.01)和对照组(t值分别为35 68、22.52、22 24,P值均小于0.01).(3)ESC +P物质组与P物质组创面组织中有大量PGP 9.5和P物质阳性神经纤维再生,创面深层部分神经纤维末梢向表皮延伸.ESC组、对照组仅见创面深层有少量PGP 9.5和P物质阳性神经纤维,且未向表皮延伸.伤后14、23 d,ESC+P物质组创面PGP 9.5阳性神经纤维面积占(3.86±0.25)％、(7 03±0.28)％,明显高于ESC组[(1.48±0.30)％、(3.01±0 43)％,t值分别为23 95、30 27,P值均小于0.01]和对照组[(1 46±0 23)％、(2.84±0.29)％,t值分别为27.35、40.32,P值均小于0.01].伤后14、23 d,ESC+P物质组创面P物质阳性神经纤维面积占(2.01±0 14)％、(1.19±0 11)％,明显高于ESC组[(0.85±0 17)％、(1.34±0 21)％,t值分别为20.50、2.60,P＜0.05或P＜0.01]和对照组[(0.74 ±0.15)％、( 1.30 ±0.17)％,t值分别为23 98、2.41,P＜0.05或P＜0.01]. 结论 感觉神经肽P物质和ESC联合应用,可以有效促进糖尿病大鼠创面愈合与神经再生.     

局部应用L-精氨酸对糖尿病小鼠创面愈合的影响

目的研究局部应用L-精氨酸对糖尿病小鼠创面治疗效果的影响。方法建立链脲霉素(Streptozotocin,STZ)诱导的Ⅰ型糖尿病小鼠创面模型;昆明小鼠随机分为正常对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、糖尿病精氨酸治疗组(C组),糖尿病小鼠创面模型建立后,观察及测量伤后0、4、8、14、16d时创面愈合面积、肉芽生长情况、组织形态学改变、羟脯氨酸(OHP)含量。结果C组创面愈合明显加快(P<0.05),创面成纤维细胞数量、胶原生成增多,OHP含量增加。结论局部应用L-精氨酸,通过加快肉芽生成,增加创面成纤维细胞数量,能促进糖尿病创面愈合。