从我国人群中再次分离到H9N2亚型流感病毒

目的 了解分离流感病毒毒株表面抗原亚型和特性及其来源。方法 病毒通过ＭＤＣＫ细胞分离,用红细胞凝集抑制（ＨＩ）和神经氨酸酶抑制（ＮＩ）测定对病毒株表面抗原进行鉴定和特性分析,人血清中抗体测定采用ＨＩ和中和实验。对患者进行个」案调查。结果 分离物为甲型流感病毒Ｈ９Ｎ２亚型,属Ｇ９类似毒株,它的ＨＡ抗原特性与已经从人、鸡和鸽分离到的Ｈ９Ｎ２亚型毒株均有差异。患者恢复期血清对分离物的ＨＩ抗体滴度为４００     

人与猪群中H3N2亚型流感病毒间关系的研究

通过血清流行病学调查、毒粒ＨＡ１基因核苷酸序列分析和ＨＡ１蛋白氨基酸序列比较，证实了人与猪Ｈ３Ｎ２亚型毒株间存在着极为密切的关系，即Ｈ３Ｎ２亚型毒株新变种在人群中出现后，很快在猪群中就能找到它存在的依据。同时猪群中Ｈ３Ｎ２亚型毒株抗体阳性率高低反映出了人群中Ｈ３Ｎ２病毒活动程度的强弱。这些结果说明，猪可能在人流感疾病发生、流行和大流行株起源中起着重要的作用。同时猪群中流感病毒抗体阳性率可做为判断人群中流感活动程度的一个指标。     

1994～1997年深圳地区流感病毒活动及H3N2亚型毒株HA1基因演变特点

目的　了解近几年流感病毒在深圳地区活动的特点及甲３（Ｈ３Ｎ２） 亚型毒株ＨＡ１ 基因演变概况。方法　病毒分离采用常规的鸡胚双腔接种,毒株检定用常量半加敏ＨＩ测定。新鲜收获含病毒粒的鸡胚尿囊液用来提取ＲＮＡ,经逆转录合成ｃＤＮＡ,经聚合酶链反应（ＰＣＲ） 扩增,产物纯化,采用双脱氧链末端终止法进行核苷酸序列测定。结果　近几年来深圳地区流感活动概况与全国情况相一致：在人群中仍同时流行Ｈ３Ｎ２,Ｈ１Ｎ１ 亚型和乙型毒株,当甲型毒株活动减弱时,乙型毒株活动就增强,反之,甲型毒株增强时,乙型毒株就减弱。随着时间的推移,Ｈ３Ｎ２ 亚型毒株ＨＡ１ 基因不断地发生点突变,这种突变严重受人群免疫压力所影响,１９９６ 年的毒株与１９９５ 的毒株相比,不仅氨基酸替换点中多数是位于抗原决定簇区或受体结合部位上,并增加两个糖基化位点,故导致Ｈ３Ｎ２ 毒株於１９９６ 年活动明显增强。结论　近来在深圳地区人群中仍同时流行着Ｈ３Ｎ２,Ｈ１Ｎ１ 亚型和乙型流感病毒。然而,不同年其优势毒株是不一样的。１９９６ 年Ｈ３Ｎ２ 毒株活动增强是由于其ＨＡ１ 区氨基酸序列发生替换所造成。     

1994～1997年深圳地区流感病毒活动及H3N2亚型毒 …

目的 了解几年流感病毒在深圳地区活动的特点及甲３（Ｈ３Ｎ２）亚型毒株ＨＡ１基因演变概况。方法 病毒分离采用常规的鸡胚双腔接种,毒株检和常量半加敏ＨＩ测定。新鲜收获含病毒粒的鸡胚尿囊液用来提取ＲＮＡ,经逆转录合成ｃＤＮＡ,经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增,产物纯化采用双脱氧链末端终止法进行核苷酸序列测定。结果 近几年来深圳地区流感活动概况与全国情况相一致;在人群中仍同时流行Ｈ３Ｎ２,Ｈ１Ｎ１ 型和乙型毒     

副流感病毒兰州株的分离与鉴定

目的 副流感病毒兰州株的分离与鉴定。方法 应用鸡胚和人胚肺成纤维突变细胞株分离病毒;应用血凝和血抑以及近年来多株流感国际和国际和国家株（Ｈ１Ｎ１亚型６株,Ｈ３Ｎ２亚型２株,Ｂ型４株）作抗原抗体交互试验,还用４类主要呼吸道病毒单克隆间接免疫荧光法与２株兰州株的病毒抗原基质片作特异性交叉反应。结果 ２株兰州株在鸡胚中培养血凝效价滴度高达１：５１２（＋＋）,它们与流感毒甲型（Ｈ１Ｎ１和Ｈ３Ｎ２）以及乙型     

流感病毒A／Guangdong／28／94HA1基因序列分析

自１９６８年流感病毒ＨａＮ２亚型首次引起人类暴发流行以来，该亚型病毒在人群中一直传播。我们在血清学抗原分析的基础上，采用ＲＴ－ＰＣＲ测序方法，对１９９４年广东地区的流行毒株Ａ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／２８／９４ＨＡ１基因序列进行分析，了解其核苷酸的变异程度。材料与方法１．流感毒株：Ａ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／２８／９４，由广东省卫生防疫站分离，并鉴定为甲型流感病毒Ｈ３Ｎ２亚型。毒株接种于鸡胚尿囊腔增殖，收获鸡胚尿囊液后，超速离心，并用３０％～６０％的蔗糖梯度离心纯化。２．提取病毒ＲＮＡ：ＲＮＡｚｏｌＴＭ…     

流感病毒相变的发现及其意义

近来，我们在流感监测中，发现了甲型流感病毒发生了相变异。据我们所知，Ｈ３Ｎ２亚型毒株发生相变为首次发现。“Ｏ”相毒株的出现，宣告了鸡胚已不同流感病毒最敏感的宿主，鸡红细胞已不是流感病毒红细胞测定中最理想的细胞。同时指出，虽然狗肾传代细胞对当前人群中所流行的流感病毒性较高，但是传代细胞有致癌性，由它分离出的病毒不能用于疫苗生产。     

抗甲3型流感病毒多克隆抗体和单克隆抗体对当前毒株(H_3N_2)的抗原性分析

我国被认为是流感病毒大流行株的发源地及新变异株的多发地［１］。当前流感病毒在人群中仍同时流行着Ｈ３Ｎ２和Ｈ１Ｎ１亚型及乙型流感病毒，优势毒株为Ｈ３Ｎ２亚型［２］。因此，很有必要了解甲３型流感病毒的变异动态。作者分别以鸡抗甲３型多克隆抗体和抗血凝素（Ｈ...     

近来我国马群中呼吸道疾病流行的病因学研究

通过病因学，血清学和流行病学研究，弄清了近期我国马群中类流感疾病流行的病因为马２亚型流感病毒。采用多克隆和单克隆抗体对分离物进行抗原性分析，结果提示，从我国马群中分离到的流感病毒株是马２（Ｈ３Ｎ８）亚型流感病毒，它绝然不同于过去我们发现的禽的Ｈ３Ｎ８流感病毒。估计它是近期内从国外马群传入我国。     

甲型流感病毒（N1N2）亚型毒株血凝素和神经氨酸酶基 …

目的 研究新分离到的Ｈ１Ｎ２亚型毒株血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）基因的来源。方法 病毒通过鸡胚增殖后提取其ＲＮＡ,通过逆转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增和产物纯化,用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定,并用ＭｅｇＡｌｉｇｎ（１．０３版）和Ｅｄｉｔｓｅｑ（３．６９版）软件进行种系发生学分析。结果 新分离到Ｈ１Ｎ２毒株ＨＡ１区氨基酸序列与Ａ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）和Ａ／Ｇｕａｍｇｄｏｎｇ／６／９     

广州地区禽H9N2亚型流感病毒的发现及感染人调查

目的 了解广州地区禽流感病毒在家禽中的流行及感染人的情况，防止香港H5N1禽流感在广州地区流行。方法 对广州地区的主要鸡场和农贸市场的家禽和密切接触家禽的职业人群进行病原学和血清学的检测。病毒分离同时采用MDCK细胞和鸡胚双腔接种法；采用微量血凝抑制半致敏法进行血清学检测。结果 从54份鸡咽拭液中分离到1株H9N2亚型流感病毒；鸡及职业人群血对分离的H9N2毒株的血抑抗体阳性率分别为12．8％和15．1％。结论 广州地区鸡群中有H9N2，亚型流感病毒存在，禽H9N2亚型流感病毒能感染人。     

深圳地区人和鸡群中H9N2亚型流感病毒病原学和血清流行病学调查

目的：了解甲型流感病毒N9N2亚型毒株在深圳地区鸡群和人群中的分布。方法：采用常规的鸡胚双腔法来分离病毒。抗体测定，采用红细胞凝集抑制（HI）试验和中和试验测定法。结果：从深圳地区农贸市场鸡群中分离到27株H9N2亚型流感病毒，但未能从人群中分离到H9N2病毒。约有26％人血清中检测到H9亚型毒株的抗体，（HI滴度≥20），同时还发现抗体阳性率和几何均数随人群年龄增长而增高，同时与职业有关。然而，在鸡群中H9毒株的抗体阳性率仅为7％。结论：禽H9N2毒株不仅能感染人，而且在深圳地区人群和禽类中较为广泛的分布。人H9N2很大可能来源于鸡的H9N2毒株。     

Seroprevalence of avian influenza H9N2 among poultry workers in Shandong Province, China

H9N2 avian influenza virus has been circulating widely in birds, with occasional infection among humans. Poultry workers are considered to be at high risk of infection with avian influenza due to their frequent exposure to chickens, but the frequency of H9N2 avian influenza virus infections among them is still indistinct. This study was carried out in order to identify the seroprevalence of H9N2 avian influenza virus among poultry workers in Shandong, China. During the period from December 2011 to February 2012, a total of 482 subjects took part in this study, including 382 poultry workers and 100 healthy residents without occupational poultry exposure. Serum samples were collected and tested for the presence of antibodies against H9N2 avian influenza virus by hemagglutination inhibition (HI) and microneutralization (MN) assays. Nine subjects (9/382?=?2.3 %) were positive for antibodies against H9N2 avian influenza virus among poultry workers by either HI or MN assays using ≥40 cut-off, while none of the 100 healthy residents were seropositive. In conclusion, our study identified H9N2 avian influenza infections among poultry workers in Shandong, China, and continuous surveillance of H9N2 avian influenza virus infection in humans should be carried out to evaluate the threat to public health.     

猪在禽H9N2亚型流感病毒感染人中的作用

目的　了解猪在禽H9N2亚型流感病毒感染人中的作用。方法　用RT PCR扩增目的基因,用PGEM T Vector(美国Promega公司) 4℃过夜连接,重组质粒转入dH5α细菌,筛选阳性菌落,酶切鉴定,送六合通公司自动测序,然后进行进化树分析。结果　两株山东猪H9N2毒株基因组与人及禽分离出的H9N2病毒均有差异,中国内地从人分离出的H9N2毒株的基因组接近鸡的毒株,而香港特区从人分离出的接近鹌鹑的毒株;禽H9N2毒株不仅宿主范围广,同时其基因组具有多样性。结论　禽H9N2亚型毒株是直接感染人,而不是通过所谓的中间宿主猪,然后再感染人。     

Molecular aspects of avian influenza (H5N1) viruses isolated from humans

In 1997, 18 human infections with H5N1 influenza type A were identified in Hong Kong and six of the patients died. There were concomitant outbreaks of H5N1 infections in poultry. The gene segments of the human H5N1 viruses were derived from avian influenza A viruses and not from circulating human influenza A viruses. In 1999 two cases of human infections caused by avian H9N2 virus were also identified in Hong Kong. These events established that avian influenza viruses can infect humans without passage through an intermediate host and without acquiring gene segments from human influenza viruses. The likely origin of the H5N1 viruses has been deduced from molecular analysis of these and other viruses isolated from the region. The gene sequences of the H5N1 viruses were analysed in order to identify the molecular basis for the ability of these avian viruses to infect humans.     

流感病毒A/广州/333/99(H9N2)毒株基因组特性的研究

目的 了解一株再次从流感患儿中分离出禽H9N2流感毒株的基因组特性，并弄清它的来源。方法 病毒在鸡胚中传代，从收获的尿囊液中提取RNA，通过逆转录合成cDNA，cDNA用PCR扩增。PCR产物用纯化试剂盒纯化，接着做核苷酸序列测定，然后用Meg Align(Version 1.03)和Editseg(Version 3.69)软件进行基因进化树分析。结果 A／广州／333／99（H9N2）毒株的基因组属于禽流感病毒，但它明显不同于A／Duck/Hong Kong/Y439/97毒株。同时不含有任何人流感病毒基因节段，其基因组中有4个基因节段（分别编码HA、NA、NP和NS蛋白）来自G9毒株基因系，而其余4个基因节段（分别编码PB2、PB1、PA和M蛋白）来自G1毒株基因系。结论 A／广州／333／99（H9N2）病毒是G9和G1毒株通过基因重配而来的重配株，它最大可能性直接来自禽。进一步证实了禽H9N2毒株能感染人，同时首次证实了H9N2不同基因系毒株间，在自然界中也能发生基因重配。     

Potency of an inactivated avian influenza vaccine prepared from a non-pathogenic H5N1 reassortant virus generated between isolates from migratory ducks in Asia

A reassortant influenza virus, A/duck/Hokkaido/Vac-1/2004 (H5N1) (Dk/Vac-1/04), was generated between non-pathogenic avian influenza viruses isolated from migratory ducks in Asia. Dk/Vac-1/04 (H5N1) virus particles propagated in embryonated chicken eggs were inactivated with formalin and adjuvanted with mineral oil to form a water-in-oil emulsion. The resulting vaccine was injected intramuscularly into chickens. The chickens were challenged with either of the highly pathogenic avian influenza virus strains A/chicken/Yamaguchi/7/2004 (H5N1) or A/swan/Mongolia/3/2005 (H5N1) at 21 days post-vaccination (p. v.), when the geometric mean serum HI titers of the birds was 64 with the challenge virus strains. The vaccinated chickens were protected from manifestation of disease signs upon challenge with either of the highly pathogenic avian influenza viruses. However, challenge virus was recovered at low titers from the birds at 2 and 4 days post-challenge (p.c.). All 3 chickens challenged at 6 days p.v. died, whereas 3 chickens challenged at 8 days p.v. survived. These results indicate that the present vaccine confers clinical protection and reduction of virus shedding against highly pathogenic avian influenza virus challenge and should be useful as an optional tool in emergency cases.     

北京市1例人感染H9N2禽流感病例的流行病学调查与分析

目的 分析北京市人感染H7N9禽流感疫情强化监测中发现的1例人感染H9N2禽流感病例流行病学调查情况,为今后科学防控人感染H9N2禽流感疫情提供参考.方法 采用现场流行病学和实验室检测相结合的方法,收集病例流行病学资料,采集并检测病例、暴露环境和密切接触者等标本,分析流行病学特征和可能的感染来源.结果 病例发病第3日和第7日咽拭子标本检测均为H9N2禽流感病毒核酸阳性.病例发病前10天内无禽类接触史,但病例平时活动有暴露于H9N2禽流感病毒污染环境的可能.密切接触者在医学观察期内均未出现流感样症状.结论 该病例为北京市首例成人感染H9N2禽流感确诊病例,同时也是北京市第二例H9N2禽流感确诊病例.医疗机构加强流感样病例监测是及时发现人感染H9N2禽流感病例的重要手段.