丙型肝炎病毒基因分型研究状况

当前HCV基因分型研究十分活跃,但由于在基因分型的方法、命名等方面尚不统一所以各国学者报道的分型结果很不一致。本文对近来HCV基因分型的现状,存在的问题及开展HCV基因型研究的意义进行了综述。     

丙型肝炎病毒血清学分型与基因分型研究

为了解某农村单采浆供血员人群所感染丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的血清型和基因型构成，并对两种分型方法进行比较，本工作以ＨＣＶＣ区型特异性多肽对抗－ＨＣＶ进行血清学分型，对已确定血清型的血清进行５′非编码区（ＮＣＲ）逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析以确定基因型，并对６份扩增产物进行序列测定。结果显示１４０份抗－ＨＣＶ阳性血清中，血清Ⅰ型和Ⅱ型分别为４４份（３１．４３％）和１２份（８．５７％），余８４份未能分型。４４株已知血清型的ＨＣＶ中，１ｂ、２ａ和３ｂ等３种基因型分别为３４株（７７．２７％）、９株（２０．４５％）和１株（２．２７％）。两种分型方法一致率为９３．１８％（４１／４４）。对６株ＨＣＶ５′ＮＣＲ的序列分析证实了ＲＦＬＰ分型的正确性。结论认为该人群ＨＣＶ感染以血清Ⅰ型或基因１ｂ型为主；Ｃ区型特异性多肽血清学分型法与ＲＦＬＰ基因分型法符合率高，具有一定应用价值。     

丙型肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒抗体IgM及HCVRNA检测结果的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对住院病人抗丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）阳性血清标本进行抗－ＨＣＶＩｇＭ的检测，并与ＨＣＶＲＮＡ检测结果比较。结果表明，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阳性，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阴性及ＨＣＶＲＮＡ阴性、抗－ＨＣＶ阳性三种类型中均有抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性者。结果还表明ＨＣＶＲＮＡ阳性病例的抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性率明显高于ＨＣＶＲＮＡ阴性的病例（Ｐ＜０．０５），在临床诊断上ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性病例的肝病大多数为急性肝炎（ＡＨ）和慢性活动性肝炎（ＣＡＨ），ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性比较，各类肝病的病例数无明显差别。     

丙型肝炎病毒血清学分型应用的可行性研究

目的 探讨丙型肝炎病毒血清学分型的可行性。方法 应用EIA法对兰州地区148例抗－HCV阳性者进行血清学分型。结果 血清学方法的分型率为56．08％（83／148）,其中血清1型占50．60％（42／83）,血清2型占43．47％（36／83）,1＋2混合型占6．03％（5／83）。对其中70例HCVRNA阳性血清的基因型与血清型结果进行比较,二者完全相符。结论 丙型肝炎病毒的血清学分型具有一定的临床应用价值。     

丙型肝炎病毒基因分型研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)基因型众多,其命名和分型标准已渐趋统一,一般采用Simmonds命名系统。不同基因型的分布地理差异明显,我国以1b、2a型最常见,南北差异可能不大。现有的HCV基因分型法有多种,PCR和血清学两类方法各有其局限性,相应也出现多种改进及新方法,主要是针对PCR法的改进。近几年新兴的DNA芯片技术也开始应用于HCV基因分型,很可能提供一种更敏感、快速、高效的HCV基因分型法。     

丙型肝炎病毒研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）为RNA病毒，属黄病毒属。自从1989年ChOO等采用分子克隆技术首先克隆和描述了HCV基因组后，对于HCV的研究已经取得了很大进展。1病毒颗粒的特性：丙型肝炎病毒是一种球形外壳病毒，直径约50纳米。由血源感染的急性期患者和实验感染的黑猩猩中获得的HCV在蔗糖中的浮力密度约为1．069八m3，而复制后细胞培养所获得的HCV在蔗糖中浮力密度为1．129／cm3。血清中病毒的低密度与其中所含低密度脂蛋白有关，这种脂蛋白的出现与HCV有密切联系。这些脂蛋白使HCV更容易通过细胞摄粒作用进人肝细胞内。慢性肝炎患者中获…     

丙型肝炎病毒三种不同分型方法的比较

分别应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物酶切分型法（酶切法）、型特异引物分型ＰＣＲ法及血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）型特异性抗体酶联免疫测定法（ＥＩＡ），对１２０例抗－ＨＣＶ阳性患者血清进行ＨＣＶ分型检测，比较其分型结果。结果显示酶切法与ＰＣＲ法均成功地对９６例（８０％）进行分型，其中Ⅱ型８６例（８９．６％），Ⅲ型８例（８．３％），Ⅱ／Ⅲ型混合感染２例（２．１％），且两种方法的结果完全一致。ＥＩＡ法检测出型特异性抗体７８例（６５％），其中血清１型（相当于基因Ⅰ、Ⅱ型）６８例（８７．２％），血清２型（相当于基因Ⅲ、Ⅳ）６例（７．７％），血清１、２型双阳性者４例（５．１％）。对三种方法均阳性的６６例的分型结果进行比较，ＥＩＡ法与酶切法和ＰＣＲ法的符合率达９７．０％。表明三种分型方法的结果高度一致。     

抗一HCV阳性无病毒血症患者HCV特异性免疫反应研究

目的 研究抗ＨＣＶ阳性无病毒血症患者特异的体流及细胞免疫状态。方法 对１５例抗ＨＣＶ阳性无病毒血症患者,１５例慢性ＨＣＶ持续感染者及１５例正常对照者进行研究。通过ＭＴＴ、ＬＤＨ释放法、酶联免疫等方法观察患者外周Ｔ细胞反应、自然杀伤（ＮＫ）细胞活性、细胞因子分泌及特异性体液免疫反应。结果 无病毒血症者Ｔ细胞增殖反应明显大于持续感染者及对照组,并且Ｔ细胞对核心区抗原增殖最大,ＮＳ３次之,对ＮＳ５则无明     

丙型肝炎病毒包膜区变异与感染慢性化关系的初步研究

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)包膜区变异与其感染慢性化的关系。方法 3份HCV慢性感染者和3份急性感染者血标本，采用逆转录—聚合两链反应(RT—PCR)扩增HCV的E1区C端及E2区N端片段(573bp)，扩增产物进行克隆，以单链构象多态性(SSCP)和异质性双体(HD)分析对每份血清30个克隆的E1／E2区准种(quasispecies)进行筛选，挑选每份标本HCV的优势株与劣势株序列进行测定，分析非同义替换碱基数与同义替换碱基数比率(dN／dS，间接反映选择压力)和推导的氨基酸序列。结果 HCV慢性感染者病毒准种的复杂性和E2区dN／dS明显高于急性感染者。HCV慢性感染者的E2区氨基酸替换率(8．46％)比急性感染者(1．02％)更高，而两者的E1区氨基酸替换率(分别为2．74％和1．09％)均较低。尽管HVR1变异程度更高，但仍存在高度保守的氨基酸位点。结论 HCV持续性感染与准种复杂性增高和宿主对HVR1的免疫选择有关。     

线探针核酸杂交分析贵州地区HCV感染株基因型

目的　分析贵州地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染株的基因型。方法　用第二代线探针核酸杂交方法,对９８ 例ＨＣＶ感染者血清进行基因分型。结果　１２ 例献血员血清,均为ＨＣＶ１ｂ 型;１５ 例血液病患者中,１４ 例（９３－３％ ）为ＨＣＶ１ｂ ,１ 例（６－７％ ）为ＨＣＶ１ｂ ＋ ２ 型。慢性丙肝患者３７ 例中,ＨＣＶ１ｂ 型３４例（９１－９％ ） ,混合感染基因型３ 例（ＨＣＶ１ａ ＋ １ｂ 、ＨＣＶ１ｂ ＋ ２ 、ＨＣＶ１ａ ．１ｂ ＋ ２ａ２ｃ 各１ 例）。静脉药瘾者３４ 例,其中ＨＣＶ１ｂ 感染１３ 例（３８－２％ ） ,ＨＣＶ６ａ１０ 例（２９－４％ ） ,ＨＣＶ３ｂ４ 例（１１－８％ ） ,ＨＣＶ３ａ１ 例（２－９ ％） ,混合感染６ 例（１７－６ ％） ,大多为ＨＣＶ２ 复合其他基因型。结论　贵州地区ＨＣＶ感染者中,以ＨＣＶ１ｂ 基因型为主,其次为ＨＣＶ６ａ ,尚存在ＨＣＶ３ａ 和ＨＣＶ３ｂ 。其中ＨＣＶ３ａ、３ｂ 、６ａ ,在本地区系首次报告,但主要存在于静脉药瘾者中。虽然有混合感染基因型的存在,但其基因基础需测序分析     

丙型肝炎病毒结构蛋白在痘苗病毒中的表达

为研究中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的抗原性及在细胞内的加工，将丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’非编码区（ＮＴＲ）和结构基因（Ｃｏｒｅ＋Ｅ１＋Ｅ２／ＮＳ１）插入痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５中，转染ＴＫ－１４３细胞，经纯化得到丙型肝炎（ＨＣＶ）重组痘苗病毒ｖＪＳＡ１１７５ＣＥ株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交表明，ＨＣＶ结构基因存在于痘苗病毒之中。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现，ｖＪＳＡ１１７５ＣＥ表达蛋白带位于９０ｋＤａ，为一多聚蛋白；此蛋白为分泌型，分泌量与细胞裂解物内量大致相同     

HCV准种多样性及其与临床关系的研究

目的     

沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分子流行病学研究

目的 研究沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分布和特点。方法 应用半巢式聚合酶链反应（PCR）扩增乙型肝炎病毒P基因，将PCR产物应用ABI377自动测序仪直接做核苷酸序列分析，并用DNA STAR软件进行种系发生分析及基因型鉴定。结果 HBV DNA标准株P基因片段可进行基因分型。在沈阳地区慢性HBV感染者中可检出基因型B、C和D，检出率分别为22％、50％和28％，基因型C分布与基因型B、D的差异有统计学意义，在慢性乙型肝炎患者和慢性HBV携带者间各基因型间分布比较中差异无统计学意义。结论 通过测定HBV DNAP基因序列片段可进行HBV DNA基因分型。沈阳地区乙型肝炎病毒基因型有基因型B、C和D型，其中基因型C为优势基因型。     

Treatment of chronic hepatitis C in patients with HIV/HCV coinfection

Hepatitis C virus (HCV) infection is one of the most frequent causes of comorbidity and mortality in the human immunodeficiency virus (HIV) population, and liver-related mortality is now the second highest cause of death in HIV-positive patients, so HCV infection should be countered with adequate antiviral therapy. In 2011 began the era of directly acting antivirals (DAAs) and the HCV NS3/4A protease inhibitors telaprevir and boceprevir were approved to treat HCV-genotype-1 infection, each one in combination with pegylated interferon alfa (Peg-IFN) + ribavirin (RBV). The addition of the first generation DAAs, strongly improved the efficacy of antiviral therapy in patients with HCV-genotype 1, both for the HCV-monoinfected and HIV/HCV coinfected, and the poor response to Peg-IFN + RBV in HCV/HIV coinfection was enhanced. These treatments showed higher rates of sustained virological response than Peg-IFN + RBV but reduced tolerability and adherence due to the high pill burden and the several pharmacokinetic interactions between HCV NS3/4A protease inhibitors and antiretroviral drugs. Then in 2013 a new wave of DAAs arrived, characterized by high efficacy, good tolerability, a low pill burden and shortened treatment duration. The second and third generation DAAs also comprised IFN-free regimens, which in small recent trials on HIV-positive patients have shown comforting preliminary results in terms of efficacy, tolerability and adherence.