麻花秦艽组织培养及植株再生的研究

目的：研究药用植物麻花秦艽组织培养技术,为工厂化育苗提供科学依据。方法：以麻花秦艽根、茎育出的无菌苗为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验。结果：以MS培养基为基本培养基,附加BA 0.5～1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,适于丛生芽的诱导与增殖；附加IAA 1.0 mg·L^-1+BA 3 mg·L^-1,适于愈伤组织的诱导；附加IAA 1.0 mg·L^-1+BA 2.0～3.0 mg·L^-1适于愈伤组织继代培养,附加BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1适于愈伤组织的分化。结论：通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的。     

泰国葛组织培养和快速繁殖体系优化研究

目的：研究泰国葛的组织培养与快速繁殖技术。方法：以嫩枝为外植体，通过调整基本培养基、生长调节剂种类和配比、以及向培养基中添加特殊化合物，以期选择出适合的诱导、继代增殖和生根培养基配方。结果：MS+IBA 0.05 mg·L^-1+BA 0.5 mg·L^-1利于诱导出芽，可用于初代培养；MS+IBA 0.02 mg·L^-1+BA 0.2 mg·L^-1和MS+BA 0.1 mg·L^-1可用于增殖和继代培养，25 d繁殖系数3.0；1/2 MS+IBA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.2 mg·L^-1+C(特殊化合物)10 mg·L^-1适于诱导生根获得再生植株，生根率76.9%。生根苗春、夏季移栽，成活率81.0%。结论：本方法可用于泰国葛种苗的快速繁殖。     

鱼腥草新品系离体培养和快速繁殖

目的 :通过筛选鱼腥草组织培养最适的植物生长调节剂种类、浓度以及最佳外植体 ,构建起鱼腥草快速繁殖体系。方法 :利用含不同浓度的不同植物生长调节剂种类的MS培养基对鱼腥草新品系不同外植体进行培养。结果 :鱼腥草快速繁殖 ,其外植体以地上茎节和茎尖较适宜。其中 ,MS + 0 .5mg·L^-1KT培养基诱导地上茎节 ,其抽叶数多且植株高。MS + 1.0mg·L^-16 BA培养基则对茎尖愈伤组织诱导作用较佳。MS + 1.0mg·L^-16 BA + 0 .2mg·L^-1NAA和MS + 0 .5mg·L^-16 BA + 0 .2mg·L^-1NAA培养基对地上茎节丛生芽的诱导速度快 ,数目多。生根培养基则以MS + 0 .2mg·L^-1IAA最好。结论 :通过诱导鱼腥草地上茎节丛生芽可大大提高鱼腥草繁殖系数 ,为生产提供足够种源。     

多种因素对半夏外植体直接诱导形成试管小块茎的影响

目的:研究一些植物生长物质种类和浓度、水解酪蛋白(CH)、活性碳(AC)、聚乙二醇(PEG4 0 0 0 )、蔗糖含量以及葡萄糖含量对半夏外植体直接诱导形成小块茎的影响。方法:采用正交试验方法,选用半夏的叶片、叶柄和块茎为试验材料,接种于各种不同培养基中。结果与结论:叶片直接诱导小块茎的适宜培养基有:MS +MET 0 . 5mg·L^-1+6 BA 0 . 5mg·L^-1+3%蔗糖和MS +6 BA 0 . 5mg·L^-1+IAA 0 .5mg·L^-1+3%葡萄糖;块茎直接诱导形成小块茎的适宜培养基有:MS +6 BA 1 0mg·L^-1+5 %PEG +5 %蔗糖和MS +CH 5 .0 0mg·L^-1+MET 0. 5mg·L^-1+6 BA1 0mg·L^-1+0. 5 %AC +5 %蔗糖;适宜植株生长的培养基有:MS +6 BA 0 . 5mg·L^-1+IAA 0 . 5mg·L^-1+AC0 5 % +5 %蔗糖和MS +MET0 . 5mg·L^-1+6 BA 0 . 5mg·L^-1+3%蔗糖。     

新疆雪莲胚芽的组织培养和植株再生

目的:以新疆雪莲胚芽为外植体,建立一套新疆雪莲快速繁殖技术。方法:以MS培养基为基本培养基,通过研究植物生长物质BA和NAA对丛生芽的分化、丛生芽的增殖和生根的影响找出相应的最佳生长物质组合。结果:在附加NAA0.02-0.1mg·L^-1和BA2mg·L^-1的MS培养基上,所有的胚芽都可在45d内诱导出丛生芽;丛生芽切成小块后接入含NAA0.1-0.2mg·L^-1和BA2-3mg·L^-1的培养基中,都可在30d快速增殖;在含0.4mg·L^-1NAA的大量元素减半的MS培养基中,92%的不定芽可在25d内生根;再生植株移栽后,生长较好,成活率达70%。结论:新疆雪莲的胚芽可通过不定芽途径高频率的形成植株。     

新疆雪莲细胞悬浮系的建立和黄酮类活性成分的产生

目的:建立新疆雪莲的悬浮培养体系。方法:研究不同培养基、培养基初始pH、碳源、接种量、植物生长物质含量对雪莲细胞生长和黄酮合成的影响。结果:N₆液体培养基在pH5.8、蔗糖含量50g·L^-1、接种量60-80g·L^-1FW时有利于细胞生长和黄酮合成,附加BA0.2mg·L^-1+NAA2mg·L^-1有利于黄酮合成,而附加BA0.5mg·L^-1+NAA3mg·L^-1则对生长有利。结论:培养条件的优化可有效提高雪莲悬浮细胞的生长和总黄酮的合成。     

试管地黄诱导技术的研究

目的 :研究小植株离体条件下试管地黄诱导的最佳培养基和培养条件。方法 :选用地黄“855”为试验材料 ,研究了植物激素、蔗糖浓度、活性炭和日照时间等对地黄试管苗不定根的形成及膨大的影响。结果与结论 :将试管苗先在 1/2MS +IBA 1mg·L^-1的培养基中诱导生根后 ,转入诱导培养基中 ,根可膨大形成试管地黄 ,其最适诱导培养基为MS+6BA2mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖 5% ,最适培养条件为 25℃、光照 2000～3000lx ,12h·d^-1,培养基中不宜添加活性炭和GA3 。     

农杆菌介导的高卢蜜环菌遗传转化体系的优化

目的 该研究在已有高卢蜜环菌遗传转化体系的基础上，对遗传转化体系进行优化以提高转化效率，为后续蜜环菌分子标记辅助育种、基因功能的研究奠定基础。方法 首先构建遗传转化的质粒pH101-PAgGPD-GFP-TrpC，将其转化到大肠埃希菌中扩大培养并提取质粒。提取的质粒分别转化LBA4404，EHA105，GV3101，AGL-1共4种不同的农杆菌。用转化后的农杆菌浸染高卢蜜环菌，筛选出转化率最高的农杆菌。再分别从抗生素种类及浓度、共培养时间、菌液浓度和浸染方法5个方面对农杆菌介导的高卢蜜环菌遗传转化体系进行优化。采用Synbiosis ProtoCol 3测量影像分析仪观察蜜环菌在不同条件下的表型谱。结果 优化后高卢蜜环菌遗传转化条件为农杆菌菌株采用EHA105，菌液浓度为吸光度A_{600 nm}=0.6；共培养时间为2 d，浸染方式为负压浸染10 min，初筛培养基为含400 mg·L^-1头孢噻肟钠，10 mg·L^-1潮霉素的PDA培养基，复筛培养基为含12 mg·L^-1潮霉素的PDA培养基。结论 该研究在已经建立的高卢蜜环菌的遗传转化体系的基础上成功对该体系进行了优化，且优化前后的转化率差异存在明显统计学意义（P<0.05），即优化后高卢蜜环菌的转化效率约为4.33%，相比于优化前提高了约8倍。     

藏红花球茎愈伤组织快速诱导的研究

 目的快速诱导藏红花球茎愈伤组织，解决藏红花资源短缺问题。方法系统地研究外植体来源、培养基、温度、光照和激素因素对藏红花球茎诱导愈伤组织的影响。结果以出芽后芽周围2 cm左右的球茎为外植体，MS为培养基，2.0 mg·L^-1 2，4-D 和0.25 mg·L^-1 6 BA为激素，在(21±0.3)℃，黑暗环境下培养，可以在14 d以后获得60%的愈伤组织诱导率。结论外植体和激素的选择是快速诱导藏红花愈伤组织的关键。     

茜草愈伤组织诱导与快速繁殖的研究

目的 :研究茜草的茎段培养技术 ,为茜草快繁建立最佳培养条件 ;建立诱导茜草愈伤组织的培养方法 ,为茜草所含次生代谢药用成分工业化生产 ,提供方便、快捷的途径。方法 :利用植物组织培养技术 ,将茜草茎段分别在不同的培养基中培养 ,诱导其成为完整植株 ;将茜草的茎、叶、根进行愈伤组织诱导。结果与结论 :MS +2,4D 2mg·L^-1+KT0 .1mg·L^-1培养基适于茜草的愈伤诱导 ;MS+6 BA 1.5mg·L^-1培养基上茜草茎段能迅速生长成苗 ;MS +2,4D 2mg·L^-1+KT0.1mg·L^-1培养基与MS +6BA1.5mg·L^-1培养基先后使用 ,可使茜草生根。     

溪黄草离体培养和快速繁殖

目的：探讨溪黄草Isodon serra (Maxim).Kudo离培养的过程,为优良品种的快速繁殖奠定基础。方法：以溪贡草无菌苗的带节茎为外植体,采用MT基体培养基,附加不同植物激素进行试验。结果：培养基中附加激素BA有利于芽的发生;适宜的BA浓度为1mg/L,出芽率高达100％,且出芽数量多;基本培养基以完全的MT成分为好;生根据培养选择MT＋0．2mg/L NAA,生根率为100％,试管苗移栽,成活率为90％,结论,通过溪黄草离体培养的研究,获得了较高的植株再生频率,建立了有效的组织培养再生体系。     

落葵组织培养与植株再生的研究

目的　探讨落葵愈伤组织诱导与分化的过程 ,为落葵的品种改良与快速繁殖提供良好的组织培养再生体系。方法　以落葵无菌苗的茎尖 ,带节茎及叶片为材料 ,采用 MT基本培养基 ,附加不同的植物激素进行试验。结果　愈伤组织诱导的适宜培养基为 MT+BA1m g/ L+NAA0 .5 m g/ L;落葵不同外植体诱导的愈伤组织 ,分化能力也有差异 ,茎尖愈伤组织最易分化 ,最高分化率可达 6 2 .5 % ;NAA与 BA结合有利于愈伤组织的分化 ,BA1～ 2 m g/ L 时 ,对芽的分化与生长较为适宜。适宜的生根培养基为 :MT+NAA0 .2 mg/ L。结论　通过落葵愈伤组织诱导与分化的研究 ,获得了较高的植株再生频率 ,建立了有效的组织培养再生体系。     

枳壳组织培养和植株再生研究

以枳壳PoncirustrifoliataRaf．实生苗上胚轴为材料进行离体培养，BA1mg／L时，出芽率最高（86．0％），BA浓度升高，出芽率随之下降；苗龄为20d的实生苗，其外植体易于出芽；实生苗培养中照光与否对出芽无太大影响；外植体取材部位，以实生苗的中部及下部较好，出芽率可达95％以上。     

根癌农杆菌对枳壳遗传转化的影响因素

目的：建立一套根癌农杆菌转化枳壳的有效方法,为枳壳新品种选育、引入外源基因奠定基础。方法：以枳壳实生苗的上胚轴为材料,农杆菌菌株为ＥＨＡ１０１,含质粒载体ＰＧＡ４８２ＧＧ,质粒上插入了ＧＵＳ,ＮＰＴⅡ基因。结果：２０ｄ苗龄的外植体转化再生率较高;其感染前先进行２ｄ预培养,对转化有一定促进作用;外植体与农杆菌共培养时间以２～３ｄ为宜;乙酰丁香酮能较大提高转化效率,转化再生频率达２７．５％;外植体与农杆菌共培养后延迟２ｄ选择,抗性芽发生率有所提高。结论：通过探讨根癌农杆菌对枳壳遗传转化的影响因素,获得较高的转化再生频率,建立了有效的转化再生系统。     

广藿香组织培养与植株再生研究

以广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth的根尖、叶片、带节茎段及茎段为材料进行培养,结果表明：叶片及带节茎段较易诱导愈伤组织,诱导率均为87．0％以上,适宜的培养基为MT BA0．5mg／L NAA0．2mg／L。愈伤组织的分化与增殖,以MT BA0．5～1．0mg／L为好。在MT基本培养基中,组培苗就能形成根。     

土贝母组织培养及植株再生

用土贝母茎段和叶片作外植体培养,可获得大量的试管苗。茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 2,4-D 2.0 mg/L NAA 0.5 mg/L BA 1.0 mg/L(单位下同);叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方为MS 2,4-D0.5 NAA 2.0。叶片接入MS BA 3.0 NAA 1.0培养基可直接产生不定芽;愈伤组织用MS BA 2.0 IAA 1.0培养基也可产生不定芽。MS BA 2.0 IAA 0.1适于腋芽发育、增殖。壮苗生根培养基为1/2 MS IBA 1.0。诱导愈伤组织和不定芽,选用pH 6.0,琼脂0.8%~1.0%;诱导生根选用pH 5.8,琼脂0.6%~0.7%。经炼苗后,组培苗移栽成活率达90%。     

盾叶薯蓣成熟叶片植株再生的研究

目的 :以成熟叶片为外植体 ,建立一套盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis的快速繁殖技术。方法 :以大量元素减半的MS培养基为基本培养基 ,通过研究BA ,NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽增殖和生根的影响找出相应的最佳激素组合。结果与结论 :在含 1.0～ 5 .0mg·L^-1BA和 1.0～ 2 .0mg·L^-1NAA的培养基上 ,80 %以上的叶片可以在 60d内形成愈伤组织 ;愈伤组织转到含 2 .0～ 5 .0mg·L-1BA和 0 .2～ 0 .5mg·L^-1NAA的培养基上后 ,60 %以上的愈伤组织可以在 50d内分化出不定芽 ;在含 2 .0mg·L-^-1IBA的培养基上 ,100 %的不定芽可在20d内长出 4～ 6条不定根。再生植株移栽后 ,生长健壮 ,成活率达 80 %以上。     

绞股蓝的试管繁殖

绞股蓝不定苗切段或基部不定芽结节在MS+BA1mg/L+IAA0.05mg/L培养基上形成大量丛生苗,苗的切段在1/2MS+IBA1mg/L培养基上可诱导生根,形成完整植株;用聚氨酯海绵作支持物代替琼脂,可加速试管苗的生长。     

金线莲丛生芽培养及有效物质生产研究

目的探明3种因素对金线莲Anoectochilus roxburghii丛生芽生物量和有效物质积累的影响以及在反应器内通过大量培养丛生芽生产有效物质的可行性,为金线莲产品开发提供一种新的材料来源。方法以金线莲丛生芽为材料,研究外植体长度、BA质量浓度和光条件对金线莲丛生芽的影响,观察利用气升式生物反应器培养金线莲丛生芽对生物量和有效物质积累的影响。结果外植体大小为5 mm时丛生芽增殖效果显著好于1 mm。BA质量浓度为2.5 mg/L时生物量最高,但丛生芽中多糖、黄酮和总酚等有效物质的生产量在BA质量浓度为2.0 mg/L时出现最高值。明培养比暗培养更适于生物量和有效物质的积累。反应器培养的丛生芽生物量,多糖,黄酮和酚类物质的生产量(678.3、12.2、17.8 mg/L)明显高于固体培养。结论外植体长度为5 mm、BA质量浓度为2.0 mg/L、在明培养条件下,利于丛生芽的生长,可生产较多的多糖、黄酮和酚类物质。在短时间内通过气升式生物反应器可得到大量丛生芽,反应器培养比固体培养能获得更多的生物量和有效物质。