BELT402细胞低剂量辐射后细胞周期和相关蛋白表达的变化

目的研究低剂量辐射（LDR）对人肝癌细胞（BEL7402）增殖、细胞周期及相关信号蛋白表达的影响,为LDR临床应用提供理论依据。方法体外培养BEL7402,分为7个实验组：假辐射组（0mGy）、5个LDR组（25,50,75,100,200mGy）及高剂量辐射组（1Gy）。辐射后用细胞计数法及噻唑蓝比色试验（MTT）检测细胞增殖率,用流式细胞术测定细胞周期中G0／G1,S,G2／M期的比例。应用蛋白分析系统分析检测细胞周期及相关信号蛋白共40个蛋白的表达。结果细胞计数及MTT试验,5个LDR组BEL7402细胞增殖率与假辐射组比较差异不显著（P〉0．05）。流式细胞术试验,5个LDR组BEL7402细胞12、24hG0／G1期细胞比例增高,但与假辐射组比较差异不显著（P〉0．05）;S期比例降低,与假辐射组比较差异显著（P〈0．05）;G2／M期比例升高,与假辐射组比较差异显著（P〈0．05）。48h后G0／G1,S,G2／M期与假辐射组比较差异不显著（P〉0．05）。蛋白分析试验LDR后8种蛋白表达降低。结论LDR对BEL7402细胞增殖无促进作用,但在一定程度抑制增殖及细胞周期相关蛋白的表达。     

三氧化二砷体外抑制人宫颈癌Hela细胞生长机制的研究

采用MTT法观察三氧化二砷（AS2O3）对人宫颈癌Hela细胞生长抑制作用;膜联蛋白V（Annexin V）-异硫氰酸荧光素（FITC）＋碘化丙碇（PI）双参数流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡情况,FCM测定细胞周期及增殖细胞核抗原（PCNA）表达。结果 AS2O3显著抑制Hela细胞生长增殖,且剂量—效应关系显著（r=0.98,P〈0.01）,其48 h的IC50值为5.59μmol/L。Hela细胞经AS2O3处理后可发生凋亡。AS2O3显著下调PCNA表达且使细胞周期阻滞于G2/M期（P〈0.01）。认为AS2O3在体外可显著抑制人宫预癌Hela细胞生长并诱导凋亡,其机制可能与阻滞细胞周期及降低PCNA蛋白表达有关。     

L-精氨酸对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察L-精氨酸（L-Arg）对哮喘气道重构大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的细胞周期分布及细胞周期调节蛋白（CCRP）表达水平的影响,探讨L-Arg体内干预哮喘大鼠ASMC增殖的可能作用机制。方法实验分成对照组、哮喘组、L-Arg组,建立大鼠哮喘气道重构模型,检测血清NO2^-／NO3^-含量、肺内支气管内管壁和平滑肌层厚度及ASMC核数、ASMC的细胞周期分布以及ASMC内细胞周期素E（cyclin E）、cyclinA、cyclinB、蛋白27^kip1（P27^kip1）的表达。结果 哮喘组大鼠支气管内管壁、平滑肌层的厚度和ASMC数目显著大于对照组（P〈0．05）;L-Arg组大鼠支气管内管壁的厚度、平滑肌层的厚度和ASMC数目显著小于哮喘组（P〈0．05）。哮喘组血清一氧化氮（nitricoxide,NO）水平显著低于对照组（P〈0．05）;L-Arg组血清NO水平显著高于哮喘组（P〈0．01）。哮喘组G0／G1期ASMC比例及P27^kip1表达水平显著低于对照组（P〈0．01）,G2／M＋S期ASMC比例及cyclinE、cyclinA和cyclinB表达水平显著高于对照组（P〈0．01）;L-Arg组G0／G1期ASMC比例及P27^kip1表达水平显著高于哮喘组（P〈0．05）,G2／M＋S期ASMC比例及cyclinE和cyclinA表达水平显著低于哮喘组（P〈0．05）。结论 L-Arg通过调控CCRP的表达水平阻滞细胞从G1期进入S期而抑制哮喘ASMC的增殖。     

肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响

目的观察肺表面活性物质（PS）对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4＋、CD8＋T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义。方法利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4＋、CD8＋T细胞的细胞周期分布和CD4＋、CD8＋T细胞内细胞周期调节蛋白p27kip1、cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平。结果哮喘患者CD4＋、CD8＋T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G0/G1期的CD4＋T细胞比例显著高于对照组（P〈0.01）。加PS组的S期CD8＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G2期的CD8＋T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;G0/G1期的CD8＋T细胞比例高于对照组（P〈0.05）。CD4＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD4＋T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组（P〈0.01）;CD4＋T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组（P〈0.05）。CD8＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组（P〈0.01）;CD8＋T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PS通过抑制CD4＋T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27kip1的表达,抑制CD4＋T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4＋T细胞增殖;通过下调CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kip1的表达,抑制CD8＋T细胞DNA合成。     

甲氨蝶呤联合4-氢过氧环磷酰胺对干燥综合征患者单个核细胞的作用

目的研究甲氨蝶呤（MTX）联合4-氢过氧环磷酰胺（4HC）对体外培养的干燥综合征（SS）患者外周血单个核细胞（PBMC）的周期、凋亡及分泌白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法 MTX、4HC、MTX联合4HC的3组药物在4个浓度水平0、1、10、100μg/ml,与体外培养的SS患者PBMC作用48h。用流式细胞术（FCM）检测细胞周期、凋亡,用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测IL-1β、TNF-α分泌水平。对MTX、4HC在0、1、10μg/ml浓度水平进行析因设计。结果细胞周期：与对照组相比,MTX10组、MTX100组PBMC的G0/G1期比例增加,S期及G2/M期比例减少;不同药物浓度4HC组对细胞各周期影响多数无统计学意义;联合组中MTX1＋4HC1组、MTX10＋4HC10组及MTX100＋4HC100组G0/G1期细胞比例减少,S期及G2/M期比例增加。细胞凋亡：MTX10组、MTX100组、4HC10组、4HC100组和联合组PBMC凋亡率高于对照组。同一药物浓度水平时,MTX1＋4HC1组凋亡率高于MTX1组,MTX10＋4HC10组凋亡率高于MTX10组及4HC10组,MTX100＋4HC100组凋亡率高于MTX100组及4HC100组。细胞因子：不同药物浓度的MTX组、4HC组和联合组IL-1β分泌水平均低于对照组;除MTX10外,各药物组TNF-α分泌水平均低于对照组。比较同一药物浓度水平时,不同组的IL-1β、TNF-α分泌水平,混合组均低于单用药组。交互作用：MTX联合4HC在0、1、10μg/ml3个浓度对G0/G1期比例、凋亡率、IL-1β及TNF-α分泌水平4个方面的F值分别为：4.68、45.19、4.44及3.392,P值均〈0.05,提示MTX和4HC存在交互作用。结论 MTX和4HC联合作用具有协同效应。MTX和4HC联合作用于体外培养的SS患者的PBMC,可有效抑制其G0/G1期的细胞凋亡,降低促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌水平。     

白芍总苷对骨关节炎成纤维样滑膜细胞的影响

目的 观察骨关节炎（OA）成纤维样滑膜细胞（FLS）体外培养时生长增殖特性，以及白芍总苷（TGP）对其增殖能力的影响。探讨白芍总苷的抗炎机制。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTF）法和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法观察OA和正常对照（Ns）膝关节滑膜组织体外培养时FLS增殖能力和c-fos表达情况,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测培养上清中的肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），用流式细胞仪测定FLS细胞周期的变化。结果 OA和NS的FLS在体外培养时的细胞倍增时间差异无统计学意义。加入高剂量TGP对OA-FLS细胞存活分数（SF）的抑制作用较NS-FLS组更显著（P〈0，05），2000mg／L和400mg／LTGP降低培养液上清中TNF-α和bFGF的水平，升高IFN-γ含量（P〈0．05），并抑制FLS的c-fos mRNA表达（P〈0．05）。OA-FLS细胞周期测定表明加入2000mg／L的TGP可延长G1期而缩短S期，但与不加药对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 高浓度TGP对OA-FLS的增殖能力、细胞因子分泌及原癌基因表达的抑制程度大于对正常滑膜FLS的作用，表明TGP调节FLS增殖特性．有抑制OA滑膜炎的作用。     

丝裂原激活蛋白激酶阻断剂与DNA甲基化酶抑制剂对人结肠癌细胞的协同影响

目的研究细胞外信号渊节激酶-丝裂原激活蛋白激酶途径（ERKMAPK）与DNA甲基化问的关系及对结肠癌细胞生物学行为的协同影响。方法培养人结肠癌细胞SW1116，分别以PBS、二甲基亚砜（DMSO）为对照组，PD 9805950μmol／L、5氮脱氧胞苷（5-aza—dC）5μmol／L、PD9805950μmol／L＋5-aza-dC5μmol／L进行药物干预．以定量RT-PCR检测DNA甲基化酶（Dnmt）1、3a和3b基因转录水平；流式细胞仪分析细胞周期；MTT测定细胞活力；光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果ERK—MAPK途径阻断剂PD98059下调Dnmt 1和Dnmt 3b．Dnmt抑制剂5-aza-dC下调Dnmt 1、Dnmt 3a和Dnmt 3b，且5-aza-dC联合PD98059对Dnmt1及Dnmt 3a mRNA的表达下调更为显著。5-azo-dC明显降低G0／G1期细胞百分比（P〈0．05），G2／M期细胞百分比明显增加（P〈0．05）；PD98059使G0／G1期细胞百分比降低（P（0．05）．G2／M期增加（P〈0．05）。PD98059明显抑制细胞生长。PD98059促进细胞分化，呈上皮样改变，细胞变狭长，胞质减少，细胞排列开始出现相对整齐；5-azm-dC干预组细胞大小不一，出现较多多倍体细胞（多个核分裂相）。结论ERK-MAPK途径阻断剂及Dnmt抑制剂均能抑制结肠癌SW1116细胞分裂、增殖，并诱导细胞分化；两者有协同作用；ERK—MAPK信号转导途径能调控DNA甲基化水平。     

高糖与活性氧对人腹膜间皮细胞p21^Wafl表达的影响

目的：研究不同浓度葡萄糖、活性氧（过氧化氢）、抗氧化剂（丙酮酸等）对体外培养人腹膜间皮细胞（HPMC）细胞周期的影响及其机制。方法：以体外培养的HPMC作为研究对象，分别给予不同浓度的葡萄糖、过氧化氢、丙酮酸作为刺激因素，观察细胞形态，用流式细胞仪检测细胞周期改变，测定C1期细胞比例。用半定量逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）检测细胞周期调控蛋白kp21^Wafl mRNA水平，用细胞免疫组化方法检测p21^Wafl蛋白水平，分析细胞周期改变机制。结果：高糖、过氧化氢可以引起细胞形态呈肥大、衰老改变，细胞周期分析提示G1期细胞比例升高，即细胞停滞于G1期；加入抗氧化剂（丙酮酸）后，G1期细胞比例下降。高糖、外源性过氧化氢可以使p21表达增加（基因与蛋白水平），在高糖培养液中加入抗氧化剂，可以使p21表达下降。结论：高糖、外源性过氧化氢皆可使细胞周期发生停滞，且高糖增加外源性过氧化氢的毒性作用；高糖的这种作用与内源性活性氧致p21^Walf的表达增加有关，使用抗氧化剂可使之减轻。     

15-LOX-1基因表达对胃癌细胞增殖的抑制作用

目的研究15-LOX-1基因对人胃癌细胞增殖的影响。方法通过脂质体介导瞬时转染15-LOX-1基因于培养的胃癌细胞株（AGS）中，以转染空载体pcDNA3．1（＋）的细胞及未转染质粒的细胞作为对照；用RT—PCR和Westernblot检测人胃癌细胞的15-LOX-1mRNA及蛋白表达；倒置显微镜观察转染前后AGS形态变化；用MTT法比较转染前后AGS的增殖水平，流式细胞术检测转染后AGS细胞周期的变化。结果胃癌细胞系巾未检测到15-LOX—1mRNA和蛋白的表达，转染后的AGS表达有15-LOX—1的mRNA及蛋白。转染重组质粒绀细胞增殖显著低于未转染组及空质粒转染组（P〈0．05），转染后AGS细胞G0／G1期细胞明显增加，S期细胞明显减少，与未转染组及空质粒转染组相比均有显著性差异（P〈0．05）。结论15-LOX-1基因能抑制胃癌细胞的增殖，为进一步探讨胃痛的发病机制及治疗提供实验依据。     

氟对小鼠成骨细胞增殖的影响

目的 观察氟对体外培养小鼠成骨细胞增殖的影响。方法 原代培养小鼠成骨细胞，以0（对照组）、5、10、20、40mg／L剂量染氟，光、电镜观察成骨细胞的形态学变化；采用生长曲线、噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测细胞周期，观察细胞数量变化和细胞周期时相分布。结果 第10天时，5、10、20mg／L染氟组从形态学上表现出细胞增殖。而40mg／L组中出现细胞凋亡。染氟24h时，20mg／L组与对照组相比细胞增殖明显，差异具有统计学意义（P〈0．05），随着时间延长，染氟组表现出更强的增殖活性，至72h时，各染氟组成骨细胞增殖均高于对照组（P〈0．05）。24h时各染氟组间细胞增殖水平未见明显差异（P〉0．05），48h以后40mg／L组明显低于其他各染氟组（P〈0．05）。而染氟72h时5mg／L组增殖强度也低于10、20mg／L组（P〈0．05）。与对照组相比，10、20mg／L组处于G0／G1期的细胞数减少，而S期细胞数增加（P〈0．05），同时两组的细胞增殖指数也高于对照组（P〈0．05），生长表现出增殖状态；其中10mg／L组与其他染氟组之间，差异有统计学意义（P〈0．05），表现为细胞增殖能力增强。结论 低剂量的氟在较短作用时间内可以促进体外培养小鼠成骨细胞增殖，随剂量增加和暴露时间延长其促进作用减弱。     

The Effects of Stichopus japonicus Acid Mucopolysaccharide on the Apoptosis of the Human Hepatocellular Carcinoma Cell Line HepG2

In this study, the effects of Stichopus japonicus acid mucopolysaccharide (SJAMP) on the apoptosis of the human hepatocellular carcinoma cell line HepG2 were examined. The underlying mechanism was investigated by determining the effect of SJAMP on the expression of Bcl-2 and nm23-H1 genes in HepG2 cells. In vitro cultured HepG2 cells were treated with different concentrations of SJAMP. The dimethylthiazol (MTT) assay was used to determine the inhibition of cell proliferation. Expression of Bcl-2 and nm23-H1 genes was determined by Western blot analysis. The results showed that SJAMP inhibited the proliferation of HepG2 cells in a time- and dose-dependent manner, SJAMP induced apoptosis in HepG2 cells, and SJAMP decreased the expression of Bcl-2 and increased the expression of nm23-H1. We conclude that SJAMP inhibits the proliferation of HepG2 cells by inducing apoptosis. These results provide a theoretical basis for the utilization of SJAMP as a potential antitumor component for the treatment of hepatocellular carcinoma.     

胃癌增殖细胞核抗原、bcl-2基因表达及其与肥大细胞浸润的关系

目的 探讨肥大细胞对胃癌组织生长的影响机制及与增殖细胞核抗原（PCNA）、bcl-2基因的关系。方法 采用阿尔辛蓝-沙红及免疫组织化学染色法,同步检测74例胃癌标本中的肥大细胞数及PCNA、bcl-2基因蛋白的表达。运用图像分析仪对浸润的肥大细胞及PCNA的表达进行定量计数;采用半定量法检测bcl-2的表达。结果 胃癌组织内的肥大细胞主要分布于癌旁交界区。此区肥大细胞的数量显著多于癌内间质区（t=9．11,P〈0．01）,两者呈正相关（r=0．303,P〈0．01）。肥大细胞的数量与PCNA及bcl-2的表达呈显著负相关。有肥大细胞浸润组的PCNA表达指数显著低于无肥大细胞浸润组（P〈0．01）。bcl-2高表达组的癌内间质区肥大细胞数目显著少于bcl-2低表达组。结论 癌间质内肥大细胞数目及类型的变化是肥大细胞参与机体抗肿瘤反应的形态学依据。肥大细胞可通过干扰胃癌组织PCNA、bcl-2的表达,抑制肿瘤细胞的增殖。     

大黄素对肾脏系膜细胞增殖细胞核抗原的影响

本文应用体外细胞培养和免疫组化技术,以增殖细胞核抗原(PCNA/cyclin)为标志抗原,观察了大黄素对肾小球系膜细胞周期调控的影响,发现大黄素能明显抑制系膜细胞向S期的转化。我们以往的工作已证实大黄素能抑制肾小球系膜细胞c-myc原癌基因mRNA的表达,并可能通过阻抑系膜细胞由G_1期向S期转化,进而抑制系膜细胞增殖。本项研究通过观察大黄素对细胞周期S期标志抗原(PCNA/cyclin)的影响,进一步证实了上述理论。     

急性非淋巴细胞白血病患者细胞PCNA、DNA变化的临床意义

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)及 DNA表达与白血病患者骨髓细胞增殖之间的关系 ,以及其变化的临床意义。方法　用双标记流式细胞术对急性非淋巴细胞白血病 (ANL L )患者的骨髓细胞进行了 PCNA表达、DNA含量及细胞周期分布检测。结果　 ANL L患者 PCNA表达为 (5 9.86± 2 2 .4 9) % ,显著高于正常对照组 (2 4 .0 1± 6 .94 ) % ;PCNA表达在白血病病程中呈动态变化 ,治疗前 PCNA标记指数 (L I)为 (6 0 .2 2±2 0 .35 ) % ,完全缓解时接近正常 [(2 6 .2 8± 12 .5 1) % ],复发时升至 (5 1.4 2± 2 1.34) % ;DNA异倍体的检出率为2 1.9%。结论　 PCNA表达对观察 ANL L 患者病情有重要参考意义 ,其表达增高可能预示临床复发     

冬凌草甲素对鼻咽癌HNE-1细胞株生长及其PCNA、Caspase-3表达的影响

目的观察冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞株HNE-1生长及其细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3表达的影响。方法 HNE-1中加入冬凌草甲素,MTT法观察其生长情况,FCM检测细胞周期,免疫细胞化学染色法检测PCNA,Western-blot技术检测Caspase-3。结果加入冬凌草甲素后HNE-1细胞生长受抑制,细胞被阻滞于G_0/G_1期;冬凌草甲素作用48 h后,HNE-1细胞的PCNA蛋白表达下调,Caspase-3蛋白表达增加。结论冬凌草甲素在体外可显著抑制人鼻咽癌细胞株HNE-1细胞生长并诱导其凋亡,其机制可能是下调PCNA蛋白表达,激活Caspase-3的活性。     

E-cadherin和PCNA在脑胶质瘤中的表达及关系

采用免疫组织化学方法检测51例脑胶质瘤患者术后存档的石蜡切片组织中上皮钙粘附素(E—cadherin)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果显示，74．51％(38／51)的脑胶质瘤患者E—cadherin表达减弱，25．49％(13／51)的患者E—cadherin表达正常；68．63％(35／51)的患者PCNA呈高表达，31．37％(16／51)的患者PCNA呈低表达。二者表达有相关性(P＜0．05)。认为E—cadherin表达正常对脑胶质瘤细胞增殖有抑制作用，E—cadherin的表达减弱后细胞增殖能力增加；E—cadherin对脑胶质瘤细胞增殖的抑制作用是不完全的。     

苯乙酸钠诱导人前列腺癌细胞凋亡及其机理的研究

目的　探讨苯乙酸钠 (Na PA)诱导人前列腺癌细胞株 (PC- 3)凋亡及其分子机理。方法　应用流式细胞术 (FCM)观察不同剂量 Na PA对 PC- 3细胞周期改变的影响 ,通过 RT- PCR检测 bcl- 2和增殖细胞核抗原 (PCNA)在 m RNA水平的表达。结果　 PC- 3细胞体外经不同剂量 (0m M/ L,1 .5m M/ L,3.0 m M/ L,6.0 m M/ L) Na PA处理后 ,细胞周期的 G0 / G1 期升高 ,S期、G2 / M期相对下降 ,G0 / G1 峰前有明显的亚二倍体峰 ,即凋亡峰 ,且随着 Na PA浓度的增加 ,凋亡细胞数逐渐增多 (P<0 .0 0 1 ) ;bcl- 2和 PCNA在 m RNA水平随 Na PA剂量的增加 ,表达量下降。结论　Na PA可能通过下调 bcl- 2和 PCNA在 m RNA水平的表达诱导 PC- 3细胞凋亡。     

细粒棘球蚴囊液对HepG2肝癌细胞系细胞周期的影响

目的探讨细粒棘球蚴(Eg)囊液(HCF)在感染急性期对宿主肝细胞MAPK信号通路及细胞周期的影响。方法常规方法培养HepG2细胞,以HCF为刺激物,于不同时间点用Western blot检测p-ERK、增殖细胞核抗原PC-NA、细胞周期蛋白cyclin-D1、A、B1和E的表达水平,并与无FCS组比较。结果 Western blot检测显示,15%、30%HCF组p-ERK分别在换液培养3h和30min高表达(P<0.05),PCNA分别在3h和12h高表达(P<0.05),cyclin-D1在3h高表达(P<0.05),cyclin-A分别在3h和12h高表达(P<0.05),15%HCF组cyclin-E在3h高表达(P<0.05),15%、30%HCF组cyclin-B1在各时间点表达量微弱(P<0.05)。结论 HCF对体外培养的HepG2细胞无毒害,且对其增殖有一定的促进作用。     

不同浓度甲氨蝶呤对外周血单个核细胞表达和分泌白细胞介素-17的影响

目的 体外观察不同浓度的甲氨蝶呤(MTX)对外周血单个核细胞(PBMCs)表达和分泌白细胞介素(IL)-17的影响,探究MTX有效治疗类风湿关节炎(RA)的可能机制.方法 分离RA患者和健康人PBMCs,予不同浓度MTX预处理,抗人CD3和抗人CD28刺激后,37 ℃体积分数为0.05的CO2培养箱培养.分别于培养的不同阶段收集细胞或上清液,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析IL-17mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养液中IL-17的浓度;荧光抗体标记细胞表面抗原CD4和胞内蛋白 IL-17,流式细胞仪分析CD4+IL-17+细胞的比例.结果 比较采用两两配对t检验或独立样本t检验.结果 浓度为0.1、1.0、5.0、25.0μg/ml MTX组IL-17mRNA/GAPDH比值分别为(0.58±0.09、0.48±0.11、0.50±0.09、0.51±0.14),与无药抗体组(0.76±0.08)组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.01);IL-17分泌水平则分别为(121±54)、(104±45)、(90±36)、(115±41)pg/ml,与无药抗体组(370±187)pg/ml组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.01);MTX处理组CD4+IL-17+细胞比例的平均值下降,但统计学检验差异无统计学意义(P＜0.05).结论 MTX可以有效抑制PBMCs合成和分泌IL-17,而且在一定的剂量下可发挥显著作用,加大剂量并不能增强该作用.     

p21和增殖细胞核抗原在肝硬化组织的表达及其与肝细胞不典型增生的关系

目的探讨p21和增殖细胞核抗原（proliferatingcellnuclearantigen,PCNA）的相互关系及它们在肝硬化、肝细胞不典型增生（LCD）、肝细胞癌(HCC)形成中的作用。方法运用S-P法对60例单纯肝硬化、30例癌旁肝硬化及27例HCC的p21、PCNA及HBsAg表达情况进行实验研究。结果癌旁肝硬化、单纯肝硬化、癌组织p21阳性率分别为90%、68.33%、62.96%。癌旁肝硬化与单纯肝硬化及癌组织之间,差别有显著性意义(P＜0.05)。伴LCD改变的肝硬化,p21、PCNA及HBsAg阳性率分别为92.45%、73.59%、64.92%均高于不伴LCD改变的肝硬化组织（P＜0.05）。HBsAg阳性及PCNA表达阳性的肝硬化组织,其p21阳性表达率分别为87.32%、86.21%,均明显高于HBsAg阴性及PCNA阴性的肝硬化组织（P＜0.01）。结论(1)p21的过度表达可能与HCC的起始过程有关,在HCC形成发展的早期阶段发挥重要作用。(2)LCD是一群具有肿瘤性增殖潜能的癌前细胞群,尤其是伴有HBV感染,且有p21及PCNA共同过量表达者,有发生HCC的高度危险。(3)HBV感染及PCNA过量表达与p21表达密切相关。