rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34^＋细胞含量

本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨影外周血混合采集物中CD34^＋细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF5μg／（kg·d）,连续5天。第4天和第5天分别采集骨髓和外周血干细胞。首次干细胞采集时用EX2100血细胞分析仪检测供者外周血细胞计数,同时应用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34^＋细胞数量。结果表明：rhG—CSF动员的70例供者首次干细胞采集时外周血单核细胞的数量为（1．15±0．60）×10^9／L;骨髓和外周血采集物中的CD34^＋细胞总量分别是（5．854±2．93）×10^7和（1．33±0．77）×10^8;骨髓和外周血混合采集物的CD34^＋细胞总量是（1．92±0．86）×10^8。Pearson和Spearman分析显示首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数（×10^9／L）与骨髓采集物中CD34^＋细胞的总量（相关系数：r=0．265,P=0．027）、外周血采集物中CD34^＋细胞总量（r=0．340,P=0．004）以及混合移植物中CD34^＋细胞的总量（r=0．398,P：0．001）均存在显著的相关性;多因素分析表明,首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数与骨髓采集物、外周血采集物以及混合移植物中CD34^＋细胞的总量均呈正相关关系（P值分别为0．027、0．004和0．001）。首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量对混合移植物中CD34^＋细胞总量预测的敏感性是71％,特异性是70％（P=0．007）。结论：rhG-CSF动员的骨髓和外周血混合移植健康供者首次干细胞采集时外周血单核细胞计数可有效预测输注给受者的CD34^＋细胞总量即采集效果。     

重组人G-CSF对健康供者外周造血干／祖细胞动员和采集效果的影响因素分析

应用重组人粒系集落刺激因子（rhG—CSF）对健康供者进行动员并采集造血干细胞用于异基因外周血造血干细胞移植已在临床广泛应用，本研究通过对影响外周干细胞动员和采集效果的多因素分析，进一步探讨最佳动员方案及采集时机。采取回顾性方法分析了431例健康供者外周血干细胞动员采集效果，并进一步分析了供者一般特征、rhG—CSF动员天数、每日皮下注射次数、剂量与采集效果的关系。结果表明：rhG—CSF在动员中平均应用剂量为5．7μg／（kg·d），平均采集1．7次，收获单个核细胞数平均为9．57×10^8／kg，CD34^＋细胞平均为4．91×10^6／kg。绝大多数供者不良反应轻微。多因素分析结果显示，采集效率主要与供者体重指数，采集天数相关。rhG—CSF动员第5天采集的供者，其MNC数、CD34^＋细胞数及第一次单采成功率均优于其他时间采集的供者。同时，本组供者应用rhG—CSF剂量较小且剂量范围较窄，rhG—CSF剂量不如采集时间对采集物质量的影响明显。结论：小剂量应用rhG—CSF动员并于第5天开始采集是健康供者造血干细胞动员的较理想方案。     

rhG-CSF动员健康供者CD34^＋细胞产率的影响因素分析

为探讨rhG—CSF动员健康供者年龄、性别等因素对采集物CD34^＋细胞产率的影响,分析61例健康供者外周血采集物CD34^＋细胞数量与自身特点的相关性,并进行多因素回归分析。以供者性别、年龄、身高、体重、体重指数（BMI）和采集时间作为研究参数,外周血采集物单核细胞计数、CD34^＋细胞占有核细胞百分比、CD34^＋细胞计数、CD34^＋细胞每公斤体重（供者）计数的均值作为研究变量。结果表明,供者年龄是影响CD34^＋细胞产率主要因素,呈中等负相关（-0．60〈r〈-0．45,P〈0．005）。偏相关分析排除身高、体重、BMI的影响,年龄仍和CD34^＋细胞产率呈中等负相关（-0．50〈r〈-0．35,P〈0．02）。BMI仅与CD34^＋细胞每公斤体重计数呈微弱负相关（r=-0．297,P〈0．05）,性别对CD34^＋细胞产率无明显影响,CD34^＋细胞计数的差别仅出现在男性和女性低龄组（年龄〈35岁）间,男性身高、体重、BMI为CD34^＋细胞计数增加的有利因素。供者采集时间为给药后第4天采集,70％供者CD34^＋细胞产率达峰值。结论：年龄应作为供者选择的首要因素,性别、身高、体重和BMI对CD34^＋细胞产率的影响是次要的。     

rhG-CSF对骨髓采集物中记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用

本研究主要探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）对骨髓采集物记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用。采用流式细胞仪检测稳态骨髓（SS—BM）和rhG—CSF预激的骨髓（G—BM）中CD4^＋、CD8^＋T细胞百分比及其记忆细胞表面黏附分子CD49d、CD54、CD62L和CD11a的表达。结果显示：rhG—CSF应用后骨髓采集物中CD4^＋、CD8^＋T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低（P〈0．001）,记忆T细胞的比例没有明显变化;CD49d在CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达百分比显著下降（p〈0．05）,但在记忆T细胞的表达百分比没有明显的变化;CD54在CD4^＋及其记忆T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞的表达百分比明显降低（P〈0．05）,而在CD8^＋记忆T细胞的表达百分比没有明显变化;CD62L在CD4^＋、CD8^＋及其记忆T细胞的表达百分比显著下降（P〈0．01）;CD11a在CD4^＋及其记忆T细胞的表达百分比明显降低（p〈0．05）,而在CD8^＋及其记忆T细胞的表达百分比没有明显变化。结论：rhG—CSF部分下调骨髓中CD4^＋、CD8^＋以及相应的记忆T细胞上黏附分子表达。     

rhG-CSF对健康供者外周血和骨髓免疫特性影响的比较

本研究探讨rhG—CSF对健康供者外周血采集物（G—PB）和骨髓采集物（G—BM）免疫学特性影响的异同。用MTT法和夹心酶联免疫复合物（ELISA）法检测G—PB和G—BM中T淋巴细胞增殖能力和IL-4、IFN-7的分泌，并用流式细胞术测定两种移植物的T细胞亚群、树突状细胞（DC）亚群、单核细胞及共刺激分子CD28的表达。结果表明：G—PB中淋巴细胞，CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞，DC1、DC2以及单核细胞的含量，CD4／CD8的比值高于G—BM（P〈0，001）。G—PB的T淋巴细胞增殖能力高于G—BM（P〈0．05）；每微升G—PB移植物中T淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ,IL-4的量均明显高于G—BM，且G—PB中IL-4／IFN-γ比值小于G-BM（P〈0．001），DC2与T淋巴细胞的比值也低于G—BM（P〈0．01）；而G-PB中CD4^＋、CD8^＋细胞上CD28表达的百分比和总体表达均高于G—BM（P〈0．001）。结论：rhG—CSF体内应用诱导G—PB和G—BM产生的T细胞免疫低反应性是有差异的，而两者之间的差异是G—PB和G—BM移植后移植物抗宿主病（GVHD）发生率和程度不同的免疫学基础。     

外周血CD3+CD45+T细胞在原发性肝癌患者中的表达及意义

目的探讨原发性肝癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）患者外周血中CD3^＋CD56^＋T细胞、CD3^＋CD56^-T细胞、CD3^＋CD56^＋NK细胞在（HCC）细胞免疫中所发挥的作用。方法采用流式细胞技术对14例HCC患者及30例健康对照人群外周血中的CD3^＋CD56^＋T细胞、CD3^＋CD56^-T细胞、CD3^-CD56^＋NK细胞进行检测。结果14例HCC患者与30例正常对照组外周血测定结果比较发现：HCC患者外周血中CD3^＋CD56^-明显降低，CD3^＋CD56^＋则明显升高，与正常对照组比较差异具有极显著性（P均小于0．005）。HCC患者CD3^-CD56^＋（NK）较正常对照组下降，两组比较差异具有显著性（P小于0．05）。结论CD3^＋CD56^-T细胞在HCC患者外周血中增生活跃，提示高表达的CD3^＋CD56^-T细胞在肝癌免疫应答中具有重要意义。     

rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4^＋CD8^＋初始及记忆T细胞亚群的比较

本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员的外周血采集物（G—PB）与稳态骨髓（SS—BM）中CD4^＋、CD8^＋初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CIM5RA和CD62L的表达将CD4^＋、CD8^＋T细胞划分为初始T细胞（naive，CIM5RA^＋CD62L^＋）、中心记忆T细胞（centralmemory，TCM，CIM5RA—CD62L^＋）、效应记忆T细胞（effeetor memory，TEM，CIM5RA^-CD62L^-）、终末分化效应记忆T细胞（terminally difierentiated effeetor memory，TTTp，CIM5RA^＋CD62L^-）。用流式细胞仪测定G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞的比例组成，并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量。结果表明：G—PB中CD4^＋、CD8^＋T细胞的比例组成及CD4^＋／CD8^＋比值均高于SS—BM（P〈0．05）；G—PB中CD4^＋初始T细胞的比例显著低于SS—BM（P〈0．001），而CD4^＋TEM比例显著高于SS—BM（P〈0．001）；G—PB中CD8^＋初始和记忆T细胞亚群的比例与SS—BM无显著差异（P〉0．05）；与SS—BM相比，G—PB中CD4^＋CD62L^＋T细胞的比例明显降低（P=0．001），每微升G—PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS—BM（P〈0.001）。结论：G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异，这种差异可能影响G—PB和SS—BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同。     

应用MCS＋ED采集自体外周血干细胞治疗糖尿病足的研究

目的探讨糖尿病足患者外周血干细胞的采集方法。方法11例患者均给予G—CSF300μg／d动员,在3～5d后用MCS＋ED血细胞分离机采集患者自体单个核细胞,处理全血量（4905．88±306．78）ml,用介法将干细胞悬液注入患肢胴动脉。结果采集物中单个核细胞含量（14．83±2．28）×10^9／袋;CD34^＋细胞含量（5．32±3．62）×10^7／袋,产品容积（125．38±10．82）ml：10例患者外周血干细胞移植后疼痛、间歇性跛行、患肢发凉、溃疡等临床症状明显改善,1例临床症状未改善。结论MCS＋ED采集外周血干细胞安全可靠,效果良好;用介入法进行外周血干细胞移植对患者损伤小、操作方便,可有效改善糖尿病足的症状。     

重组人白介素11联合粒细胞集落刺激因子动员的自体外周血造血干细胞移植

本研究旨在探索重组人白介素11（rhIL—11）联合重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员外周血造血干细胞进行自体外周血干细胞移植的作用。16例预行自体外周血干细胞移植的非霍奇金淋巴瘤及急性髓系白血病患者随机分为实验组（rhIL-11联合rhG—CSF动员）及对照组（rhG—CSF动员），两组均在动员性化疗后血象下降至最低值有回升迹象时应用rhIL—11及rhG—CSF；rhG—CSF5μg/（kg·d）动员中位时间5．5天，rhIL—1150μg/（kg·d）动员中位时间4天；动员后观察外周血白细胞和血小板计数，以及干细胞采集物单个核细胞、CD34^＋细胞、CFU—GM集落数的变化；按常规进行自体外周血干细胞移植后，观察粒细胞及血小板植活时间及单采血小板输注量。结果显示：实验组及对照组动员后外周血白细胞和血小板计数，以及干细胞采集物单个核细胞、CD54^＋细胞及CFU—GM集落数无显著性差异（P〉0．05）。自体外周血干细胞移植后，实验组中性粒细胞数≥0.5×10^9／L的中位时间为10．5天，对照组中为13天．实验组比对照组提前2.5天（P〈0．05）。实验组血小板数≥20×10^9／L的中位时间为11.5天，对照组为13天，实验组比对照组提前1.5天（p〈0．05）。实验组输注单采血小板中住数为3.5单位，对照组为5单位，实验组比对照组减少1．5单位（P〈0．05）。实验组使用动员剂的不良反应主要有低热、乏力、感冒样症状、食欲不振、头晕、肌肉酸痛等，对照组仅出现低热，患者对以上症状均可以耐受，停药后症状自行消失。结论：rhIL—11联合rhG—CSF动员外周血造血干细胞安全有效，在自体外周血干细胞移植后造血重建较快，单采血小板输注量少。     

亲缘与非亲缘供者造血干细胞动员和采集的安全性比较

本研究对捐献骨髓及外周造血干细胞的健康亲缘供者及只捐献外周造血干细胞的非亲缘供者,在造血干细胞动员和采集的安全性方面进行比较。对2005年9月至2006年8月在北京大学人民医院血液病研究所提供异基因造血干细胞的亲缘供者100例及2003年11月至2007年12月在中国造血干细胞捐献者资料库北京管理中心登记的非血缘供者71例,在造血干细胞动员、采集及采集后1、3、6个月及每年进行了评估。对血常规指标、不良反应等进行观察记录,并对随访期间的长期不良反应及生活质量进行了问卷调查。结果显示：亲缘供者提供的骨髓＋外周血干细胞总MNC剂量为6．70（4．11—12．23）×10^8／kg,总CD34^＋细胞剂量为3．40（1．61—13．57）×10^6／kg：非亲缘供者提供的外周血干细胞总MNC剂量为6．69（3．35-11．48）×10^8／kg,总CD34^＋细胞剂量为3．50（1．15—11．60）×10^6／kg。动员时的常见副作用为骨痛,在亲缘供者的发生率为47％,在非亲缘供者的发生率为43．7％,两组之间无显著性差异;采集时的常见副作用为感觉异常（口唇和四肢）,在亲缘供者的发生率为25％,在非亲缘供者的发生率为29．6％,两组之间无显著性差异;所有供者对副作用皆可耐受,没有供者因为不能耐受而中断采集。亲缘供者由于骨髓和外周血的采集,其血红蛋白水平低于非亲缘供者[（125．8±20．2）g／L vs（143．2±20．1）g／L]（P〈0．05）。非亲缘供者由于外周干细胞采集多为2次,其血小板计数低于亲缘供者[（126．2±57．2）×10^9／L vs（162．4±72．9）×10^9／L]（P〈0．05）。在长期随访中,亲缘供者与非亲缘供者的血常规检查结果比较无显著性差异,无长期的不良反应,健康状况良好。结论：亲缘与非亲缘供者进行造血干细胞采集都是安全可行的。术前进行完备的检查,术中仔细操作、严密观察,及术后长期随访对于供者的安全有重要的意义。     

低剂量rhG-CSF对56例非血缘供者外周造血干细胞动员

本研究观察低剂量人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对非血缘健康供者的影响,探讨用于中华造血干细胞捐赠者资料库提供的非血缘健康供者外周造血干细胞动员方案。56例非血缘健康供者接受rhG-CSF 5μg/(kg.d)皮下注射,在动员第4、5两天或第5、6两天采集干细胞,观察动员效果及不良反应,检测动员前后血常规指标、CD3+、CD4+、CD8+和CD20+细胞比例;对采集物进行单个核细胞(MNC)和CD34+细胞计数;对所有供者随访至2006年5月31日。结果显示:在rhG-CSF动员过程中出现1级毒副作用(按WHO分级标准):腰背酸痛17.9%(10/56)、焦虑失眠8.9%(5/56)、疲乏4.5%(3/56)等,无需特殊处理,无需终止动员。第4、5两天采集和第5、6两天采集所得的MNC分别是(5.95±1.52)×108/kg和(7.19±2.12)×108/kg;CD34+细胞分别是(3.03±1.09)×106/kg和(7.92±2.50)×106/kg。血红蛋白水平、血小板量、CD3、CD4、CD8、CD20百分比动员前后无变化。结论:5μg/(kg.d)rhG-CSF用于非血缘健康供者的动员是安全而有效的。     

应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4~+ CD25~+调节性T细胞

目的探讨在人重组的粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血单个核细胞中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞可行性及其表型和功能。方法收集本院外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB组)和动员后的外周血采集物(G-PB组)各10例,用免疫磁珠法分选出CD4+CD25?T细胞,并用转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导,分别应用流式细胞术、RT-PCR和细胞增殖、抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较2组之间CD4+CD25+T细胞转化率、抑制功能的差异。结果1)G-PB和PB来源的CD4+CD25?T细胞在抗-CD3 M cAb和TGF-β1作用下CD25+分子表达不同,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);2)TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3;3)PB、G-PB来源的TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞具有免疫抑制功能,cpm值分别为:11 739±352和18 732±437(P<0.05)。结论G-CSF动员的外周血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。     

间充质干细胞对活化T淋巴细胞的免疫调节作用

本研究的目的是探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对活化T淋巴细胞的免疫调节作用及其在allo—HSCT相关GVHD防治中的作用。用终浓度为10μg/ml的PHA于不同时间作用T淋巴细胞，以^3H—TdR掺入法检测T细胞增殖功能；以不同数量的MSC分别与活化T淋巴细胞作用，根据MSC数量不同实验分为A组（对照组，不加MSC）、B组（MSC2×10^4）、C组（MSC4×10^4）、D组（MSC8×10^4），用^3H—TdR掺入法检测作用前后T细胞功能，FCM检测细胞免疫表型。结果显示，在终浓度为10μg／ml PHA作用下，T淋巴细胞的增殖能力随培养时间的延长而增强，48小时达高峰。FCM检测MSC细胞表型表明：CD44、CD105、CD29、FIK1表达阳性，不表达CD33、CD34、CD45、HLA—DR。随着MSC数量增加，与共培养前相比，T细胞的SI值逐渐降低（P〈0．05），但C组和D组间比较无差异（P〉0．05）。在低数量MSC作用下，CD3^＋CD4^＋表达低于对照组（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD152^＋高于对照组（P〈0．05）；C组和D组与对照组相比，CD3^＋CD4^＋表达明显降低（P〈0．01），CD3^＋CD8^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD152^＋明显增高（P〈0．01）。结论：丝裂原PHA可以使T细胞活化；骨髓MSC在体外可以使活化T细胞功能和细胞免疫表型发生改变，下调CD3^＋CD4^＋的表达，上调CD3^＋CD8^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD152^＋的表达。     

健康供者特征对rhG-CSF预激的骨髓采集物CD34+细胞和T细胞亚群的影响

目的 探讨健康供者特征对rhG-CSF预激的骨髓(G-BM)采集物造血和免疫细胞成分的影响.方法 150名健康供者体内应用rhG-CSF 5 μ·kg-1·d-1连续4～5 d,第4,5天采集骨髓和外周血,用流式细胞术测定G-BM采集物中的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD14+、CD34+细胞以及CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的数量,并分析供者性别、年龄、体重、是否妊娠等特征对G-BM成分的影响.结果 150名健康供者G-BM所含有核细胞,淋巴细胞,CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD14+、CD34+细胞以及CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的中位值分别为31 050(12 200～58 100)、2122(506～6618)、1344(307～4791)、692(145～3038)、616(112～2575)、986(265～2958)、63(11～505)和83(9～390)/μl.年龄≤38岁的供者G-BM中的有核细胞、CD34+细胞以及CD3+ CD4-CD8-调节性T细胞的数量分别为33800(18600～57100)、76(22～505)和97(11～380)/μl,显著高于年龄＞38岁的供者[分别为28 000(12 200～58 100)、49(11～220)和65(9～389)/μl],P值分别为＜0.05,＜0.001和0.001.外周血单核细胞计数＞0.37×109 /L的供者G-BM中有核细胞的数量[33550(12 200～57 100)/μl]显著高于≤0.37×109 /L的供者[27 150(13 800～58 100)/μl](P=0.005).多因素分析显示年龄和外周血单核细胞是G-BM中有核细胞采集量的影响因素[HR值分别为0.41和2.87;P值分别为0.01和0.003];年龄是G-BM中CD34+细胞采集量的唯一影响因素(HR=0.26;P值=0.001);年龄还是G-BM中CD3+ CD4-CD8-调节性T细胞数量的影响凶素[HR值为0.31;P=0.001].结论 年龄是影响G-BM中有核细胞、CD34+细胞和CD3+ CD4-CD8-调节性T细胞采集数量的因素,年龄≤38岁的供者更易采集满足临床需要的有核细胞和CD34+细胞;外周血单核细胞＞0.37×109 /L的供者采集的G-BM含有较多数量的有核细胞.     

rhG-CSF对供者骨髓和外周血采集物中Th17细胞的影响

本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）供者体内应用对骨髓采集物（GBM）和外周血采集物（GPB）中Th17细胞的影响。对25名亲缘供者皮下注射rhG-CSF5μg/（kg.d）,连用5天,于第4、5天分别采集骨髓和外周血,注射前留取部分供者稳态骨髓（steady state bone mavrow,SSBM）和稳态外周血（steady state peripheral blood,SSPB）。采用流式细胞术测定动员前后供者骨髓和外周血中T细胞分泌IL-17的变化。结果显示：rhG-CSF体内应用后供者骨髓中CD4＋T细胞和CD8＋T细胞分泌Il-17的能力较稳态骨髓明显下降（GBM vs SSBM Th17/CD4＋T,0.74%±0.27%vs1.78%±1.19%,p〈0.05;Tc17/CD8＋T,0.19%±0.16% vs 0.36%±0.37%,p〈0.05）,外周血中的变化与骨髓相同（GPBvsSSPBTh17/CD4＋ T,1.82%±0.91%vs3.26%±1.89%,p〈0.01;Tc17/CD8＋T,0.21%±0.17%vs0.44%±0.28%,p〈0.01）。25例供者GBM与GPB相比,GPB中Th17/CD4＋ T和Tc17/CD8＋ T的比值均高于GBM（p〈0.05,p〈0.01）。结论：体内应用rhG-CSF能够抑制供者骨髓及外周血采集物中Th17细胞的产生,它可能是GPB和/或GBM混合移植对GVHD的发生率没有增加的部分原因。     

rhG-CSF体内诱导造血干细胞移植供者外周血T细胞免疫耐受的初步研究

本研究探讨rhG CSF体内应用诱导健康供者外周血T淋巴细胞免疫耐受的机制。对 15例病人进行了外周血干细胞移植 ,借助三色和四色荧光标记技术 ,对供者rhG CSF动员前后外周血T细胞上共刺激分子CD2 8的表达、树突状细胞 (DC)亚群以及CD8 CD2 8- 抑制性T细胞的变化进行了流式细胞术测定。结果显示 ,rhG CSF动员后外周血采集物中CD3 CD2 8 细胞的相对数显著升高 (P <0 .0 1) ,CD2 8表达的平均荧光强度明显降低 (P<0 .0 5 ) ;CD8 CD2 8 细胞的相对数也显著升高 (P <0 .0 1)。但在T细胞上CD2 8总体表达的相对荧光强度无变化 (P >0 .0 5 )。动员前外周血中DC2的含量明显低于正常骨髓 (P <0 .0 1) ,动员后采集物中DC2的数量较动员前和正常骨髓均有显著增加 (P <0 .0 1) ,DC的数量也显著增加 (P <0 .0 1) ,DC1 DC2比值倒置 (P <0 0 1) ,而DC1在动员前后无变化 (P >0 .0 5 )。CD8 CD2 8- 细胞占有核细胞的百分比较动员前明显增加 (P <0 0 5 )。结论 :rhG CSF体内应用后 ,采集物中DC2和CD8 CD2 8- 抑制性T细胞数量的增加可能是外周血T细胞免疫耐受产生的重要机制。     

Peripheral blood stem cell apheresis for allogeneic transplants: Ibni Sina experience

BACKGROUND: The rate of utilizing peripheral blood stem cells (PBSC) as a source for allogeneic stem cells is growing rapidly. We aimed to demonstrate our 4 years experience as the largest apheresis center in Turkey and analyzed the content of the apheresis material. PATIENTS AND METHODS: From 1998 to the end of April 2002, 151 leukopheresis procedures were performed on 116 healthy donors (M/F:66/50) with a median age of 30 years (14-53). The HLA identical sibling donors received rhG-CSF 10 microg/kg/day sc. for 4 days and at the 5th day leukopheresis was started until collecting >4 x 10e6/kg CD34+ cells. Two times the donors' total blood volume was processed in 195 min (178-245) on continuous flow cell separators using peripheral venous access. RESULTS: Preapheresis WBC was 51.5 x 10e9/L (range, 13.11-91.3). Mono nuclear cell, CD34 and CD3 quantity of the harvest material were 5.35 x 10e8/kg (range, 0.45-23.46), 6.4 x 10e6/kg (range, 2.49-33.27) and 2.79 x 10e8/kg (range, 0.46-30.95), respectively. We were able to reach the target CD34 count after 1st cycle in 39% and 2nd cycle 61% of the procedures. In all donors with a peripheral blood CD34 count >80/mcl we succeeded to collect enough stem cells with only one leukopheresis. CONCLUSION: Collection of peripheral blood stem cells with continuous flow cell separators is well tolerated, with no mobilization failures or poor mobilizers. We collected high values of CD34+ cells (med. 6.4 x 10e6/kg) at the expense of high CD3+lymphocytes (med. 2.79 x 10e8/kg), which may increase the risk of acute and chronic GVHD after allogeneic hemapoietic cell transplantation.     

同胞异基因外周血干细胞移植治疗白血病研究

本研究观察异基因外周血干细胞移植 (PBSCT)治疗白血病的疗效与副作用。所选供者均为HLA A、B、DR位点与患者完全相同的同胞兄弟姐妹。供者经 2 5 0 μg/kgrhG CSF动员 5天后 ,单采外周血干细胞 1- 2次。 4例白血病病人经过改良Bu/Cy预处理方案 ,输入单个核细胞 6.78× 10 8/kg± 1.96× 10 8/kg( 5× 10 8/kg - 8.67×10 8/kg) ,其中CD3 4 为 15 .0 2× 10 6 /kg± 8.93× 10 6 /kg ( 5 .3× 10 6 /kg - 2 4 .2 3× 10 6 /kg) ,用MTX CsA MMF预防急性移植物抗宿主病 (aGVHD)。结果表明 :移植前 2天到移植后 2天白细胞降至最低 ,移植后 11- 17天中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L ,移植后 11到 5 5天血小板 >5 0× 10 9/L。 4例中 2例出现aGVHD ,2例出现cGVHD ,2例出现感染。移植后 2 8天复查骨髓显示造血恢复 ,STR位点的DNA检查显示供者细胞生长。结论 :采用改良Bu/Cy方案和用MTX CsA MMF预防aGVHD方案进行PBSCT治疗白血病是一种安全、可靠的治疗方法。