rAAV2-NTF2对糖尿病大鼠血视网膜屏障的保护作用

目的： 观察2型重组腺相关病毒－核运输因子2（rAAV2-NTF2）对糖尿病大鼠血视网膜屏障功能损伤的拮抗作用。方法: 伊凡思蓝（EB）灌注铺片观察糖尿病大鼠视网膜血管分布和形态。亚克隆构建pSNAV－NTF2载体, 腺相关病毒包装形成rAAV2-NTF2。成年雄性Wistar大鼠,以右眼为实验眼,玻璃体腔注射4 μL rAAV2-NTF2,左眼为对照眼,玻璃体腔注射rAAV2-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）4 μL。1个月后取4只大鼠左眼,固定后取视网膜制备全视网膜铺片,荧光显微镜下观察EGFP表达情况。再行STZ腹腔注射诱导糖尿病,同时设单纯糖尿病组（diabetes,D组）和正常组（normal,N组）。糖尿病1个月后以45 mg/kg剂量静脉注射EB,循环2 h后1%多聚甲醛枸橼酸缓冲液灌注并摘除眼球取视网膜,置于甲酰胺中浸泡提取染料,用分光光度计测量甲酰胺中染料的浓度。结果: 正常组大鼠可见在低背景荧光下视网膜血管对EB有很好的屏障作用,糖尿病2周大鼠视网膜血管仅见背景荧光增强,糖尿病1月后血管出现异常节段性扩张,局部血管周围EB渗漏。糖尿病1个月大鼠视网膜内EB浓度是正常组的4.67倍,P<0.01,提示糖尿病大鼠血-视网膜屏障受损。玻璃体腔注射rAAV2-NTF2,视网膜内EB浓度为(8.30±4.16)μg/g视网膜干重,较对侧眼(22.13±8.43)μg/g视网膜干重明显减少,可以部分改善血-视网膜屏障的破坏,降低EB-白蛋白渗漏（P<0.05）。结论: 玻璃体腔注射rAAV2-NTF2可减轻糖尿病大鼠视网膜血-视网膜屏障功能的破坏,为糖尿病视网膜病变的基因治疗提供了实验依据。     

伊文思蓝检测急性高眼压后大鼠血-视网膜屏障的变化

目的:检测急性高眼压后大鼠血-视网膜屏障(BRB)的改变.方法:大鼠随机分为正常对照组、实验对照组和实验组（急性高眼压模型）.动物分别存活3h、12 h、1d、3d、7d,处死前注射伊文思蓝(EB),共聚焦显微镜检测视网膜铺片和切片中EB的分布;用分光光度计定量视网膜EB的含量.结果:在急性高眼压后视网膜中可见,EB红...     

TNF—α、IL—8在多脂多糖致大鼠脑水肿发生中的变化和意义

目的：探讨肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素－8（IL－8）在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS)致大鼠脑水肿发生中的变化及作用。方法：LPS诱发大鼠脑水肿发生后，制备脑组织匀浆，ELISA法测定IL－8含量，放免法测定TNF－α含量。结果：LPS注入后TNF－α、IL－8相继释放增加，与A组、NS组比较差异有非常显著性（P＜0．01），48h后仍维持较高水平，LPS组脑组织含水量与Evans blue(EB)含量，TNF－α与脑组织含水量，IL－8与脑组织含水量，IL－8与EB含量均呈正相关，r值分别为0．537、0．423、0．473、0．831。P＜0．05。结论：TNF－α、IL－8与脑组织炎性损伤密切相关，介导了脂多糖导致脑水肿的发生、发展过程。     

哮喘豚鼠气道上皮细胞原癌基因c-fos活化与ET-1释放相关性的研究

目的：探讨哮喘豚鼠发作时气道上皮细胞原癌基因c-fos的活化与上皮细胞释放内皮素－1（ET－1）的相关性。方法：将豚鼠随机分为哮喘组，地塞米松组和正常对照组。以卵蛋白致敏建立哮喘动物组模型；再给予肌注地塞米松（0．5mg/kg)治疗则为地塞米松组。利用Dot blot与Northern blot及免疫组化染色法，研究c-fos在气道上皮细胞中的表达；利用放射免疫法测定各组支气管－肺泡灌洗液（BALF）中ET－1的含量。结果：正常对照组有低水平的c-fos基因表达和ET－1合成。哮喘组豚鼠在激发30min后，气道上皮细胞c-fos mRNA表达及Fos蛋白染色阳性颗粒都达到高峰，持续2h左右。同时，BALF中ET－1的含量在30min 后也达到高峰，持续2－3h。地塞米松组的c-fos mRNA及蛋白表达水平均明显低于哮喘组（P＜0．01），但高于正常对照组；并且该组BALF中ET－1的含量也低于哮喘组（P＜0．01）。结论：c-fos基因活化与ET－1释放在哮喘豚鼠发病中都具有重要作用，两者密切相关。ET－1的释放可能受控于c-fos基因的活化。     

骨骼肌提取液对大鼠坐骨神经损伤所致腰段脊髓腹角和背根节神经细胞溃变的影响

用ＣＴ－ＨＲＰ逆行追踪法及ＣｈＡＴ单克隆抗体的ＡＢＣ免疫组织化学技术研究了新生大鼠骨骼肌提取液（ＭＥ，２０～５０ｋＤ）对钳夹大鼠坐骨神经所致的腰骶部脊髓腹角和背根节神经细胞溃变的影响。实验结果显示：注射ＭＥ实验组的脊髓腹角运动神经元和背根节细胞的存活均数与注射盐水的对照组相比，其比值为６：０，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。提示骨骼肌提取液（２０～５０ｋＤ）对脊髓腹角运动神经元和背根节感觉神经细胞的演变有明显的保护作用。     

高血压伴糖尿病患者血浆ET、6-K-PGF1α与尿Alb测定的意义

目的;探讨高血压病伴糖尿病患者血管内膜及肾功能受损的情况。方法：用放射免疫分析（RIA）测定75例高血压患者（其中39例伴糖尿病）、血浆内皮素（ET）、6－酮－前列腺素F1α与尿白蛋白（Alb),同时 设健康的正常对照组35例。结果：高血压者血浆ET、6－K－PGF1α与尿Alb均高于正常对照组（P＜0．01）,与高血压不伴糖尿病者相比,伴糖尿病者血浆ET和尿Alb高（P＜0．05）,但6－K－PGF1α虽高但无统计学意义。结论：高血压病伴糖尿病者不仅血流动力学异常,且肾功能害也较严重。     

银杏叶提取物对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

探讨银杏叶提取物（GBE）对脂多糖（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI0的保护作用。给大鼠静脉LPS复制ALI动物模型。首先动态观察ALI的形成过程，注LPS后2h已形成明显的ALI。另批大鼠随机分成：对照组（静注生理盐水），LPS组（静注LPS，5mg/kg体重），CBE＋LPS组（注LPS前三天开始每天灌胃给GBE一次，按黄酮甙8mg/kg体重计算，当日在给LPS前h再给一次GBE），每组6只大鼠。注LPS或盐水后2h收集标本，进行测定。发现：注LPS后肺湿／干重量比，肺泡灌洗液中蛋白含量及肺血管通透指数均升高（均P＜0．01）；血中乳酸（LD），一氧化氮（NO），内皮素－1（ET－1），肿瘤坏死因子－α（TNF－α）含量及血乳酸脱氢酶（LDH）活性，均有显著升高（P＜0．01，P＜0．001）。而肺组织细胞膜Na^ -K^ ATPase活性显著下降（P＜0．01）。预先给予GBE可显著缓解上述变化（P＜0．05，P＜0．01）。提示GBE在防治肺的急性炎症性疾病中有一定的应用前景。     

骨骼肌提取液对大鼠坐骨神经损伤所致腰段脊髓腹角和背根节神…

用ＣＴ－ＨＲＰ逆行追踪法及ＣｈＡＴ单克隆抗体的ＡＢＣ免疫组织化学研究了新生大鼠骨骼肌提取液（ＭＥ，２０－５０ｋＤ）对钳夹大鼠坐骨神经所致的腰骶部脊髓腹角和背根节神经细胞溃变的影响。实验结果显示：注射ＭＥ实验组的脊髓腹角运动神经元和背根节细胞的存活元旦数与注射直的对照组相比，其比值为６：０，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。提示骨骼肌提取液（２０－５０ｋＤ）对脊髓腹角运动神经元和背根节感觉神经细胞的溃变     

PKC抑制剂灯盏花素乙对甲醛炎性痛大鼠脊髓NOS表达及NO含量的影响

目的：观察蛋白激酶C（PKC）选择性抑制剂灯盏花素乙（CH）对甲醛炎性痛时大鼠自发痛反应、脊髓一氧化氮合酶（NOS）表达和一氧化氮（NO）含量的影响，探讨炎性痛时脊髓内NO产生是否受PKC调控。 方法： 采用右后掌足底注射甲醛复制炎性痛模型；计数缩足反射次数反映自发痛程度；应用NADPH-d组织化学法测定脊髓NOS表达；硝酸/亚硝酸还原法测定脊髓腰膨大部位NO2-/NO3-含量。 结果： 甲醛炎性痛大鼠L5脊髓后角浅层和中央管周围灰质NADPH-d阳性细胞的数目、阳性细胞胞体及纤维的染色深度均明显大于正常对照组，脊髓腰膨大部位 NO2-/NO3-含量明显增高。预先鞘内给予CH，可明显抑制甲醛炎性痛诱导的大鼠第二相自发痛反应以及脊髓NOS表达和NO2-/NO3-的含量。 结论： 炎性痛时，脊髓伤害性感受神经元内PKC激活可以促进NOS表达和NO的产生。     

丹参改善烧伤后肠道缺血的实验研究

目的探讨丹参改善烧伤后肠道缺血的作用及其机制.方法Wistar大鼠88只,分为3组,正常组8只,烫伤组40只,治疗组40只.烫伤组和治疗组制成30%深Ⅱ度烫伤模型,伤后均以林格氏液复苏,治疗组用丹参注射液腹腔注射治疗,8 h 1次,烫伤组以等容积生理盐水腹腔注射作对照.分别于伤后3、6、12、24、48 h检测大鼠肠黏膜血流量(IMBF)、血浆内皮素(ET)及一氧化氮(NO)含量.结果(1)伤后IMBF显著低于伤前(P＜0.01),但治疗组IMBF下降幅度明显低于烫伤组(P＜0.05,P＜0.01);(2)伤后ET、NO均升高(P＜0.01),但治疗组与烫伤组相比较,ET含量降低、NO含量升高(P＜0.05,P＜0.01),ET/NO比值与IMBF行相关性分析呈显著负相关(r=-0.89,P＜0.01).结论丹参能显著改善烧伤后肠道缺血、增加血液灌流,其机制与调节ET、NO含量进而优化ET/NO比值有关.     

脊髓及脊髓损伤的生物力学

脊髓及脊髓损伤的生物力学研究有助于我们认识损伤机制，理解损伤的临床病理结果，进一步指导预防、治疗。作者重点对脊髓(包括灰白质、脑脊液、齿状韧带、软膜、硬脊膜)的力学特性及脊髓损伤力学研究中的动物模型(包括撞击损伤模型、压迫损伤模型)和有限元模型进行了综述，并对近年脊髓损伤在细胞水平的生物力学研究作了简要介绍。     

超声检查胎儿脊髓圆椎在脊髓拴系中的诊断价值

目的 分析超声定位胎儿脊髓圆椎末端在诊断脊髓拴系中的临床应用价值.方法 选取脊髓拴系胎儿8例为(脊髓拴系组)480例健康胎儿(正常组).两组均应用三种超声定位方法检出,分析比较脊髓拴系的诊断率.结果常规方法、常规方法联合扩展剖面容积成像方法与联合三种方法的检出率:健康胎儿脊髓圆椎末端检出率分别为80.0％、90.0％、98.8％,具有统计学差异(P＜0.05);脊髓拴系胎儿检测率分别为75.0％、87.5％、100.0％,具有统计学差异(P＜0.05).结论超声定位胎儿脊髓圆椎末端在诊断脊髓拴系效果好.     

NADPH-Diaphorase-Positive Structures in the Spinal Cord and Spinal Ganglia

Histochemical reactions in which the incubation mixtures had different pH values were used to study the locations of NADPH-diaphorase (NADPH-D) in the spinal cord (SC) and spinal ganglia (SG) in adult rats. The results showed that use of an incubation mixture with pH 7.4 detected neurons with different NADPH-D activities and that not only the enzyme distribution density but also the number of NADPH-Dpositive neurons could be assessed. Not all SC and SG neurons were found to contain NADPH-D activity: high levels of activity were seen in small and intermediate SG neurons, while motoneurons had low levels of activity. Other cellular structures in the SC also had NADPH-D activity and were interneurons.     

丹参对脊髓损伤后伤区血流量及血液流变学指标的影响

目的 :比较应用丹参对兔脊髓损伤 (SCI)后伤区血流量及血液流变学指标的影响 ,探讨丹参对脊髓损伤的保护机制。方法 :5 8只成年日本大耳白兔 ,随机分成四组 ,A组 10只 ,作为正常组 ;B、C、D组各 16只 ,分别作对照组、地塞米松 (Dex)治疗组和丹参治疗组。比较脊髓损伤前后及应用Dex、丹参治疗后伤区血流量 (SCBF)及血液流变学指标的变化。结果 :脊髓损伤后 ,SCBF下降 ,血液粘度(ηb)、纤维蛋白原 (Fib)、细胞聚集指数 (RAI)增高。Dex对脊髓SCBF和血液流变学指标异常的改善不明显 ,而使用丹参治疗后 ,脊髓SCBF增高 ,血液流变学指标明显改善。结论 :丹参对脊髓损伤具有保护作用 ,且疗效较Dex明显 ,为临床治疗提供依据。     

Arterial Blood Supply to the Spinal Cord in Animal Models of Spinal Cord Injury. A Review

Animal models are used to examine the results of experimental spinal cord injury. Alterations in spinal cord blood supply caused by complex spinal cord injuries contribute significantly to the diversity and severity of the spinal cord damage, particularly ischemic changes. However, the literature has not completely clarified our knowledge of anatomy of the complex three‐dimensional arterial system of the spinal cord in experimental animals, which can impede the translation of experimental results to human clinical applications. As the literary sources dealing with the spinal cord arterial blood supply in experimental animals are limited and scattered, the authors performed a review of the anatomy of the arterial blood supply to the spinal cord in several experimental animals, including pigs, dogs, cats, rabbits, guinea pigs, rats, and mice and created a coherent format discussing the interspecies differences. This provides researchers with a valuable tool for the selection of the most suitable animal model for their experiments in the study of spinal cord ischemia and provides clinicians with a basis for the appropriate translation of research work to their clinical applications. Anat Rec, 300:2091–2106, 2017. © 2017 Wiley Periodicals, Inc.     

大鼠脊髓损伤及继发损伤时脊髓诱发电位与运动诱发电位的变化

本文采用改良Ａｌｌｅｎ’ｓ法，分别以５０ｇ／ｃｍ和１００ｇ／ｃｍ打击大鼠Ｔ１３～Ｌ１脊髓，造成不同程度的脊髓损伤，分别观察伤后２４小时内的ＳｐＥＰ和ＣＭＥＰ的变化，以了解不同程度损伤对ＳｐＥＰ和ＣＭＥＰ的影响及ＳｐＥＰ、ＣＭＥＰ的变化与脊髓继发性损伤发展过程的关系。结果表明：①两种不同程度的脊髓损伤均可造成大鼠脊髓ＳｐＥＰ，ＣＭＥＰ的明显变化，尤以ＳｐＥＰ变化明显。损伤越重，电位改变越明显．②在脊髓损伤后１～２４小时内，伤后１０分钟ＳｐＥＰ，ＣＭＥＰ波幅却有明显降低，４～８小时进一步降低。两次降低有明显差异。ＳｐＥＰ峰潜伏时延长，以４～８小时显著。表明原发损伤后在受损部位存在继发性损伤，提示阻止继发损伤的时间应早于伤后４小时，并尽可能提前。     

Spinal Cord Neuronal Pathology in Multiple Sclerosis

The objective of this study was to assess neuronal pathology in the spinal cord in multiple sclerosis (MS), both within myelinated and demyelinated tissue. Autopsy material was obtained from 38 MS cases and 21 controls. Transverse sections were taken from three spinal cord levels and stained using Luxol Fast Blue/Cresyl Violet and myelin protein immunohistochemistry. Measurements of neuronal number and size were made for all neurons within the anterior horns of the gray matter. Neurons were classified as motoneurons or interneurons according to size criteria. In comparison with controls, both motoneuron and interneuron number were reduced in MS cases at the upper cervical (interneuron P  = 0.0549; motoneuron P  = 0.0073) and upper thoracic (interneuron P  = 0.0507; motoneuron P  = 0.0144), but not the lumbar level. Interneuron cross-sectional area was reduced in MS cases at all levels (upper cervical, P  = 0.0000; upper thoracic, P  = 0.0002; lumbar, P  = 0.0337). Neuronal loss appears to be predominantly related to local gray matter plaques, whereas interneuron atrophy occurs in both myelinated and demyelinated areas.