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1.
目的 探讨EB病毒(EBV)抗体及血清EBV-DNA载量检测在诊断儿童EB病毒感染传染性单核细胞增多症中的意义.方法 收集2007年1月~2008年10月间入住北京儿童医院住院治疗的130例EBV感染传染性单核细胞增多症患儿,采用间接免疫荧光法检测EBV特异性抗体及抗体亲和力,荧光定量PCR方法检测血清中EBV-DNA载量.结果 在130例儿童EBV感染传染性单核细胞增多症病例中,入院时血清EBV抗体反应存在多种类型,抗EBV-CA-IgM阳性率达95.4%,随着时间推移,EBV特异性抗体及抗体亲和力出现相应的变化.77例进行血清EBV-DNA检测,总阳性率为15.6%(12/77),平均拷贝数为1.5×104copies/ml,动态监测提示EBV-DNA载量亦随时间变化而变化.结论 血清EBV-CA-IgM结合EBV-CA-IgG亲和力检测,可以提高原发性EBV感染传染性单核细胞增多症诊断的敏感度.血清中EBV-DNA检测在原发性EBV感染传染性单核细胞增多症诊断中的作用有待进一步研究.  相似文献   

2.
目的评价核酸浓缩提取法实时荧光定量PCR检测血浆EBV DNA载量的方法学性能。方法分析该检测系统的灵敏度、线性范围、精密度、与其他商品化的PCR检测系统相关性,并对132份临床标本进行检测分析。结果检测灵敏度为2.0×102Copies/ml;最低检测界限5.00×102Copies/ml。结果在5×102~5×106Copies/ml范围内呈线性,回归方程为y=0.245+0.945 x,r=0.998。批内CV 4.3%~7.6%,批间CV 8.9%~11.8%,总CV 9.9%~14.0%。与其他商品试剂对比检测,两者相关性良好(y=0.332+0.941x,r=0.952),结果相差在0.5 log以内。2组病例中,EB病毒急性感染组的血浆EBV DNA平均载量为8.2×104Copies/ml,EB病毒急性感染组与EB病毒既往感染组的血浆EBV DNA阳性率存在显著差异(P0.01),健康对照组未检测出血浆EBV DNA。结论核酸浓缩提取法实时荧光定量PCR检测血浆EBV DNA载量,具有准确、快速、简便的优点,适合临床实验室常规开展。  相似文献   

3.
目的探讨EB病毒(EBV)DNA定量检测在鼻咽癌患者不同临床分期中的诊断价值。方法选取广东省汕头大学医学院附属粤北人民医院2013年3月至2015年12月500例病理诊断为鼻咽癌的患者作为研究组,同时选取200例健康体检人群作为对照组。2组同时采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测血浆EBV-DNA的表达量,并对2组之间及临床TNM分期I、Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ的结果进行比较;再将其分别与酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测的血清EBV病毒壳抗原免疫球蛋白A(VCA-IgA)检测结果进行比较。结果荧光定量PCR方法检测EBV-DNA表达量中,研究组阳性率75.00%,对照组阳性率9.00%,两者差异有统计学意义(P0.05)。鼻咽癌患者血浆EBV-DNA拷贝数与临床TNM分期呈正相关,差异有统计学意义(P0.05);鼻咽癌分期越晚,血浆EBV-DNA拷贝数越高。结论血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌患者临床TNM分期有显著相关性,可作为评估鼻咽癌患者临床分期的1种辅助性分子生物指标,具有较高应用价值。  相似文献   

4.
目的寻找可以协助诊断单倍体造血干细胞移植(haplo-HSCT)后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)的EB病毒DNA(EBV-DNA)载量及其持续时间的最佳临界值。方法回顾性分析北京大学血液病研究所2016年1月至12月期间haplo-HSCT后合并EBV感染患者的相关数据,通过构建ROC曲线计算约登指数寻找对PTLD有诊断意义的EBV-DNA载量及其持续时间的临界值。结果共纳入94例患者,其中20例(21.3%)发生PTLD,诊断PTLD时中位EBV-DNA载量为70400(1710~1370000)拷贝/ml,EBV血症中位持续时间为23.5(4~490)d。二元logistic回归分析显示,PTLD组与非PTLD组两组间EBV-DNA最高载量及EBV血症持续时间差异均有统计学意义(P=0.018,P=0.001)。构建ROC曲线计算约登指数,EBV-DNA载量≥41850拷贝/ml对PTLD有诊断意义[曲线下面积(AUC)=0.847],敏感度、特异度分别为0.611、0.932;EBV血症持续时间≥20.5 d对PTLD有诊断意义(AUC=0.833),敏感度、特异度分别为0.778、0.795。结论动态监测haplo-HSCT后PTLD高危患者的EBV载量及关注其持续时间有重要临床意义,有助于预测PTLD的发生并早期采取干预措施。  相似文献   

5.
目的 比较分析淋巴瘤患者血浆和外周血单个核细胞(PBMC) EBV-DNA的阳性率及病毒载量.方法 采用荧光定量PCR法,对56例淋巴瘤患者(霍奇金淋巴瘤13例,非霍奇金淋巴瘤43例)血浆和PBMC EBV-DNA进行定量测定,比较分析两种样本的EB病毒阳性率及EBV载量的差异.结果 淋巴瘤患者血浆EBV-DNA阳性率(26.8%)与PBMCEBV-DNA阳性率(32.1%)之间差异无统计学意义(P>0.05);EB阳性淋巴瘤患者血浆与PBMC的EBV栽量之间差异也无统计学意义(P>0.05).结论 荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA具有较好的特异性和敏感性,血浆EBV-DNA定量可以代替PBMC EBV-DNA定量作为监测EBV阳性淋巴瘤疗效的一个生物标志.  相似文献   

6.
目的 探讨EB病毒(EBV)感染患儿EBV-DNA载量与机体免疫及肝肾功能的相关性.方法 选择该院2016年5月至2019年5月收治的EB V-DNA阳性患儿90例为研究对象,按照EBV-DNA载量的差异分成低载量组(<5×104 copy/mL)44例、中载量组(5×104~5×105 copy/mL)24例和高载量...  相似文献   

7.
目的:探讨非高发区人群血浆EB病毒(EBV)DNA检测对鼻咽癌筛查的价值及临床应用。方法:回顾性分析2015年11月至2020年7月就诊于四川省肿瘤医院的1 153例初治鼻咽癌和244例性别年龄相匹配的健康正常人血浆EBV DNA检测结果。用实时荧光定量PCR法检测EBV DNA。分别以400拷贝/ml为临界值判断(≥...  相似文献   

8.
目的:探索噬血细胞综合征(HLH)患者中EB病毒(EBV)感染患者的免疫功能状态。方法:回顾性分析北京协和医院急诊科2015-01—2019-12期间明确诊断为HLH患者的临床资料和相关免疫学指标。将血EBV-DNA500 copies/mL定义为EBV感染阳性。使用SPSS 19.0软件,比较EBV阳性和EBV阴性HLH患者的免疫学差异,并分析EBV-DNA滴度水平和免疫指标是否有相关性。结果:EBV阳性HLH患者较EBV阴性HLH患者病死率明显增高。在免疫学方面,EBV阳性HLH患者补体C4更高,CD3~+T细胞计数显著减低,CD8~+T细胞计数显著减低,CD4/CD8比值显著升高。相关性分析发现,补体C4和EBV-DNA滴度水平呈正相关(R=0.418,P=0.000),CD8~+T细胞水平和EBV-DNA滴度水平呈负相关关系(R=-0.359,P=0.002);CD4/CD8水平和EBV-DNA滴度水平呈正相关关系(R=0.402,P=0.000)。结论:EBV感染的HLH患者预后较差,有明显减低的CD3~+T细胞和CD8~+T细胞计数以及更高的补体C4,且补体C4和CD8~+T细胞计数都与EBV-DNA滴度显著相关。  相似文献   

9.
目的 研究全血和血浆标本对荧光定量PCR方法检测鼻咽癌患者EB病毒DNA的差异.方法 收集40例鼻咽癌患者的全血和血浆标本,用荧光定量PCR方法检测其EB病毒DNA含量,并对结果进行比较分析.结果 全血和血浆标本的EBV-DNA阳性率(含弱阳性)分别为85.0%和72.5%,差异无统计学意义(χ2=3.20,P>0.05),但不含弱阳性则阳性率分别为62.5%和32.5%,差异有统计学显著性意义(χ2=10.08,P<0.01);全血和血浆标本EB病毒DNA浓度几何平均浓度分别为3.58±1.42和4.72±1.53logcopies/ml,差异有统计学显著性意义(t=10.48,P<0.001);全血和血浆标本EB病毒DNA浓度有一定相关性(r2=0.787),但97.5%的患者全血载量高于血浆载量.结论 荧光定量PCR法检测EB病毒DNA全血标本好于血浆标本,更适合在临床实验室应用.  相似文献   

10.
目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定血液肿瘤患者血浆中EB病毒(EBV)和巨细胞病毒(CMV)DNA水平,探讨血浆EBV DNA和CMV DNA定量测定的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测280例血液肿瘤患者血液中EBV DNA和CMV DNA载量。结果 280例血液患者中EBV DNA检测阳性率为17.1%,CMV检测阳性率为18.9%,动态监测病毒DNA拷贝数为10~2~10~7 copy/mL。接受外周造血干细胞移植的患者126例,其中EBV检测阳性率为28.6%,CMV检测阳性率为40.5%。血液肿瘤患者进行抗病毒治疗后,均在7~14d后转阴。结论实时荧光定量PCR动态检测血液肿瘤患者EBV DNA和CMV DNA水平对于EBV和CMV感染患者的疗效判断具有重要临床意义。  相似文献   

11.
目的探讨荧光定量PCR检测对诊断和治疗非典型EB病毒(EBV)感染的临床意义。方法对2007-04-2009-10诊断为非典型EBV感染90例患儿,抽静脉血2 ml,注入枸橼酸钠抗凝剂与静脉血充分混匀,用核酸扩增荧光PCR法测定基因拷贝数,同时进行常规外周血及异型淋巴细胞检查,对照病因和首发临床表现,分析儿童感染非典型EBV时荧光定量PCR检测的基因拷贝数变化。结果 EBV-DNA拷贝数能早期反映出非典型EBV感染,拷贝数越高,出现多器官损害概率越高。结论荧光定量PCR检测EBV-DNA拷贝数有助于早期诊断非典型EBV感染,能减少诊疗的盲目性,对临床有一定指导意义。  相似文献   

12.
目的 应用定量PCR方法 监测造血干细胞移植(HSCT)后单个核细胞EBV含量,评估其临床效果.方法 51例HSCT患者从预处理阶段开始,采用荧光定量PCR方法 每周1次检测外周s血单个核细胞EBV-DNA拷贝数,分析EBV再活化的影响因素以及EBV-DNA拷贝数与发生淋巴增殖性疾病(PTLD)的相关性.结果 51例患者EBV血症累积发生率为58.8%,HSCT后EBV感染的时间晚于CMV感染[分别为(39.6±23.5)d和(25.0±15.1)d,P<0.01].Allo-HSCT中HLA不合患者EBV血症的累积发生率显著高于HLA相合患者(分别为93.3%和48.1%,P<0.01),应用ATG组显著高于无ATG组(分别为92.3%和18.7%,P<0.01),年龄<20岁组患者显著高于≥20岁组(分别为100%和53.1%,P<0.01).30例患者中4例(13.3%)EBV血症发展为EBV-PTLD,均为持续2周以上EBV-DNA>106拷贝/ml的患者(13例中4例).PTLD患者的中位生存时间为19.5(11~75)d.结论 HSCT后EBV活化比率高,尤其是在HLA不相合供者、应用ATG和年龄<20岁的患者,有必要常规进行单个核细胞EBV-DNA检测.Allo-HSCT患者在EBV-DNA拷贝数>106拷贝/ml,尤其是持续2周以上者,易进展为PTLD,应给予抢先治疗.  相似文献   

13.
目的检测鼻咽癌患者外周血淋巴细胞中EB病毒DNA载量.并分析其与鼻咽癌临床分期的关系。方法选取2012年1月至2013年1月我院肿瘤科收治住院的87例鼻咽癌患者.采用实时荧光定量PCR法检测外周血淋巴细胞EB病毒DNA含量;统计学分析其与患者临床分期的关系。结果鼻咽癌患者外周血淋巴细胞中EB病毒DNA检出率为82.76%(72/87),EB病毒DNA拷贝数的中位数为7.58×106拷贝数/ml,I、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者每毫升DNA拷贝数分别为f4.25±1.141x10^3、(4.56±0.68)×10^4、(7.88±1.65)×10^5和(8.09±1.65)x106;EB病毒DNA载量随着疾病临床分期的增加呈现逐步升高的趋势。且差异显著(P〈0.05)。结论鼻咽癌患者外周血淋巴细胞中EB病毒DNA载量与患者临床分期相关.提示EB病毒DNA载量与鼻咽癌病情进展关系密切.在临床上可作为鼻咽癌患者病情监测及判断疗效的一种有效手段。  相似文献   

14.
We assessed the safety profile, tolerability, and antiviral effect of 12 weeks of triple combination therapy with stavudine (d4T), didanosine (ddI), and nelfinavir in patients who had not previously received therapy with d4T, ddI, or a protease inhibitor. We also assessed the effect of the buffered tablet formulation of ddI on the pharmacokinetics of nelfinavir. The study had a single-arm, open-label design and enrolled patients aged > or =18 years who had HIV infection and > or =10,000 plasma HIV RNA copies/mL. Patients received the full recommended doses of oral d4T, ddI, and nelfinavir. Efficacy was assessed in terms of change from baseline in plasma HIV RNA and CD4+ cell counts, as well as in terms of the proportion of patients achieving HIV RNA levels <400 copies/mL. The first 10 patients enrolled in the study were included in a substudy to determine the effects of the buffered tablet formulation of ddI on the pharmacokinetic profile of nelfinavir. A dose of ddI was given 1 hour before nelfinavir, after which the maximum plasma concentration (Cmax), time to Cmax (Tmax), and area under the concentration-time curve (AUC) of nelfinavir were determined. A total of 22 patients entered the trial, of whom 1 (5%) had AIDS, 12 (55%) had symptomatic HIV infection, and 9 (41%) were asymptomatic. The median baseline CD4+ cell count was 315 cells/microL (range, 70-709 cells/microL), and the median plasma viral load was 4.8 log10 copies/mL (range, 4.0-5.6 log10 copies/mL). ddI had no clinically significant effects on the plasma pharmacokinetics of nelfinavir. At the end of 12 weeks of treatment, the mean (+/- SE) decrease in plasma viral load was 1.36+/-0.24 log10 copies/mL, and 8 of 16 patients (50%) achieved plasma HIV RNA levels <400 copies/mL; the mean (+/- SE) increase in CD4+ cell count was 111.4+/-31.7 cells/microL. Patients who were judged to be compliant with antiretroviral therapy (ie, who missed <7 days of all 3 study drugs during 12 weeks of treatment) experienced mean decreases in viral load exceeding 2.0 log10 copies/mL, and 6 of 7 patients achieved HIV RNA levels <400 copies/mL after 12 weeks of therapy. Although 95% of patients reported an adverse event of grade 1 or higher, only 1 patient experienced a grade 3 or 4 adverse event (maculopapular rash) related to nelfinavir. As reflected in the Cmax, Tmax, and AUC, administration of ddI 1 hour before nelfinavir did not influence the pharmacokinetic profile of the protease inhibitor. Triple drug therapy with d4T, ddI, and nelfinavir was well tolerated and associated with few clinically significant toxicities. This treatment resulted in substantial reductions in viral load and improvements in CD4+ cell count over 12 weeks.  相似文献   

15.
ObjectQuantification of urinary miRNAs can be challenging especially for low abundance miRNAs. We aimed to optimize the quantification of urinary exosomal miRNAs and compare the performance efficiency between droplet digital PCR (ddPCR) and real-time quantitative PCR (qPCR).MethodsWe optimized a number of parameters for ddPCR such as annealing temperatures, annealing time and PCR cycle number. We also compared the performance of ddPCR and qPCR.ResultsBy comparing the fluorescence amplification separation, the optimal annealing temperature was 59 °C, optimal annealing time was 60s and optimal cycle number was 45 for measuring urinary exosomal miRNAs. ddPCR had much higher technical sensitivity compared to qPCR. The minimal detectable concentration of miR-29a was <50 copies/μL by ddPCR compared to 6473 copies/μL for qPCR. Also, ddPCR generated more consistent results for serially diluted samples compared to qPCR. ddPCR generated smaller within-run variations than qPCR though this did not reach statistical significance. It also resulted in better reproducibility with smaller between-run variations.ConclusionsOptimization of urinary exosomal miRNA ddPCR assay is dependent on assessing key variables including experimental annealing temperature and time as well as the number of PCR cycles. ddPCR has a higher sensitivity, reproducibility, and accuracy in comparison to qPCR.  相似文献   

16.
目的通过总结、分析慢性活动性EB病毒感染(CAEBV)患者的临床资料,以提高对CAEBV的诊断、治疗的认识。方法回顾性分析2008年10月-2013年1月诊治的9例CAEBV患者的临床症状特点,以及实验室检食、病原学相关检查、影像学和病理学检佥结果等,并评估其对药物治疗的反应和随访、预后表现。结果CAEBV临床症状缺乏特异性,主要表现为发热、肝脾和淋巴结肿大,其他尚有乏力、恶心、皮疹、黄疸等。辅助检查的异常发现包括:贫血、白细胞降低、中性粒细胞降低、血小板减少、乳酸脱氧酶及羟丁酸脱氢酶升高等肝功能异常及胸部影像学的异常表现等。病原学相关检查结果:6例患者抗EB病毒衣壳抗原IgA抗体升高,8例EB病毒早期抗原IgG为阳性,实时定量聚合酶链反应俭测外周血EB病毒DNA载量(中位数)为3.07×10^5copies/mL。9例患者中6例死亡,其中1例死于颅内出血,1例死于多脏器功能衰竭,1例死于噬血细胞综合征,1例死于肺部感染4例患者进展为淋巴瘤,在抗肿瘤治疗过程中1例死于肝功能衰竭,1例死于严重感染。结论CAEBV临床表现多样且缺乏特异性,常伴有各系统严重并发症,部分患者可进展为淋巴细胞增殖性疾病,预后差,病死率高,应引起临床重视。  相似文献   

17.
目的 调查浙江地区胃癌病人胃组织中EB病毒的感染情况。方法 用PCR方法对26例胃癌组织和15例非胃癌胃组织标本进行EBV -DNA测定。 结果 26例胃癌病人胃癌组织EBV -DNA阳性19例 (73.1 % ) ;其中9例分化型腺癌EBV -DNA阳性5(55.6 % ) ,12例低分化腺癌阳性11例 (91.7 % ) ;5例粘液、印戒细胞癌阳性3例 (60 % )。对照组15例胃组织阳性6例 (40% ) ,( χ2=4.37,p<0.05)。结论 本研究提示 ,浙江地区胃癌病人胃癌组织存在较高的EB病毒感染 ,EB病毒可能参与了胃癌的发生  相似文献   

18.
[目的]寻找荧光定量PCR检测传染性单核细胞增多症(IM)EBV DNA拷贝量的最佳样本。[方法]采用荧光定量PCR分别检测了IM病人的外周血单个核细胞、全血基因组DNA及血浆的EBV DNA拷贝量,并比较各种方法的阳性率及拷贝量。[结果]三种不同来源的样品荧光定量PCR方法的阳性率分别为76%、69%、23%。全基因组及单个核细胞组阳性率比较经x^2检验,差异无显著性,且两组拷贝量比较差异亦无显著性。血浆组阳性率及拷贝量与前两种方法比较差异均有显著性。[结论]外周血单个核细胞是荧光定量PCR检测IM的EBV DNA量的最佳样本。  相似文献   

19.
Human rhinoviruses (HRV) frequently cause acute respiratory infections and chronic respiratory disease exacerbations. However, testing is not generally offered. We developed a modified HRV quantitative polymerase chain reaction (qPCR) assay to assess viral loads in the community and hospital patients. The assay had a lower limit of detection of 2 log10 viral copies/mL and displayed linearity over 5 log10 viral copies, with a lower limit of quantitation of 4 log10 viral copies/mL. Mean viral loads (95% confidence interval) for hospitalized children, university students, and institutionalized elderly, were 7.08 log10 viral copies/mL (6.7–7.5), 6.87 log10 viral copies/mL (6.5–7.2), and 7.09 log10 viral copies/mL (6.9–7.3), respectively (P = 0.67). Serial specimens of 14 university students showed a decrease of mean viral loads from 6.36 log10 viral copies/mL on day 1 to 2.32 log10 viral copies/mL 7 days past symptom onset (P < 0.001). Using an HRV qPCR, we showed that viral loads did not differ between the community and hospitalized populations and significantly decreased following symptoms onset in healthy individuals.  相似文献   

20.
目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者体内 EB 病毒衣壳抗体(EBV-VCA-IgG、IgA)滴度及病毒DNA载量,探讨SLE患者EB病毒感染情况及病毒再发感染后的激活对SLE总体疾病活动度的影响。方法收集80例SLE患者、118例非SLE的风湿患者、33例正常对照组血标本,运用酶联免疫吸附实验(ELISA)测EB病毒抗体,实时荧光定量PCR测EBV-DNA载量。运用卡方检验比较各组病毒抗体或DNA阳性率差别,非参数检验比较各组病毒抗体滴度、红细胞沉降率、SLE疾病活动度(SLEDAI)等,Spearman相关分析病毒抗体滴度或DNA载量与SLEDAI的关联性。结果(1)抗体阳性率:SLE组EBV-IgA阳性率显著高于非SLE组及正常对照组(57.5%vs.16.96%,χ2=37.054,P<0.000;57.5%vs.15.15%,χ2=16.92,P<0.000),并与SLE的发病有显著的相关性(r=7.57,P<0.05),但IgG抗体阳性率与对照组相比无差别。抗体滴度:SLE组EBV-IgA及IgG滴度显著高于正常对照组[EBV-IgA:1.11(2.268) vs.0.495(0.856),Z=-2.836,P=0.005;EBV-IgG:5.391(6.038)vs.4.121(5.231),Z=-2.49,P=0.013];(2) SLE组EBV-IgA及IgG滴度与对应的SLEDAI未发现明显的相关性(EBV-IgA:r=0.164,P=0.195;EBV-IgG:r=-0.09,P=0.576)。也未发现EBV-IgA阳性患者在皮疹、关节炎、肝损害、SLEDAI、低补体血症等方面与阴性患者的差别,但红细胞沉降率却明显高于阴性患者[47(82.75)mm/1 h vs.26.5(46.25)mm/1 h, Z=-3.028,P=0.002];(3)80例SLE患者中有42例随访了IgA表型变化,但未发现表型变化对SLEDAI未见明显差异的影响。(4)SLE患者EBV-DNA阳性率也显著高于非SLE风湿病组(27.5% vs.12.8%,χ2=6.712,P<0.05),SLE患者EB病毒DNA载量异常与正常者的SLEDAI比较无统计学意义[分别为15(22) vs.13(20.25),Z=-0.573,P=0.567],并且异常DNA载量值与对应的SLEDAI之间也未见明显的相关性。结论 SLE患者EBV抗体及DNA的高表达,提示EB病毒与SLE密切相关,但是近期感染或再发感染的激活(EBV-IgA或DNA)未影响到SLE总体的疾病活动度变化。  相似文献   

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