ROBO3在儿童急性髓系白血病患者中的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究ROBO3在儿童急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其对AML细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用荧光定量PCR法检测不同治疗阶段的儿童AML患者骨髓中ROBO3的表达,分析初诊患儿ROBO3表达量与临床特征的关系。同时采用电转染的方法靶向干扰ROBO3表达,应用CCK-8法检测其对AML细胞系（HL-60和THP-1）增殖的影响,流式细胞术检测其对凋亡的作用。结果：与健康对照组相比,ROBO3在初诊儿童AML患者中显著高表达,尤其是在非M3型、年龄偏小的患者（<10岁）及高危组中高表达。而且与初发组相比,治疗后完全缓解组ROBO3 mRNA的表达水平显著下降。靶向ROBO3可以有效抑制AML细胞的增殖,并促进细胞凋亡。结论：ROBO3在儿童AML患者中差异表达,很可能是儿童AML潜在的标志物及新靶点。     

DcR3表达在肝癌细胞凋亡和增殖中的作用研究

目的通过体外试验探讨诱骗受体3(DcR3)对肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法构建DcR3慢病毒载体和慢病毒非特异性载体,转染HepG2细胞株后,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)判断转染效率。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测DcR3蛋白表达水平;并绘制生长曲线检测细胞增殖情况;采用荧光定量PCR (qPCR)方法检测细胞凋亡指标半胱天冬酶-3 (caspase 3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)转录水平变化。结果检测3株肝癌细胞HepG2、MHCC-LM3和MHCC-97H的DcR3蛋白表达水平,发现细胞株HepG2较MHCC-LM3、MHCC-97H中的DcR3蛋白表达水平明显低,差异具有统计学意义(P0.05)。上调HepG2细胞株的DcR3的mRNA水平后,细胞凋亡指标caspase 3和Bax转录水平明显下降,抗凋亡基因Bcl-2转录水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。当培养到第4天时,LV-DcR3组增殖速度[(39.45±3.61)]与LV-NC组[(25.98±5.34)]比较,差异具有统计学意义(P=0.022);当培养到第6天时,LV-DcR3组增殖速度[(65.84±6.16)]较LV-NC组[(33.34±4.55)],差异有统计学意义(P=0.002)。结论DcR3具有促进肝癌细胞增殖和抗凋亡作用,其机制可能与上调抗癌基因Bcl-2的表达有关。     

酪氨酸激酶RON在霍奇金淋巴瘤中的表达及其对细胞增殖的影响

目的探讨RON在霍奇金淋巴瘤（HL）中的表达及其对HL细胞增殖的影响。方法采用免疫组化法检测RON蛋白在HL中的表达情况,并用原位杂交法检查RON的表达与EB病毒感染的相关性。将HL细胞株（L428细胞）分成4组：空白对照组、Zt/f2（2F2）预处理组、巨噬细胞刺激蛋白（MSP）刺激组和联合处理组。通过四唑盐比色法、流式细胞术分别检测L428细胞的增殖和凋亡。结果 RON蛋白在HL呈异常高表达（47.86%）,其表达率与EB病毒感染呈正相关（r=0.32,P=0.02）。与空白对照组相比,MSP刺激组RON的磷酸化被激活,L428细胞增殖明显,Zt/f2（2F2）预处理组与联合治疗组细胞增殖则受抑制（P均〈0.05）。同时,Zt/f2（2F2）组L428细胞凋亡被诱导,且呈时间依赖性。结论 RON的表达促进HL瘤细胞增殖,而抑制RON表达可诱导其凋亡。     

C-erbB3在食管癌组织中的表达及临床意义

已有研究证实C-erbB家族在恶性肿瘤的发生与发展过程中起重要作用,C-erbB2在食管组织中的过度表达与食管癌的分级、浸润深度、淋巴结转移和预后相关[1].作者采用免疫组织化学的方法检测C-erbB3在食管癌组织及对照组中的表达情况,旨在探讨C-erbB3的表达与食管癌临床和病理的关系.……     

circ-0005273靶向miR-1200对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨circ-0005273对食管癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制.方法 收集41例食管癌患者的癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测组织中circ-0005273和miR-1200表达.体外培养食管癌Eca109细胞,分别转染circ-0005273小干扰RNA、miR-1200模拟物,或共转染circ-0005273小干扰RNA与miR-1200抑制剂.采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白印迹法检测细胞中cleaved-caspase9、cleaved-caspase3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-1200与circ-0005273调控关系.结果 食管癌组织中circ-0005273的表达量高于癌旁组织,而miR-1200的表达量低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P＜0.05).干扰circ-0005273表达或过表达miR-1200后,Eca109细胞光密度(0D)值和克隆形成数降低,凋亡率和cleavde-caspase9、cleavde-caspase3蛋白的表达量增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).circ-0005273靶向负调控miR-1200,干扰miR-1200可逆转干扰circ-0005273对Eca109细胞增殖和凋亡的影响.结论 circ-0005273在食管癌组织中呈高表达,干扰circ-0005273可能通过靶向负调控miR-1200阻碍了食管癌细胞增殖,并加剧了细胞凋亡.     

蝙蝠葛碱对人食管癌细胞Eca-109的增殖和凋亡影响的实验研究

目的研究蝙蝠葛碱对人食管癌细胞Eca-109的增殖和凋亡的影响。方法 12 h、24 h、48 h采用MMT实验检测0μM、20μM、40μM、80μM的蝙蝠葛碱作用于人食管癌细胞Eca-109增殖的抑制率,并经流式细胞仪对人食管癌细胞Eca-109凋亡周期、早期凋亡率进行检测,同时应用Western blot法对细胞凋亡基因Caspase-3、Bax、Bcl-2表达进行检测。结果与0μM蝙蝠葛碱比较,20～80μM蝙蝠葛碱均能对Eca-109细胞的增殖进行抑制,并细胞生长抑制率随着蝙蝠葛碱浓度增加、作用时间延长而增高,差异有统计学意义(P 0. 05);相较于0μM蝙蝠葛碱,20μM、40μM、80μM蝙蝠葛碱的G1期细胞均增加,并G1期细胞随着蝙蝠葛碱浓度的逐渐增加而不断增多,差异有统计学意义(P 0. 05); G2M期细胞随着蝙蝠葛碱的浓度增加而呈增多趋势; 20～80μM蝙蝠葛碱对人食管癌Eca-109细胞凋亡均具有促进作用,且细胞凋亡率随着蝙蝠葛碱应用浓度增加而不断升高,差异有统计学意义(P 0. 05); 20～80μM蝙蝠葛碱作用24 h后Caspase-3蛋白活性、Bax蛋白的表达均增强,而Bcl-2蛋白的表达减少,差异有统计学意义(P0. 05)。结论 20～80μM蝙蝠葛碱能对人食管癌细胞Eca-109增殖进行抑制,促进Eca-109细胞凋亡,并呈剂量、时间依赖性,分析原因可能与上调Caspase-3、Bax蛋白表达、下调Bcl-2表达有关。     

食管癌中ICE、Fas、FasL的表达及其意义

目的 了解食管癌组织中的促凋亡状况及其与抗肿瘤免疫的关系。方法 采用免疫组化LSAB法对46例食管癌手术切除标本中的白细胞介素lβ转化酶(IL-1β converting enzyme,ICE)、Fas、FasL蛋白进行标记，并对其中13例进行TdT介导dUTP缺口末端标记。结果 ICE、Fas、FasL蛋白在癌巢中的阳性率分别为78．26％、60．87％和47．83％，ICE蛋白的表达程度与癌组织学分级有相关性。结论 癌组织表达Fas、FasL，可能参与癌细胞的免疫逃避；ICE的表达与癌组织分化有一定关系。     

TRIM31基因沉默对U266细胞增殖及凋亡的影响及其机制

目的:探讨三结构域蛋白31(TRIM31)基因沉默对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制.方法:以正常人骨髓浆细胞为对照,用RT-qPCR和Western blot实验检测人多发性骨髓瘤细胞株(U266、RPMI-8226、NCI-H929和KMS-11)中TRIM31 mRNA和蛋白表达水平.用RT-qPCR...     

C—erbB3在食管癌组织中的表达及临床意义

已有研究证实C—erbB家族在恶性肿瘤的发生与发展过程中起重要作用，C—erbB2在食管组织中的过度表达与食管癌的分级、浸润深度、淋巴结转移和预后相关。作者采用免疫组织化学的方法检测C-erbB3在食管癌组织及对照组中的表达情况，旨在探讨C—erbB3的表达与食管癌临床和病理的关系。     

PLAC8在子宫内膜癌中的表达及其调控癌细胞增殖和凋亡的机制

目的 探讨胎盘特异性蛋白8(PLAC8)在子宫内膜癌中的表达及其调控癌细胞凋亡的机制.方法 采用免疫组织化学法检测PLAC8在子宫内膜癌组织中的表达水平,分析PLAC8表达与患者临床病理参数、患者生存时间的关系.构建敲低PLAC8表达的Ishikawa细胞株,采用MTT试验检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,...     

长链非编码RNA MEG3抑制食管癌细胞增殖和侵袭作用研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MEG3对食管癌细胞增殖和侵袭等生物学行为的调控作用。方法收集食管癌手术患者的肿瘤组织42例(肿瘤组)及与其配对的肿瘤旁正常食管组织42例(对照组),通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测MEG3的表达水平并比较其在肿瘤和正常组织中的表达差异;采用聚乙烯亚胺(PEI)和脂质体分别进行MEG3过表达或干扰消除实验;采用噻唑蓝(MTT)、Transwell小室来对各组的KYSE30细胞的增殖活性和侵袭活性进行检测。结果 RT-PCR的结果显示,与正常组织相比,lncRNA MEG3在食管癌组织中呈现低表达。过表达MEG3抑制食管癌细胞系KYSE30细胞增殖,敲除MEG3之后,能够增加食管癌细胞的增殖和侵袭作用。结论 lncRNA MEG3参与食管癌的发生和发展,在食管癌中作为一个肿瘤抑制基因发挥着关键作用。     

薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响

目的观察薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响。方法结肠癌SW480细胞分为4组,其中A组为对照组,B,C,D组分别在培养基中给予5,10,20mg／L薏苡仁酯处理。采用噻唑蓝比色法检测4组细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果作用24h后,B,C,D组的抑制率分别为16．43％,22．51％,31．24％,呈剂量依赖关系,与A组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）;给药后24hD组细胞G0～G,期比例较A组增高,S期细胞比例较A组降低（P〈O．05）;D组24,48h凋亡率明显高于A组,差异有统计学意义（P（0．05）。结论薏苡仁酯可在体外直接抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,在结肠癌中药防治中有一定作用。     

miR-9调控GOLPH3抑制食管癌EC109细胞的增殖和迁移

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-9在食管癌中的表达水平及其对食管癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测食管癌患者癌组织及其癌旁组织中miR-9及高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因的表达水平;miR-9模拟物转染食管癌细胞系EC109,qRT-PCR检测miR-9的表达水平;MTT试验、平板克隆形成试验、Transwell迁移试验和流式细胞术检测过表达miR-9对EC109细胞生物学功能的影响。构建野生型和突变型GOLPH3双荧光素酶报告基因载体,并检测荧光素酶活性。qRT-PCR及western blot检测过表达miR-9后,GOLPH3 mRNA和蛋白质的表达水平。结果与癌旁组织相比,食管癌组织中miR-9的表达水平明显降低(P0.01),而GOLPH3基因表达水平明显升高(P0.01)。与阴性对照组相比,miR-9模拟物转染后,食管癌EC109细胞中miR-9的表达水平明显升高(P0.01),且细胞增殖和迁移能力明显降低(P0.01),其细胞周期阻滞于G_2/M期(P0.01)。双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和western blot证实miR-9能与GOLPH3特异性结合(P0.01),并介导GOLPH3 mRNA的降解(P0.01),且GOLPH3蛋白的表达水平降低(P0.05)。结论 miR-9在食管癌中呈低表达,并可通过调控GOLPH3参与食管癌的发生、发展。     

牛蒡子苷元对人食管癌细胞增殖、凋亡的影响

目的 观察牛蒡子苷元(ARG)对人食管癌细胞(EC-1)增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将不同浓度的ARG作用于EC-1细胞,采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖活性(ARG浓度分别为2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/L,作用时间为24、48、72、96、120 h),流式细胞术检测细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳和DNA缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,免疫细胞化学法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达水平的改变(该3种检测均采用:ARG浓度10.0、20.0、40.0 mg/L,作用时间24h);分析不同浓度ARG对EC-1细胞的影响.并设阴性对照组(只加培养液不加药物)进行比较.结果 ARG对EC-1细胞增殖、凋亡的影响呈剂量/时间依赖性.随ARG浓度和作用时间的递增,对EC-1细胞增殖的抑制率递升(P＜0.05或P＜0.01).随ARG浓度的递增,EC-1细胞凋亡率和凋亡指数递升(P均＜0.01),Bcl-2表达率递降(P＜0.01),Bax表达率递升(P＜0.01).上述变化与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 ARG可明显抑制EC-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与ARG调控Bcl-2、Bax基因表达而诱导EC-1细胞凋亡有关.     

二氢杨梅素对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响

目的研究二氢杨梅素(DMY)对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响。方法 2014年3月至2015年2月,该院采用99%纯度的DMY为抑制剂,以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,采用MTT法、流式细胞术法和免疫细胞化学来分析乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的情况。结果当使用浓度大于20μg/mL的DMY处理细胞时,出现了抑制效果,但效果不佳;当用40与80μg/mL的DMY时,明显地抑制了乳腺癌细胞MCF-6的增殖,且有不同程度的敏感性。当DMY为80μg/mL时,其IC50为226.9μg/mL。抑制率和IC50分别与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。40与80μg/mL的DMY处理乳腺癌细胞MCF-6可以诱导其周期阻滞在G2/M期(P0.01),并表现出明显的细胞凋亡现象,同时,G0/G1期也受到阻滞,S期细胞比例降低明显,差异有统计学意义(P0.05);当使用浓度大于20μg/mL的DMY时,PCNA阳性率有所下降,当浓度为40μg/mL的DMY时,乳腺癌细胞MCF-6的PCNA阳性率明显下降(P0.01),尤其浓度为80μg/mL的DMY时,阳性率为10.00%。与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论对乳腺癌患者采用DMY可以有效抑制癌细胞快速增殖,加速器凋亡,减缓患者病情,疗效突出。     

土贝母含药血清对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察土贝母含药血清对人肺癌细胞增殖、凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用灌胃SD大鼠土贝母水提物的方法制备其含药血清.应用不同浓度(0.0％、2.5％、5.0％、10.0％、20.0％、40.0％)含药血清处理人肺癌A549和H1299细胞.采用MTT、免疫荧光法观察含药血清对人肺癌细胞增殖的影响,采用流式...     

双靶向TRAIL过表达联合辐射对乳腺癌MDA—MB-435细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨Egr-1和hTERT双靶向介导TRAIL过表达联合辐射对乳腺癌细胞增殖和凋亡的作用,为肿瘤基因一放射治疗提供必要的参考。方法实验分为正常对照组（Contr01）、CRAd．pEgr-1-TRAIL组、2．0Gy照射组及CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy照射组。病毒感染和X射线照射后,分别采用CCK-8试剂盒和AnnexinV—FITC试剂盒检测细胞增殖和细胞凋亡。结果随着时间延长,各组细胞均表现增殖状态,control和CRAd．pEgr-1-TRAIL组MDA-M昏435细胞增殖较快,且无明显差异,而2Gy和CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy组细胞增殖较慢,且以CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy组更明显,48h时甚至出现增殖抑制;2．0Gy组（24和48h）和CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy组（12,24和48h）均较control组显著增加（P〈0．05,P〈0．01）,而且CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy组（24和48h）也较2．0Gy组显著增加（P〈0．05,P〈0．01）。与control组比较,CRAd．pEgr-1-TRAIL组细胞凋亡无显著变化,而2．0Gy组和CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy组细胞凋亡显著增加（P〈0．05,P〈0．01）,尤其以CRAd．pEgr-1-TRAIL＋2．0Gy组更明显,与2．0Gy组比较,具有统计学差异（P〈0．05）。结论电离辐射能诱导MDA—MB-435细胞增殖抑制和凋亡增加,双靶向介导的TRAII．过表达能增强这种作用。     

槐耳清膏对肺腺癌细胞增殖凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨槐耳清膏抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡的抗肿瘤作用的分子机制。方法应用不同浓度槐耳清膏处理肺腺癌细胞,细胞增殖活性利用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色法检测,细胞凋亡应用 Annexin V‐FITC／PI双染流式细胞术检测,细胞中相关基因表达利用免疫技术检测。结果 CFSE 染色结果发现槐耳能够明显抑制肺腺癌细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性;Annexin V‐FITC／PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡结果发现槐耳能够促进肺腺癌细胞凋亡,具有浓度和时间依赖性;免疫蛋白印迹实验结果发现在肺腺癌细胞中,槐耳能够抑制相关基因 EZH2、β‐catenin 和 bcl‐2的表达。结论在肺腺癌细胞中槐耳清膏抗肿瘤作用的分子机制可能是通过抑制 EZH2／β‐catenin 信号通路,抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡。     

The effects of acetylsalicylic acid on proliferation,apoptosis, and invasion of cyclooxygenase-2 negative colon cancer cells

BACKGROUND: Acetylsalicylic acid (ASA, aspirin), the most common nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID), has been shown to have a protective effect against the incidence and mortality of colorectal cancer. However, the mechanism of its anticancer function remains unclear. The aim of this study was to determine the effects of acetylsalicylic acid on proliferation, apoptosis, and invasion in human cyclooxygenase-2 (COX-2) negative colorectal cancer cell lines. MATERIALS AND METHODS: After treatment with various concentrations of ASA, cell proliferation was measured in the human colon cancer cell line SW480. Apoptotic cells were identified by transmission electron microscopy, acridine orange staining, and flow cytometry. The invasive potential of SW480 cells was detected using an in vitro invasion assay. The production of carcinoembryonic antigen was measured by microparticle enzyme immunoassay. Expression of Bcl2, Bax, CD44v6, and nm23 were evaluated by immunocytochemistry. RESULTS: ASA significantly inhibited the proliferation of SW480 cells and stimulated apoptosis. Production of carcinoembryonic antigen and the invasive potential of SW480 cells were also inhibited by ASA. After treatment with ASA, down-regulation of Bcl2 and CD44v6 expression and up-regulation of nm23 expression were observed in SW480 cells. No obvious effect of ASA was found on Bax expression. CONCLUSION: Our findings reveal that ASA inhibits the proliferation and promotes apoptosis in the human colon cancer cell line SW480. Down-regulation of Bcl2 expression might represent a potential mechanism by which ASA induces apoptosis in this COX-2 negative colon cancer cell line. Our results also suggest that ASA decreases the invasive potential of these colon cancer cells. Decreased CEA content and CD44v6 expression and elevated nm23 expression may contribute to the effect of ASA on invasive potential of SW480 colon cancer cells.