NLRP3炎症小体与心肌缺血再灌注损伤的研究进展

及时再通阻塞的冠状动脉是降低急性心肌梗死患者死亡率的关键,但实现再灌注的同时可能对缺血的心肌造成二次损伤,即心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体通过促进心肌细胞焦亡、级联放大炎症反应和破坏心肌血管内皮细胞,参与了MIRI的整个过程,引起了临床广泛关注。目前,以NLRP3炎症小体及其调节因子为药物靶点的相关研究正在如火如荼地开展,有望为MIRI的预防和治疗提供新的思路。     

NLRP3炎症小体作为肾脏疾病潜在治疗靶标的研究进展

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)和慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)是肾脏常见病理状态。最近,大量证据表明肾脏疾病与炎症小体之间存在关联,尤其是核苷酸结合寡聚化结构域(nucleotide-binding oligomerization domain, NOD)样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体。 经典的NLRP3炎症小体是由NOD样受体(NOD-like receptors, NLRs)、凋亡相关的斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 (Caspase-1)组成的多蛋白复合物。大量的研究探索了NLRP3炎症小体在肾脏疾病发生发展中的机制以及在肾脏疾病中针对NLRP3炎症小体的治疗。本文综述了近几年NLRP3炎症小体在肾脏疾病中的作用的最新发现以及以NLRP3炎症小体为靶标的最新治疗策略。     

NLRP3炎性小体研究进展

NLRP3炎性小体(inflammasome)是NLR炎性通路中的重要组成部分,可以识别细菌、病毒等病原体,激活半胱天冬酶-1(Caspase-1),进一步活化炎性因子如白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白介素-18(interleukin-18,IL-18)等,杀灭/清除入侵的病原体,维持机体固有免疫和特异性免疫;同时又能导致靶组织靶细胞损害的瀑布样效应,出现发热等全身炎症性反应。由于该炎性通路在多种疾病中均发挥重要的作用,近年来NLRP3炎性小体受到越来越多的关注。     

MCC950通过抑制NLRP3炎症小体通路引发的焦亡缓解原发性痛经

目的：研究原发性痛经(primary dysmenorrhoea, PDM)中子宫损伤的机制,并探讨MCC950治疗或缓解PDM的机制。方法：采用随机数表法将30只健康未孕雌性大鼠分为对照组、模型组（PDM组）和MCC950组,每组10只。PDM组和MCC950组联合注射苯甲酸雌二醇和催产素建立PDM大鼠模型;MCC950组对大鼠腹腔注射NLRP3选择性抑制剂MCC950;对照组注射相同剂量的0.9%氯化钠注射液。用大鼠扭体次数、扭体评分和扭体潜伏期来评估PDM模型和症状;ELISA法检测大鼠血清中PGE2和PGF2α的水平,也用于评价PDM模型和症状;用光学显微镜观察大鼠子宫组织形态,评估其损伤程度;Western blot法检测大鼠子宫组织中NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65、NLRP3炎症小体成分蛋白、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β、IL-18的表达水平,探讨子宫组织焦亡的分子机制。结果：与对照组相比,模型组大鼠扭体次数、扭体评分显著升高;子宫病理损伤评分显著升高;血清PGF2α水平和PGF2α/PGE2比值显著升高;子宫组织NF-κB p65、phospho-...     

姜黄素抑制NLRP3炎症小体减轻早期脓毒症大鼠心肌细胞损伤的机制研究

目的:探讨姜黄素对早期脓毒症大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白（NLRP3）炎性小体的作用及其机制。方法:24只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为3组：假手术组（Sham组, n = 8）、脓毒症组（Sepsis组, n = 8）、姜黄素干预组（Cur组, n = 8）。...     

游离脂肪酸通过自噬调节Kupffer细胞中NLRP3炎症小体的激活抑制非酒精性脂肪性肝炎的机制研究

目的 探讨自噬在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中对NLRP3炎症小体激活的调控作用.方法 将分离培养的Kupffer细胞(KCs)随机分为对照组、棕榈酸(PA)组、PA+雷帕霉素组(自噬激活组)和PA+渥曼青霉素组(自噬抑制组).收集细胞及培养基上清液,通过qPCR与Western Blotting技术检测四组KCs...     

NLRP3炎症小体在白塞综合征中的研究

白塞综合征（Behçet’s syndrome，BS）是一种以复发性口腔溃疡、外阴溃疡、皮肤病变和葡萄膜炎等为特征的变异性血管炎。Th细胞和Treg细胞失衡及各类细胞因子异常在其发病过程中发挥了重要作用。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体是固有免疫系统的重要成分，可介导半胱-天冬氨酸特异性蛋白酶-1（cysteine aspartic acid specific protease-1，caspase-1）激活，促进细胞因子IL-1β、IL-18分泌，进而参与细胞损伤。NLRP3炎症小体的异常激活在多种自身免疫性疾病的发生和进展中发挥着重要作用。近年来，有关NLRP3炎症小体与BS相关性研究受到广泛关注。本文将对NLRP3炎症小体的结构、功能及其在BS中的研究进展进行综述，旨在为BS的发病机制提供新的研究思路。     

NLRP3炎症小体对大鼠心肌细胞H9C2钙化的影响

目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体对大鼠心肌细胞H9C2钙化的调控作用。方法 采用10 mmol/L的β-甘油磷酸钠培养10 d,诱导心肌细胞钙化模型。具体分组为：空白对照组、钙化模型组、模型+NLRP3抑制剂组。其中模型+NLRP3抑制剂组为造模前采用10μM NLRP3-IN-2预处理细胞,并于24 h后再采用β-甘油磷酸钠诱导。采用Von kossa染色观察各组心肌细胞钙化情况;生化试剂盒检测细胞上清中碱性磷酸酶（ALP）活性;流式检测各组细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR实验（qPCR）检测各组细胞凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、胱天蛋白酶1(caspase-1)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达情况。结果 与空白对照组相比,模型组可见颗粒状沉积物分布在细胞周围,ALP活性水平显著上升,细胞凋亡水平显著上升,ASC、caspase-1、BMP-2、Runx2 mRNA表达水平显著上升;与模型组相比,模型+NLRP3抑制剂组中细胞钙沉积情况显著减轻,ALP活性水平显著下调,细胞凋亡水平显著下降,ASC...     

冠心病患者血清NLRP3炎性小体、NF-κB的表达及其与Gensini评分的关系

目的探讨冠心病患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、核因子-κB(NF-κB)的表达,及其与冠状动脉Gensini评分的关系。方法纳入于2016年1月至2018年12月在河南省胸科医院住院的冠心病患者120例,分为稳定型心绞痛(SAP)组患者40例、不稳定型心绞痛(UAP)患者组40例与急性心肌梗死(AMI)患者组40例,选取同期30名冠脉造影未见异常或狭窄<50%作为对照组。应用ELISA法检测四组血清NLRP3炎性小体、NF-κB的表达水平;根据冠状动脉造影结果对各组患者进行Gensini评分;采用秩和检验分析血清NLRP3、NF-κB水平和Gensini评分的相关性。结果(1)SAP组、UAP组和AMI组患者血清NLRP3、NF-κB的表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(t值分别为9.758、11.734、14.361,P<0.01),且AMI组明显高于SAP组和UAP组,差异有统计学意义(t值分别为11.392、10.716,P<0.05)。(2)根据冠状动脉造影结果计算Gensini积分:SAP组[(45.37±8.26)分]、UAP组[(58.47±18.54)分]、AMI组[(78.72±22.35)分]均明显高于对照组[(18.21±4.63)分],差异有统计学意义(P<0.05),且AMI组Gensini积分较其他三组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)采用Spearman相关性分析显示:血清NLRP3水平与Gensini积分呈正相关(相关指数r=0.496、P<0.001);血清NF-κB水平与Gensini积分亦呈正相关(相关指数r=0.506、P<0.001),随着炎症因子水平的升高,冠脉Gensini积分亦上升。结论NLRP3炎性小体、NF-κB与冠心病发展存在密切关系,其水平与Gensini评分均呈正相关,提示二者在冠心病发生发展过程中起着一定作用,有可能成为评估冠状动脉血管狭窄程度的预测因子。     

NLRP3 炎症体在肺损伤中的研究进展

急性肺损伤（acutelunginjury,ALI）是由多种非心源性致病因素所导致的毛细血管膜通透性增高的急性进行性低氧性呼吸功能不全或呼吸衰竭。促炎介质的释放和细胞凋亡在ALI的发生和发展过程中产生了重要的作用。尽管ALI的发病机制和治疗手段已经取得了很大的发展,但是其病死率仍然达到40％。细胞因子、炎症趋化因子和黏附分子分泌过度失调的炎症反应促进了ALI的发展。     

NLRP3炎症小体与糖尿病并发症的研究进展

糖尿病是目前全球的主要健康问题之一。糖尿病是一种全身性、慢性低度炎症反应性疾病,以胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能异常为特征。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可以调节各种炎症因子的表达,如白细胞介素(IL)-1β及IL-18等。研究发现,NLRP3炎症小体不仅参与糖尿病的炎症过程,而且在糖尿病并发症的发生发展中发挥重要的作用。本文就NLRP3炎症小体在糖尿病及其并发症中的作用及相关机制予以综述。     

NLRP3炎症小体与葡萄膜炎的关系

目的 分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在葡萄膜炎患者发生及预后中的作用.方法 选取2019年4月至2020年2月该院收治的葡萄膜炎患者290例作为观察组,另选取同期该院体检健康者280例作为对照组,比较2组的NLRP3相对表达水平与IL-1β水平,根据观察组患者疾病严重程度评分,采用Pear...     

梅毒血清固定患者NLRP3炎症小体及细胞因子表达的研究

目的 检测梅毒血清固定患者的NLRP3炎症小体及相关细胞因子的表达水平,探讨它们在梅毒血清固定形成过程中的作用.方法 采用病例对照研究的方法,运用qRT?PCR检测梅毒血清固定患者及健康人的PBMCs中NLRP3炎症小体及相关细胞因子mRNA的表达,并用ELISA检测上述两组血清中细胞因子IL?1β和IL?18水平.结...     

呼吸机相关肺损伤患者血清及诱导痰液NLRP3炎症小体的表达及与其它炎症因子的相关性

目的分析呼吸机相关肺损伤(VILI)患者血清及诱导痰液No d样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体及炎性因子的表达,探讨两者在VILI发病中的作用。” 方法测定76例VILI患者及30例健康体检者(对照组)的血清、诱导痰中NLRP3 炎症小体的表达,以及血清中白介素1β(IL-1β),IL-18,IL-6和肿瘤坏死因子-α(TN F-α)等炎性指标。根据Murray肺损伤评分(LIS)将VILI患者分为两个亚组:轻、中度肺损 伤组(LIS≤2.5分)、重度肺损伤组(LIS>2.5分)。分析各组NLRP3炎症小体与炎性因子的相 关性。结果轻中度肺损伤组、重度肺损伤组血清、诱导痰中NLRP3 炎症小体表达水平明显高于对照组［血清:106.3±29.3,131.1±37.1 vs 79.2±27 .3 pg/ml;诱导痰:95.1±24.4,119.2±36.7 vs 76.0±20.6 pg/ml］,重度肺损 伤组上述指标亦明显高于轻中度肺损伤组( t=3.82,4.03,均P <0.05)。与对照组比 较,轻中度肺损伤组、重度肺损伤组血清中IL-1β(8.7±2.4,11.6±2.7 vs　5.5± 1.9 pg/ml),IL-18(11.3±3.4,15.6±4.7 vs 4.5±1.3 pg/ml),IL-6(46.4± 12.1,74.6±24.8 vs　6.4±1.8 pg/ml),TNF-α(16.1±4.4,22.8±5.1 vs 　9.2±1.5 ng/ml)水平明显升高;与轻中度肺损伤组比较,重度肺损伤组血清中各炎性 因子水平亦明显升高( t=4.87,4.62,7.94,5.33,均P <0.05)。轻中度肺损伤组 患者血清、诱导痰中NLRP3炎症小体浓度与IL-1β,IL-18均呈显著正相关( P <0.05) 。重度肺损伤组患者血清、诱导痰中NLRP3炎症小体浓度与IL-1β,IL-18,IL-6,TNF- α均呈显著正相关( P <0.05)。结论 VILI患者血清、诱导痰中 NLRP3表达明显上调,且与炎性因子密切相关,参与VILI的发生、发展,阻断NLRP3炎性小体 的激活可能成为VILI的潜在治疗靶点。     

NLRP1和NLRP3炎性体的研究进展

炎性体作为一种新近发现的蛋白质复合物,其活化后可促进炎性因子的成熟与释放,在先天性免疫中发挥着重要的作用。本文就核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1（NLRP1）和3（NLRP3）炎性体的构成、激活机制及信号传导通路和相关的疾病做出综述,并对NLRP1和NLRP3炎性体与早产的关系做出推测。     

TNF-α和CRT双信号对RA患者滑膜组织NLRP3炎症小体的活化作用

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和钙网织蛋白(CRT)双信号对类风湿性关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)中核苷酸结合寡聚化结构域受体3(NLRP3)炎症小体活化的影响。方法采用间接免疫荧光染色法检测12例RA和10例骨性关节炎(OA)患者滑膜组织NLRP3、衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达,并与滑膜衬里层和衬里下层FLS标志物进行共定位研究。采用胶原酶消化法分离RA患者滑膜组织中FLS并进行体外培养。分别用不同浓度的TNF-α或脂多糖(LPS)(刺激剂)处理细胞,采用免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞NLRP3、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)和白细胞介素18前体(pro-IL-18)的蛋白和mRNA表达。加入尼日利亚菌素(Nigericin)或CRT后采用免疫印迹法检测FLS中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)活化片段p20的表达;收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测分泌型白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平。结果 RA患者滑膜组织中NLRP3炎症小体的主要成分NLRP3和ASC的平均荧光强度高于OA患者(P<0.01)。NLRP3、ASC和IL-1β裂解片段(cleaved IL-1β)与RA患者滑膜衬里层FLS表面标志物PDPN和衬里下层FLS表面标志物CD248均有共定位。体外细胞实验结果显示TNF-α可以促进FLS中NLRP3和pro-IL-1β的蛋白表达;与对照组(无刺激剂)相比,二者的mRNA表达显著增加(P<0.05、P<0.001),而LPS对RA患者FLS中NLRP3炎症小体的预活化无影响。TNF-α/Nigericin或TNF-α/CRT双信号能够促进FLS中Caspase-1的活化,导致Caspase-1活化片段p20呈浓度依赖性升高;与对照组相比,TNF-α/CRT组分泌型IL-1β显著升高(P<0.05)。结论 TNF-α/CRT双信号可促进RA患者FLS中NLRP3炎症小体的活化。     

姜黄素抑制NLRP3炎症小体减轻早期脓毒症大鼠心肌细胞损伤的机制研究

目的探讨姜黄素对早期脓毒症大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP3)炎性小体的作用及其机制。方法 24只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:假手术组(Sham组, n = 8)、脓毒症组(Sepsis组, n = 8)、姜黄素干预组(Cur组, n = 8)。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型, 造模后腹腔注射姜黄素100 mg/kg, 24 h后重复给药, Sepsis组注射生理盐水。于6、24、48 h通过ELISA法检测大鼠血浆中心肌损伤特异性肌钙蛋白T(cTnT)水平;取48 h大鼠心肌组织经苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理损伤情况;通过TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;Western-blot法检测Cleaved caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白的表达情况;透射电镜下观察心肌细胞内部超微结构改变。结果 Cur组6、24、48 h大鼠血浆cTnT水平明显低于Sepsis组, 差异有统计学意义(P<0.05);HE染色可见Sepsis组心肌炎性细胞浸润, 细胞水肿、坏死, 而Cur组仅见部分细胞水肿和坏死现象;TUNEL染...     

脓毒症患者外周血单核细胞NLRP3炎性小体的表达研究

目的:分析脓毒症患者外周血单核细胞(PBMCs)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、半胱氨酸天冬氨酸酶-1(caspase-1)mRNA表达及下游炎症因子水平变化,探讨其在脓毒症发生发展中作用。方法:选取192例脓毒症患者为脓毒症组、187例非感染性全身性炎症反应综合征(SIRS)患者为SIRS组、184例来医院体检的健康人群为参照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测NLRP3 mRNA、caspase-1 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平及血浆白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平。结果:脓毒症组患者血清PCT水平、血清CRP水平、APACHEⅡ及SOFA评分最高、SIRS组患者次之、参照组最低(P0.05)。脓毒症患者NLRP3 mRNA、caspase-1 mRNA表达和血浆IL-1β、IL-18水平最高、SIRS组患者次之、参照组最低(P0.05)。脓毒症患者NLRP3 mRNA表达与caspase-1 mRNA表达(P0.05)、血浆IL-1β水平(P0.05)、血浆IL-18水平(P0.05)均呈正相关;且脓毒症患者NLRP3 mRNA、caspase-1 mRNA表达均与血清PCT水平、血清CRP水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分呈正相关(P0.05)。影响脓毒症患者预后的独立危险因素有血清PCT、CRP水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分、NLRP3 mRNA表达、caspase-1 mRNA表达及血浆IL-1β、IL-18水平(P0.05)。结论:脓毒症患者外周血单核细胞NLRP3 mRNA、caspase-1 mRNA高表达,血浆IL-1β、IL-18水平升高,NLRP3炎性小体参与脓毒症发生发展。