复合致病因素诱导的肝硬化大鼠血浆同型半胱氨酸变化及其意义

目的 探讨复合致病因素诱导的肝硬化大鼠血浆同型半胱氨酸变化及其意义.方法 采用复合致病因素法制备大鼠肝硬化模型,正常对照组动物饲以标准饲料和自来水.分别在喂饮4,6,8周无菌无内毒素条件下取血测定血浆中谷丙转氨酶(alanine transferase,ALT)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、叶酸、维生素B12(VitB12)、内毒素(endotoxin)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)含量,取肝组织测定匀浆中一氧化氮(nitric oxide,NO)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及抗O·-2活力.结果 随肝硬化病程进展,血浆内毒素和Hcy逐渐升高并呈平行变化,8周时升高具有统计学意义(P<0.05);TNF-α从4周到8周逐渐升高,均显著高于正常对照(P<0.05);匀浆中NO在4周即显著升高,之后呈下降趋势,但在8周仍显著高于正常对照水平(P<0.05);抗O*-2活力在6周时升高显著(P<0.05);MDA呈明显增高趋势,至8周时显著高于正常对照与4周和6周时;各时间点叶酸和VitB12含量变化不大;相关分析显示,血浆内毒素与血浆TNF-α和Hcy、与匀浆NO和MDA之间呈显著相关,匀浆NO与Hcy和MDA之间显著相关.析因分析显示,甲硫氨酸循环中相关因素对总变异的贡献是:同型半胱氨酸>VitB12>叶酸.结论 复合致病因素诱导肝硬化大鼠发生的高同型半胱氨酸血症,可能与肠源性内毒素血症互为因果,加重肝脏损伤,最终促进肝硬化形成.     

复合致病因素诱导大鼠肝硬化各脏器纤维化改变及机制

目的：观察复合致病因素诱导的大鼠肝硬化形成过程中肺脏、肾脏、心脏的纤维化改变并探讨其发生机制。方法：将51只大鼠随机分为正常对照组、肝硬化模型4周组、6周组及8周组。采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化,分别摘取肝脏、肺脏、肾脏、心脏称重,计算各脏器系数;HE和VG染色分别观察各脏器损伤和纤维化情况;腹主动脉取血,测定血浆内毒素、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBil）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;分别测定肝、肺、肾、心肌组织匀浆中TNF-α和丙二醛（MDA）水平。结果：模型各组血浆ALT活力、TBiL和TNF-α水平均高于对照组（P〈0.05）;血浆内毒素水平随病程进展逐渐升高,模型6周组及8周组明显高于对照组（P〈0.05）。模型各组肝、肺、肾、心组织匀浆TNF-α、MDA水平随病程进展均逐渐升高并显著高于正常对照组（P〈0.05）。各脏器组织纤维化指数均逐渐升高并显著高于正常对照组（P〈0.05）。结论：肝硬化发病过程中,由肠源性内毒素引发的全身炎性反应,是导致各脏器发生纤维化的重要机制。     

SORBS1基因甲基化在Hcy诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激中的作用

目的:探讨SORBS1基因甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激中的作用。方法:将培养冻存的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)复苏培养至第三代,分成四组:(1)Hcy组;(2)叶酸组;(3)叶酸+VitB12组;(4)空白对照组。用基因芯片法筛选出具有差异的甲基化位点SORBS1。siRNA转染HUVEC,检测转染后三组(SORBS1-siRNA组,NC-siRNA组和空白对照组)HUVEC的SORBS1、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶2(SOD2)的表达水平。结果:与空白对照组相比,Hcy组SORBS1甲基化水平升高(P<0.05);与Hcy组比较,叶酸组、叶酸+vitB12组SORBS1甲基化水平均降低(P<0.05)。与NC-siRNA组和空白对照组相比,SORBS1-siRNA组SORBS1和SOD2表达水平均下降(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05)。结论:Hcy可通过调节SORBS1基因的甲基化水平诱导人脐静脉内皮细胞的氧化应激,为Hcy导致HUVEC氧化应激的分子机制提供了新思路。     

复合致病因素诱导的大鼠肝硬化并发细菌易位的研究

目的:观察复合致病因素诱导大鼠肝硬化形成过程中肠道细菌转位以及合并感染的情况.方法:将61只大鼠随机分为模型组和正常对照组,模型组53只,正常对照组 8只,观察造模过程中大鼠的感染率和死亡率.于第2、4、6、8周末取材:腹主动脉取血,测定血浆谷丙转氨酶(GPT)活力和总胆红素(TBil)水平;摘取肝脏、脾脏后称重;无菌摘取肠系膜淋巴结并进行细菌培养,观察菌落形成情况;观察大鼠合并感染情况.结果:模型复制成功,模型组大鼠合并感染率为18.6%(8/43),其中肺脏感染率为16.3%(7/43),并有细菌易位.结论:肝硬化大鼠易并发各种细菌感染,可能是导致病情加重甚至多脏器功能衰竭的重要原因.     

一氧化氮在实验性肝硬化内毒素血症大鼠中的作用

目的探讨一氧化氮(NO)在实验性肝硬化内毒素血症大鼠中的作用。方法采用大鼠饮用0.03%～0.04%硫代乙酰胺(TAA)溶液10周复制肝硬化模型,随机分为:①正常+LPS组(对照组);②肝硬化组(TAA组);③肝硬化+LPS组(TAA+LPS组);④肝硬化+LPS+AG组(氨基胍组)。模型造成后,除TAA组外,其余各组向腹腔内注入大肠杆菌内毒素(LPS)3.0 mg/kg,同时TAA组向腹腔内注入等量的生理盐水,AG组于注射LPS 3 h后,腹腔注射AG(50 mg/kg)。并在注入LPS 6 h后,各组动物经腹主动脉穿刺采全血观察血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、一氧化氮(NO)的表达。结果对照组、TAA组、AG组、TAA+LPS组动物血浆内NO、AST、ALT水平依次升高,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论一氧化氮参与了大鼠肝硬化时内毒素血症引起的肝损伤,但它未起到保护作用,它与内毒素对机体的损伤有关。     

肝硬化患者血清同型半胱氨酸检测的临床价值

目的:探讨肝硬化患者血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平变化的临床价值。方法:检测85例肝硬化患者和50例健康对照血清Hcy水平、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP)活性以及血清白蛋白(Alb)和总胆红素(TBil)浓度,并进行统计学分析。结果:肝硬化患者血清Hcy水平[(18.6±5.4)μmol/L]较对照组[(10.8±3.7)μmol/L]显著升高(P<0.01)。肝硬化患者Hcy水平随着Child-Pugh得分的升高而升高,各级之间比较有显著性差异(P<0.05)。肝硬化患者治疗后Hcy水平[(16.5±4.7)μmol/L]较治疗前[(18.6±5.4)μmol/L]显著降低(P<0.05)。结论:血清Hcy水平对肝硬化患者肝功能损害程度的判断、疗效监测和预后评估有重要价值。     

肝硬化大鼠不同脏器 NO 表达差异及其机制

目的：：观察肝硬化大鼠发病过程中不同脏器 NO 表达的差异并探讨其可能原因。方法：采用复合致病因素法建立肝硬化大鼠模型。8周末测定大鼠血浆内毒素(ET)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;检测各组织匀浆中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量;组织学切片 HE 染色进行巨噬细胞计数。结果：与正常对照组相比,肝硬化大鼠血浆 ET、TNF-α、ALT 水平明显升高,肝、肺、心、脑、肾组织中巨噬细胞计数及匀浆中 MDA、NO、iNOS 含量升高,除脑组织巨噬细胞计数以外,其它指标升高均具有统计学意义。结论：肝硬化发病过程中,肠源性内毒素及其诱导产生的 TNF-α,是不同脏器 NO 表达差异的重要原因;而巨噬细胞在各个脏器分布的特点,是导致 NO 表达差异的基本机制。     

高同型半胱氨酸血症导致动脉粥样硬化氧化应激机制的研究进展

同型半胱氨酸(Hcy)是一种含硫氨基酸,它可通过多种途径介导动脉粥样硬化,其促进动脉粥样硬化形成的机制,包括氧化应激、炎性反应、内皮功能障碍、血管平滑肌细胞增殖、内质网应激等,血管细胞氧化应激被认为是导致血管损伤的重要机制之一。Hcy通过诱导活性氧类自由基产生增加,改变许多细胞的分子结构,导致细胞功能受损,进而导致动脉粥样硬化。     

复合因素诱导大鼠肝硬化模型的建立

目的研究复合因素引起的肝硬化大鼠动物模型。方法以四氯化碳(CCl4)花生油加髙脂低蛋白饮食为实验一模型组,以CCl4花生油、髙脂低蛋白饮食加饮用30%的酒精为实验二模型组;造模6周后,观察大鼠的体重、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和肝脏组织病理结构的改变。结果实验一模型组大鼠饮食量降低,体重缓慢增加,成模54只,造模成功率为90.0%;实验二组成模10只,造模成功率为16.7%。实验一模型组和实验二模型组血清ALT和AST水平显著高于对照组。肝脏大体形态和肝组织的结构发生了肝脏纤维化病变。结论 CCl4花生油加髙脂低蛋白饮食即可诱导大鼠形成典型的肝硬化病变,造模成功率高,病变稳定,操作简单。     

氧化应激在酒精性心肌病大鼠中的作用

目的 研究氧化应激在酒精性心肌病中的作用.方法 采用长期大量自由饮用酒精的方式建立酒精性心肌病大鼠自由饮模型,6个月后,观察大鼠心肌组织的形态学改变及超微结构的变化,测定心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肤(GSH)水平.结果 模型组大鼠心肌组织中MDA含量明显升高(P<0.01),SOD活力和GSH含量明显降低(P<0.01).结论 长期摄入大量酒精可使氧自由基代谢失衡,导致心肌损伤.氧化应激在酒精性心肌病发病机制中发挥着重要的作用.     

甜菜碱对肝纤维化大鼠肺组织氧化应激的影响

目的：观察甜菜碱对肝纤维化大鼠肺组织氧化应激的影响。方法：复合致病因素诱导复制肝纤维化大鼠模型,给予甜菜碱[500 mg/（kg·d）]进行干预。4周末,测定大鼠血浆内毒素、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、透明质酸含量及碱性磷酸酶活性;观察肝组织及肺组织的病理学改变;检测肺组织匀浆中TNF-α、ONOO-、NO、MDA的变化。结果：肝纤维化组动物血浆内毒素、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、透明质酸含量明显增高、碱性磷酸酶活性增加,肺组织 TNF-α、NO、ONOO-、MDA 含量均升高;给予甜菜碱后大鼠血浆内毒素及其余各项指标水平均降低,肺组织中 TNF-α、ONOO-、NO、MDA明显降低,尤以TNF-α和MDA的变化更为显著,肺组织的病理学改变也减轻。结论：（1）肝损伤及肝纤维化可导致肺部损伤。（2）甜菜碱可能通过某种机制降低肠源性内毒素水平,进而降低炎性因子水平、减轻肺组织的氧化应激反应,减轻肺损伤。     

肝硬化患者好发胆结石的危险因素探讨

目的 分析肝硬化患者好发胆结石的危险因素.方法 选择369例肝炎后肝硬化患者,均进行腹部B超检查确定有无胆结石存在并测定门静脉内径及胆囊壁厚度,抽血测定血浆内毒素水平;同时根据血中胆红素、清蛋白、凝血酶原时间、腹腔积液和肝性脑病的有无进行Child-pugh分级.结果 Child-pughB级 C级肝硬化患者胆结石检出率为52.41%,child-pugh A级患者检出率为22.53%,差别有统计学意义(P＜0,01);高内毒素血症患者胆结石检出率为46.10%,低内毒素血症患者检出率为31.63%,差别有统计学意义(P＜0.01);门静脉内径≥13mm的患者胆结石检出率为45.75%.门静脉内径＜13mm的患者检出率为31.94%,差别有统计学意义(P＜0.01).胆囊壁厚度≥4mm的患者胆结石检出率为42.01%,胆囊壁厚度＜4mm的患者检出率为32.69%,差别有统计学意义(P＜0.05).结论 肝功能失代偿、内毒素血症、门静脉内径较宽和胆囊壁较厚是肝硬化好发胆石的主要危险因素.     

抗坏血酸对静脉铁剂诱导氧化应激的影响

目的观察静脉铁剂诱导慢性肾功能不全患者体内急性氧化应激并探讨抗坏血酸的预防作用及其机制。方法慢性肾衰竭非透析患者10例,铁蛋白均<300ng/ml。原发疾病慢性肾小球肾炎5例,糖尿病肾病3例,高血压肾损害2例。每位患者均先后接受单纯静脉铁剂治疗,小剂量及大剂量抗坏血酸预防性处理。不同临床干预组间的间隔时间为3~5d。每位患者均应用右旋糖酐铁治疗。分别直接给予静脉补充铁剂(100mg),在静脉补充铁剂前滴注小剂量抗坏血酸(1.0g)或大剂量抗坏血酸(3.0g),测定给予右旋糖酐铁前及给予后1、2、3h血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平。结果10例患者试验前平均血清肌酐(7.98±2.22)mg/dl,平均血清尿素氮(79.43±21.22)mg/dl,平均血清铁蛋白(129.03±55.16)ng/ml,平均血清铁(56.20±25.71)μg/dl。(1)静脉注射铁剂前MDA为(4.75±1.58)nmol/ml,注射铁剂后1h达高峰(11.72±2.09)nmol/ml,较给铁前明显升高(P<0.001);静脉注射铁剂前血清SOD为(54.19±3.41)NU/ml,注射铁剂后1h为(52.89±3.39)NU/ml、3h为(52.49±3.84)NU/ml,静脉注射铁剂后血清SOD的水平间差异无显著性意义(P>0.05);血清GSH在静脉注射铁剂后1h下降达谷值(197.36±34.47)mg/L,但与静脉注射铁剂前的(223.94±40.79)mg/L比较差异无显著性意义(P>0.05)。(2)在补充铁剂前滴注小剂量抗坏血酸可以降低铁剂诱导的血清MDA峰值水平(P<0.001);但对血清SOD没有明显影响,各时间点血清SOD值与单独给铁组相比差异无显著性意义(P>0.05);各时间点血清GSH的水平有所升高,但与单独给予铁剂组相比差异无显著性意义(P>0.05)。(3)在补充铁剂前滴注大剂量抗坏血酸也可以降低注射铁剂所诱导的血清MDA峰值水平(P<0.001),但与小剂量组间差异无显著性意义(P>0.05);给铁前〔(61.45±4.74)NU/ml〕、给铁后3h〔(56.62±4.04)NU/ml〕血清SOD值均较单独补铁组〔(54.19±3.41)NU/ml,(52.49±3.84)NU/ml〕有明显升高(P<0.05);各时间点血清GSH值较单独补铁组亦有所升高,但无显著性差异,较小剂量抗坏血酸组变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性肾衰竭患者接受静脉铁剂治疗时,可以诱导氧化应激反应在短期内急性加剧。铁剂应用前静脉补充抗坏血酸可在一定程度上阻止静脉铁剂所诱导的氧化应激恶化现象。大剂量组可能比小剂量组效果更好。     

还原型谷胱甘肽对氧化应激所致肝损伤的作用机制

从氧化应激损伤肝细胞的机制、还原型谷胱甘肽（Glutathione,GSh0的作用机制、GSH在肝脏疾病中的应用三方面描述了氧化应激在肝细胞损伤中的作用,并着重讨论了还原型谷胱甘肽的本质及其作用机制;在临床应用方面,举例说明还原型谷胱甘肽在各种肝病中发挥积极的作用。结果表明GSH作为抗氧化剂和细胞代谢剂,成为临床中重要的治疗和辅助治疗药物。     

肝功能检查对治疗肝硬化的临床作用

目的：探讨肝功能检查对肝硬化治疗的临床作用。方法随机选取2011年1月—2014年1月来该院治疗的肝硬化患者100例为研究对象,设为观察组,并以100例在该院体检正常的健康人为对照组。对两组进行肝功能检查,在检查前,避免食用辛辣、油腻食品,忌烟酒,于清晨空腹取3 mL静脉血,采用全自动生化分析仪检测血液中CHE (血清胆碱酯酶)、ALB(白蛋白)、CHO(血清胆固醇)及TBA(总胆汁酸)含量,并进行比较分析。结果观察组的CHE (血清胆碱酯酶)含量为(2311±855)U/L、ALB(白蛋白)含量为(31.4±6.7)g/L以及CHO(血清胆固醇)含量为(2.8±0.8) ummol/L均显著低于对照组,两者差异具有统计学意义(P<0.05),观察组TBA(总胆汁酸)含量为(48.8±32.3)mol/L,显著高于对照组,两者差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,不同Child-Pugh分级患者的CHE、ALB、CHO水平均显著高于治疗前,两者差异有统计学意义(P<0.05);不同Child-Pugh 分级患者的TAB水平均显著低于治疗前,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论CHE(血清胆碱酯酶)、ALB(白蛋白)、CHO(血清胆固醇)及TBA(总胆汁酸)水平等各项肝功能指标的检查对肝硬化患者的治疗及预后病情诊断具有重要意义。     

细胞受到氧化应激后损伤的检测方法

正常生理状态下,机体活性氧的产生与消除处于一个动态平衡中。而在某些病理生理状态下,细胞内的自由基产物超出其自身的抗氧化能力时,便会产生氧化应激。活性氧基团引起的氧化损伤在许多慢性疾病中起着重要作用,如糖尿病、动脉粥样硬化等。近年来,一些动物、细胞实验及临床试验对细胞氧化损伤的方法展开了研究。对目前国内外常用的检测细胞氧化损伤的方法予以综述,以期为检测细胞氧化受损提供更好的参考。     

层粘连蛋白测定在肝硬化诊断中的意义

目的探讨人血清层粘连蛋白(Laminin,LN)水平在肝硬化疾病诊断中的意义.方法应用酶联法测定肝硬化患者血清LN的含量,比较对照组及脂肪肝组、慢性肝病组等其它疾病对照组的血清LN水平的差异.结果肝硬化组血清LN水平高于对照组(P＜0.001).结论血清LN水平是诊断肝硬化的良好指标.     

姜黄素对实验性大鼠非酒精性脂肪肝病氧化应激、炎性因子及细胞凋亡水平的影响

目的 探讨姜黄素对实验性大鼠非酒精性脂肪肝病肝脏氧化应激、炎性因子及细胞凋亡等水平的影响并初步探讨其机制.方法 将大鼠随机平均分为正常对照组(NC组)、高脂饮食组(HF组)和高脂饮食+姜黄素治疗组(HF+curcumin组),各组给予相应处理造模后,观察肝脏病理变化并分析相关血清学指标.结果 NC组、HF组和HF+curcumin组大鼠血GSH-Px、T-AOC、SOD分别为28.5±2.5、21.7±3.1、24.1±1.2;4.3±0.9、1.8±1.1、2.9±0.7;163.7±13.4、123.5±21.1、143.1±16.7,MAD分别为1.3±0.5、3.2±0.8、2.4±0.6,血IL-6、TNF-α分别为67.5±12.4、114.5±15.2、91.3±16.1;32.8±5.5、40.5±4.2、34.5±6.1,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);各组间NF-κB/GAPDH及Bcl-2/Bax比值差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 姜黄素能够减轻NAFLD大鼠肝脏脂肪变性程度,改善胰岛素抵抗、肝功能及病理损伤,明显减轻其发病关键环节氧化应激,炎性反应及细胞凋亡的程度.