CXCL13与恶性肿瘤的研究进展

CXC亚家族趋化因子13(CXCL13)是CXC趋化因子家族成员之一.CXCL13能与其特异性受体CXCR5结合,趋化CXCR5+的成熟B细胞、滤泡辅助性T细胞 、树突状细胞以及巨噬细胞,在适应性免疫中发挥重要作用.一直以来,人们认为CXCL13能促进恶性肿瘤的发生、发展和转移,但近年来部分关于CXCL13与恶性肿瘤关系的研究证实CXCL13在恶性肿瘤的治疗中也发挥着重要的作用.因此研究C X C L 13的一般生物学特性及其与恶性肿瘤的关系具有重要意义.     

趋化因子在肝脏疾病中作用的最新进展

自从趋化因子被发现并于1992年正式命名以来,关于其在各种疾病中作用的研究层出不穷.近年来发现,趋化因子在肝脏疾病如病毒性肝炎和肝细胞癌的发生发展占有重要地位,如可以调节肝细胞、Kupffer细胞、肝星形细胞、内皮细胞等的迁移和活动,从而调节肝的炎性反应,还可促进癌细胞的存活、增殖、转移、侵袭,增强肿瘤炎性微环境,促进肝癌的进一步发展.因而深入理解CXCL9、CXCL10、CXCL11在病毒性肝炎以及CXCL12和CX3CL在肝细胞癌中的作用机制,有助于更好地认识趋化因子和肝脏疾病的关系,为临床治疗提供新思路.     

CXCL8/CXCR1驱动FOXS1蛋白促进食管癌ECA109细胞增殖、侵袭及迁移

为了探讨CXC趋化因子配体8(CXC motif chemokine ligand 8,CXCL8)/CXC趋化因子受体1(CXC chemokine receptor 1,CXCR1)对体外人食管癌细胞ECA109增殖、凋亡及侵袭迁移的影响，并观察其与叉头框家族S1(forkhead box S1,FOXS1)蛋白的关系，将人食管癌细胞ECA109转染后分为对照组、CXCL8组、CXCL8+Con-siRNA组和CXCL8+CXCR1-siRNA组。CXCL8终浓度为10μg/mL。采用MTT试验检测细胞增殖情况，克隆试验检测克隆形成情况，流式细胞仪进行细胞凋亡测试，侵袭与迁移能力由Transwell试验和划痕试验测定，Western blotting检测细胞中CXCR1、FOXS1蛋白表达水平。结果显示，与对照组比较，CXCL8能够显著促进ECA109细胞增殖、克隆、侵袭和迁移(P<0.05),而干扰CXCR1后这些作用被阻断(P<0.05)。CXCL8组、CXCL8+Con-siRNA组细胞凋亡率与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05),CXCL8+CXC...     

趋化因子CXCL12及其配体CXCR4、CXCR7对HER2阳性乳腺癌细胞生物学功能的影响北大核心CSCD

目的:探究趋化因子CXCL12及其配体CXCR4、CXCR7对HER2阳性乳腺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养HER2阳性乳腺癌细胞BT474,应用siRNA转染技术单独或联合沉默CXCR4、CXCR7,RT-PCR与Western blot检测转染效率;应用CXCL12刺激上述转染细胞,并将其分为5组,A组:正常培养的BT474细胞;B组:CXCL12处理的BT474细胞;C组:CXCL12处理的转染si-CXCR4细胞;D组:CXCL12处理的转染si-CXCR7细胞;E组:CXCL12处理的联合转染si-CXCR4与si-CXCR7细胞;应用CCK-8、流式细胞术、划痕实验、侵袭实验及Western blot分别检测沉默CXCR4和(或)CXCR7对CXCL12诱导的乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭和EMT行为的影响。结果:转染siRNA能显著降低BT474细胞中CXCR4和(或)CXCR7的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);单独或联合沉默CXCR4与CXCR7均能明显抑制CXCL12对乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭行为的促进作用(P<0.05或P<0.01),并以联合沉默CXCR4与CXCR7时效果最为显著(P<0.01),与单独沉默CXCR7相比,沉默CXCR4更能抑制CXCL12对乳腺癌EMT的促进(P<0.05)。结论:沉默CXCR4或CXCR7表达均能抑制CXCL12对HER2阳性乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭的促进功能,但CXCL12主要通过与CXCR4相互作用来促进乳腺癌的EMT行为,而同时抑制CXCR4或CXCR7能更有效地抑制CXCL12的上述功能。     

CXCL12对人早孕期蜕膜基质细胞侵袭性的调节作用

正常妊娠时,独特的母-胎免疫调节对胚胎的生长、发育至关重要.母-胎界面主要组成细胞蜕膜基质细胞(dedidual stromal cells,DSCs)与滋养细胞的相互作用是母-胎免疫调节的重要环节.CXCL12/CXCR4是一对功能广泛的趋化因子配体受体对,本课题组前期研究发现人早孕期DSCs表达趋化因子受体CXCR4,而滋养细胞表达其配体CXCL12,提示CXCL12/CXCR4可能是滋养细胞-DSC相互作用的重要调节分子[1].本研究拟分析滋养细胞来源的CXCL12对DSCs增殖和侵袭功能的调节作用,以解析CXCL12/CXCR4信号通路在滋养细胞-DSC相互调控及母-胎界面免疫微环境形成中的作用.     

sCXCL16对弥漫大B细胞淋巴瘤的体外生物学影响与初步机制

目的探讨s CXCL16对弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)细胞体外生物学特征的影响,并分析其初步机制。方法采用CCK8法观察DLBCL细胞株增殖能力;应用Transwell法检测细胞的迁徙能力,全基因组表达谱芯片筛选不同干预组差异表达的基因;运用Western blot检测差异基因的蛋白表达。结果外源性s CXCL16重组蛋白对DLBCL细胞增殖影响差异无显著性,但可促进DLBCL细胞自身的迁移并具有剂量依赖性,使用CXCR6抗体可阻断该作用;外源性添加重组蛋白s CXCL16可影响DLBCL细胞多种基因表达,其中趋化因子配体/受体途径相关的13种基因出现上调; Western blot结果证实外源性添加s CXCL16重组蛋白可上调TNFRSF12A蛋白表达,而使用CXCR6抗体则降低其表达。结论 s CXCL16可能通过其自身受体CXCR6,以剂量依赖性模式促进DLBCL细胞的迁移,并调控多种趋化因子配体/受体的表达。     

CD47对卵巢癌细胞释放趋化因子的作用

该文旨在探索敲低整合素相关蛋白CD47对卵巢癌细胞生物学行为和功能的作用。在卵巢癌细胞转染靶向CD47的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)后,采用Western blotting、 qRT-PCR、流式细胞术验证敲低效率;采用CCK-8、划痕实验、 Transwell观察细胞增殖、迁移和侵袭情况;采用qRT-PCR检测细胞中CD47、IL-6、 C-X-C基序趋化因子配体1(C-X-C motif chemokine ligand 1,CXCL1)、CXCL8、 C-C基序趋化因子配体20(C-C motif chemokine ligand 20,CCL20)mRNA表达;采用ELISA检测细胞上清IL-6和CXCL8的释放;采用Transwell观察敲低CD47后卵巢癌细胞对巨噬细胞迁移的影响。结果发现敲低CD47分子对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭无明显作用;而敲低CD47可降低卵巢癌细胞趋化因子CXCL1、 CXCL3、 CXCL8、 CCL20和IL-6的表达,且明显地降低巨噬细胞的迁移能力。该研究表明卵巢癌细胞中CD47分子能够通过调节自身...     

缺氧条件下CXCL13通过MAPK信号通路促进人骨髓间充质干细胞增殖和自噬

目的探索CXC趋化因子配体13(CXCL13)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)自噬和增殖的影响及机制。方法 hBMSC分为对照组、缺氧组、 CXCL13处理组、 CXCL13和SB203580的联合处理组。除对照组外,其余各组均在920 mL/L N_2、 30 mL/L O_2和50 mL/L CO_2建立的细胞缺氧模型下进行培养。缺氧组不进行任何处理, CXCL13处理组给予50 ng/mL CXCL13重组蛋白刺激,联合处理组则预先添加20μmol/L丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580,培养30 min后,再以50 ng/mL CXCL13刺激。分别采用噻唑蓝(MTT)法检测hBMSC增殖活性, annexinⅤ-FITC/PI双标记结合流式细胞术检测hBMSC的凋亡, Western blot法检测hBMSC的核因子κB(NF-κB)、 beclin-1蛋白水平, ELISA检测细胞裂解液自噬相关蛋白7(ATG7)的含量。结果与缺氧组及联合处理组相比, CXCL13处理组hBMSC的细胞增殖活性、 beclin-1及NF-κB蛋白水平均升高、凋亡率明显降低;细胞裂解液ATG7水平升高。结论缺氧环境下, CXCL13通过MAPK/NF-κB信号通路促进hBMSC自噬和增殖。     

CXCL12α和CXCL12β促进培养的LX-2肝星状细胞迁移

目的探讨C-X-C趋化因子配体12α(CXCL12α)和CXCL12β对肝星状细胞迁移的影响。方法体外培养LX-2肝星状细胞,分为正常对照组、10ng/mL血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)组、(50、100、200)ng/mL CXCL12α组、(50、100、200)ng/mL CXCL12β组。采用TranswellTM法检测CXCL12α和CXCL12β对LX-2细胞迁移能力的影响;外源性CXCL12刺激LX-2细胞,用Western blot法检测C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达。结果 TranswellTM实验结果显示各组迁移的LX-2细胞个数分别为:正常对照组(66.33±11.43)、PDGF-BB组(127.47±31.68)、50ng/mL CXCL12α组(106.13±12.94)、100ng/mL CXCL12α组(125.87±17.00)、200ng/mL CXCL12α组(137.07±21.03)、50ng/mL CXCL12β组(103.80±11.26)、100ng/mL CXCL12β组(122.33±19.46)、200ng/mL CXCL12β组(124.40±15.16)。CXCL12α和CXCL12β均可促进LX-2细胞迁移;且随着CXCL12α和CXCL12β浓度增加,LX-2细胞迁移增强。LX-2细胞可表达CXCR4蛋白,外源性CXCL12刺激LX-2细胞后,CXCR4蛋白表达无变化。结论 CXCL12α和CXCL12β均可促进肝星状细胞迁移。     

趋化因子受体3及其配体参与结核病免疫机制和诊断的研究进展

趋化因子（CXCL）9、CXCL10、CXCL11是目前研究较多且与结核免疫密切相关的3种趋化因子，同属于趋化因子受体3(CXCR3)配体。CXCL9、CXCL10、CXCL11主要作用于活化的CD4细胞（CD4+T细胞）、细胞毒性T淋巴细胞（CD8+T细胞）和自然杀伤（NK）细胞，参与结核病发病及免疫过程，在细胞免疫中发挥重要作用。本文总结了近5年CXCL9、CXCL10及CXCL11在结核病免疫机制和检测中作用的相关研究，以期为结核病诊断和疗效评估提供新的方法。     

早孕滋养细胞膜型及可溶性趋化因子CXCL16表达调控

目的 探讨趋化因子CXCL16在人早孕滋养细胞表达和释放的调控机制.方法 原代培养人早孕滋养细胞,实时定量RT-PCR、免疫化学和ELISA方法分析CXCL16的表达和分泌;ELISA方法分析细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4刺激前后滋养细胞CXCL16的表达和分泌水平;ELISA方法分析ADAM10治疗前后滋养细胞CXCL16的表达及分泌水平.结果 滋养细胞表达并分泌趋化因子CXCL16;IFN-γ治疗后滋养细胞表达和分泌CXCL16水平均显著上升(P<0.01),但TNF-α和IL-4并不影响CXCL16的表达或分泌;ADAM10可以加速CXCL16自滋养细胞的脱落,但并不上调CXCL16的合成.结论 IFN-γ和ADAM10参与调控母胎界面滋养细胞趋化因子CXCL16的合成和分泌.     

CXCL5与肿瘤的相关性研究进展

CXCL5属于趋化因子CXC家族中的一员,主要表达于上皮细胞,属于炎性中介,可以识别并与G蛋白偶联受体CXCR2结合通过细胞自分泌或非自分泌途径行使许多细胞功能,包括黏附、侵袭和扩散,从而可影响肿瘤的生长、增殖、转移和侵袭。该文针对CXCL5在肿瘤中的表达作一简要概述。     

CXCL12/CXCR4/MMP-2信号通路对三阴型乳腺癌生物学行为的影响

目的探讨CXCL12/CXCR4/MMP-2信号通路对三阴型乳腺癌增殖和迁移等生物学行为的影响。方法通过脂质体介导的瞬时转染CXCR4-siRNA和pc DNA3.1-CXCR4,提取MDA-MB-231细胞中RNA和蛋白质,分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中CXCR4、CXCL12及MMP-2的mRNA和蛋白质的表达变化,应用MTT实验和划痕实验检测转染后肿瘤细胞的增殖和迁移能力的改变。结果转染CXCR4-siRNA后实验组细胞中CXCR4 mRNA及蛋白表达减少(P0.01),CXCL12mRNA及蛋白表达增加(P0.01),MMP-2 mRNA及蛋白表达减少(P0.01);MTT实验和划痕实验结果显示转染后72 h细胞的增殖能力下降,划痕愈合迟缓;转染pc DNA3.1-CXCR4后实验组细胞中CXCR4 mRNA及蛋白表达上调(P0.01),CXCL12 mRNA及蛋白表达降低(P0.01),MMP-2 mRNA及蛋白表达增加(P0.01),MTT实验和划痕实验结果显示转染后72h细胞的增殖能力增加,划痕愈合加快。结论三阴型乳腺癌MDA-MB-231细胞中存在CXCL12/CXCR4/MMP-2信号通路的激活,抑制CXCR4表达可以抑制肿瘤细胞的增殖和迁移等恶性生物学行为。     

CD47及其配体在肿瘤免疫治疗中的研究进展

CD47是一种广泛表达的免疫调节蛋白, 通过与信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα, SIRPα)、血小板反应素-1(thrombospondin-1, TSP1)和整合素等配体结合, 调节细胞的迁移和吞噬活性, 在维持免疫系统动态平衡中发挥重要作用。CD47在各类癌症中的过度表达往往与临床不良预后相关。封闭CD47可以抑制实体瘤及血液系统恶性肿瘤的生长, 并提高常规化放疗及其他靶向治疗的疗效。文章就CD47在肿瘤增殖、侵袭及转移中的关键信号和相关靶向治疗进行综述, 阐述了CD47与其配体在肿瘤进展中的作用及CD47相关药物的研究现状。     

CXCL13联合VEGFA过表达抑制荷黑素瘤和结肠癌小鼠的肿瘤生长

目的 探究CXC趋化因子配体13(CXCL13)与血管内皮生长因子A(VEGFA)对肿瘤生长的影响。方法 通过慢病毒包装及感染技术，构建稳定过表达CXCL13、 VEGFA、 CXCL13联合VEGFA的B16小鼠黑素瘤细胞和MC38小鼠结肠癌细胞。采用CCK-8、 5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法、集落形成实验检测过表达后肿瘤的体外增殖能力。建立过表达CXCL13、 VEGFA细胞的小鼠皮下荷瘤模型探索对体内肿瘤生长的影响。结果 与对照组相比，体外单独过表达CXCL13、单独过表达VEGFA和联合过表达CXCL13和VEGFA对B16和MC38细胞增殖无明显影响。体内单独过表达CXCL13和单独过表达VEGFA对黑素瘤的生长无明显影响，而联合过表达CXCL13和VEGFA显著抑制黑素瘤的生长；在MC38结肠癌模型中，单独过表达CXCL13组和单独过表达VEGFA组的肿瘤体积和质量显著高于对照组，而联合过表达CXCL13和VEGFA组的肿瘤体积和体质量较单独过表达组显著减小。结论 CXCL13联合VEGFA过表达抑制荷黑素瘤和结肠癌小鼠的肿瘤生长。     

CXCL14在感染性疾病中的作用

趋化因子CXCL14是一种高度保守的趋化因子,在正常皮肤上皮中大量表达,除了参与细胞增殖、迁徙,血管生成,肿瘤抑制等生物学活动外,CXCL14在细菌、病毒、衣原体、寄生虫等感染性疾病中发挥调节作用,并具有广谱抗菌活性.此外,CXCL14对活化的巨噬细胞,未成熟的树突状细胞和自然杀伤细胞等具有化学吸引力.CXCL14可能成为感染性疾病治疗的新药.     

CXCL10在Graves’病发病中的作用

CXC趋化因子配体-10（CXCL10）属于CXC家族的非ELR亚组趋化因子, 参与多种疾病的发生,主要介导Th1型炎症反应,趋化单核细胞和T细胞,与变态免疫发生、自身免疫性疾病等有关。CXCL10与Graves’病之间关系的研究将为深入探讨Graves’病的发病机制及诊断治疗提供新的思路。     

趋化因子及其受体CXCL12/CXCR4在人前列腺癌转移机制中的作用

目的 探讨趋化因子及其受体CXCL12/CXCR4在人前列腺癌转移机制中的作用.方法 免疫组织化学技术分析CXCL12/CXCR4蛋白在18例前列腺癌组织中的表达;免疫细胞化学技术分析CXCL12/CXCR4蛋白在人前列腺癌细胞株PC3、DU145和LNCap中的表达;迁移、侵袭试验分析外源性CXCL12对PC3、DU145和LNCap体外侵袭能力的调节作用.结果 18例人前列腺癌组织中,17例不同强度表达CXCR4蛋白,1例阴性表达,同时除1例标本弱表达CXCL12蛋白外,其余不表达CXCL12蛋白.3种前列腺癌细胞株均表达CXCR4蛋白,不表达CXCL12蛋白.外源性CXCLl2可明显促进PC3、DU145及LNCap的体外迁移、侵袭,以抗CXCL12或CXCR4抗体预处理PC3、LNCap细胞可以拮抗CXCL12对它们的促迁移、侵袭作用.结论 人前列腺癌组织表达CXCR4蛋白,CXCL12/CXCR4信号通路可能参与前列腺癌的侵袭、转移.     

槐耳颗粒免疫调控CXCL1在乳腺癌中的作用研究

目的研究CXCL1与乳腺癌增殖转移的相关性,为乳腺癌发病机制提供线索,探究中药槐耳颗粒对乳腺癌发生发展的影响及其发挥效应的机制,为乳腺癌的治疗提供理论依据。方法分别设置1 nmol/ml CXCL1组、0.1 nmol/ml CXCL1组、anti-CXCR2中和抗体处理组、5 mg/ml槐耳颗粒组、10 mg/ml槐耳颗粒组及空白对照组6组。CCK8检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,ELISA检测槐耳颗粒组与空白对照组CXCL1表达量,ELISA检测各组细胞Survivin、VEGF、MMP13的表达量。结果 CCK8检测细胞增殖活性:与空白对照组相比,CXCL1处理组细胞增殖活性明显增高且存在剂量依赖关系,有统计学意义(P0.05);与空白对照组相比,anti-CXCR2中和抗体处理组细胞增殖活性明显降低(P0.05);与空白对照组相比,槐耳颗粒组细胞增殖活性明显降低(P0.05)且存在剂量依赖关系;流式测细胞凋亡结果:与空白对照组相比,CXCL1处理组细胞凋亡率明显降低(P0.05)且存在剂量依赖关系,与空白对照组相比,anti-CXCR2中和抗体处理组细胞凋亡率明显增高(P0.05),与空白对照组相比,槐耳颗粒组细胞凋亡率明显增高且随浓度增加作用增强(P0.05);CXCL1表达量:与空白对照组相比,槐耳颗粒组CXCL1表达量明显降低(P0.05),且存在剂量依赖关系;survivin、VEGF、MMP13表达量:与空白对照组相比,CXCL1处理组蛋白表达量明显增高(P0.05)且存在剂量依赖关系,anti-CXCR2中和抗体处理组蛋白表达量明显降低(P0.05),槐耳颗粒组蛋白表达量明显降低(P0.05)且存在剂量依赖关系。结论乳腺癌中CXCL1通过与其受体CXCR2结合促进survivin的表达从而促进乳腺癌细胞的增殖抑制其凋亡,促进乳腺癌的发生;同时通过促进VEGF与MMP13的表达促进肿瘤血管的生成及细胞外基质的降解,提示CXCL1可能促进肿瘤转移。中药槐耳颗粒可通过抑制CXCL1表达而有效抑制乳腺癌细胞的增殖以及侵袭转移从而达到治疗效果。     

趋化因子受体CXCR3与其配体在小鼠暴发性肝炎发病中免疫学机制研究

目的 探讨趋化因子受体CXCR3与其配体(CXCL9/Mig,CXCL10/IP-10)在小鼠暴发性肝炎淋巴细胞迁移和急性肝衰竭中的作用.方法 6～8周龄雌性BALB/cJ小鼠腹腔注射100 PFU 3型鼠肝炎病毒(MHV-3),采用流式细胞术检测感染MHV-3后的BALB/cJ小鼠肝脏、脾脏和外周血T细胞和NK细胞的比例、数量以及其表面趋化因子受体CXCR3的表达频率.实时定量PCR技术检测感染MHV-3后的BALB/cJ小鼠肝内趋化因子CXCL9和CXCL10 mRNA的表达水平.Transwell细胞迁移试验评估病毒感染的肝细胞及CXCL10对脾脏淋巴细胞的趋化作用.结果 BALB/cJ小鼠感染MHV-3后,肝脏T细胞和NK细胞的数量及CXCR3的表达频率均显著增加,然而在脾脏和外周血均显著减少.实时定量PCR检测证实,感染MHV-3 48 h后,肝内趋化因子CXCL9和CXCL10 mRNA的表达比感染前分别上升了15.6和98.8倍.体外Transwell试验表明,病毒感染的肝细胞及重组CXCL10/IP-10蛋白对脾脏T细胞和NK细胞具有明显的趋化作用,并且这种趋化作用能被抗-CXCL10抗体显著阻断.结论 趋化因子受体CXCR3与其配体(CXCL9和CXCL10),尤其是CXCL10的相互作用在小鼠暴发性肝炎肝内淋巴细胞的募集及随后的坏死性炎症和急性肝衰竭中可能发挥着重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of the chemokine receptor CXCR3 and its ligands in the migration of lymphocytes and acute hepatic failure. Methods BALB/cJ mice (6-8 weeks, female) were intraperitoneally injected with 100 PFU mouse hepatitis virus-3(MHV-3). The proportions and numbers of T cells and NK cells in liver, spleen, and blood as well as the expression of CXCR3 in T cells, and NK cells post MHV-3 infection was analyzed by flow cytometry. The hepatic mRNA level of the CXCR3-associated chemokines(CXCL9 and CXCL10) was detected by real-time PCR. A transwell migration assay was used to assess the chemotactic effect of MHV-3-infected hepatocytes and CXCL10 on the splenic lymphocytes. Results Following MHV-3 infection, the number of hepatic NK cells and T cells and the frequencies of hepatic NK cells and T cells expressing CXCR3 increased markedly; however, in the spleen and peripheral blood, they both decreased significantly. Moreover, the hepatic mRNAs levels of CXCL9 and CXCL10 were significantly elevated post infection. The transwell migration assay demonstrated that MHV-3-infected hepatocytes have the capacity to attract and recruit the splenic NK cells and T cells, and CXCL10 plays a key role in lymphocyte mobilization from the spleen. Conclusion Interactions between CXCR3 and its ligands (CXCL9 and CXCL10),especially CXCL10 may play a key role in the recruitment of intrahepatic lymphocytes and subsequent necroinflammation and acute hepatic failure in MHV-3 infection.