抗凋亡基因bcl—2在肺癌组织中的表达及意义

ｂｃｌ－２基因是近年发现的第三类肿瘤基因，是一种调控细胞死亡的“存活基因”，可抑制编程性细胞死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ），又称细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），故称之为抗凋亡基因。细胞凋亡发生障碍，可导致细胞堆积，而形成肿瘤。本...     

大黄素对肺癌细胞株A549凋亡及端粒酶逆转录酶表达的影响

细胞凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡(programmed cell death),是指细胞在一定生理和病理条件下,由基因控制,遵循自身程序的细胞自主性死亡^[1]。肿瘤的发生取决于肿瘤细胞的凋亡率和增殖率的动态平衡是否破坏,这一过程取决于多种凋亡相关基因的表达水平及相互作用,这些正常调控 机制的紊乱促使肿瘤发生发展。大黄素(Emodin)属单蒽环类1,8-二羟基蒽醌衍生物,与阿霉素、柔红霉素等抗癌药同属蒽醌类化合物,是大黄、虎杖、何首乌等多种中药的有效成分之一。大黄素药理作用广泛,具有免疫调节、抗菌、抗炎、抗肿瘤等方面的作用^[2]。目前对于大黄素抗肿瘤作用的研究主要集中在肺癌、肝癌、卵巢癌、神经外胚层肿瘤等一些实体肿瘤上。对于大黄素影响细胞凋亡作用的机理仍无明确的认识。本研究将大黄素作用于人肺癌细胞株A549,探讨它对细胞凋亡的影响及作用机制,为大 黄素的临床应用提供实验依据。     

抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达及其意义

目的　检测抗凋亡基因survivin在食管癌中的表达情况 ,并初步探讨survivin表达与食管癌的关系。方法　 2 7例新鲜的食管癌组织提取RNA ,利用半定量RT PCR方法 ,检测食管癌中survivin的mRNA表达水平 ,与其相配对的正常组织进行比较分析。通过在食管癌细胞系中转染survivin的显性负突变体 (surT34A) ,观察食管癌细胞在软琼脂中的集落形成能力 ,并利用流式细胞仪分析食管癌细胞对抗凋亡能力。结果　 2 7例食管癌组织中 ,有 18例survivin的表达高于配对的正常组织 ,食管癌组织中survivin的表达水平 (2 .0 8± 1.32 )明显高于正常对照组织 (1.2 2± 1.0 9)。在食管癌细胞系中也检测到survivin的表达。转染surT34A的EC970 6细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于对照细胞。survivin过表达可以使得EC970 6细胞在撤血清后凋亡减少 ,而surT34A则使EC970 6细胞凋亡增多。结论　survivin异常高表达与食管癌具有密切相关性。SurT34A可以抑制食管癌细胞的软琼脂集落形成能力 ,并使其对抗凋亡能力减弱 ,部分抑制食管癌细胞的恶性表型。     

抗凋亡基因bcl-2在子宫内膜癌的表达及意义

目的探讨抗凋亡基因ｂｃｌ２与子宫内膜癌的关系。方法应用免疫组化链霉菌－抗生物素过氧化物酶染色法,检测１５例子宫内膜非典型增生及５０例子宫内膜腺癌的石蜡包埋标本中ｂｃｌ２基因的表达。结果子宫内膜非典型增生组织中,ｂｃｌ２蛋白高表达,子宫内膜腺癌中ｂｃｌ２低表达（Ｐ＜０．０５）。在子宫内膜腺癌中,随着临床分期的升高、组织病理分级的降低及肌层浸润的加深,ｂｃｌ２表达阳性率逐渐下降（Ｐ＜０．０５）。结论ｂｃｌ２可能与子宫内膜组织的异常增殖有关,并主要在早期起作用。     

肺癌组织端粒酶表达与耐药,凋亡相关基因关系及其临床意义

目的 探讨肺癌冰冻组织端粒酶催化亚单位（ｃａｔａｌｙｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｓｕｂｕｎｉｔ,ｈＴＲＴ／ｈＥＳＴ２）编码基因ｍＲＮＡ表达与细胞凋亡,增殖,耐药及凋亡相关基因的关系及其预后意义方法 应用ＴＲＡＰ－ＰＣＲ,原位杂交检测端粒酶活性（ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ,ＴＡ）及ｈＴＲＴ／ｈＥＳＴ２表达,ＲＴ－ＰＣＲ,免疫组化检测耐药及凋亡相关基因ｍＲＮＡ及蛋白水平,原位杯端标记（ｉｎｓｉｔｕｅ     

端粒酶基因hTRT在乳腺癌中的表达

端粒酶在肿瘤发生、诊断、治疗及预后判断等研究中均具有重要地位。端粒酶的蛋白亚单位ｈＴＲＴ(ｈｕｍａｎｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ)基因已经被克隆。我们采用ｈＴＲＴ基因探针和原位杂交技术检测了 4 6例乳腺癌及其癌旁组织和 5 3例乳腺良性病变中的ｈＴＲＴ基因ｍＲＮＡ表达 ,探讨ｈＴＲＴ基因表达在乳腺癌诊断中的价值。一、材料与方法1 标本来源 :4 6例乳腺癌中 ,侵袭性导管癌 4 4例 ,乳头派杰病 2例。 4 6例乳腺癌相应的癌旁组织距离肿瘤 2ｃｍ以上。 5 3例乳腺良性病变中 ,乳腺纤维腺瘤 32例 ,…     

抗凋亡基因Bcl—2和Bcl—xL在急性白血病患者中的表达

Ｂｃｌ 2基因家族是重要的凋亡调控基因 ,由于Ｂｃｌ 2 ,Ｂｃｌ ｘＬ 能抑制多种因素介导的细胞凋亡以及它的异常表达对肿瘤的发病、复发和化疗反应的影响 ,而引起人们的极大关注。为此我们用ＲＴ ＰＣＲ的方法检测了31例急性白血病患者骨髓细胞中Ｂｃｌ 2 ,Ｂｃｌ ｘＬ ｍＲＮＡ表达的水平 ,具体报告如下。1　材料与方法1.1　实验对象急性白血病 31例经ＦＡＢ分型确诊 ,其中 2 4例经ＭＩＣ确诊。急性髓细胞白血病 18例 ,急性淋巴细胞白血病 11例 ,慢性髓细胞白血病急粒变 2例。男 19例 ,女 12例 ,年龄 16～ 72岁 ,平均 30岁。我们将 31例病…     

子宫内膜癌中细胞凋亡和bcl-2、bax基因的表达

目的 探讨细胞凋亡及其调控基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ在子宫内膜癌变过程中的作用。方法应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法和ＴＵＮＥＬ技术,对子宫内膜腺癌癌变过程各级病变组织中细胞凋亡、ｂｃｌ－２和ｂａｘ蛋白进行测定。结果 正常增生期子宫内膜有偶发凋亡,子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌的细胞凋亡率分别为０．６％和２．８％。ｂｃｌ－２蛋白在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌的表达率分别为１００％、７４．４％     

凋亡抑制基因survivin在非小细胞肺癌中的表达

目的：探讨survivin基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达。方法：应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(SP)法，检测survivin基因在76例NSCLC肿瘤组织、30例病灶旁正常肺组织中的表达。结果：survivin基因在正常肺组织不表达，76例肺癌组织中，46例表达阳性，占60．5％．survivin基因表达与肺癌患者的年龄、性别、吸烟、病理类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期无明显相关关系．．结论：survivin基因在肺癌组织中的异常表达，对NSCLC发生发展起重要作用。survivin基因可能成为NSCLC新的诊断标志及基因治疗的新靶点。     

bcl-2基因在胃癌和肝癌中的表达及意义

bcl-2基因及其家族作为重要的凋亡调控基因在多种肿瘤中得到研究.胃癌细胞中可能并不出现理论上的bcl-2表达增加,bax表达下降,而是存在恰好相反的情况.bcl-2在肠型胃癌中的表达高于弥漫型胃癌,在胃癌的早期发生及表型分化方面起着重要作用.肝癌中bcl-2蛋白表达水平上调和bax蛋白表达水平下降导致bax/bcl-2比例下调,在肝癌发生过程的调控中可能具有一定的意义,并且可能与肝胆管癌发生有关,而在肝细胞癌发生过程中的作用有限,bcl-2和bax蛋白表达的阳性率与肝癌病理分级之间均未见明显的相关性.     

肺癌组织中端粒酶基因与端粒酶活性关系的研究

目的 探讨肺癌组织中端粒酶基因hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关，深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法 采用TRAP－PCR和RT－PCR方法分别检测68例肺癌组织及相应癌旁肺组织中端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERP的表达。结果 68例肺癌组织中端粒酶阳性率为79．4％（54／68）,hTR阳性率为98．5％（67／68）,hTERT阳性率为91．2％（62／68）。68例癌旁组织中无一例表达端粒酶阳性，但大多数癌旁组织均表达hTR(62/68,91.2%)，仅7例hTERT表达阳性（10．3％），与hTR相比，hTERT同端粒酶具有更高的一致性，其一致率为89．0％（121／136），而ThTR与端粒酶的一致率为43．4％（59／136）。结论 端粒酶的活性可能在肺癌发生发展中起重要的作用。hTR与hTERT可能是在转录后或翻译后水平对端粒酶进行调控的。     

顺铂对人肺癌SPCA-1细胞端粒酶活性的影响

目的 观察顺铂(DDP)对人肺癌SPCA-1细胞端粒酶活性的影响。方法 不同浓度的DDP处理体外培养的人肺癌SPCA-1细胞72h，非放射性标记的改良TRAP法测定端粒酶活性，MTT法测定细胞增殖抑制，透射电镜、流式细胞仪观察细胞凋亡。结果 DDP可抑制SPCA-1细胞端粒酶活性，随DDP浓度增大，端粒酶活性抑制增强。MTT结果显示DDP抑制SPCA-1细胞增殖且抑制率有浓度依赖性。透射电镜可观察到典型的细胞凋亡形态学，流式细胞仪结果表明DDP诱导SPCA-1细胞凋亡在一定浓度范围内呈剂量依赖性。结论 端粒酶活性的抑制可能是DDP发挥抗肺癌活性的作用机制之一，端粒酶活性可作为评价DDP抗肺癌化疗效果的指标之一。     

端粒酶反义DNA影响肺癌细胞体外生长的初步研究

目的 研究端粒酶反义核苷酸对肺癌细胞体外生长的影响。探讨针对端粒酶进行肺癌基因治疗的可行性。方法 人工合成硫化修饰六核苷酸端粒酶ＤＮＡ序列「５′－ｄ（ＴＴＡＧＧＧ）－３′」,在体外与端粒酶阳性肺癌细胞系８０１－Ｄ共同培养,观察其对肺癌细胞端粒酶活性、细胞形态和生长特性的影响。结果 端粒酶反义ＤＮＡ对端粒酶阳性肺癌细胞系８０１－Ｄ的生长和集落形成有明显的抑制作用。细胞形态发生明显改变,端粒酶反义ＤＮ     

端粒酶活性在肺癌中表达的临床研究

目的 研究端粒酶活性在肺癌中的表达及临床应用价值。方法 应用改良ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ法对２９例经临床及胸部Ｘ光片和ＣＴ检查高度怀疑为肺癌的患者通过纤维支气管镜所取的病变组织进行端粒酶活性检测,同时行病理不、支刷脱落细胞和抗直菌检查。结果 病理证实为肺癌的２２例中有１８例端粒酶活性表达阳性,阳性率为８１．８１％;４例异型细胞中端粒酶活性表达阳性１例;２例慢性炎症中端粒酶活性表达阳性１例;１例肺结核患者     

非小细胞肺癌端粒酶活性与端粒酶RNA、端粒酶催化亚单位的相关性及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)端粒酶活性（telomerase activity,TA)、端粒酶RNA（telomerase RNA,hTR）端粒酶催化亚单位（telomerase catalytic subunit,hTRT/hEST2)编码基因的表达,彼此间相关性及其预后意义。方法 TRAP－PCR（telomerase repeat amplification protocol PCR)检测TA,RT－PCR检测hTR,原位杂交检测hTRT/hEST2mRNA表达。结果 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2 mRNA阳性率分别为68．4％（26／38）、55．2％（32／58）和74．1％（43／58）,TA与hTRT/hEST2阳性相关（r=0.84,P=0.01),与hTR无相关性（r=0.16,P=0.23）。低分化以及有淋巴结或远处转移者TA及hTRT/hEST2阳性率增高;TA及hTRT/hEST2阳性组中位生存期（10．4个月,7．5个月）低于阴性组（13．5个月,14．7个月;P＝0．074,P＝0．01）,hTR阳性组中位生存期（12．9个月）略高于阴性组（11．5个月,P＝0．23）,仅hTRT/hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2表达高于癌旁正常组织;hTRT/hEST2够能反应TA活性,二者为NSCLC恶性表型增高的标志;hTRT/hEST2具有独立的预后意义。     

肺癌化疗前后外周血端粒酶活性的变化及临床意义

目的　评价测定外周血中端粒酶活性在肺癌化疗中的临床价值。方法　采用端粒酶重复序列扩增和微板杂交检测方法 ,检测 4 9例肺癌患者化疗前后外周血中端粒酶活性并进行分析和评价。结果　化疗前后端粒酶活性变化与病理类型有关 ,小细胞肺癌化疗后全部下降。 31例化疗后端粒酶活性下降 ,其中 2 1例化疗达有效。而 18例端粒酶活性升高中化疗无效占15例。结论　测定肺癌患者化疗前后外周血中的端粒酶活性变化对肺癌化疗疗效的评定有比较重要的意义。     

人肺癌端粒酶活性的研究

目的 探讨端粒酶活性表达与肺癌发生发展的关系。方法 应用ＰＣＲ－ＴＲＡＰ－银染法检测５０例肺癌组织及细胞和２０例相应癌旁组织、５例肺结核瘤组织及细胞的端粒酶活性。结果 肺癌组：３６例手术切除肺癌组织中端粒酶阳性率为９１．７％,７例纤维支气管镜活检肺癌组织和７例癌性胸水细胞中端粒酶阳性例数分别为６例和５例;总检出率为８８％（４４／５０）。对照组：癌旁组织中端粒酶阳性率为１０％（２／２０）,肺结核瘤组     

肺癌患者端粒酶表达的meat分析

目的 衡量端粒酶活性和肺癌的相关性,综合评价端粒酶活性作为肺癌诊断标记物的效度。方法 检索并筛选出28篇有关端粒酶活性和肺癌的流行病学资料,用meta分析（包括Fleiss固定效应模型或D－L随机效应模型）合并效应尺度OR,并汇总端酶活性在肺癌诊断中的特异度和灵敏度,评价该肿瘤标记物的效果。结果 D－L法计算OR合燕为66．43,（38．48－104．53）,Fleiss法将同质的25项研究结果加权并后,肺癌组累积1361例,对照组累积1321例,检测灵敏度为0．7987,特异度为0．9341。结论 端粒酶是一种较理想的诊断性肿瘤标志物,该研究结果为将端粒酶活性纳入肺癌筛检划提供一定的理论依据。     

采用改进方法检测肺癌组织端粒酶活性

用改进的ＴＲＡＰ法检测肺癌的端粒酶活性,探讨端粒酶活性与肺癌的关系。方法：用培养瓶替代液氮瓶收集标本,采用ＴＲＡＰ改进方法,内含３６ｐｂ质控模板预防假阴性,增加强物长度避免二聚体形成,且使反应一步完成,并用银染法显示检测结果,对４５例病理确诊的肺癌手术标本及一株肺癌细胞株的端粒酶活性进行检测。