肺癌组织中端粒酶基因与端粒酶活性关系的研究

目的 探讨肺癌组织中端粒酶基因hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关，深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法 采用TRAP－PCR和RT－PCR方法分别检测68例肺癌组织及相应癌旁肺组织中端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERP的表达。结果 68例肺癌组织中端粒酶阳性率为79．4％（54／68）,hTR阳性率为98．5％（67／68）,hTERT阳性率为91．2％（62／68）。68例癌旁组织中无一例表达端粒酶阳性，但大多数癌旁组织均表达hTR(62/68,91.2%)，仅7例hTERT表达阳性（10．3％），与hTR相比，hTERT同端粒酶具有更高的一致性，其一致率为89．0％（121／136），而ThTR与端粒酶的一致率为43．4％（59／136）。结论 端粒酶的活性可能在肺癌发生发展中起重要的作用。hTR与hTERT可能是在转录后或翻译后水平对端粒酶进行调控的。     

人肺癌组织端粒酶活性与p16基因二者相关性探讨

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中端粒酶活性与p16基因的相关性及二者与肺癌发生发展的关系.方法:肺癌标本48例,12例癌旁组织,7例非肿瘤病例的正常肺组织.以Telomerase PCR ELISA检测标本端粒酶活性,以RT-PCR的方法检测p16基因mRNA转录情况,以免疫组化方法检测组织标本p16蛋白表达.结果:1)肺癌组织标本36/48(75.00%)和1例癌旁组织检出端粒酶活性.2)48例NSCLC组织中32例进行了p16 mRNA及蛋白表达检测.16/32(50.00%)检测到p16mRNA转录,7例正常组织中均检测到p16 mRNA转录.NSCLC组织标本中17/32(53.13%)未检测到p16蛋白表达,7例正常肺组织中均检测到p16蛋白表达.3)24例端粒酶阳性NSCLC组织中15例p16 mRNA表达缺失,8例端粒酶阴性的NSCLC组织中仅1例p16mRNA表达缺失.相关系数为-0.433,P=0.013,具有显著负相关.结论:端粒酶、p16基因在NSCLC的发生发展中起重要作用,端粒酶活性有望成为预测肿瘤发生、肿瘤诊断的良好指标.端粒、端粒酶与p16基因可能成为抗肿瘤治疗的新靶点.     

乳腺癌的hTERT基因表达和端粒酶活性关系分析

目的为了分析端粒酶催化亚基在乳腺癌组织中的表达情况.方法对52例各型乳腺癌病理样本进行了端粒酶活性(TRAP-ELISA方法)和端粒酶催化亚基(hTERT)mRNA表达检测(RT-PCR).同时还比较了同一样本的癌组织和癌组织端粒酶活性和hTERT的表达情况.结果表明乳腺癌组织样本中94%呈端粒酶阳性,癌旁组织中有部分样本(2/35)呈弱阳性;hTERT(P＜0.01).结论认为端粒酶活性可能成为乳腺癌恶性程度或肿瘤易发指标,并且有可能采用更为廉价的RT-PCR进行辅助诊断.     

胰腺癌组织中端粒酶活性检测及基因表达

目的　探讨胰腺癌组织端粒酶活性和端粒酶基因表达及两者的相关性 ,及其与癌生物学行为的关系 ,以评价端粒酶活性和端粒酶基因表达检测对胰腺癌的诊断价值。方法　采用TRAP -PCR -ELISA方法和原位杂交方法 ,检测了 2 3例胰腺癌患者端粒酶活性和基因表达情况。结果　 2 3例胰腺癌组织端粒酶阳性率为 87.0 % ,10例癌周组织阳性率为 10 .0 % ,两者有显著性差异 (P <0 .0 5 )。 2 3例胰腺癌组织中 19例 (82 .6% )hTR表达阳性 ,10例癌周组织中 1例 (10 .0 % )hTR表达阳性。胰腺癌组织中hTR表达阳性率与癌周组织比较 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。端粒酶活性及其基因表达与胰腺癌组织学分级、临床分期及伴随局部淋巴结转移无明显相关性 (P >0 .0 5 )。结果还显示端粒酶活性与hTR基因表达相关 (P <0 .0 5 )。结论　端粒酶可能是胰腺癌发生的早期事件 ,端粒酶活性及端粒酶基因表达的检测对胰腺癌具有一定的诊断价值     

卵巢癌及其癌旁正常组织端粒长度、端粒酶活性的测定及意义

目的端粒酶的激活与肿瘤增殖密切相关，本实验旨在评价卵巢癌及其癌旁正常组织端粒长度、端粒酶活性及意义．方法，用Southern印迹杂交法测定卵巢癌及癌旁正常组织端粒长度，TRAP-PCR-银染法测定端粒酶活性的改变、RT-PCR扩增端粒酶基因hTERT的表达．结果：卵巢癌组织与癌旁正常组织中hTERT的mRNA表达与端粒酶活性表达一致，卵巢癌组织中84．0％（42／50）有端粒酶活性表达，而在卵巢癌旁正常组织中只有8．0％（4／50）有端粒酶活性表达。不同卵巢癌组织的端粒长度差异无统计学意义，卵巢癌组织端粒长度短于癌旁正常组织，但差异无统计学意义．结论：检测端粒酶活性可用于卵巢癌临床诊断，端粒的长度不能精确地反映端粒酶活性．     

胃癌大肠癌端粒酶基因 hTR表达

[目的]探讨胃癌和大肠癌中端粒酶基因hTR表达与临床参数的关系，评价hTR表达检测在胃癌和大肠癌诊断中的价值。[方法]用原位杂交的方法检测端粒酶基因hTR在胃癌、大肠癌、胃癌和大肠癌癌旁组织、胃和大肠良性病变中的表达和分布情况。[结果]57例胃癌中hTR基因表达阳性率为94.7%（54/57)；57例癌旁组织中hTR基因表达阳性率为0（0／57）；69例胃良性病变中hTR基因表达阳性率为2.9%(2/69)。胃癌组织中hTR基因的表达与癌旁组织、胃良性病变比较差异有显著性（P均＜0.001)。胃癌组织中hTR的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移相关（P均＜0.05)，与肿瘤分期无相关性（P＞0.05)。51例大肠癌中hTR基因表达阳性率为94.1%(48/51)；51例癌旁组织中hTR基因表达阳性率为0（0／51）；31例大肠良性病变中hTR基因表达阳性率为3.2%(1/31)。大肠癌组织中hTR基因的表达与癌旁组织、大肠良性病变比较差异有显著性（P均＜0.001)。大肠癌组织中hTR的表达与患者性别、病变部位、病理分类大体类型、淋巴结转移和临床分期无相关性（P均＞0.05)，与肿瘤病理分级相关（P＜0.05)。[结论]端粒酶基因hTR表达检测在胃癌和大肠癌的诊断中可能有一定的价值。     

上皮性卵巢癌hTERT表达及端粒酶活性的研究

目的探讨人端粒酶反转录酶(hTERT)表达及端粒酶活性与卵巢癌发生、发展的关系,评价其可否作为卵巢癌的肿瘤标志物及预后指标.方法应用RT-PCR及端粒重复扩增方法对43例上皮性卵巢癌、11例良性卵巢肿瘤和卵巢正常组织以及4例交界性卵巢肿瘤共69份标本进行hTERTmRNA及端粒酶活性检测.结果hTERT表达及端粒酶活性率在卵巢癌中分别为83.7%(36/43)及76.7%(33/43),良性肿瘤中均为9%(1/11),在正常卵巢组织和交界性卵巢肿瘤中阴性,其差异在卵巢癌与良性肿瘤及正常组织间均有显著性(P值分别为0.0004及0.0001).hTERT及端粒酶阳性率在某些预后因素如肿瘤类型、组织学分级、临床分期及肿瘤转移之间的差异皆无显著性.结论卵巢癌中存在高频率的hTERT表达及端粒酶激活,表明hTERT作为端粒酶的催化亚基,在肿瘤细胞端粒酶的激活中起关键作用.hTERT表达及端粒酶活性可望作为有价值的肿瘤标志物而用于卵巢癌的早期诊断,但其预后价值尚有待于进一步研究.     

非小细胞肺癌端粒酶催化亚单位的表达及其与c-myc基因的相关性

目的研究端粒酶催化亚单位(hTERT)在非小细胞肺癌的表达及其与c-myc基因的相关性,并探讨肺癌hTERT激活的可能调节机制.方法应用荧光半定量逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测非小细胞肺癌组织hTERT及c-myc mR-NA表达水平,对两者进行统计学相关分析.结果51例非小细胞肺癌hTERT表达阳性率为86.3%,明显高于癌旁正常肺组织和良性病变组织(分别为14.3%和27.3%).hTERT的表达和肿瘤组织病理类型、分化程度、临床分期、肿块大小及淋巴结转移指标间未见明显相关性.相关分析显示hTERT与c-myc mRNA表达存在显著相关性,相关系数r=0.633(P＜0.001).结论hTERT对肺癌诊断具有潜在临床价值,hTERT的表达与c-myc表达存在显著相关性,进一步支持c-myc的过度表达可能是肺癌端粒酶激活和调节的机制之一.     

非小细胞肺癌端粒酶活性与端粒酶RNA、端粒酶催化亚单位的相关性及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)端粒酶活性（telomerase activity,TA)、端粒酶RNA（telomerase RNA,hTR）端粒酶催化亚单位（telomerase catalytic subunit,hTRT/hEST2)编码基因的表达,彼此间相关性及其预后意义。方法 TRAP－PCR（telomerase repeat amplification protocol PCR)检测TA,RT－PCR检测hTR,原位杂交检测hTRT/hEST2mRNA表达。结果 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2 mRNA阳性率分别为68．4％（26／38）、55．2％（32／58）和74．1％（43／58）,TA与hTRT/hEST2阳性相关（r=0.84,P=0.01),与hTR无相关性（r=0.16,P=0.23）。低分化以及有淋巴结或远处转移者TA及hTRT/hEST2阳性率增高;TA及hTRT/hEST2阳性组中位生存期（10．4个月,7．5个月）低于阴性组（13．5个月,14．7个月;P＝0．074,P＝0．01）,hTR阳性组中位生存期（12．9个月）略高于阴性组（11．5个月,P＝0．23）,仅hTRT/hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hEST2阳性与阴性组生存期差异有显著性;多因素Cox回归分析hTRT/hEST2对生存期有影响。结论 非小细胞肺癌TA、hTR和hTRT/hEST2表达高于癌旁正常组织;hTRT/hEST2够能反应TA活性,二者为NSCLC恶性表型增高的标志;hTRT/hEST2具有独立的预后意义。