聚合酶链反应（PCR）在快速诊断结核性脑膜炎中的价值

1985年,Mullis结核分支杆菌DNA创建了聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术,1989年Hance等首先将该技术应用于检测分支杆菌,[1]1990年我国引进了该项技术,从而开辟了以PCR为代表的分子生物学技术检测结核分支杆菌阶段.     

PCR技术在传染病病原诊断中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，最初由Mullis等于1985年首先建立，是一种在体外模拟自然DNA复制过程，用聚合酶催化物扩增核酸分子的新技术。PCR技术以其快速、简便、敏感度高、特异性强等优点，而广泛应用于分子生物学、医学、农业和法医等领域。     

聚合酶链反应及其在乙型肝炎研究中的应用

<正> 聚合酶链反立(Polymerase Chain Reaction,PCR),又称体外基因扩增技术或无细胞分子克隆体系。是在体外摸拟天然DNA复制过程的核酸扩增技术。1985年美国Cetus公司的Mullis等设计并研究成功了PCR。同年Saiki等首次报导应用PCR技术扩增3-球蛋白。现PCR方法已广泛应用于分子生物学研究、遗传性疾病诊断、传染病源检测、法医、考古等方面。并且有     

荧光定量PCR技术及其在肿瘤研究中的现状

自Mullis1 985年发明PCR技术以来 ,PCR技术已广泛应用于生命科学研究的各个领域 ,荧光定量PCR(fluorescencequantitativepolymerasechainreaction,FQ PCR) [1] 是 1 995年由美国PE(PerkinElmer)公司研制出来的一种核酸定量技术。该技术较常规PCR具有简便、灵敏、准确等优点 ,在临床具有广阔的应用前景。本文就其原理、特点及在肿瘤研究方面的应用简要综述如下。1　荧光定量PCR技术原理及过程FQ PCR的分子生物学基础是按常规PCR方式进行体外基因扩增 ,即在PCR反应体系中加入一荧光标记的探针 ,该探针能与扩增基因的某一区域的…     

PCR及其相关技术在感染性疾病诊断中的应用

聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）是上世纪八十年代由Mullis等[1]首次公开发表的一种DNA体外扩增技术。其发表后激发起了人们对这项技术的兴趣,并且由此翻开了分子生物学飞速发展的新篇章。然而刚开始时,人们对PCR技术并不看好。因为它不仅操作复杂,而且成本非常高,并不能得到普遍应用。     

诊断结核杆菌的PCR技术在我院建立

聚合酶链反应(polymcrase chain reaction,PCR)是1985年由 Mullis 等人首先发明,很快在分子生物学领域中得到应用。近年来,国内亦将 PCR 技术广泛地用于基因的分离、表达,人类病毒、肿瘤、地中海贫血、细菌感染等的诊断。长期以来,结核病病原学诊断一直缺少快速、特异、敏感的手段,而PCR 技术在基因水平上为此开辟了新的途径。目前,国内有报道,采用 PCR 技术对痰标本、支气管肺泡灌洗标本(BAL)及淋巴结进行病原学诊断获得成功。在此基础上,我们建立了用 PCR 技术检测胸水中的结核杆菌特异性的 DNA 基因序列,从而提     

PCR技术在DNA片段扩增的应用与意义

1985年,Mullis等人发明了PCR技术,短短十余年间,这一技术得到迅速发展和应用,由扩增已知基因发展到扩增未知基因。本文旨在介绍利用PCR技术扩增未知序列DNA片段的最新进展及这些技术在基因克隆研究中的应用。1985年,美国PE2cetus公司人类遗传研究室的Mullis等人发明了体外无限扩增核酸片段的聚合酶链式反应,即PCR技术。目前,PCR技术已在众多的研究领域得到广泛应用,如在基因克隆、基因定点突变、c DNA文库构建、基因测序、载体构建以及人类基因组计划等方面发挥着重要作用。在今天的"基因大战"中,新基因的发现与克隆已成为研究的热点。而扩增未知序列的PCR技术格外引人注目,许多新方法应运而生,本文旨在介绍这方面的研究进展。     

PCR技术在传染病病原诊断中的应用

PCR系PolymeraseChainReaction的缩写,中文译名为聚合酶链反应,最初由Mullis等于1985年首先建立[1],是一种在体外模拟自然DNA复制过程,用聚合酶催化物扩增核酸分子的新技术,以其快速、简便、敏感度高、特异性强等优点,而广泛应用于分子生物学、医学、农业和法医等领域。在传染病研究中,首先被用于病毒性感染的诊断,特别是对于难以培养的病原体,PCR成为其检测的重要手段。本文拟对PCR技术在传染病病原诊断中的应用作一介绍。1　PCR技术的基本原理[1～4]PCR是由引物介导将特异性DNA序列在酶促作用下进行扩增的方法。整个反应过程包…     

聚合酶链式反应

<正> 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reac-tion,PCR),即 DNA 体外扩增技术,是1985年由美国 Mullis 首创的一种生物高技术。随着耐高温的 Taq 酶的出现,扩增自动化     

PCR技术及其应用

PCR(Polymerase Chain Reaction)中译为聚合酶链反应,是一种体外核酸扩增技术,又称为无细胞分子克隆法。 PCR技术是1985年美国PE-Cetus公司的人类遗传研究室Mullis等人发明的一项具有划时代意义的新技术。该技术快速、简便、灵敏、特异。可在短短的几个小时内将Pg     

PCR技术将在临床检验领域迎来新契机

1985年,Mullis发明的聚合酶链式反应(PCR)技术在医学界掀起了基因诊断技术的热潮,PCR技术凭借快速、简便、灵敏等优点以惊人的速度广泛应用于临床基因诊断等领域,成为现代医学发展的又一里程碑.但十多年的临床实践表明,PCR技术本身在工作流程标准化、PCR仪器标准化和PCR产品标准化等方面还存在着若干弊端,这导致检测结果上的差异,这已经成为当前困扰临床医师、实验室技术人员以及患者的普遍问题.     

聚合酶链反应及其在病毒性肝炎中的应用

聚合酶链反应(polymerase Chain Rea-ction,PCR),又称体外基因扩增技术或无细胞分子克隆体系.它是一种在体外模拟天然DNA复制过程的核酸扩增技术.1985年美国Cetus公司的Mullis等设计并研究成功了PCR,同年Saiki等首次报道应用PCR方法结合液相杂交技术快速诊断遗传病.经过这短短的五年,PCR得到了不断的改进和发     

应用聚合酶链反应检测结核菌的临床分析(附80例报告)

自美国Mullis等1985年首创的聚合酶链反应技术(PCR)以来,为临床病原微生物的检测带来突破性的进展。特别近十年来PCR技术广泛用于临床。同外用于结核杆菌的检测,取得较满意的效果。1992年以来我国应用PCR技术检测结核菌在临床上已逐渐推广应用。我院自1992年底以来对80例结核病患者的痰及部分胸水、脑脊液、尿标本     

PCR技术在传染病中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术是1985年Mullis建立的;1988年Erlich引入耐热Taq酶后几年来其应用越来越广泛,给医学生物界带来了一场深刻的变革。该技术具有灵敏性高、特异性强及快速、操作简便等优点,故尤其适用于传染病中难以培养和(或)生长缓慢的病原微生物的诊断。本文重点介绍PCR技术在诊断结核性脑膜炎、乙型肝炎、爱滋病等疾病中的应用。     

诺贝尔奖金获得者对AIDS理论表示怀疑

Kary Mullis因发明多聚酶链反应(PCR)而荣获1993年诺贝尔化学奖。他认为AIDS不是由HIV引起的,他与支持HIV/AIDS理论的科学家展开了一场引人注目的辩论。Mullis的主要观点如下: 1.所谓的AIDS病毒被鉴定出已有10年之久,科学家们仍不能解释HIV是如何损害免疫系统的,或者不知道如何阻止此过程发生。     

PCR技术及在临床检验中的应用

聚合酶链式反应(Polymerase Chain ReactionPCR)是体外酶促反应合成特定核酸序列的一种方法。1985年美国年轻科学家Mullis的这一具有划时代意义的技术发明,使人们多年来期望能在体外无限扩增DNA的梦想变为现实。之后,PCR技术迅速渗透到生命科学的各个领域,成为当今重要的分子学生物学技术之一;PCR技术本身及相关技术也以惊人的速度发展,产生了许多新型的PCR技术或由PCR衍生的新技术。现在,PCR技术已成为生命科学实验室获取某一日标DNA片段的常规技术,广泛应用于基因分离、克隆和核酸序列分析,突变体和重组体构建,基因表达与调控的研究,多态性分析,遗传病和传染病诊断,肿瘤机制的探查,法医学和考古学等领域或学科。     

重组PCR快速基因定点突变的技术方法

聚合酶链式反应(PCR)是由Mullis等联合研制的一种在体外快速对特定DNA序列扩增的技术[1]。本研究通过重组PCR技术对growth associated protein-43(GAP-43)基因Ser41(丝氨酸)AGC定点突变为Ala41(甘氨酸)GCC,此方法比传统的体外基因突变技术更简单、快速而且经济。1材料和方法1.1     

聚合酶链反应及反向膜杂交法检测沙眼衣原体等感染

自 Mullis1983年发明聚合酶链反应 (PCR)技术以来 ,经过不断的改进 ,现已出现了不对称 PCR、反向 PCR、多重PCR、定量 PCR等多种 PCR技术。本文仅用 PCR反向膜杂交法对 16 2 7例可疑性传播疾病患者尿道或宫颈分泌物进行淋球菌 (NG) ,沙眼衣原体 (CT) ,解脲支原体 (UU ) 3项检测 ,取得了较好的效果 ,报告如下。1　材料与方法1.1　标本来源及取材方法　标本均由本院临床科室从疑有NG、CT、UU感染的患者 ,取其宫颈分泌物送检。共检测标本16 2 7份 ,其中 NG2 97份 ,CT6 72份 ,UU6 5 8份。取材方法 :用消毒棉签插入宫颈口或尿道…     

实时荧光定量PCR技术应用于核酸定量检测的研究进展及展望

聚合酶链式反应技术（PCR）自1985年问世以来，以其灵敏性、特异性和快速性在医学和分子生物学等领域得到广泛的应用。近年来出现的核酸定量PCR技术尤其是实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，RQ--PCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具，本文就此技术的研究进展及其在核酸定量检测中的应用做一综述。     

PCR技术及其在生物医学中的应用

PCR技术是1985年建立的一种核酸片段体外酶扩增技术,它经变性、退火、延伸的循环,使核酸片段指数式增加。PCR技术可应用于分子生物学的许多领域,如基因缺失测定、复杂基因的分析、核酸片断的定量测定、DNA诱变、基因克隆以及核酸序列分析等。在临床医学中,PCR也有越来越广泛的应用,如遗传病、传染病及肿瘤的诊断和基因治疗等。与传统的DNA杂交及克隆方法相比,PCR技术具有快速、简便、灵敏度高和稳定性好等优点。本文简介PCR技术的原理及其在分子生物学和临床医学中的主要应用。