人轮状病毒持续感染细胞中病毒增殖条件的研究

本文研究了人轮状病毒持续感染细胞中病毒增殖的条件,发现较为适宜的培养温度为37℃左右,在培养基中添加适量胰岛素、氢化可的松和维生素B_6等可显著促进轮状病毒的增殖,而新生牛血清以及干扰素诱生抑制剂——放线菌素D则对病毒增殖无明显影响.     

流行性出血热病毒SR-11株在Vero-E6细胞上制备血凝素

本文报道了流行性出血热病毒SR-11株在Vero-E6细胞上制备的血凝素滴度可达1:16～1:64。并发现鹅红细胞对血凝素的敏感性有显著个体差异。制备的血凝素用于血凝抑制试验结果满意。     

EXPRESSION DIFFERENCES OF VASCULAR GROWTH FACTORS IN HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CELL LINE A549 AND CISPLATIN-RESISTANT HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CELL LINE ADDP549

Objective To elucidate the expression differences of vascular growth factors in human lung adenocarcinoma cell line A549 and cisplatin resistant human lung adenocarcinoma cell line ADDP549.MethodsRT PCR and immunohistochemistry was used to detect the Mrna and protein expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (Bfgf) in A549 and ADDP549.ResultsVEGF and Bfgf Mrna were expressed in A549 and in ADDP549. VEGF and Bfgf Mrna expression levels in ADDP549 were significant higher than those in A549 (P＜0.025). VEGF and Bfgf protein expressions were all strong positive in A549 and ADDP549.ConclusionThere are certain differences between VEGF and Bfgf expressions in A549 and ADDP549. Drug resistance of lung cancer is associated with those above genes over expressions. Over expression of vascular growth factors are related to drug resistance of lung cancer.     

厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的:探讨厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549的作用.方法:survivin siRNA转染、厄洛替尼单独或联合应用于人肺腺癌细胞A549,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察对A549细胞的增殖抑制作用,免疫组化染色法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况.结果:survivin ...     

黄芪总苷对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究黄芪总苷(TA)对人肺腺癌A549细胞增值及凋亡的影响.方法:采用不同药物浓度作用于人肺腺癌A549细胞,应用MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术分析药物对细胞的影响.结果:TA对A549细胞有明显的生长抑制及凋亡作用,并呈剂量、时间依赖性.DNA凝胶电泳显示出特征性凋亡梯状带.结论:在一定条件下,TA可抑制人肺腺癌细胞增殖,抑制作用具有明显的浓度和时间依赖性,同时可诱导其凋亡,凋亡可能与细胞周期阻滞有关.     

风疹病毒分离株在人脑神经细胞中的形态与形态发生

观察风疹病毒(RV)分离株在人的神经细胞中形态和形态发生过程。方法利用超薄切片电子显微镜技术对自行分离的RV JR 23株在人脑神经细胞中的形态与形态发生过程进行了研究。 结果RV JR23袜感染人脑神经细胞24h后,可在细胞浆的核周围观察到病毒相关结构,包括电子致密颗粒,10nm,核衣壳样结构,15～25nm,“包涵体”样结构,“条纹”样结构伴随核衣壳样颗粒,并逐渐增多。96h可见完整病毒颗粒,192h达到高峰。病毒颗粒呈圆形,由单层脂质膜包绕,直径60～80nm。病毒在双层核膜中间装配,然后披上单层核膜而成熟,核膜破碎后释放入细胞浆。病毒颗粒多见于核周围。结论RV JR23株能在人神经细胞中广泛增殖,其形态发生有独特的方式。     

人肺腺癌A549细胞系SP细胞亚群的分选及初步探讨

目的：探讨一种简单有效的分离肺癌干细胞的方法。方法：用免疫组化方法检测人肺腺癌A549细胞系中ABCG2蛋白的表达情况;用流式细胞学方法分选A549细胞系中side population cells（SP细胞）及非SP细胞亚群,并对该两亚群细胞的分化功能进行检测;用RT—PCR方法检测两亚群细胞ABCG2的表达。结果：免疫组化方法检测A549细胞系中ABCG2蛋白的阳性表达率为2％。流式方法成功分选得到SP细胞及非SP细胞亚群,其中SP细胞含量约为A549活细胞总量的1．09％,经拮抗剂Verapamil处理后下降为0．20％,两亚群细胞经培养后重新上机检测,发现SP细胞亚群可产生SP细胞及非SP两种细胞,而非SP细胞只能产生非SP细胞。SP细胞表达ABCG2,非SP细胞则不表达。结论：人肺腺癌A549细胞系SP亚群细胞富集了肺癌干细胞。通过流式细胞仪分选肺腺癌SP细胞亚群是分离肺腺癌干细胞的有效方法。     

饲醋大鼠血清对人肺腺癌细胞株A549抑制作用的实验研究

目的:探讨饲醋大鼠血清对人肺腺癌细胞株A549增殖、凋亡的影响.方法:采用MTT法检测饲醋大鼠血清对人肺腺癌细胞A549的增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞凋亡率.结果:饲醋大鼠血清能明显抑制A549细胞的增殖,且呈时间依赖效应(P<0.05);并且,可显著增加A549细胞的凋亡率(P<0.01).结论:饲醋大鼠血清可通过抑制增殖和促进凋亡,明显抑制人肺腺癌细胞株A549细胞的生长.     

某院住院患者乙型和丙型肝炎病毒感染状况调查与分析

目的了解医院住院患者乙型和丙型肝炎病毒感染的血清流行病学状况。方法采用酶联免疫法对医院2012年住院患者肝炎病毒血清标志物HBsAg和抗-HCV进行检测。结果住院患者HBsAg总体阳性率为9．84％,抗-HCV总体阳性率为0．75％;儿科HBsAg阳性率最低,为4．93％,血液内科抗-HCV阳性率最高,为1．94％,阳性率与其他科室差异有统计学意义（P〈0．05）;HBsAg和抗-HCV阳性率在性别差异无统计学意义（P〉0．05）;51～60岁年龄段HBsAg阳性率最高,0～10岁年龄段HBsAg最低,二组差异有统计学意义（P〈0．05）;从事服务业的住院患者HBsAg、抗-HCV阳性率最高,与其他职业阳性率差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论医院住院患者HBsAg阳性率较高,应做好患者院内感染和医务人员职业感染的预防工作,对感染患者予以及时有效的治疗。     

EXPRESSION DIFFERENCES OF VASCULAR GROWTH FACTORS IN HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CELL LINE A549 AND CISPLATIN-RESISTANT HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CELL LINE A_(549)~(DDP)

Objective To elucidate the expression differences of vascular growth factors in human lungadenocarcinoma cell line A549 and cisplatin-resistant human lung adenocarcinoma cell line A549DDP . Methods RT-PCR and immunohistochemistry was used to detect the mRNA and protein expressions of vascular endothelial growth factor ( VEGF) and basic fibroblast growth factor ( bFGF) in A549 and A549DDP . Results VEGF and bFGF mRNA were expressed in A549 and in A549DDP VEGF and bFGF mRNA expression levels in A549DDP were significant higher than those in A549 (P< 0 .025 ). VEGF and bFGF protein expressions were all strong positive in A549 and A549DDP. Conclusion There are certain differences between VEGF and bFGF expressions in A549 and A549DDP . Drug-resistance of lung cancer is associated with those above genes over-expressions. Over-expression of vascular growth factors are related to drug resistance of lung cancer.     

热疗对人肝癌细胞株HepG2生长影响的体外研究

目的:探讨热疗对人肝癌细胞株HepG2生长的影响.方法:人肝癌细胞株HepG2细胞常规方法培养,采用水浴加热法(43.0℃)分别加热0.5h、1h和1.5h.处理后继续培养48h、72h、96h、120h和144h,绘制生长曲线;处理后分别培养0h、3h、6h、12h和24h,倒置显微镜观察细胞的形态变化.结果:随着加热时间的延长HepG2细胞数明显减少(P＜0.05,P＜0.01),细胞的形态也发生明显病理变化.结论:热疗对人肝癌细胞株具有细胞毒性作用,加热时间对癌细胞的生长有重要影响,热疗作为治疗肝癌的一种辅助疗法,值得进一步研究.     

Liver cell dysplasia in association with cirrhosis and hepatitis B virus

ＬＩＶＥＲＣＥＬＬＤＹＳＰＬＡＳＩＡＩＮＡＳＳＯＣＩＡＴＩＯＮＷＩＴＨＣＩＲＲＨＯＳＩＳＡＮＤＨＥＰＡＴＩＴＩＳＢＶＩＲＵＳＷａｎｇＸｕｅｃｈｕｎ，ＬｉＷｅｉ，ＺｈａｎｇＪｉｎｃｈｉ，ＫｏｎｇＬｉｎｇｊｕｎ，ＺｈｅｎｇＷｅｉｍｉｎ（Ｄｅｐｔ，ｏｆＰａ...     

肝细胞不典型增生与肝硬化和HBV的关系

用组织学和免疫组化方法探讨116例肝组织中的肝细胞不典型增生(LCD)发生率和乙型肝炎病毒(HBV)抗原的表达情况.发现肝细胞癌(HCC)伴肝硬化的LCD发生率为21/30(70%),单纯肝硬化为2/10(20%),HCC不伴肝硬化1/12(8.33%),正常对照1/64(1.56%).试验组52例中有46例HBsAg阳性,其中24例有LCD(52.17%),而6例HBsAg阴性肝组织中无1例有LCD(P<0.05).52例中22例HBcAg阳性,其中14例有LCD(63.64%);30例HBcAg阴性,10例有LCD(33.33%),前者LCD发生率明显高于后者(P<0.05).结果还发现,HBsAg和HBcAg阳性肝硬化的LCD发生率(65.71%,77.78%)明显高于HBsAg和HBcAg阴性的肝硬化及HBsAg、HBcAg阳性的非肝硬化病例(P<0.01,P<0.05).表明LCD的发生与肝硬化和HBV都有关.     

肝细胞不典型增生与肝硬化和HBV的关系

用组织学和免疫组织化学方法探讨116例肝组织中的肝细胞不典型增生(LCD)发生率和乙型肝炎病毒(HBV)抗原的表达情况。发现肝细胞癌(HCC)伴肝硬化的LCD发生率为21/30(70％);单纯肝硬化为2/10(20％);HCC不伴肝硬化1/12(8.33％);正常对照1/64(1.56％)。试验组52例中46例呈HBsAg阳性,其中24例有LCD(52.17％)。而6例HBsAg阴性肝组织中均未发现LCD(P<0.05)。52例中22例HBcAg呈阳性反应,其中14例有LCD(63.64％);30例HBcAg阴性,10例有LCD(33.33％),前者LCD发生率明显高于后者(P<0.05)。结果还发现,HBsAg和HBcAg阴性肝硬化组织中LCD发生率(65.71％;77.78％)明显高于HBsAg和HBcAg阴性的肝硬化及HBsAg、HBcAg阳性的非肝硬化病例(P<0.01,P<<0.05)。表明LCD的发生与肝硬化和HBV均有关。     

EFFECTS OF MUTATIONS IN THE POLYMERASE GENE OF HEPATITIS B VIRUS GENOME ON LAMIVUDINE THERAPY

ffeStnn Objectif Wr les effets des mutations du motif YMDD (twineme thionineaSperticachoagurtic acid) de Ia --se dans le tw du virus d' optite B (HBV) sur Ie traitement antiviraI dlamivudine. mebo he mpnt d 'ADN du HBV contenant le nzotif me dens le gdne Pht obtenu mrM d pertir des 19 matw chroniques d' mptite B avec lerum ADN HBV witi f d la 48for rtins dutraitement d lamivudine. L' 8chantillon etait SUkt d I' analyse sdquentielle automatique. te infiuences desvarinbles des mutati…     

鹅血清中发现鸭乙型肝炎病毒样颗粒

用DNA斑点杂交、电镜、免疫电镜和斑点酶免疫法(Dot EIA),在鹅血清中发现一种与鸭乙型肝炎病毒(DHBV)相似的病毒颗粒。用DNA斑点杂交法和Dot EIA在鹅群中测得DHBV DNA和DHBsAg的阳性率均为32.43%(12/37)。对阳性血清进行电镜观察,见到直径30～60nm的球型颗粒,形态与DHBV相似。抗DHBsAg能使病毒颗粒发生凝聚。用CsCl密度梯度法对DHBV阳性血清进行超速离心,发现病毒颗粒分布在1.16～1.24g/ml的密度范围内,与DHBV的密度范围(1.15～1.25g/ml)接近一致,表明鹅血清中的病毒颗粒,不仅在形态学上与DHBV相似,且核酸序列与DHBV也有同源性,由其编码产生的表面抗原成分与DHBsAg有共同的抗原性。作者提出,这种病毒可能是1.独立存在于鹅体内的一种新的DNA病毒,与肝脏的关系有待探讨;2.作用于不同宿主的DHBV;3.DHBV的不同亚型。     

HBV与HCV重叠感染的研究

应用ＰＣＲ法和套式ＰＣＲ法对深圳地区４４例ＨＢＶ血清学标志物阳性者进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，并同时作ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠的感染情况，同时观察其血清ＡＬＴ的情况。结果发现，４４例患者中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（２７．２７％）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２２例（５０．００％），抗ＨＣＶ阳性２１例（４７．７３％）．表明ＨＢＶ与ＨＣＶ的重叠感染率较高，应引起人们的重视。     

人肺腺癌A549细胞系干细胞样细胞的培养检测及其抗顺铂能力的研究

目的:从人肺腺癌A549细胞系中培养获得含干细胞样细胞的球细胞(Sphere细胞),检测相关标志物表达及其对顺铂的耐药性.方法:采用含特定生长因子的无血清培养基诱导A549细胞的Sphere细胞形成,用亲脂荧光染料标记技术和免疫荧光法检测Sphere细胞中干细胞的存在,用流式细胞术检测干性标志物CD133,OCT4,C...     

小鼠SRS白血病病毒感染的细胞株的建立及其生物学特性

用小鼠SRS腹水瘤的无细胞提取液感染体外培养的小鼠NIH/3T3细胞,建立可传递的、感染SRS白血病病毒(SRSV)的细胞株。感染的NIH/3T3细胞,电镜下可见A型和C型病毒颗粒,X-C检测和逆转录酶活性测定均为阳性。感染SRSV的细胞形态变圆,并出现集落性生长,给3只BALB/c(nu nu)裸鼠皮下接种,在15d内都产生纤维肉瘤。Southern blot分子杂交法证明,感染的NIH/3T3细胞内有游离的前病毒DNA存在,将其无细胞提取液注入SW-1近交系新生乳鼠,在191d内有52.38％诱发了淋巴细胞白血病和胸腺淋巴瘤。     

乙型肝炎病毒DNA转染人T淋巴细胞株的研究

本文试用磷酸钙DNA共沉淀法将HBV DNA转染于培养的人T淋巴细胞株-CEM细胞中,HBV可在转染后的细胞中复制和转录,转染后的细胞培养液中,用酶联免疫吸附法可检测出HBsAg,细胞中可检测出3.2Kb和2.2Kb的HBV DNA片段,HBV DNA对体外培养的人 T淋巴细胞株的成功转染将有助于HBV致病机理的研究。