抗Thy—1单克隆抗体的免疫抑制作用

从体内，体外研究了抗Ｔｈｙ－１单克隆抗体（Ｍｃ－Ａｂ）的免疫抑制作用，结果表明：（１）体外抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞，无补体时能抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；（２）在体内，可以抑制小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖，但不影响ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖反应。结果说明：抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ的免疫抑制使用可能包括补体依赖性细胞毒作用和通过Ｔｈｙ－１分子 地     

ANAE染色和抗Thy1—SPA菌体花环双标记法的建立及其用于检测 …

目的 建立ＡＮＡＥ染色联合抗Ｔｈｙ１ＳＰＡ菌体花环双标记法，并试图利用此法证明抗θ抗体对ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞的特异作用。方法 利用双标记法对正常小鼠胸腺及脾细胞进行检测，观察抗Ｔｈｙ１ＳＰＡ抗体对ＡＮＡＥ阳性细胞结合的专一性。结果 双标记法中，抗Ｔｈｙ１ＳＰＡ菌体花环阳性同ＡＮＡＥ阳性一样，能很好反映６１５小鼠胸腺或脾脏Ｔ细胞数（Ｐ〉０．０５）；胸腺和脾脏细胞Ｔｈｙ１＾＋－ＡＮＡＥ＾＋率，即双标记     

ANAE染色和抗Thy1-SPA菌体花环双标记法的建立及其用于检测小鼠T淋巴细胞的研究

目的建立 ANAE染色联合抗 Thy1SPA菌体花环双标记法 ,并试图利用此法证明抗θ抗体对 ANAE阳性淋巴细胞的特异作用。方法利用双标记法对正常小鼠胸腺及脾细胞进行检测 ,观察抗 Thy1SPA抗体对 ANAE阳性细胞结合的专一性。结果双标记法中 ,抗 Thy1SPA菌体花环阳性同 ANAE阳性一样 ,能很好反映 6 15小鼠胸腺或脾脏 T细胞数 (P>0 .0 5 ) ;胸腺和脾脏细胞 Thy1 - ANAE 率 ,即双标记阳性率略低于总的 ANAE 或总抗θ菌体花环 数 ,但 3者之间有明显的相关性。结论成功建立了 ANAE-抗 Thy1SPA菌体花环法 ,并首次用此法证明抗θ血清对 ANAE阳性细胞的特异作用     

抗TCR／CD3单克隆抗体研究应用的现状与展望（一）抗TCR／CD3单克

ＴＣＲ／ＣＤ３复合体是Ｔ细胞功能和特异性的主要调节者，抗ＴＣＲ／ＣＤ３单克隆抗体（抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ）能模拟其重量性配体，并与之结合，然而这些抗体导致Ｔ细胞呈现两个相反的效应─—Ｔ细胞的活化和抑制，且这两方面在基础研究及临床中都被广泛应用。本文首先归纳概述了抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ及其体内的免疫抑制机制，并对其在自身免疫病和器官移植领域中的应用进行了综述。     

抗TCR/CD3单克隆抗体的免疫增强作用及其应用

抗ＴＣＲ／ＣＤ３单克隆抗体（抗ＴＣＲＭｃＡｂ,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ）对Ｔ细胞具有强活化作用,已成为当今最常用的Ｔ细胞活化剂之一。本文从免疫增强角度着重归纳了抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ激活Ｔ细胞的条件、机制和效应,并简要介绍了其在免疫功能低下疾病中研究应用的现状     

抗人重组IL－1单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定；抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ｌｇＧｌ；免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带；ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α、ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无交又反应；放射免疫测定结果证实，３株抗体分别识别ＩＬ－１分子上两个不同的抗原决定簇。     

B7-H1协同刺激淋巴细胞增殖并诱导产生抑制性T细胞

目的：探讨B7-H1分子在抗原诱导的免疫反应中的作用。方法：在可溶性抗原PPD诱导淋巴细胞增殖体系中,加入中和抗体检测B7-H1的协同刺激作用。转染表达B7-H1的ECV304细胞,观测其对PPD诱导的淋巴细胞增殖、细胞因子分泌及淋巴细胞亚群比例的影响。将刺激后的淋巴细胞过继至自体或同种异体增殖体系中,检测其功能。结果：抗B7-H1中和抗体可降低PPD诱导的淋巴细胞增殖反应和细胞因子分泌;转染B7-H1的ECV304细胞可协同刺激抗原诱导的淋巴细胞增殖,促进细胞因子IL-10的表达,并改变T细胞亚群分布,增加CD4^＋T细胞亚群比例;自体或同种异体过继实验显示,B7-H1刺激后的淋巴细胞具有显著的免疫抑制功能。结论：B7-H1分子可协同刺激淋巴细胞增殖并诱导产生具有免疫抑制功能的T细胞亚群。     

抗人C1q McAb轻链可变区基因结构特点

运用计算机进行基因序列分析在分子生物学研究中起重要作用，已被越来越多地用于研究大量累积的序列数据，获得许多重要发现。对抗人Ｃ１ｑ轻链可变基因（Ｃ１ｑＶ_Ｌ）的分析结果表明：Ｃ１ｑＶＬ属鼠ＩｇＶＫ基因家族，但与其它种属的Ｉｇ基因也显示较高同源性。它的另─个显著特点是与自身抗体编码基因高度同源。研究结果对我们进─步认识抗－Ｃ１ｑ抗体生理、病理作用具有─定价值。     

单克隆抗体Wu174的建立

用Ｎｕｌｌ细胞系Ｒｅｈ细胞免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系ＮＳ－１融合，运用人肾脏冰冻切片免疫酶染色法进行了筛选，获得了一株能稳定分泌ＩｇＧ１亚类抗人普通型急性淋巴母细胞性白血病抗原（ＣＡＬＬＡ）单克隆抗体的杂交瘤细胞系，即Ｗｕ１７４。文中叙述了对单克隆抗体Ｗｕ１７４特异性的鉴定，并对其初步应用价值和抗细胞性单克隆抗体筛选方法的选择进行了讨论。     

多反应性单克隆抗体的免疫生化分析

探讨多反应性抗体的交叉反应机制是免疫学基础理论研究的重要课题。我们曾研制了一批多反应性单克隆抗体，其中抗体ＸＹ１２不仅能够与中间纤维蛋白结合，而且还与ＤＮＡ发生反应。本文采用免疫生化的方法，产生、纯化并分析了抗体ＸＹ１２的Ｆａｂ片段。ＥＬＩＳＡ和放射免疫印迹结果表明，这些Ｆａｂ片段仍具有完整抗体的多反应性。竞争性抑制实验显示，一定量的波形蛋白能够有效地抑制抗体ＸＹ１２与ＤＮＡ的结合。这些结果提示抗体ＸＹ１２的对两种抗原的反应确实都发生在抗体与抗原的结合区域而非抗体的其它部位。     

抗HSV糖蛋白单克隆抗体可变区基因的克隆和序列测定

选用具有动物体内高保护作用的抗ＨＳＶ－１／ＨＳＶ－２型共同性糖蛋白Ｃ（ｇＣ）单克隆抗体１Ａ１２，从其杂交瘤细胞中提取总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５为引物反转录合成ｃＤＮＡ，用一对鼠抗体通用ＶＨ引物和一对Ｖ引物进行ＰＣＲ，扩增出１Ａ１２ＶＨ和１Ａ１２ＶＬ基因，并分别克隆入ｐＵＣ１８质粒中，序列分析结果表明，１Ａ１２ＶＨ基因由３３６ｂｐ组成，编码１１２个氨基酸，隶属于小鼠重链第３组亚组（Ｄ）；１Ａ     

抗HSV糖蛋白单克隆抗体重链可变区DNA的克隆及序列分析

作者从分泌具有高中和活性和高保护作用的抗ＨＳＶ型共同性糖蛋白Ｃ的鼠源性单抗的杂交瘤细胞１Ａ１２／４Ｄ５中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ。用合成的寡核苷酸引物从中扩增了抗体的重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑取两个阳性克隆进行核苷酸序列分析，见所克隆基因确可编码小鼠抗体的重链可变区。     

ESTABLISHMENT AND CHARACTERIZATION OF PERMANENT MURINE HYBRIDOMAS SECRETING MONOCLONAL ANTI-THY-1 ANTIBODIES *

Hybridomas secreting anti-Thy-1 antibodies were produced by fusing cells of the mouse myeloma line P3-NSI/1-Ag4-1 (NS-1) with spleen cells from AKR/J mice immunized with C3H/Di thymus cells and by subsequent growth in tissue culture and selection of the hybrid cells. Two permanent hybridomas, 1B5 and 1aG4/C5, secreting antibodies of IgG3 subclass were isolated by repeated cloning of cells by dilution and in soft agar. Growth of the hybrid cell colonies depended on the presence of feeder cells; spleen cells at 1-2 X 10⁶/ml were most effective, then thymus cells at 1-4 X 10⁶/ml and peritoneal cells at a concentration 1-2 orders of magnitude lower. The two hybridomas were grown in vitro or in vivo and their products were further analysed. In tissue culture in serum-free medium under the optimum conditions the supernatant from hybridoma 1B5 contained 0.07 mg/ml of antibodies and that from hybridoma 1aG4/C5 had 0.26 mg/ml of antibodies, whereas ascites 1B5 contained 3.6 mg/ml and ascites 1aG4/C5 4.4 mg/ml of antibodies. A very low electrophoretic mobility of both antibodies facilitated their isolation. The specificity of the antibodies was tested in the cytotoxicity assay in the presence of complement and by the binding of isotopically labelled antibodies to thymus cells from A/Ph mice and other Thy-1.2⁺ strains and A. Thy-1.1 and AKR/J mice. Antibodies of clone 1aG4/C5 were specific for Thy-1.2⁺ cells, whereas antobodies of clone 1B5 at higher concentrations also reacted with Thy-1.1⁺ cells from the thymus and lymph nodes. Both antibodies killed more than 95% thymus cells and 60-70% lymph node cells in the cytotoxicity assay. The specificity of antibodies for T lymphocytes was confirmed in the functional test in which the antibodies eliminated the response of spleen cells to Concanavalin A but did not affect the response to lipopolysaccharide in the presence of complement.     

用一种新的免疫方法制备抗NPY单克隆抗体

本文报道了在８淋巴细胞杂交瘤技术中采用脾内微量免疫及腹腔植入联合免疫方法获得了两株分泌抗神经肽Ｙ（ＮＰＹ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞系，用ＥＬＩＳＡ法测定腹水ＭｃＡｂ的效价为１０￣（－３）～１０￣（－５）。ＥＬＩＳＡ交叉试验结果表明，该ＭｃＡｂ不与ＡＣＴＨ反应，两种ＭｃＡｂ的亲和常数（Ｋａ）各为１×１０￣９Ｍ￣（－１）和５×１０￣７ｍｏｌ／Ｌ￣（－１），抗原决定簇分析结果表明此两种ＭｃＡｂ针对不同抗原决定簇。     

抗激活小鼠T细胞抗原单克隆抗体(2H3)的免疫生物学特性分析

2H3为一株抗激活小鼠T细胞表面抗原的单克隆抗体。间接ELISA法所进行的免疫球蛋白属性分析实验表明:2H3属于IgG_1型抗体。同位素H~3-TdR掺入实验表明:2H3能以剂量依赖的方式明显抑制小鼠激活T细胞及CTLL-2细胞依赖IL-2的增殖;能够明显抑制ConA诱导小鼠脾细胞转化早期(12h内)的非特异性淋巴细胞增殖反应。对不同品系小鼠间的双向混合淋巴细胞反应(MLR),2H3也表现出明显的抑制作用,且这种抑制作用具有剂量相关性和无H-2限制性。实验结果提示:2H3具有抗小鼠细胞膜表面IL-2R单克隆抗体的免疫生物学特征。     

抗天花粉蛋白单抗用于天花粉蛋白免疫毒素的亲和纯化

天花粉蛋白（ＴＣＳ）是一种单链致核糖体失活的蛋白，用细胞融合技术筛选到一株分泌抗该蛋白单抗的杂交瘤细胞株（Ｔ１Ａ９），并将单抗Ｔ１Ａ９制成免疫亲和凝胶，用此亲和凝胶纯化以ＴＣＳ和抗人黑色素瘤单抗Ｎｇ７６构建的免疫毒素，能有效地分离掉样品中的游离抗体，提高免疫毒素的毒效。体外细胞毒性实验表明，亲和纯化的免疫毒素对黑色素瘤细胞（Ｍ２１）的杀伤作用比分子筛（ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００）层析后的样品提高了６．３倍。它对Ｍ２１细胞的半致死浓度（ＩＣ＿（５０））为１．０×１０￣（－１０）ｍｏｌ／Ｌ。比ＴＣＳ和Ｎｇ７６的混合物的毒性（ＩＣ＿（５０）＝２．５×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ）提高了２５００倍。ＴＣＳ是制备免疫毒素的一种有效和常用的“弹头”，用此法纯化这类免疫毒素将会有一定的普遍性。