水通道蛋白4在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在乳腺癌发展中的作用机制。方法选用高表达AQP4的T47D及MCF-7细胞系,通过50siRNA干扰技术下调乳腺癌细胞T47D和MCF-7细胞系中AQP4的表达水平,检测下调的AQP4对乳腺癌细胞侵袭及转移的影响。结果下调的AQP4能够显著的抑制乳腺癌细胞的侵袭及转移。结论 AQP4表达水平与乳腺癌病情发展有相关性,可以进一步开发成为新的靶点。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白，即水孔蛋白（Ａｑｕａｐｏｒｉｎｓ，ＡＱＰ）是新近发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白，广泛存在于动物、植物及微生物。目前在哺乳动物组织中鉴定的水通道有六种，每种水通道有其特异笥的组织分布，不同水通道在肾脏和其它器官吸收和分泌过程中的作用和调节机制不同。研究ＡＱＰ的生理和病理生理变化及遗传和获得性水代谢障碍疾病的关系，并给予相应的干预措施具有重要意义。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白，即水孔蛋白（Ａｑｕａｐｏｒｉｎｓ，ＡＱＰ）是新近发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白，广泛存在于动物、植物及微生物。目前在哺乳动物组织中鉴定的水通道有六种，每种水通道有其特异性的组织分布，不同水通道在肾脏和其它器官吸收和分泌过程中的作用和调节机制不同。研究ＡＱＰ的生理和病理生理变化及与遗传和获得性水代谢障碍疾病的关系，并给予相应的干预措施具有重要意义。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白在体内广泛分布，具有特殊的分子结构和生物学特性。受诸多因素的调节，如蛋白激酶C、pH值、睾丸激素、温度等。其中水通道蛋白4（AQP4）与脑水肿关系密切。水通道蛋白使水代谢的研究跃入了一个全新的阶段，它的发现使我们能够在分子水平研究水的运动，将会阐明许多系统疾病的发病机制，并予以相应的干预，对于临床及实际工作具有重要的指导意义。     

水通道蛋白8在人脑胶质瘤组织的表达及临床意义

目的:探讨水通道蛋白8(AQP8)在人脑胶质瘤中的表达及其与预后的关系。方法:选取河南省人民医院2017年7月至2019年7月35例人脑胶质瘤组织,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测AQP8的表达,再通过短发卡RNA(shRNA)技术下调AQP8基因,通过细胞增殖测定和Transwell侵袭/转移实验研究其...     

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3对胆囊癌迁移侵袭的影响

目的探究胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factorⅡ,IGF-Ⅱ)mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)对胆囊癌迁移侵袭的作用。方法应用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测23份胆囊癌组织和23份癌旁组织中IGF2BP3的表达水平;在胆囊癌细胞中利用小干扰RNA(siRNA)敲减目的基因IGF2BP3;Transwell迁移实验与带胶Transwell侵袭实验检测敲减IGF2BP3后对胆囊癌细胞迁移侵袭能力的影响;细胞免疫荧光法检测敲减IGF2BP3后上皮细胞间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达水平变化。结果 IGF2BP3在胆囊癌组织中高表达(P0.05);与正常胆管上皮细胞比较,5株胆囊癌细胞系中IGF2BP3高表达;敲减IGF2BP3后,胆囊癌细胞系的迁移侵袭能力明显降低(P0.0001);敲减IGF2BP3后EMT相关蛋白表达水平下调。结论 IGF2BP3通过促进EMT,从而促进胆囊癌侵袭转移。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白，又称水蛋白（ａｑｕａｐｏｒｉｎ，ＡＱＰ），是一系列具有同源性的内在膜蛋白家族成员。迄今，已从哺乳动物组织中鉴定了８种水蛋白，它们广泛分布于机体不同的组织器官中，倡导着不同类型细胞膜的跨膜水转运，其功能受到某些因素的影响，并与某些疾病的发生有着密切的关系。水通道的研究有助于更深入地了解某些病理生理机制，为某些疾病的治疗提供新的途径。     

大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白2和水通道蛋白4表达的影响

目的 研究大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白（AQP）2、AQP4表达的影响及探讨大黄利尿机制。 方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组，每组8只，分别给予不同剂量大黄总蒽醌灌胃，每天1次，共灌5 d。第4天测定大鼠24 h尿量，尿液Na+水平及尿渗透浓度。5 d后处死大鼠，腹主动脉取血，进行血液生化指标检测；并留取肾脏，用免疫组化、Western印迹和RT-PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。 结果 与正常对照组比较，大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠24 h尿量显著增加[(16.21±1.96) ml、(18.16±1.80) ml比（13.85±1.25）ml, P均＜ 0.05]，低剂量组大鼠尿量变化不明显；中、高剂量组大鼠肾脏AQP2蛋白及mRNA表达均显著下降（P均＜ 0.01），高剂量组大鼠肾脏AQP4蛋白及mRNA表达显著下降（P ＜ 0.01）；中剂量组大鼠AQP4蛋白表达下降（P ＜ 0.01），但mRNA表达无显著降低；低剂量组大鼠AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达无显著变化。 结论 大黄总蒽醌能降低大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平，这可能是大黄产生利尿的机制之一。     

水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白在体内广泛分布,具有特殊的分子结构和生物学特性。受诸多因素的调节,如蛋白激酶C、pH值、睾丸激 素、温度等。其中水通道蛋白4(AQP4)与脑水肿关系密切。水通道蛋白使水代谢的研究跃入了一个全新的阶段,它的发现使我们能 够在分子水平研究水的运动,将会阐明许多系统疾病的发病机制,并予以相应的干预,对于临床及实际工作具有重要的指导意义。     

水通道蛋白与腹膜超滤

近年来研究发现水通道蛋白（aquaponn，AQP）可介导自由水被动跨生物膜转运，在维持细胞内外环境的稳定平衡中具有特殊作用。现已发现13种AQP分子AQP0—12（11，12又称超AQP），分布于腹膜组织的AQP主要有两种（AQP1，AQP3），其中AQP1被认为是腹膜转运“三孔”模型中的超小孔，在腹膜跨细胞水转运中起重要作用，近年来对AQP3的研究提示它可能也在腹膜液体转运中起到重要作用，研究AQP在腹膜超滤中的作用及可能调节机制，对认识腹膜UFF的机制具有重要意义。     

功能性便秘患者结肠黏膜水通道蛋白3和水通道蛋白9的表达及意义

目的研究功能性便秘患者结肠黏膜水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白9（AQP9）的表达与分布情况．并探讨其与便秘的关系。方法采用免疫组化技术和Western印迹半定量检测法检测45例功能性便秘患者（试验组）和21例无便秘患者（对照组）结肠黏膜AQP3和AQP9，把AQP3和AQP9与相应内参蛋白β-actin的灰度值之比视为AQP3和AQP9的相对含量。结果免疫组化检测显示：AQP3主要表达在结肠黏膜顶部的吸收细胞．且主要分布于细胞膜的基底侧和腔面，杯状细胞少见阳性染色，AQP9主要表达在黏膜腔面的杯状细胞，且主要分布于细胞膜的基底侧。Western印迹检测结果：试验组和对照组升结肠AQP3灰度比平均值分别为0．905和0．798（P〈0．05）。AQP9灰度比平均值分别为0．544和0．543（P〉0．05）；试验组和对照组降结肠AQP3灰度比平均值分别为0．697和0．701（P〉0．05），AQP9灰度比平均值分别为0．575和0．732（P〈0．05）。结论功能性便秘患者升结肠黏膜AQP3表达高于非便秘者，而其降结肠AQP9表达则低于非便秘者；AQP3和AQP9含量的增减可能在便秘的发生发展过程中发挥了重要作用。     

生长抑素受体-2基因逆转上皮-间充质转化抑制肝癌细胞侵袭转移机制的研究

目的 观察生长抑素受体-2(SSTR2)基因对肝癌细胞株MHCC-97H侵袭转移及上皮-间充质转化(EMT)特性的影响.方法 构建慢病毒3FLAG-puromycin-LV及SSTR2-LV,转染肝癌细胞株MHCC-97H,噻唑蓝(MTT)、免疫荧光检测转染效率.采用Transwell侵袭实验和迁移实验分别检测未转染细胞(空白对照组)、转染3FLAG-puromycin-LV细胞(阴性对照组)和转染SSTR2-LV细胞(实验组)侵袭转移能力的强弱.镜下观察转染前后细胞形态的变化,免疫荧光检测转染前后细胞上皮表型蛋白和间质表型蛋白的定位和表达,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染后细胞SSTR2的表达,Westem blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达.结果 SSTR2-LV可以有效转染肝癌细胞株MHCC-97H,稳定表达SSTtR2的mRNA和蛋白.转染SSTR2-LV的肝癌细胞株MHCC-97H较空白对照组和阴性对照组侵袭迁移能力明显受到抑制(P＜0.05).镜下观察肝癌细胞株MHCC-97H转染SSTR2-LV后,由成纤维细胞样、排列分散,转变为细胞排列紧密如铺路石.免疫荧光染色结果可见肝癌细胞株MHCC-97H转染后细胞膜表达的E-cadherin荧光由胞质转移至细胞周边浓聚,而Vimentin的荧光强度较前下降.采用Western blot进行蛋白定量分析,转染后MHCC-97H细胞上皮表型标志性蛋白E-cadherin、β-连环蛋白(β-catenin)表达量增高,间质表型标志性蛋白N-cadherin、Vimentin表达量减少,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 转染再表达SSTR2MHCC-97H细胞可以增加上皮表型蛋白表达,减少间质表型蛋白,从而逆转肝癌细胞EMT,导致肿瘤细胞侵袭能力减弱.     

水通道蛋白3、4、8在大鼠慢传输型便秘模型结肠黏膜中的表达

目的探讨水通道蛋白（AQP）3、4、8在大鼠慢传输型便秘（STC）模型中的表达情况。方法利用复方地芬诺酯灌胃的方法建立大鼠STC模型,采用RT—PCR方法测定STC组（16只）及对照组大鼠（16只）升、降结肠黏膜的AQP3、4、8mRNA表达情况。结果STC组与对照组升结肠、降结肠AQP3平均相对表达量分别为0．344和0．602（P〈0．05）、0．419和0．509（P〉0．05）：STC组和对照组升结肠、降结肠AQP4平均相对表达量分别为0．764和0．759（P〉0．05）、0．776和0．736（P〉0．05）;AQP8在实验组和对照组升降结肠中未见明显表达。结论AQP3在STC大鼠的升结肠黏膜中表达下调,对水吸收起调节作用：AQP4和AQP8的表达无明显变化。     

Sensitization of human colon cancer cells to trail-mediated apoptosis

TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL), a novel member of the tumor necrosis factor (TMF) family, is thought to induce apoptosis preferentially in cancer cells; however, increasing evidence suggests that a number of cancers are resistant to TRAIL treatment. FLICE-like inhibitory protein (FLIP), which structurally resembles caspase-8, can act as an inhibitor of apoptosis when expressed at high levels in certain cancer cells. The purpose of our present study was to determine whether human colon cancer cells are sensitive to TRAIL treatment and, if not, to identify potential mechanisms of resistance. Colon cancer cells of different metastatic potential (KMlZC, KML4A, and KM20) were found to be resistant to the effects of TRAIL when used as a single agent. FLIP expression levels were increased in all three KM cell lines. Treatment with either actinomycin D (Act D;10 μ/ml) or cycloheximide (CHX; 10 μg/ml) decreased FLIP expression levels in all three cell lines. The decrease in cellular levels of FLIP was associated with sensitization to TRAIL-mediated apoptosis, as demonstrated by enhanced cell death and caspase-3 activity compared with either Act D or CHX alone. Our findings suggest that reduction of FLIP levels by Act D or CHX renders TRAIL-resistant human colon cancer cells sensitive to TRAIL-mediated apoptosis. The combination of TRAIL along with agents such as Act D or CHX, which target proteins that prevent cell death, may provide a more effective and less toxic regimen for treatment of resistant colon cancers. Presented at the Forty-First Annual Meeting of The Society for Surgery of the Alimentary Tract, San Diego, Calif., May 2l–24, 2000, and published as an abstract in Gastroentmolog 118:A1025, 2000. Supported by grants R01 AG10885, R01 DK48498, PO1 DK35608, and T32 DK07639 from the National Institutes of Health, Bethesda, Md.     

瘦素对人肾小管上皮细胞表型转化及纤维连接蛋白表达的影响

目的:通过观察瘦素(leptin)刺激对人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,探讨瘦素对HK-2细胞转分化的作用。方法:将体外培养的HK-2细胞分为对照组和不同浓度瘦素作用组。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态学变化;实时荧光定量RT-PCR法检测HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和FN mRNA的表达水平;免疫细胞化学法检测HK-2细胞表达α-SMA的阳性细胞百分数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HK-2细胞培养液上清中FN的表达。结果:分别用50、100、200 ng/ml瘦素作用HK-2细胞48 h后,(1)HK-2细胞逐渐由椭圆形变成长梭形,类似肌成纤维细胞的形态;(2)RT-PCR结果表明,瘦素作用可以下调E-cadherin mRNA的表达,同时上调α-SMA、FN mRNA的表达。(3)免疫细胞化学结果表明,对照组HK-2细胞几乎不表达α-SMA,随着瘦素作用浓度的增加,α-SMA阳性的HK-2细胞百分数逐渐增多;(4)ELISA结果表明,对照组HK-2细胞有基础水平的FN分泌,各瘦素作用组上清液中FN的表达水平较对照组显著增加,且呈一定的剂量依赖关系。结论:瘦素可诱导肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞,分泌细胞外基质,从而可能参与肾间质纤维化的发生发展。     

上皮间质转化与肝细胞癌肺转移的相关性研究

目的 研究上皮间质转化和肝细胞癌肺转移的关系.方法 2000年1月至2004年3月于中山医院肝外科手术病理诊断为肝细胞癌的患者中,根据术后随访期内有无肺转移分为有肺转移组和无远处转移组,每组随机选择50例患者的原位肝癌组织制成组织芯片.用免疫组织化学染色(二步法)方法检测组织芯片上肺转移组和无远处转移组患者的肝痛组织的上皮间质转化的标志(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin),单因素和多因素分析这些标志和肝细胞癌肺转移的关系.结果 单因素分析了性别、年龄、HbsAg、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤大小、数目、癌栓、包膜、肝门淋巴结、肿瘤分化程度、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维连接蛋白(Fibroneetin)的表达与肺转移的相关性,结果显示:患者AFP水平>400 ng/ml、肿瘤直径>10 cm、门静脉癌栓、分化程度低、E-cadherin的低表达、Fibronectin的高表达、Vimentin的高表达与肝细胞癌肺转移相关;多因素分析显示肿瘤直径>10 cm、门静脉癌栓、分化程度低、Fibronectin高表达是肝细胞癌肺转移的危险因素.结论 肝细胞癌患者肝癌组织的上皮间质转化与其发生肺转移有密切关系.     

TrkB影响结肠癌细胞SW620侵袭能力及与ERK信号通路活化关系的研究

目的:探讨干扰结肠癌细胞TrkB蛋白表达及抑制ERK活化对细胞增殖、凋亡和侵袭以及细胞内ERK磷酸化水平的影响。方法:应用特异性TrkB-siRNA瞬时转染及ERK特异性抑制剂处理SW620结肠癌细胞,观察SW620细胞增殖、凋亡和侵袭情况以及细胞内ERK磷酸化水平的变化。结果:特异性siRNA转染高表达TrkB的SW620细胞,TrkB蛋白表达减少,ERK的磷酸化水平降低,且转染组细胞数显著低于对照组(P=0.001),转染组的细胞凋亡率显著高于对照组(P=0.000 1),24 h后侵袭至下层小室的细胞数转染组显著低于对照组(P=0.001);ERK抑制剂明显降低SW620细胞ERK磷酸化水平(P=0.001),而对ERK蛋白表达没有影响,且应用ERK抑制剂作用SW620细胞,对照组和处理组中细胞数没有显著差异(P=0.544),对照组和处理组中SW620细胞的凋亡率差异无统计学意义(P=0.103),但对照组24 h后侵袭至下层小室的细胞数显著高于处理组(P=0.0001)。结论:干扰TrkB蛋白表达能够降低高转移结肠腺癌SW620细胞内ERK磷酸化水平,促进细胞凋亡并抑制细胞增殖和侵袭。同时应用ERK特异性抑制剂也显著抑制细胞侵袭。因此ERK信号转导通路可能与TrkB介导的结肠腺癌细胞抗凋亡和侵袭能力的增加相关,沉默TrkB表达可能成为阻断结肠癌转移的新靶点。