402株结核分枝杆菌对一线和二线抗结核药物的获得性耐药情况

结核是影响人类健康的重要感染性疾病,早期、准确的诊断和鉴别诊断对选择合理的治疗方法、改善患者预后具有十分重要的意义。由于抗结核药物的广泛应用,患者用药过程的不合理,一线及二线抗结核药物的耐药率逐年升高〔1〕。本研究拟分析结核分枝杆菌对一线和二线药物的获得性耐药情况。1资料与方法     

589株结核分枝杆菌对10种药物的耐药性分析

目的了解深圳市第三人民医院结核病患者结核分枝杆菌对10种药物的耐药情况。方法用MB/Bact 240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对患者的多种标本进行分枝杆菌分离培养鉴定,对分离到的结核分枝杆菌采用绝对浓度法对10种抗结核药物,利福平（RFP）、异烟肼（INH）、乙胺丁醇（EMB）、链霉素（SM）,利福喷丁（RFT）、丙硫异烟肼（TH）、氧氟沙星（OFL）、卷曲霉素（CPM）、卡那霉素（KM）和对氨基水扬酸（PAS）进行药敏试验。结果 1722例患者的标本结核分枝杆菌培养阳性589株,阳性率为34.2%（589/1722）,589株结核分枝杆菌对10种药总耐药率38%（224/589）,单耐药率最高为SM（17.1%）,最低为PAS（3.4%）;55株MDR-TB对另外8种药物耐药率最高为RFT（94.5%）,最低为KM（20%）和PAS（20%）,对10种药物全耐者有3株（0.5%）。结论结核菌耐药情况仍然十分严重,应加强抗结核药物的耐药性监测;根据药敏试验结果选择科学有效的化疗方案。     

结核分枝杆菌126株药敏结果分析

在日常工作中．我们发现有些结核分枝杆菌有药物依赖现象．尤其是耐多药菌．其菌落生长旺盛程度和数量．往往是高浓度药物培养基大于(或等于)低浓度药物培养基以及大于(等于)对照组培养基。为此特进行试验研究．以分析结核分枝菌依赖抗结核药物的发生率及特点。     

442株结核分枝杆菌药敏试验结果分析

结核病是当今全球范围对人类最具威胁性的感染性疾病之一 ,是传染性疾病中死亡率最高的疾病 ,全球约有三分之一人口 (约 2 0亿 )感染了结核分枝杆菌。尤其是耐多药结核病(MDR- TB)的出现 ,使全球约三分之二的结核患者处于耐多药危险中。为了解我院的 MDR- TB流行情况 ,现将 2 0 0 2年结核分支杆菌临床分离株药敏试验结果进行分析。1　材料和方法1.1　菌株　以本院全年临床痰标本分离出的结核分枝杆菌菌株作为试验对象 ,共 4 4 2株。1.2　培养基的制备　 1药物敏感性测定所用对照和基础培养基为新改良罗氏培养基 ,配方和制备方法按《结…     

分枝杆菌感染状况和结核分枝杆菌耐药性分析

目的了解本地区就诊患者分枝杆菌感染状况和结核分枝杆菌耐药情况。方法用对患者标本进行分枝杆菌培养鉴定和药敏试验。结果 9653份标本分枝杆菌培养阳性2759例,其中1229株分枝杆菌行菌种鉴定和药敏试验,非结核分枝杆菌219株,结核分枝杆菌1010株,纳入929株药敏结果进行分析,对4种一线抗结核药物至少耐一药232株,耐二药51株、耐三药49株,耐四药33株,耐多药92株。结论本地区分枝杆菌非肺部感染应引起高度重视,结核菌总耐药率和耐多药率近几年维持在稳定高位,结核菌耐药情况仍然十分严重。     

南京地区结核分枝杆菌耐药监测疫情趋势分析

目的了解南京地区胸科医院结核病患者结核分枝杆菌对临床常用9种药物的耐药情况。方法对我院分离的结核分枝杆菌采用绝对浓度法对9种抗结核药物:链霉素、异烟肼、乙胺丁醇、利福平、对氨基水杨酸、丁胺卡那霉素、卷曲霉素、左氧氟沙星、对氨基水杨酸异烟肼进行药敏试验,同时用PNB、TCH进行菌种初步鉴定。结果 10014株结核分枝杆菌中,总耐药率38.42%(3847/10014),单耐药率最高为利福平(27.35%),最低为卷曲霉素(0.50%);2017株耐多药结核分枝杆菌对另外7种药物单耐药率最高为链霉素(56.22%),最低为卷曲霉素(1.69%),对9种药物全耐者有3株。结论结核分枝杆菌对多种药物耐药率高,应加强抗结核药物耐药性监测,根据药敏试验结果选择科学有效的化疗方案。     

110株结核分枝杆菌二线药敏结果分析

目的了解2007年至2010年胜利油田结核分枝杆菌菌株对二线结核药的耐药状况,初步探讨本地耐多药（MDR-TB）及广泛耐药（XDR-TB）结核病发病情况。方法运用药物敏感检测和调查相结合,收集2007年2月至2010年8月结核病患者痰标本进行分离培养和菌种鉴定,同时对4种一线药物及4种二线药物应用比例法进行耐药性检测。结果在所分离的110株耐药结核分枝杆菌中,MDR-TB 14例,其中XDR-TB6例,耐LFX占17.3%,耐AK、PAS、CM分别为：6.4%、5.5%、1.8%,对二线药物的耐药顺位依次LFX〉AK〉PAS〉CM。结论胜利油田结核病患者二线药物耐药情况严重。     

上海地区结核分枝杆菌分离株对一线和二线抗结核药物的耐药性分析

目的 了解结核分枝杆菌分离株对一线和二线抗结核药物的耐药性。方法 收集2008年1月至2009年3月采用Bactec-MGIT 960检测的518株结核分枝杆菌,分析药物敏感试验结果。数据行x2检验。结果518株结核分枝杆菌菌株对一线和二线抗结核药物全敏感168株,占32.44％;耐药350株,占67.56％;单耐药72株,占13.90％;耐两种药24株,占4.63％;耐三种及以上药254株,占49.03％。217株为耐多药菌株,占所有病例的41.89％。65株为广泛耐药菌株,占所有病例的12.55％,占耐多药菌的29.95％。在一线药物中,耐异烟肼有278株,耐药率达53.67％;二线药物中,耐氧氟沙星有206株,耐药率达39.77％。433例复治患者任一药物耐药率、耐多药率和广泛耐药率分别为72.05％、46.42％和13.86％,均高于初治患者的44.70％、18.82％和5.88％（x2 =24.253,x2=22.229,x2=4.117,均P＜0.01）。结论 上海地区结核病专科医院结核分枝杆菌分离株的耐药率高,且耐多药与广泛耐药率也较高,在复治患者中耐药情况更严重。     

抗结核药物对非结核分枝杆菌菌种鉴定的试验

报告２２种非结核分枝杆菌典型株对１２种抗结核药物的敏感性试验结果,２２种非结核分枝杆菌在食ＴＨ１３２１,ＴＢ１,ＰＡＳ,ＩＮＨ培养其呈现不同程度耐药性,胞内分枝杆菌等１３种非结核分枝杆菌在含ＳＭ,ＥＭＢ,ＲＦＰ培养基呈现不同程度耐药性,鸟分枝杆菌等６种非结核分支杆菌在含ＮＦＬＸ,ＯＦＬＸ,ＣＦＬＸ培养基呈现不同程度耐药性,海分枝杆菌等３种非结核分枝杆菌在含ＣＰＭ培养其呈现不同程度耐药性,龟分枝杆菌     

145株非结核分枝杆菌对10种药物的耐药性分析

目的了解我院非结核病患者分离的非结核分枝杆菌对10种药物的耐药状况。方法用MB/Bact 240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对患者的多种标本进行分枝杆菌分离培养鉴定,对分离到的分枝杆菌采用绝对浓度法对10种抗结核药物,利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素,利福喷丁、丙硫异烟肼、氧氟沙星、卷曲霉素、卡那霉素和对氨基水扬酸进行药物敏感性试验。结果 1722例患者的标本非结核分枝杆菌培养阳性145株,对10种药总耐药率97.2%（141/145）,单耐药率最高为异烟肼、链霉素和对氨基水扬酸,最低为氧氟沙星。结论非结核分枝杆菌耐药情况十分严重,应加强抗结核药物的耐药性监测;根据药敏试验选择科学有效的化疗方案。     

结核分枝杆菌新疆临床分离株耐药情况调查

目的分析新疆部分地区结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对抗结核药物的耐药情况,探讨本地区耐药结核病的发生率及特点。方法收集2008年11月～2009年10月新疆喀什、和田、皮山等南疆地区确诊的结核病患者痰液标本,进行MTB的分离培养及菌种初步鉴定,并应用比例法对分离菌株进行耐药性检测,与本课题组所做北疆地区耐药情况进行比对。结果共分离到102株分枝杆菌,88株(86.3%)属于结核分枝杆菌复合群,7株(6.9%)属于牛分枝杆菌,7株(6.9%)属于非结核分枝杆菌。88株结核分枝杆菌中对1种以上抗结核药物具有耐药性的有20株,总耐药率为22.7%(20/88),MDR-TB为6.8%(6/88)。新疆南疆地区4种一线抗结药物的耐药率:H15.9%、R8.0%、S12.5%、E3.4%,明显低于新疆北疆地区抗结药物的耐药率:H53.3%、R28.5%、S48.4%、E46.8%。结论新疆南疆地区结核总耐药率有所下降,耐多药率有上升趋势,在结核病防治工作中应给予高度重视;新疆南、北疆地区耐药情况不同,北疆耐药率明显高于南疆地区。     

难治性肺结核分支杆菌耐药性和药物依赖性的实验观察

目的探讨难治性肺结核分支杆菌耐药性和药物依赖性。方法对难冶性肺结核病人痰标本培养分离的分枝杆菌65株（例）,进行低浓度、高浓度抗结核药物的耐药性和依赖性实验观察。结果65株分枝杆菌对SM、INH和RFP三种药物均耐药,EMB耐药率也较高（75．4％和69．2％）。分枝杆菌对sM依赖率分别为38．5％,INH为26．2％,RFP为18．5％,EMB为10．8％;同时依赖两种药物者为15．4％,三种药物为12．3％,四种药物为4．6％。结论难治性肺结核具有很高的耐药性和较高的依赖性。     

四川省非结核分枝杆菌耐药分析

目的 探讨非结核分枝杆菌(non - tuberculosis mycobacterium,NTM)的流行病学特征和耐药现状,为NTM肺病的防治策略提供科学依据.方法 对2002 - 2011年四川省结核病参比实验室收集的分枝杆菌进行药物敏感性检测及菌种鉴定.对确诊为NTM病例进行流行病学分析.结果 2002 - 2011年四川省结核病参比实验室对2356个分枝杆菌菌株进行菌种鉴定,确诊为NTM的为251株,占10.65％,其中245株对异烟肼、对氨基水杨酸钠、乙胺丁醇、利福平、链霉素等常用抗结核药物存在不同程度的耐药,耐药率高达97.60％,且大多菌株同时对多种抗结核药物耐药.结论 四川省NTM对抗结核药物的耐药率高,研究、探索抗NTM的新药及更为有效的诊断方法是当务之急.     

结核分枝杆菌katG基因突变对异烟肼耐药性的影响

目的探讨结核分枝杆菌katG基因突变TGG328TTT(Trp328Phe)对异烟肼耐药性的影响。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv和临床突变株DNA为模板,采用PCR扩增野生型和双突变型(含Trp328Phe与Met420Thr)katG基因,采用重叠延伸PCR技术构建单突变型(Trp328Phe)katG基因。将各katG基因重组至质粒pET22b(+),再导入表达宿主菌BL21(DE3)pLySs中,IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法对重组KatG蛋白进行分离纯化。通过各重组KatG蛋白与过氧化氢和邻联大茴香胺反应,检测受试菌过氧化氢酶和过氧化物酶的活性。结果成功获得纯化的KatG蛋白。相比野生型KatG(19.05U/mg和7.05×10-3 U/mg),单突变型KatG(10.50U/mg和2.23×10-3 U/mg)过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降44.9%和68.3%,双突变型KatG(11.88U/mg和3.31×10-3 U/mg)则分别下降37.6%和53.0%。结论 katG基因(Trp328Phe)突变引起KatG酶活性部分缺失,与异烟肼耐药有关,可作为耐药菌株基因检测的标志用于基因芯片的开发。双突变时KatG蛋白活性较高,提示katG-328TTT具有代偿性突变的作用。     

微孔板稀释法检测结核分枝杆菌丙硫异烟胺耐药结果分析

目的以MGIT960快速药敏法为参照,微孔板稀释法检测结核分枝杆菌丙硫异烟胺耐药的效果。方法采用MGIT960快速药敏(MGIT法)和微孔板稀释法对248株结核分枝杆菌临床分离株进行丙硫异烟胺药敏试验,检测结核分枝杆菌对该药物的耐药性。随机选取117株菌株进行该药物的11个浓度梯度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64μg/mL)的药敏检测,比较两种方法最低抑菌浓度的一致性。结果 MGIT法的平均检测时间为10.1d,微孔板稀释法检测时间为8d,两者差异有统计学意义(P0.001)。与MGIT法测定结果比较,微孔板稀释法检测的敏感度为96.5%(55/57),特异度为93.2%(178/191),符合率为94.0%(233/248),Kappa值为0.84。两种方法所获得的MIC值的总一致率为81.2%(95/117),其中在MIC值8.0μg/mL的分离株中,两种方法的一致率为86.3%(82/95);在MIC值≥8.0μg/mL的分离株中,两种方法的一致率仅为59.1%(13/22)。结论两种方法对丙硫异烟胺进行耐药检测有较高的一致性,但也存在一定的差异。微孔板稀释法比MGIT法简单,快速,适合用于结核分枝杆菌对丙硫异烟胺耐药性的快速检测。     

噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的研究

目的 建立快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的噬菌体生物扩增法,并探讨其在结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性测定中的应用价值。方法 应用噬菌体生物扩增法测定112株结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性,并与绝对浓度法结果进行比较,对不符合的菌株采用Bactec MGIT 960测定其最低抑菌浓度(MIC)。以细菌接种量为10^-3mg/ml,药物浓度5μg/ml、37℃作用24 h为药敏试验条件。结果 噬菌体法测定112株结核分枝杆菌临床分离株卷曲霉素敏感91株、耐药21株,绝对浓度法敏感92株、耐药20株;两法测定均为敏感89株、均为耐药18株。在5株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符的菌株中,3株噬菌体法与MIC测定结果相符合。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则噬菌体法测定卷曲霉素耐药性的敏感性为90%(18/20),特异性为96.7%(89/92),阳性预测值为85.7%(18/21),阴性预测值为97.8%(89/91),准确性为95.5%(107/112)。结论噬菌体生物扩增法测定卷曲霉素耐药性简便快速,只需2 d时间,操作不需特殊仪器设备,具有很高的敏感性和特异性,可作为MTB的卷曲霉素耐药性快速筛选方法,建议临床推广应用。     

结核分枝杆菌katG Asn329Val突变导致异烟肼耐药

摘要：目的 研究结核分枝杆菌katG基因Asn329Val突变导致异烟肼耐药的机制。方法 扩增含有突变位点和野生型的全长katG基因,经TA克隆、定向克隆构建表达载体,原核表达KatG蛋白,纯化后比较重组KatG酶活性。结果 获得了katG基因的高效表达。重组蛋白酶活性显示,Asn329Val突变导致重组KatG过氧化氢酶活性完全丧失,但仍保持一定的过氧化物酶活性;Ser315Thr突变导致重组KatG过氧化氢酶和过氧化物酶活性部分丧失;Arg463Leu突变对过氧化氢酶活性和过氧化物酶活性影响均不大。结论 katG Asn329Val突变引起了KatG过氧化氢酶活性的完全丧失,可能是导致菌株对异烟肼耐药的机制。     

深圳市结核病一线抗结核药的耐药监测结果分析

目的了解深圳市结核分枝杆菌耐药情况,为深圳市结核病控制提供科学依据。方法依据(WHO/IUALD)结核病耐药指南,将深圳市1999-2008年间所有新涂阳和新登记的复治涂阳的肺结核作为监测对象,对6702例成功分离的结核分枝杆菌菌株,用比例法进行药物敏感实验。结果总耐药率37.8%,初始耐药率22.1%,获得性耐药率37.8%;耐多药率4.7%,初始和获得性耐多药率分别为3.8%和16.3%;初治和复治患者的耐单药率和单药耐药频率均以S和H为主,复治组R的耐单药率显著高于初治组;初治患者含耐R的病例共333例,其中耐HR211例,占60%;复治患者含R耐药的患者共99例,其中耐HR78例,占79%。结论深圳市耐药结核病的发生率较高,耐药现状应该引起高度重视。 更多还原…     

结核病专科医院和结防机构二线抗结核药物使用现状调查

目的了解肺结核患者在专科医院治疗与在结防机构治疗期间二线抗结核药的使用情况。方法在全国选取5个省市作为研究地区。采用随机抽样原则对患者病案进行调查,并对知情关键人物进行访谈。结果患者的二线抗结核药物使用比例高达到56.3%;使用的二线药种类较多,其中左氧氟沙星在2个机构中使用最多,分别占到89.6%和81.0%。结论在二线抗结核药物的使用上存在很大问题,因此政府和医院要出台相应政策使二线抗结核药物使用规范化。     

福建省耐多药结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物表型耐药与gyrA基因突变特征分析

目的 了解福建省耐多药(Multi-drug resistant, MDR)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)氟喹诺酮类药物(Fluoroquinolones,FQs)的gyrA基因突变特征,为FQs耐药菌株的快速分子药敏检测提供基础科学数据。方法 收集来自福建省2010-2011年和2008-2009年耐药监测点的所有MDR Mtb临床菌株,采用常规比例法进行FQs敏感性试验。PCR扩增包含gyrA耐药决定区的基因片段,测序后比对分析。结果 共收集到MDR结核分枝杆菌临床菌株119株,经常规药敏试验,氧氟沙星(Ofloxacin,Ofx)的耐药率为26.89%,左氧氟沙星(Levofloxacin,Lfx)耐药率为25.21%,莫西沙星(Moxifloxacin,Mfx)耐药率为11.76%。FQs敏感株gyrA基因未检测到突变。gyrA基因在Ofx耐药菌株的突变率为84.38%(27/32),Lfx耐药菌株的突变率为83.33%(25/30), Mfx耐药菌株的突变率为92.86%(13/14)。gyrA基因突变为点突变,共发现有5种突变类型,以Asp94Gly,Asp94Asn和Ala90Val为主。结论 福建省MDR-Mtb对FQs耐药的主要原因是gyrA基因突变,最常见的突变位于第94位,第90位和第91位密码子。