咖啡酸对同型半胱氨酸诱导的脑微循环障碍的改善作用

<正>目的:研究咖啡酸对同型半胱氨酸诱导的小鼠脑细静脉内黏附白细胞的抑制作用及其机制。方法:同型半胱氨酸(0.1mg/g体重)一次性皮下注射诱导小鼠脑细静脉内白细胞黏附模型。     

高同型半胱氨酸兔软脑膜微循环血栓形成与血管内皮功能

目的观察高同型半胱氨酸（HHcy）模型兔软脑膜微血管口径、白色微小血栓（白微栓）数量和血管内皮功能变化及其相关分析。方法采用L-蛋氨酸皮下注射法建立HHcy家兔模型,应用“颅骨窗口法”和微循环闭路检测系统观察其软脑膜微血管中自微栓数量及微血管口径变化;采用柱前衍生反相高效液相色谱-荧光法检测同型半胱氨酸（Hey）浓度;平行观测血管内皮功能指标血管性血友病因子抗原（vWF,用酶联免疫吸附法）、血浆内皮素-1（ET-1,用ELISA）、血清-氧化氮（NO,用化学比色法）水平;并对HHcy所致ET-1、NO血液浓度变化和微血管口径变化进行相关分析。结果与正常对照组比较,HHcy模型兔软脑膜微血管中白微栓数量增加（23．00±6．00个／min VS4．00±1．00个／min,P〈0．01）,伴微血管口径缩小（80．80±6．30／μmVS110．20±7．20μm,P〈0．01）,ET-1明显增加（168．40±13．20ng／Lvs93．25±13．20ng／L,P〈0．01）,NO明显降低（22．83±3．53μmol／Lvs38．31±3．20μmol／L,P〈0．01）;vWF有所增加,但无显著性差异（127．10±32．33％VS119．55±43．56％,P〉0．05）。相关分析显示,模型兔Hcy水平升高与ET-1血浆浓度成正相关（r=0．727,P〈0．01）;与NO血清浓度成负相关（r=-0．48,P〈0．05）。模型组ET-1含量升高时,微血管收缩明显,两者呈明显负相关（r=-0．56,P〈0．05）;而NO与ET-1的变化相反,微血管收缩时,NO含量降低,微血管扩张时,NO含量升高,两者呈良好正相关关系（r=0．613,P〈0．05）。结论HHcy兔软脑膜微血管口径变化及白微栓增多与HHcy引起的微血管内皮功能紊乱、ET-1／NO等活性物质的合成与分泌失调有关。     

黏附分子与冠状动脉病变程度的相关性分析

探讨黏附分子与冠状动脉病变程度的关系。分析 88例冠状动脉造影患者临床资料 ,并经ELISA法检测患者循环血中可溶性细胞间黏附分子 1(sICAM 1)、可溶性血管细胞黏附分子 1(sVCAM 1)、P选择素 (P selectin)水平。结果sICAM 1、sVCAM 1和P selectin在冠心病患者循环血中明显增高 ,与病变严重程度有一定关系 ;P selectin在急性冠状动脉综合征患者中 [( 3 8 76± 6 74) μg L) ]明显增高 ,与对照组 [( 19 5 4± 1 72 ) μg L]间有非常显著性差异(P <0 0 1) ;sICAM 1与低密度脂蛋白呈正相关 (r=0 2 71,P <0 0 5 ) ;sVCAM 1与年龄和胆固醇呈正相关 (r =0 2 84,P <0 0 5 ;r=0 3 69,P <0 0 1)。提示循环血中黏附分子水平可反映出动脉粥样硬化病变的炎症反应状态。可作为估计冠状动脉粥样硬化病变严重程度的指标之一     

维持性血液透析尿毒症患者sICAM-1和E-选择素水平的变化

目的 :测定维持性血液透析 (MHD)的尿毒症患者血浆中细胞间黏附分子 1(ICAM 1)和E 选择素的水平 ,探讨MHD患者动脉粥样硬化的病理机制。方法 :应用双抗夹心ELISA法 ,测定 10 5例MHD患者和 2 5例健康人 (对照组 )血浆中ICAM 1和E 选择素的水平 ,同时用B超测定患者颈动脉粥样硬化的情况 ,记录两组的血压并测定其血脂、血糖、血尿素和肌酐的水平。结果 :①MHD组血浆ICAM 1和E 选择素的水平均明显高于对照组 (P <0 .0 1)。MHD组中 ,有颈动脉硬化者血浆I CAM 1和E 选择素的水平明显高于无颈动脉硬化组 (分别为P <0 .0 1和P <0 .0 5)。②MHD组血浆ICAM 1与E 选择素以及与甘油三酯 (TG )均呈显著的正相关 (r值分别为0 .62及 0 .60 )。血浆ICAM 1的水平与舒张压也呈正相关(r=0 .41)。结论 :MHD患者存在明显的血管内皮功能损伤。血浆ICAM 1和E 选择素可作为MHD患者血管内皮损伤的标志物 ,其与MHD患者的动脉粥样硬化密切相关     

大肠癌患者血清可溶性P-选择素和细胞间黏附分子-1的表达及意义

目的 探讨大肠癌患者手术前后血清可溶性P-选择素（sP-selectin）、细胞间黏附分子-1（sICAM-1）的表达及临床意义。方法 采用ELISA检测30例大肠癌患者术前、术后15日、术后30日及20例对照组血清sP—selectin、sICAM-1的表达水平。结果 ①大肠癌患者血清sP—selectin、sICAM-1的表达水平均显著高于对照组，P〈0.05；术后15日下降，仍高于对照组水平，P〈005；术后30日降至对照组水平，P〉0．05；②大肠癌患者血清sP-selectin、sICAM-1的表达水平与淋巴结转移和临床分期相关，P〈0．05，与年龄、性别、肿瘤大小厦组织学分级无明显相关。P〉O．05。结论 sPselectin、slCAM-1参与了大肠癌侵袭转移过程，是反映大肠癌的发生、发展及预后的一个重要指标。     

脓毒症大鼠肺血管内皮细胞、细胞间粘附分子1和E-选择素的变化及其意义

目的:观察脓毒症大鼠肺血管内皮细胞(VEC)、细胞间黏附分子1和E-选择素的变化特点并探讨其意义.方法:60只SD大鼠随机分成对照组和脓毒症组.以脂多糖(LPS)静脉注射制备大鼠脓毒症模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法研究ICAM-1和E-选择素的表达;用Hoechest染色评价肺VEC凋亡;用电子显微镜观察肺VEC.结果:脓毒症组大鼠肺ICAM-1 mRNA和ICAM-1蛋白的表达与对照组比较明显增加(P<0.01),脓毒症组ICAM-1 mRNA和ICAM-1蛋白的表达6小时增高,24小时达到高峰;E-选择素表达6小时达高峰,以后逐渐下降,24小时后降至对照组相同水平.脓毒症组肺VEC随着制模时间的延长,坏死和凋亡显著增加(P<0.01),电子显微镜观察也得到证实.结论:脓毒症大鼠肺ICAM-1和E-选择素的表达明显增加,可能导致肺VEC的坏死和凋亡以及急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的发生.     

切应力和溶血磷脂酰胆碱对内皮细胞表面黏附分子表达的影响

在体内 ,内皮细胞的功能不仅受化学因子的调节 ,而且还受力学因素的影响。为探讨流体切应力和溶血磷脂酰胆碱 ( L ysophosphatidylcholine,L yso- PC)的双重作用对培养的人脐静脉内皮细胞 ( Hum an um bilical veinendothelial cells,HU VECs)表面黏附分子 ICAM- 1、VCAM- 1、E- selectin表达的影响 ,采用流式细胞仪技术检测了L yso- PC( 3 0 μg/m l)和流体切应力 ( 2 .2 3、4.2 0 dyne/cm2 )的协同作用下内皮细胞黏附分子表达的变化。结果显示 :在受剪切作用之前 ,用 L yso- PC孵育激活内皮细胞 ,或预先剪切后再用 L yso- PC孵育 ,内皮细胞的 ICAM- 1和VCAM- 1表达与两种刺激同时作用相比 ,显著增加 ( P<0 .0 5 ) ;切应力或 L yso- PC的单独作用 ,以及两种刺激同时存在对 HU VEC的 E- selectin表达无显著影响。而在受剪切作用之前 ,用 L yso- PC孵育激活内皮细胞 ,或预先剪切后再用 L yso- PC孵育 ,内皮细胞的 E- selectin表达与两种刺激同时作用相比 ,显著增加 ( P<0 .0 5 )。结论认为 :即使在不利于细胞黏附的力学环境中 ,流体切应力与 L yso- PC的协同作用 ,也可能是在炎症部位单核细胞对内皮细胞募集增加的重要原因之一     

细胞间黏附分子-1的研究概况及临床意义

细胞间黏附分子-1( ICAM-1)是一种细胞表面的跨膜糖蛋白,可介导细胞与细胞间或细胞与细胞外基质之间的相互作用.ICAM-1广泛地参与细胞黏附、炎症的发生发展、信号转导和肿瘤转移等多种重要的生理及病理过程.在临床上,ICAM-1可作为多种炎症或肿瘤发展和预后的重要生物标记物之一.以ICAM-1为靶点的药物或能预防和治疗多种急、慢性炎症引起的组织损伤和肿瘤等.     

高同型半胱氨酸血症对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的影响

目的:观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠的影响,探讨HHcy在多发性硬化(MS)中的意义。方法:饮水中添加4%蛋氨酸使C57BL/6鼠具有HHcy,以MOG35-55肽段免疫C57BL/6鼠制备EAE模型,分别产生四组观察对象:普通喂养的正常鼠和EAE鼠(HC组和EAE组),添加蛋氨酸辅食的小鼠和EAE鼠(HC+Hcy组和EAE+Hcy组)。制模后3周内的不同时间段,评估各组小鼠症状,测定血清Hcy水平;3周后比较各EAE组小鼠细胞TNF-α、IFN-γ和IL-17因子水平。结果:EAE和HC组小鼠血清Hcy浓度无显著统计学差异(P>0.05);EAE+Hcy组小鼠临床症状评分和体重减轻均较EAE组严重(P<0.05);EAE+Hcy组小鼠TNF-α和IFN-γ水平显著高于EAE组(P<0.05),而IL-17水平在两组中无显著统计学差异(P>0.05)。结论:EAE疾病过程中Hcy水平无明显升高,但HHcy可加重EAE的临床症状,其机理同Hcy促进TNF-α和IFN-γ细胞因子产生有关,而与IL-17无关。     

缺血后处理改善脑缺血再灌注大鼠软脑膜微循环

目的:研究缺血后处理(I-postC)对脑缺血/再灌注(I/R)大鼠软脑膜微循环的改善作用及其机制。方法:32只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)、I/R、I-postC及缺血预处理(IPC)组,采用颈动脉引流法建立大鼠全脑I/R损伤模型,于实验结束时观测软脑膜微循环和脑表面血流量变化,酶联免疫吸附法测定血浆可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)含量,试剂盒测定脑组织髓过氧化酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,免疫印记法检测脑组织血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和NF-κB p65的表达。结果:(1)I-postC明显改善微循环血流状态,减轻I/R所致的细动静脉收缩和脑表面血流量降低(均P<0.05),且脑组织VE-cadherin量减少程度较I/R组减轻(P＜0.05);(2)与I/R组比较,I-postC组血浆sICAM-1含量、脑组织MPO活性和MDA含量降低(P＜0.05或P＜0.01),SOD活性增高(P＜0.05),且脑组织NF-κB p65表达下调(P＜0.05)。结论:I-postC可改善脑I/R大鼠软脑膜微循环,其机制与抑制ICAM-1介导的中性粒细胞活化有关。     

sICAM—1、sE—selectin水平在肝癌诊疗中的价值

目的：探讨血清细胞间粘附分子－1（sICAM-1),E-选择素（sE-selectin)在肝癌诊疗中的价值。方法：检测健康人，慢性肝炎，肝硬化，肝癌者手术前后，sICAM-1,sE-selectin水平变化。结果：79例名期肝癌者总体sICAM-1,sE-selectin水平明显高于慢性肝炎，肝硬化和健康对照组（P＜0．01），但I期肝癌组与慢性肝炎，肝硬化组比较无显著差异；各期肝癌术后sICAM1-1及Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ期肝癌术后sE-selectin水平均较术前明显下降。结论：提示早期肝癌患者检测血清sICAM-1,sE-selectin无确诊意义，但可作为中，晚期肝癌者特别是AFP阴性患者的血清学确诊参考和预后的监测指标。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者细胞粘附分子水平的研究

目的探讨细胞粘附分子在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症(OS-AHS)发病中的作用。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测30例老年OSAHS患者及30例老年健康对照者血清可溶性细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和E-选择素的含量。结果OSAHS组血清ICAM-1、VCAM-1、E-选择素含量分别为245.22±71.19ng/ml、24.01±4.79ng/ml、和86.58±48.02ng/ml,均明显高于健康对照组(P<0.01),且随OSAHS程度的加重而明显升高。ICAM-1、E-选择素水平与睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)呈明显正相关(P<0.01);I-CAM-1水平与最低血氧饱和度(SaO2min)呈明显负相关(P<0.01)。结论OSAHS患者血清中可溶性粘附分子ICAM-1、VCAM-1和E-选择素水平可作为反映OSAHS严重程度的敏感指标。     

sICAM-1和sVCAM-1与乙肝病毒标志物关系的研究

目的探讨可溶性血管内皮细胞问黏附分子1(sVCAM-1)和可溶性细胞问黏附分子1(sICAM-1)的水平与乙肝病毒标志物之间的关系。方法用ELISA法测定乙肝病毒标志物、sVCAM-1、sICAM-1，用PER法定量测定HBV-DNA的含量。结果HBVM阳性者，除HBsAb阳性者外，其血清sVCAM-1、sICAM-1水平较全阴性者均有较明显的升高，但升高的各组间无明显差异；sICAM-1与ALT呈正相关(r=0．652)，与HBA-DNA呈负相关(r=-0．498)；sVCAM-1与ALT、HBV-DNA的相关系数r分别为0．191、-0．027。结论1、乙肝病毒感染者血清sVCAM-1、sICAM-1有明显的升高，各组间无明显差异。2、sICAM-1的水平可以反应肝脏的损害程度和HBV-DNA的复制情况。     

高同型半胱氨酸血症与脑梗死患者血液流变性变化的相关分析

目的:分析高同型半胱氨酸(HCY)血症与脑梗死患者血液流变性变化的相关性。方法:测定40例不同性别健康人(健康对照组)、42例正常HCY脑梗死患者(正常Hcy组)和50例高HCY脑梗死(高HCY组)患者血液流变学指标:全血低切粘度(ηbL)和高切粘度(ηbH)、血浆粘度(ηp)、红细胞压积(Hct)、血沉(ESR)、纤维蛋白原(Fib)、红细胞变形指数(TK)、红细胞聚集系数(AI),分析HCY水平与血液流变学指标的相关性。结果:高HCY血症组男女性ηp、ηbL、ηbH、AI、TK、Fib及ESR与健康对照组和正常HCY组比较有显著性差异(P<0.01);高HCY水平与脑梗死患者血液流变指标异常明显正相关。结论:高HCY血症是脑梗死患者血液流变性异常的重要影响因素。     

氟伐他汀对缺血再灌注损伤兔心肌细胞间粘附分子的影响

目的:探讨氟伐他汀短期预处理对缺血再灌注损伤兔心肌的保护作用及其机制。方法:日本大耳白兔21只随机分为3组:①假手术对照组(Sham组),②缺血再灌注组(IR组),③氟伐他汀干预组(F组)。实验中持续监测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LWEDP)、左室内收缩压最大上升速率和下降速率(±dp/dtmax)的变化,再灌注结束后用伊文氏蓝和TTC染色法确定缺血和梗死心肌范围,用RT-PCR进行心肌局部ICAM-1 mRNA表达测定。结果:缺血再灌注后,F组上述心功能各项指标较IR组明显改善,心肌组织ICAM-1 mRNA水平较IR组显著降低;心肌梗死面积较IR组明显减小。结论:氟伐他汀短期预处理可降低心肌缺血再灌注后心肌ICAM-1 mRNA表达,降低心肌梗死程度,改善心功能,对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

NF-κB及ICAM-1在脑出血大鼠及过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞中的表达

目的： 探讨脑出血后炎症反应机制及核因子-κB(NF-κB)与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)间表达的关系。方法： 建立大鼠脑出血模型及过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞的模型，分别采用免疫组化、原位杂交、免疫细胞化学及Western blotting方法观察NF-κB和ICAM-1的表达。结果： 大鼠脑出血后NF-κB 及ICAM-1表达均增强，ICAM-1的表达高峰（1 d）先于NF-κB（4 d），但在体外实验中，过氧化氢损伤后即刻大鼠脑微血管内皮细胞中NF-κB表达即增加，2 h后ICAM-1表达也上调，NF-κB的抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC)可下调NF-κB及ICAM-1表达。结论: 在活性氧损伤中NF-κB作为ICAM-1的活化因子，可上调ICAM-1表达，但在脑出血这一复杂的病理生理变化中，尚有其它因素参与对NF-κB 及ICAM-1表达的调控。     

蛛网膜下腔出血后基底动脉细胞间粘附分子-1的表达

目的：探讨蛛网膜下腔出血（SAH）后迟发性脑血管痉挛的病理过程中细胞间粘附分子－1（ICAM－1）与其发生时相间的关系。方法：采用49只雄性SD大鼠，随机分为实验组和对照组，实验组按存活时间分为6组，采用经额钻孔、注血的方法制作SAH动物模型。切取基底动脉，分别行HE染色和ICAM－1免疫组化染色，进行体视学图像分析。结果：病理切片经图像分析，在SAH后1h和48h管腔面积显缩小（P＜0．001），48h后基底动脉壁发生明显病理形态学变化。SAH后3h血管内皮细胞ICAM－1表达逐渐增强，48h后达到高峰。结论：SAH后可引发急性脑血管痉挛和迟发性脑血管痉挛。ICAM－1参与的炎症反应在SAH后迟发性脑血管痉挛的形成和发展过程中发挥关键性作用。     

Leukocyte Rolling in Rat Mesentery Venules: Distribution of Adhesion Bonds and the Effects of Cytoactive Agents

A new method of analyzing in vivo measurements of leukocyte WBC rolling along venular endothelium (EC) has been developed to extract insightful information on the dynamics of WBC–EC bond formation and disruption. The rolling velocity of WBCs was obtained by intravital microscopy of rat mesenteric venules. For the spontaneous rolling observed following exteriorization of the mesentery, we estimated that the average distance between clusters of adhesion bonds which tether a rolling cell to the venular wall was about 2 m, and that the average lifetime of a bond cluster at the trailing edge of the rolling cell, from its exposure to the tensile force to its release, was on the order of 0.05 s. Both the inter-cluster distance and the lifetime were significantly reduced by treatments with the chemoattractant N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine and the cytokine interleukin-1, while the average lifetime of the stretched bond clusters was not significantly changed by treatment with the cytoskeleton-modifying agents cytochalasin B and colchicine. Each of the four treatments significantly reduced the heterogeneity in the cell rolling velocity, presumably by the selective recruitment of WBC subsets from the circulating WBC population or by a reduction in the heterogeneity of endothelial adhesiveness. These results were analyzed in the context of in vitro data in the literature on molecular bonds of cell adhesion. The findings suggest that, in the case of spontaneous rolling, there are on average approximately 2–3 clusters of adhesion bonds between a rolling cell and the vessel wall, and approximately five bonds in each cluster. © 2001 Biomedical Engineering Society. PAC01: 8719Uv, 8717-d, 8714Ee, 8715By     

急性脑缺血白细胞与内皮细胞粘附性变化的实验研究

为探讨脑缺血再灌注损伤时局灶区白细胞的粘附变化,通过免疫荧光标记技术和显微超高速摄录像系统观察脑缺血再灌注损伤局灶区白细胞的粘附性,结果显示脑缺血再灌注损伤局灶区微动脉白细胞附壁指数升高,白细胞与内皮细胞间断裂应力降低,粘附力显著增强。上述结果表明脑缺血再灌注损伤时内皮细胞和白细胞粘附性显著增强,白细胞在脑缺血再灌注损伤中起重要作用。     

Inhibition of endothelial cell adhesion molecule expression with SJC13, an azaindolidine derivative,in vitro

Stimulation of cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) with lipopolysaccharide (LPS) induces adherences for human promyelocytic cell line HL60. Adherence of HL60 cells to HUVEC stimulated with LPS for 4h was completely inhibited by pretreatment with SJC13, an azaindolidine derivative. The mechanism whereby SJC13 inhibits the adhesiveness of HUVEC was investigated. Pretreatment of SJC13 inhibited LPS-induced expression of E-selectin and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), but not intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), in HUVEC, determined by flow cytometry and cellular enzyme-linked immunosorbent assay (cell-ELISA). The inhibitory activity was concentration dependent between 62.5 and 1,000 g/ml. SJC13 also selectively inhibited LPS-induced increases in E-selectin and VACM-1 mRNAs, indicating that the action of SJC13 is to inhibit synthesis of these molecules. These data demonstrate that SJC13 is capable of selectively inhibiting the expression of E-selectin and VCAM-1, but not ICAM-1, in endothelial cells.accepted by I. Ahnfelt-Rønne