三种方法在梅毒螺旋体血清学检测中的评价

甲苯胺红不加热血清学试验 (ＴＲＵＳＴ)是实验室梅毒血清学检测的常规方法 ,由于其采用的是非特异性血清学试验 ,肉眼判断结果 ,因而敏感性及特异性较差 ,容易出现漏检。但其操作简单、快速 ,因而临床仍然采用ＴＲＵＳＴ法为常规使用方法。ＴＰ -ＥＬＩＳＡ法具有操作简便、灵敏度高且特异性强 ,易于自动化操作及资料结果的保存。我们对甲苯胺红不加热血清学试验 (ＴＲＵＳＴ)和梅毒螺旋体酶联免疫试验 (ＷＰ -ＥＬＩＳＡ)二种方法进行比较 ,现将实验比较结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　经临床及ＴＰ -ＰＡ方法确诊为梅毒 ;患…     

梅毒螺旋体血清学检测方法的临床评价

目的比较几种梅毒螺旋体血清学检测方法。方法对我站2005年1月～2006年1月的门诊梅毒患者血清，采用甲苯胺红不加热血清反应素试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验、蛋白印迹试验检测IgM。结果WB检测IgM对早期梅毒的诊断有统计学意义。结论梅毒螺旋体特异性IgM抗体检测灵敏度高、特异性强，适用于未经治疗的各个时期的梅毒诊断。WB检测IgM简便易行，是筛查和检测早期梅毒的首选方法。     

梅毒螺旋体血清学检测方法比较

梅毒血清学试验是目前诊断梅毒的主要实验室检查方法,但目前存在多种方法,因此,分析各种方法在临床上的应用价值、确定适合临床的最佳方法很有必要。本文用SYP（胶体金试纸条法）ELISA（酶联免疫试验）、TRUST（甲苯胺红不加热血清实验）3种方法对梅毒患者的标本进行检测,并对检测结果及各种方法优缺点进行比较,为临床疑似梅毒和术前检查梅毒的诊断方法提供参考。1材料和方法1.1标本来源120份标本均来自我院皮肤性病科、创伤科及市防疫站已确诊的梅毒患者。     

梅毒螺旋体血清学检测方法的临床评价

目的 比较几种梅毒螺旋体血清学检测方法.方法 对我站2005年1月～2006年1月的门诊梅毒患者血清,采用甲苯胺红不加热血清反应素试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验、蛋白印迹试验检测IgM.结果 WB检测IgM对早期梅毒的诊断有统计学意义.结论 梅毒螺旋体特异性IgM抗体检测灵敏度高、特异性强,适用于未经治疗的各个时期的梅毒诊断.WB检测IgM简便易行,是筛查和检测早期梅毒的首选方法.     

梅毒血清学检测方法应用近况

近年来,梅毒在中国发病率居高不下。梅毒检测成为许多服务行业、义务献血者等群体体检的必检项目之一,也是现症病人诊断及疗效观察的重要手段。目前实验室梅毒血清学检测方法主要有:性病研究实验室试验(VDRL)、不加热血清反应素试验(USR)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、19S-IgM梅毒螺旋体血球凝集试验(19S-IgM-TPHA)、19S-IgM梅毒螺旋体明胶凝集试验(19S-IgM-TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。不同检测方法的检测结果对不同时期梅毒的诊断具有不同的意义。     

两种检测梅毒螺旋体血清试验的比较

用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒微粒凝集试验(TPPA)同时检测50例梅毒疑似血清，并对两种方法进行比较。TRUST和TPPA试验的敏感性符合率达到84％，但TRUST特异性差。非梅毒螺旋体抗原血清试验可作为梅毒患者的疗效观察(定量试验)；梅毒螺旋体抗原血清试验作为确诊试验很重要。     

梅毒螺旋体血清学几种检测方法的比较

目的探讨几种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA),胶体金快速检测试验(SYP)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)分别检测一定时间段内的735份标本,其中31例为确诊感染病例。结果对735份标本进行SYP初筛后,21份显示弱阳性;对21份弱阳性标本行TPPA法检测,3份滴度低于1∶80,余均显示阴性;ELISA法检测结果与TPPA法相同。31份阳性标本用TRUST法复核,临床无症状者的20份标本多呈弱阳性,有明显临床症状者的标本均呈强阳性。结论临床可用SYP法做为初筛试验,ELISA和TPPA法做为确认诊断试验。     

梅毒螺旋体血清学检测技术的研究进展

梅毒是由苍白螺旋体（treponema pallidum,TP）感染引起的一种慢性全身性性传播疾病,其临床表现复杂、多样。近年来,梅毒的流行不但没有得到控制,其流行趋势更加严峻,据世界卫生组织报道每年大约有1200万新增梅毒患者,其中发展中国家占90％以上。梅毒患者的早诊断、早治疗对控制其蔓延至关重要。梅毒的诊断必须依靠病史、症状及实验室检查结果进行综合分析,梅毒的实验室检查结果对诊断具有决定性作用,其中血清学抗体检查起着重要作用。     

梅毒血清学试验几种检测方法比较

梅毒是由苍白密螺旋体引起的一种性传播疾病,具有较强的传染性,梅毒螺旋体对人体的黏膜及皮肤有很强的亲和性,可以引起全身各组织和脏器的损害,近几年在我国梅毒发病率呈逐年上升的趋势。因此,选择简单、快速、准确的方法和试剂为临床提供准确、及时的依据显得尤为重要。目前梅毒的检测多采用血清学试验。     

梅毒螺旋体血清学检验研究进展

目前梅毒螺旋体检测的主流方法是基于螺旋体和非螺旋体血清学检测。近年来,随着检验技术的发展,检测梅毒的方法也有了新的进展：利用特异性梅毒抗原的快速检验法、酶联免疫法和化学发光法等检测方法,这些新的方法利用野生或重组的T.pallidum抗原来检测IgM和IgG,具有较好的选择性和特异性。但在确认感染时还需要非螺旋体血清学检测方法的验证,因此在检测梅毒螺旋体时需要合理的运用这些方法。     

三种梅毒螺旋体检测方法的临床评价

目的:探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法:应用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST),酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)分别检测596份标本,其中57例确诊为梅毒感染。结果:ELLSA法与TPPA法检测结果之间无显著性差异(P>0.05),二者敏感性和特异性分别为94.7%,98.1%和91.2%,97.2%;TRWST与ELISA法、TPPA法之间有显著性差异(P<0.05)。结论:ELISA法和TPPA法在临床的诊断中是较好的血清梅毒螺旋体的检测方法。     

RpN47重组抗原的表达及其产物反应原性的初步鉴定

目的探讨梅毒螺旋体外膜蛋白（TpN47）重组抗原及其临床意义。方法采用PCR技术扩增TpN47重组抗原,再进行T-A克隆及测序,然后亚克隆至原核表达载体中,以亲和层析法纯化重组蛋白。将重组蛋白作为抗原制备酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒,对正常人血清200份、类风湿性关节炎（RA）阳性血清55份、系统性红斑狼疮（SLE）阳性血清34份及梅毒可疑患者阳性血清135份进行检测,其结果与梅毒血凝试验（TPHA）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）的检测结果进行比较。结果成功地构建了pET32-TpN47重组表达载体,重组的TpN47蛋白在大肠杆菌BL21中得到稳定表达。对梅毒可疑阳性血清采用ELISA、TPHA、TRUST检出阳性率分别为81.48%、98.52%、71.11%;TRUST测出的8份可疑阳性样品及31份阴性样品TPHA检测结果均为阳性,而ELISA检测结果阳性19份。ELISA检测阳性率与TRUST和TPHA比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论TpN47重组抗原具有较好的免疫反应活性,ELISA试剂特异性、敏感性次于TPHA,但明显高于TRUST。     

梅毒螺旋体比较基因组学研究进展

梅毒螺旋体(Tp)是一种可以引起慢性和持续性梅毒感染的病原体。比较基因组学通过对不同个体基因组数据进行比较分析,揭示不同个体之间的相似性和差异性。本文通过比较Tp不同菌株以及Tp和其他致病性螺旋体之间的基因组数据,探讨Tp的致病机制。     

梅毒螺旋体检测方法的临床评价

目的 探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值.方法 应用快速血浆反应素试验(RPR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)分别检测602份标本,其中61例确诊为梅毒感染.荧光定量PCR(FQ-PCR)方法对RPR阳性标本进行检测.结果 ELISA法与TPPA法检测结果之间无显著性差异(P＞0.05),二者敏感性和特异性分别为95.1%、97.8%和91.8%、96.9%;RPR与ELISA法、TPPA法之间有显著性差异(P＜0.05);FQ-PCR法检测结果均为阴性.结论 ELISA法和TPPA法是较好的血清梅毒螺旋体的检测方法.FQ-PCR法检测的阳性率低.     

梅毒螺旋体抗体三种检测方法的价值比较

目的比较三种血清梅毒螺旋体抗体（TPHA）检测方法,优选一种简便、准确的TPHA检测方法。方法采用临床上常用的胶体金法、酶联免疫吸附试验法（ELISA法）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA法）对400例标本进行TPHA检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA法检测TPHA的阳性率、灵敏度和特异度分别为74.50%、99.67%和100%;胶体金法的阳性率、灵敏度和特异度分别为41.25%、55.18%和100%;ELISA法的阳性率、灵敏度和特异度分别为60.25%、80.60%和93.46%。CMIA法检测阳性率和敏感性明显高于ELISA法和胶体金法（P〈0.05）,而特异性高于ELISA法（P〈0.05）。结论CMIA法检测TPHA特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。     

梅毒螺旋体溶血素生物信息学分析

目的本研究旨在对梅毒螺旋体(Tp)的5种溶血素进行进一步的生物信息学分析,为后续研究溶血素家族蛋白在Tp致病过程中的致病机制提供依据。 方法通过使用NCBI、BLAST、CDD、BioEdit、ExPASy、SignalP、TMHMM、MEGA、PSORTb 3.0、ABCpred等生物信息学分析方法分析梅毒螺旋体溶血素家族蛋白的一般性质、信号肽、糖基化、磷酸化位点、亚细胞位置、二级结构、功能结构域及抗原表位。 结果预测了Tp中5个溶血素家族蛋白一般性质,Tp1037功能结构域不同于其余4种,Tp0028含有1个信号肽,Tp0027含有1个糖基化位点,Tp0027和Tp1037有多个跨膜结构域,5个溶血素家族蛋白均含有多个磷酸化位点和B细胞、T细胞表位。 结论Tp含有5个溶血素家族蛋白基因,提示Tp入侵宿主时这些基因产物极有可能通过其膜成孔毒性损伤靶细胞,从而致病。     

巢式PCR检测梅毒螺旋体DNA方法研究

目的建立一种血清梅毒螺旋体DNA提取及PCR鉴定方法。方法基于化学热裂解法和柱式核酸提取原理进行血清梅毒螺旋体DNA提取。根据文献筛选优化引物建立巢式PCR检测体系,并对实验方法的特异性、抗干扰性、检测梯度进行评价。结果建立的实验方法特异性好、抗干扰性强,对TRUST为1：8以上的标本检测全部为阳性。结论提取梅毒螺旋体DNA及PCR鉴定有助于梅毒的快速诊断,对于血液中梅毒螺旋体增殖能力判断具有重大潜在应用价值。     

梅毒螺旋体血清学调查结果分析

目的了解本地区梅毒感染的流行病学情况,并对TRUST、TP-ELISA和TPPA三种检测梅毒螺旋体的方法进行临床应用评价,为预防和控制梅毒蔓延提供科学依据。方法对2006年1月～2008年12月前来本院就诊的5000份患者血清标本进行TRUST、TP-ELISA或TPPA梅毒螺旋体血清学检测,并结合流行病学史及临床表现,进行梅毒流行病学调查。随机抽取上述梅毒阳性患者血清样本120份与健康体检者血清样品130份,对每份标本同时进行TRUST、TP-ELISA和TPPA检测,评价其敏感性和特异性。结果2006～2008年度梅毒阳性率分别为2.9%,4.3%和7.7%;一期梅毒分别为57.9%、71.9%和62.3%,二期梅毒分别为32.6%、23.4%和30.3%,三期梅毒分别为1.8%、1.5%和2.0%,隐性梅毒分别为7.7%、3.2%和5.4%;梅毒患者中女性多于男性,男女比例为0.68:1,年龄分布主要在青壮年,文化程度主要以低素质为主,职业分布以服务业和打工者为主。TRUST、TP-ELISA和TPPA的敏感性分别为73.6%、89.5%和63.5%,特异性分别为89.4%、96.0%和100%。结论梅毒感染呈逐年上升趋势,防治措施亟待进一步加强。3种方法中TP-ELISA法敏感性最高,TPPA特异性最高。ELISA方法存在假阳性和假阴性结果,对于ELISA阳性的标本和在灰区的标本应做TPPA进行确认。而TRUST主要在判断患者病情和疗效方面有重要价值。     

三种方法联合检测避免梅毒诊断的假阳性结果

目的探讨用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）联合梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）的方法避免TP-ELISA法筛查梅毒抗体的假阳性结果。方法用TP-ELISA法作为临床标本的梅毒筛查实验,对阳性标本进一步作TRUST和TPPA检测。结果 TP-ELlSA法检出114例梅毒阳性标本,TPPA确证阳性111例,阳性符合率为97.36%（111/114）;其中27例TRUST阳性,TPPA确证试验均为阳性,阳性符合率为100%;97例TRUST阴性,TPPA确证阳性94例,阴性3例,不符合率为2.64%。结论 TP-ELISA法筛查梅毒存在一定比例的假阳性结果,对TP-ELlSA法测出的阳性标本先做TRUST试验,再用TPPA确证,阳性结果报告梅毒抗体阳性,阴性结果报告梅毒抗体阴性,这样能有效避免单一TP-ELISA法的假阳性结果。     

梅毒螺旋体青霉素结合蛋白的克隆及表达

目的体外克隆并表达梅毒螺旋体青霉素结合蛋白，为制备预防性疫苗奠定基础。方法利用PCR反应及基因重组技术，扩增重编码青霉素结合蛋白的基因，构建重组质粒pETJKM／TpN47，IPTG诱导表达。结果PCR法扩增出了1350bp的目的片段，原核表达质粒pETJKM／TpN47酶切鉴定正确，测序结果与Gengbank上公布的基因序列完全一致，并可在大肠杆菌中高效表达。结论成功构建了人pETJKM／TpN47原核表达载体，高效表达了青霉素结合蛋白，为梅毒的预防性疫苗的制备以及进一步研究其血清学诊断试剂奠定了基础。