阿托伐他汀对动脉粥样硬化兔氧化应激/炎症反应的影响

目的通过研究氧化应激和炎症反应探讨阿托伐他汀治疗动脉粥样硬化的非调脂作用机制。方法以高脂饲料和免疫刺激方法制备动脉粥样硬化家兔模型,给予0.435 mg/(kg.d)阿托伐他汀混悬液治疗1个月,观察家兔血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛和氧化型低密度脂蛋白含量以及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、主动脉血管细胞黏附分子1、细胞间黏附分子1、单核细胞趋化蛋白1基因和蛋白表达的变化。结果与正常对照组比较,动脉粥样硬化模型组家兔血清超氧化物歧化酶活性显著下降(P<0.01),血清丙二醛、氧化型低密度脂蛋白含量明显升高(P<0.01);主动脉血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、血管细胞黏附分子1、细胞间黏附分子1、单核细胞趋化蛋白1的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,阿托伐他汀组家兔血清超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.01),血清丙二醛、氧化型低密度脂蛋白含量均显著下降(P<0.01),主动脉血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1、血管细胞黏附分子1、细胞间黏附分子1、单核细胞趋化蛋白1的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论阿托伐他汀具有抗氧化应激和炎症反应的作...     

白细胞介素10对血管内皮细胞E选择素和血凝素样低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的研究白细胞介素10对人血管内皮细胞表面黏附分子E选择素、细胞间黏附分子1及血凝素样低密度脂蛋白受体1表达的影响,探讨白细胞介素10抗动脉粥样硬化可能的机制。方法将人脐静脉内皮细胞随机分为四组进行不同处理24 h:即空白对照组、氧化型低密度脂蛋白组、白细胞介素10组和白细胞介素10与氧化型低密度脂蛋白联合刺激组。采用流式细胞术检测细胞表面黏附分子E选择素和细胞间黏附分子1表达的变化;采用实时定量PCR和Western Blotting分别检测血凝素样低密度脂蛋白受体1的mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组比较,细胞经氧化型低密度脂蛋白刺激24 h后,其表面的黏附分子E选择素表达量显著增加了20%,血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达量也显著增加了25%,而同时加入白细胞介素10联合刺激组E选择素和血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达量与氧化型低密度脂蛋白组比较均出现显著下降(分别为20%和40%),回到基线水平。而单独使用白细胞介素10对E选择素及血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达没有影响;本实验未能检测到氧化型低密度脂蛋白对细胞间黏附分子1表达的影响。结论抗炎因子白细胞介素10能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑...     

阿托伐他汀通过过氧化体增殖物激活型受体γ促进一氧化氮生成抑制炎性因子产生

目的 观察阿托伐他汀是否能通过激活人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ从而改善血管内皮功能.方法 将体外培养的人脐静脉内皮细胞的实验分为两部分,实验一分组:①对照组;②脂多糖组(1.0 mg/L);③阿托伐他汀1.0 mmol/L组;④脂多糖+阿托伐他汀1.0 mmol/L组;⑤脂多糖+阿托伐他汀5.0mmol/L组,经孵育24 h后,收集细胞和培养上清液,用RT-PCB方法测定不同浓度阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ表达的影响,并用硝酸还原酶法测定不同浓度阿托伐他汀干预对脂多糖诱导后细胞培养上清液中的一氧化氮生成的影响,ELISA方法测定细胞培养上清液中人可溶性细胞间黏附分子含量的影响.实验二分组:①对照组;②阿托伐他汀5.0 mmol/L组;③0.2 mmol/L GW9662组;④脂多糖+阿托伐他汀5.0mmol/L组;⑤GW9662+脂多糖+阿托伐他汀5.0 mmol/L组,观察过氧化体增殖物激活型受体γ特异性阻断剂GW9662对阿托伐他汀与脂多糖共同作用后人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ表达及培养上清液中一氧化氮、人可溶性细胞问黏附分子1含量变化的影响.结果 不同浓度阿托伐他汀可上调人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ表达,且随着药物浓度的增加其上调受体表达的作用增强.不同浓度阿托伐他汀可干预脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞液中一氧化氮生成减少及人可溶性细胞间黏附分子1含量的增加,且随着药物浓度的增加上述作用增强.过氧化体增殖物激活型受体γ特异性阻断剂GW9662可部分阻断阿托伐他汀上述作用.结论 阿托伐他汀可能部分通过激活人脐静脉内皮细胞的过氧体增殖物激活型受体γ受体,促进一氧化氮生成,抑制炎性因子的产生,改善血管内皮功能.     

3种中药复方血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症因子

目的　研究四君子汤、血府逐瘀汤、补阳还五汤等3种中药复方血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）及细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响,探讨相关中药复方防治动脉粥样硬化的机制。方法　应用药物血清学方法制备四君子汤、血府逐瘀汤、补阳还五汤含药血清及正常空白血清,以供细胞实验使用。体外培养HUVEC,随机分为6组,即空白对照组、模型组、阿托伐他汀组、四君子汤组、血府逐瘀汤组、补阳还五汤组,用脂多糖刺激2　h后,分别加入阿托伐他汀和中药复方血清干预,24　h后收集细胞,用荧光定量PCR和Western　blot测定LOX-1、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达。结果　用脂多糖刺激HUVEC后,引起LOX-1、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01）,分别以血府逐瘀汤、补阳还五汤含药血清及阿托伐他汀干预后可显著抑制LOX-1、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达（P<0.05）,而四君子汤含药血清则未见显著影响（P>0.05）。结论　血府逐瘀汤、补阳还五汤可抑制LOX-1、TNF-α、VCAM-1及ICAM-1等炎症因子的表达,这可能是这两种中药复方防治动脉粥样硬化作用的机制之一。而四君子汤未见此作用。     

黄芩苷对脂多糖诱导的巨噬细胞Toll样受体4表达的影响

目的 研究黄芩苷对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞Toll样受体4和其下游信号分子抑制蛋白kB以及效应分子肿瘤坏死因子α表达的影响.方法 分别用脂多糖(终浓度1 mg/L)或脂多糖+黄芩苷(终浓度10、50和100 μmol/L)处理生长良好的小鼠巨噬细胞RAW264.7,逆转录聚合酶链反应和Western Blot检测细胞Toll样受体4表达情况和抑制蛋白kB含量变化,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α的浓度.结果 脂多糖刺激RAW264.7细胞可导致Toll样受体4表达增高,促进抑制蛋白kB降解,上调肿瘤坏死因子α表达;黄芩苷预处理能降低脂多糖诱导的Toll样受体4表达增高,降低抑制蛋白kB降解,下调肿瘤坏死因子α分泌.结论 黄芩苷可通过抑制Toll样受体4表达和降低抑制蛋白kB降解,影响Toll样受体4/抑制蛋白kB-核因子kB炎症信号途径,阻碍炎症因子肿瘤坏死因子α的生成,发挥抗炎作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一.     

3种中药复方血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症因子LOX-1、TNF-α、VCAM-1和ICAM-1表达的影响

目的研究四君子汤、血府逐瘀汤、补阳还五汤等3种中药复方血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,探讨相关中药复方防治动脉粥样硬化的机制。方法应用药物血清学方法制备四君子汤、血府逐瘀汤、补阳还五汤含药血清及正常空白血清,以供细胞实验使用。体外培养HUVEC,随机分为6组,即空白对照组、模型组、阿托伐他汀组、四君子汤组、血府逐瘀汤组、补阳还五汤组,用脂多糖刺激2h后,分别加入阿托伐他汀和中药复方血清干预,24 h后收集细胞,用荧光定量PCR和Western blot测定LOX-1、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1的m RNA和蛋白表达。结果用脂多糖刺激HUVEC后,引起LOX-1、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1的m RNA和蛋白表达显著升高(P0.01),分别以血府逐瘀汤、补阳还五汤含药血清及阿托伐他汀干预后可显著抑制LOX-1、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1的m RNA和蛋白表达(P0.05),而四君子汤含药血清则未见显著影响(P0.05)。结论血府逐瘀汤、补阳还五汤可抑制LOX-1、TNF-α、VCAM-1及ICAM-1等炎症因子的表达,这可能是这两种中药复方防治动脉粥样硬化作用的机制之一。而四君子汤未见此作用。     

血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1在人脐静脉内皮细胞表达CD40中的作用

目的研究氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞表达CD40中血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1的作用。方法在氧化低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞前预先用血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1阻断剂角叉(菜)胶(κ-carrageenan)和多聚肌苷酸(PIA)作用1h,应用亲合组织化学技术检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1的表达,流式细胞技术检测细胞表面CD40的表达。结果预先加入血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1阻断剂PIA和角叉(菜)胶的CD40的表达低于氧化低密度脂蛋白组(P<0.05)。结论在人脐静脉内皮细胞的炎症反应中,氧化低密度脂蛋白通过血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1途径激活了CD40的表达。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）是内皮细胞摄取氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的特异性受体。高脂血症、氧化应激等多种因素可以促进LOX-1的表达。LOX-1表达通过诱导各种黏附分子和炎症因子的表达、激活蛋白激酶、诱导细胞凋亡等途径促进平滑肌细胞和巨噬细胞吞噬脂质,并转化为泡沫细胞,促进动脉粥样硬化斑块的形成。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)是内皮细胞摄取氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的特异性受体.高脂血症、氧化应激等多种因素可以促进LOX-1的表达.LOX-1表达通过诱导各种黏附分子和炎症因子的表达、激活蛋白激酶、诱导细胞凋亡等途径促进平滑肌细胞和巨噬细胞吞噬脂质,并转化为泡沫细胞,促进动脉粥样硬化斑块的形成.     

同型半胱氨酸对血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 mRNA表达及氧化型低密度脂蛋白摄取的影响

为了研究同型半胱氨酸对血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA表达及对氧化型低密度脂蛋白摄取的影响，分别在培养的人脐静脉内皮细胞中加入不同浓度的同型半胱氨酸孵育48h后，利用逆转录-聚合酶链反应检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA表达的改变；采用放射配基法检测细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取。结果发现，随着同型半胱氨酸浓度的增加。提示同型半胱氨酸能促进脐静脉血管内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA的表达和对氧化型低密度脂蛋白的摄取，此效应可能与同型半胱氨酸致动脉粥样硬化作用有关。     

异常血流动力对TLR4/NF-κB信号传导通路及其下游炎症因子的影响

目的研究异常血流应力或压力单独作用对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/NF-κB信号传导通路及下游炎症因子:血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)等的影响,探讨异常血流动力导致动脉粥样硬化的机制。方法将生长良好的HUVECs以1×105个/ml密度接种于细胞综合应力刺激实验系统(型号BIO-CCS13)中进行干预。将HUVECs按所受的应力不同分成应力组、压力组和正常组。在各组应力作用下培养一天后收集细胞备用,用q PCR方法测定TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(tumor necrosis factor receptor-associated factor-6,TRAF-6)、血凝素样氧化低密度酯蛋白受体-1(LOX-1)、核因子-κB(NF-κB)、TNF-α、ICAM-1及VCAM-1因子的基因表达,用蛋白质印迹方法测定TLR4、NF-κB、LOX-1、TNF-α、ICAM-1及VCAM-1因子的蛋白表达。结果与正常组比较,应力组和压力组TLR4、My D88、TRAF-6、LOX-1、NF-κB、TNF-α、ICAM-1及VCAM-1m RNA表达水平显著升高(P0.01),TLR4、LOX-1、NF-κB、TNF-α、ICAM-1及VCAM-1蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论异常血流动力导致动脉粥样硬化的机制可能与激活TLR4/NF-κB信号传导通路和增强下游炎症因子:LOX-1、TNF-α、ICAM-1及VCAM-1等的表达有关。     

萝卜硫素对慢阻肺患者TLR4、MyD88以及下游炎性因子的影响分析

目的探讨萝卜硫素对慢性阻塞性肺病(简称:慢阻肺)患者Toll样受体(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)及炎性因子的影响作用。方法选取40例稳定期慢阻肺患者作为病例组,同期健康体检者40例作为健康组,采集患者外周静脉血,分离单核细胞,诱导形成单核细胞源性巨噬细胞(MDM),将MDM分为脂多糖、萝卜硫素、萝卜硫素+脂多糖、及不处理(空白组)。健康组不给予任何处理措施,采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测TLR4 mRNA、My D88 mRNA,免疫荧光染色法检测TLR4、My D88蛋白,采用ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、白细胞介素-6(IL-6)。结果慢阻肺患者的TLR4 mRNA、My D88 mRN、蛋白表达到水平显著高于健康组(P0.05),不同处理方式下慢阻肺患者TLR4 mRNA、My D88 mRNA、蛋白表达水平组间比较为脂多糖组空白组萝卜硫素+脂多糖萝卜硫素组且差异均具有统计学意义(P0.05)。慢阻肺患者的TNF-ɑ、IL-6表达水平显著的高于健康组(P0.05),不同处理方式下慢阻肺患者TNF-ɑ、IL-6表达水平组间比较结果为脂多糖组空白组萝卜硫素+脂多糖萝卜硫素组且差异均具有统计学意义(P0.05)。结论慢阻肺患者的外周血巨噬细胞Toll样受体(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)高表达,萝卜硫素可以降低TLR4、My D88、高表达,从而减轻慢阻肺患者的炎症反应。     

Toll样受体4/核因子κB和氧化低密度脂蛋白受体LOX-1对单核内皮细胞黏附的影响

目的近年研究表明介导先天免疫反应的受体Toll样受体4（TLR4）参与动脉粥样硬化的发生发展。TLR4激动后通过诱导核因子κB（NF—κB）激活,调控炎症因子的表达。研究观察TLR4／NF—κB激活对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化低密度脂蛋白受体（lectin—like oxidized lowdensity lipoprotein receptor-1,LOX-1）、细胞间黏附分子1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）、E-选择素（E—selectin）表达的调节,以及它们在介导单核内皮细胞黏附中的作用。方法应用脂多糖（LPS,1mg／L）刺激HUVECs 24h。采用RT—PCR方法检测TLR4、LOX-1、ICAM-1、E—selecfin mRNA表达水平;采用蛋白质印迹技术检测TLR4、LOX-1蛋白表达水平及核蛋白NF—κB p65表达的变化;采用直接计数法观察HUVECs与单核细胞的黏附率。结果LPS上调TLR4表达,激活NF—κB,上调HUVECs LOX-1、ICAM-1、E—selectin表达,增加单核细胞与内皮细胞的黏附率;抗LOX-1、ICAM-1、E—selectin抗体均部分抑制LPS介导的单核与内皮细胞黏附率的增加;NF—κB抑制剂一咖啡酸苯乙酯（CAPE）抑制了LPS介导的上述效应。结论TLR4／NF—κB激活上调LOX-1、ICAM-1、E—selectin表达,它们均在LPS介导的单核内皮细胞黏附过程中起部分作用,NF—κB在LPS介导的上述效应中起关键调节作用,干预NF—κB激活可能成为防治动脉粥样硬化的靶目标。     

Melatonin modulates TLR4‐mediated inflammatory genes through MyD88‐ and TRIF‐dependent signaling pathways in lipopolysaccharide‐stimulated RAW264.7 cells

Abstract: Increasing evidence demonstrates that melatonin has an anti‐inflammatory effect. Nevertheless, the molecular mechanisms remain obscure. In this study, we investigated the effect of melatonin on toll‐like receptor 4 (TLR4)‐mediated molecule myeloid differentiation factor 88 (MyD88)‐dependent and TRIF‐dependent signaling pathways in lipopolysaccharide (LPS)‐stimulated macrophages. RAW264.7 cells were incubated with LPS (2.0 μg/mL) in the absence or presence of melatonin (10, 100, 1000 μm ). As expected, melatonin inhibited TLR4‐mediated tumor necrosis factor alpha (TNF‐α), interleukin (IL)‐1β, IL‐6, IL‐8, and IL‐10 in LPS‐stimulated macrophages. In addition, melatonin significantly attenuated LPS‐induced upregulation of cyclooxygenase (COX)‐2 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in macrophages. Further analysis showed that melatonin inhibited the expression of MyD88 in LPS‐stimulated macrophages. Although it had no effect on TLR4‐mediated phosphorylation of c‐Jun N‐terminal kinase (JNK), p38, and extracellular regulated protein kinase (ERK), melatonin significantly attenuated the activation of nuclear factor kappa B (NF‐κB) in LPS‐stimulated macrophages. In addition, melatonin inhibited TLR4‐mediated Akt phosphorylation in LPS‐stimulated macrophages. Moreover, melatonin significantly attenuated the elevation of interferon (IFN)‐regulated factor‐3 (IRF3), which was involved in TLR4‐mediated TRIF‐dependent signaling pathway, in LPS‐stimulated macrophages. Correspondingly, melatonin significantly alleviated LPS‐induced IFN‐β in macrophages. In conclusion, melatonin modulates TLR4‐mediated inflammatory genes through MyD88‐dependent and TRIF‐dependent signaling pathways.     

Toll样受体信号途径异常活化在过敏性紫癜免疫发病机制中的作用初探

目的 探讨Toll样受体(TLRs)信号途径异常活化在过敏性紫癜(HSP)免疫发病机制中的可能作用.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞TLRs(1～10)及信号途径分子MyD88、TRAF6、TRIF,细胞因子/趋化因子干扰素(IFN)-α、IFN-β、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素诱导蛋白(IP)-10、活化正常T细胞表达和分泌的调节因子(RANTES)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)及Blys/April mRNA的表达;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Blys、IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-1β、TNF-α血浆水平;采用t检验比较2组间差异.结果 ①HSP患儿TLR1、TLR2、TLR6、TLR5、TLR3、TLR7、TLR9 mRNA表达高于健康对照组(P＜0.01),TLR4较健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05);②TLRs信号途径相关分子MyD88(2.47±1.06)与(0.73±0.22)、TRAF6(2.54±0.72)×10-3与(0.70±0.20)×10-3、TRIF(3.18±0.86)×10-3与(0.93±0.35)×10-3较健康对照组明显升高(P＜0.01);③IFN-α、IFN-β mRNA及蛋白表达明显高于健康对照组(P＜0.01);④细胞因子/趋化因子IL-6、IL-1β、IP-10、RANTES、iNOS表达高于健康对照组(P＜0.01),TNF～α表达较健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05);⑤HSP患儿Blys/April表达明显升高(P＜0.01).结论 HSP患儿TLR1、TLR2、TLR6、TLR5、TLR3、TLR7、TLR9及其信号途径相关分子MyD88、TRAF6、TRIF明显升高,提示各种病原微生物触发TLRs过度活化可能是导致HSP免疫功能紊乱的始动因素之一,TLRs过表达所致的炎症细胞因子/趋化因子或Blys/April异常产生可能参与HSP免疫发病机制.     

益气活血复方对内皮细胞TLR4及其下游MyD88、TRAF-6、TRAM、TRIF mRNA表达的影响

目的研究益气活血复方对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、Toll样受体相关分子(TRAM)、Toll样受体相关的干扰素活化子(TRIF)表达的影响,探讨益气活血复方含药血清防治动脉粥样硬化(AS)的机制。方法选择新西兰大耳白兔20只,随机分为4组,即正常组、中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组,每组5只。以上各组白兔分别以生理盐水和高、中、低浓度益气活血复方连续灌胃7d。末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清。体外培养人脐静脉内皮细胞,用LPS刺激后,分别加入高、中、低浓度益气活血复方含药血清干预24h,收集细胞,用Real ti me PCR方法测定TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM及TRIF mRNA的表达。结果用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,引起TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM及TRIF mRNA的高表达(与空白对照组比较,P0.01),用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA的高表达(与模型组比较P0.05或P0.01),对TRAM及TRIF作用不明显。结论益气活血复方可阻断TLR4高表达,同时阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径,而对MyD88非依赖性途径作用不明显,因此益气活血复方主要是通过阻断MyD88依赖性途径来发挥其抗动脉粥样硬化的作用。     

肾衰饮对CRF大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及炎症状态的影响

目的基于toll样受体(TLR)4/髓样细胞分化因子(MyD)88/核转录因子(NF)-κB信号通路探讨肾衰饮对慢性肾衰竭(CRF)大鼠炎症状态的干预机制。方法将60只SD大鼠,随机分成四组,分别为正常组、模型组、尿毒清组和肾衰饮组。进行4 w的干预治疗后,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态改变,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,分别采用免疫组化法和Western印迹检测大鼠肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结果与正常组比较,模型组HE染色显示大鼠肾脏组织发生明显病理改变,血Scr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高(P<0.01),肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组肾脏组织病理改变明显改善,血清Scr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.01),肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论肾衰饮能有效改善CRF大鼠的肾功能,其机制可能是抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路从而抑制炎症反应发生,达到治疗CRF的目的。     

姜黄素抑制肝星状细胞MyD88及信号通路细胞因子表达的研究

目的探讨姜黄素在肝星状细胞MyD88依赖性途径中的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,将HSCT6分为空白对照组、Control siRNA组、MyD88 siRNA干扰组、姜黄素组、姜黄素+Control siRNA组、姜黄素+MyD88 siRNA干扰组,siRNA处理组给予siRNA干扰48 h后,姜黄素组加入姜黄素作用24 h,各组均在收集细胞前12 h给予LPS诱导,收集各组细胞,Western blotting法检测MyD88蛋白表达;RT-PCR术检测细胞因子mRNA的表达。结果 MyD88 siRNA干扰、姜黄素均可降低MyD88蛋白的表达(P0.05),同时给予MyD88 siRNA干扰和姜黄素作用时,MyD88蛋白下降更明显(P0.05)。MyD88 siRNA干扰后TLR2、TLR4 mRNA表达差异无统计学意义(P0.05),姜黄素作用后TLR2、TLR4的mRNA表达降低,二者同时作用其下降更显著(P0.05);MyD88 siRNA干扰、姜黄素处理后NF-κB、TNF-α、IL-1βmRNA表达均降低,二者同时作用后其下降更明显(P0.05)。结论姜黄素可能通过抑制MyD88蛋白表达和MyD88依赖途径上的多种细胞因子的mRNA表达而阻断MyD88依赖性信号通路的转导,促进活化的HSCs凋亡,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

阿托伐他汀对脂多糖刺激下PBMC分泌TNF-α、IL-1β的影响

目的观察阿托伐他汀对脂多糖（LPS）刺激下外周血单核细胞（PBMC）分泌TNF-α、IL-1β的影响。方法Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,不同浓度阿托伐他汀预处理2h,而后加入10ng/ml LPS共同培养24h,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测单核细胞培养上清液肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的水平。结果1μmoL／L阿托伐他汀减少LPS刺激下PBMC分泌TNF-α 53．3％、IL-1β 35．4％,10μmoL／L阿托伐他汀减少TNF-α 82．0％、IL-1β 65．6％。结论阿托伐他汀能有效抑制LPS刺激下PBMC TNF-α及IL-1β的分泌。