微创建立小鼠心肌梗死模型及其评价

目的 探索一种微创建立小鼠心肌梗死模型的方法,并利用超声心动图进行评价.方法 40只C57BL/6雄性小鼠随机分为心梗组（MI,n=30）与假手术组（Sham,n=10）.术前及术中用异氟烷对动物行吸入麻醉,于左胸3、4肋间做一1.0 cm左右切口,将心脏从胸壁窗口挤出.MI组结扎冠脉左前降支建立心梗模型;Sham组冠脉只穿线不结扎,其余操作同MI组.术后4周采用超声心动图检测心脏结构与功能,经心肌组织病理学分析以判断模型成功与否.结果 MI组小鼠存活率为78.6％,Sham组为100％.超声结果显示,与Sham组相比,MI组小鼠的LVAWd、LVAWs、EF及FS均明显降低（P＜0.05）,LVIDd与LVIDs明显增加（P＜0.05）.Masson染色可见MI组小鼠的左心室腔明显增大,心室壁变薄,纤维化面积增加[（13.54±1.39）％比（0.08±0.03）％,P＜0.01].结论 采用本法制备小鼠心梗模型具有微创、快捷、高效、无需使用呼吸机的优势,而且模型稳定可靠.     

大鼠急性心肌梗死模型的建立

目的探讨建立一种能模拟临床心肌梗死事件及其病理生理变化的动物模型。方法 SD大鼠麻醉后,经口插管连接小动物呼吸机,开胸高位结扎冠状动脉左前降支。术后1 w超声检测大鼠心功能,TTC染色测量心肌梗死面积,评价模型制作效果。结果手术成功率为100%,术后1 w动物存活率为90.9%。术后1 w超声检查见大鼠LVEDS、LVEDD较术前扩大,LVFS较术前降低(P0.05)。大体见缺血区心室壁变薄塌陷。TTC染色测算梗死面积占左室面积的百分比为35.80%±4.32%。结论本文成功建立大鼠心肌梗死模型。该模型成功率高、心肌梗死面积稳定,可运用于心肌缺血、心力衰竭、心肌重构的发病机制和治疗方法研究。     

微创条件下小鼠心肌梗死模型建立的研究

目的:微创条件下建立小鼠慢性心肌梗死模型,为研究干细胞移植治疗对心肌梗死后心脏的影响提供模型。方法: 将70只小鼠随机分为6组,5个手术组和1个假手术组。手术组小鼠于左侧胸骨旁0.8 cm处切开一长约1 cm的切口,钝性分离暴露肋间隙。将心脏从第4、5肋间隙挤出,用5号丝线结扎左心耳和动脉圆锥下的左前降支,放回胸腔后缝合胸壁皮肤。假手术组小鼠左前降支动脉不结扎,余操作同手术组。观察手术后心脏大体形态,术后30 min、3、5、7、14和21 d的心电图及心脏组织的病理学变化。结果: 左心室梗死区呈暗褐色,经固定液灌流后梗死区呈白色透明状。术后30 min内,心电图上ST段弓背向上抬高超过0.2 mV。术后3、5、7、14和21 d,心电图被病理性Q波代替,ST段低平。苏木精-伊红染色显示,术后3、5 d有大量的炎细胞浸润,心肌细胞不完整,以术后5 d更明显。术后7 d、14 d梗死区心肌纤维断裂溶解,心肌细胞坏死,少量炎性细胞浸润,术后21 d梗死区被纤维组织所代替。结论: 以微创手术建立小鼠心肌梗死模型为一种渐进性、慢性过程,该方法操作时间短、动物耐受性好、可重复性强。     

昆明小鼠心房颤动模型的建立

目的:经小鼠球后静脉注射氯化钙(CaCl_2)-乙酰胆碱(Ach)混合液,探索一种能诱发小鼠产生心房颤动且造模周期短的心房颤动模型制备方法与技术。方法:将选取健康成年昆明小鼠24只,体质量35~55g,随机分为三组,每组8只,雌雄各半,称质量,腹腔注射10%水合氯醛(3mL/kg)麻醉,待麻醉后,经小鼠球后静脉注射不同浓度的CaCl_2-Ach混合液(内含CaCl_25~10mg/mL,Ach 25~50μg/mL),用量为0.1mL/10g,5s内注射完,多导生理记录仪记录小鼠心电图变化,间隔24h,连续给药7d,观察每次给药后小鼠心房颤动持续时间。结果:经球后静脉注射CaCl_2-Ach混合液后,三组小鼠均可诱发出心房颤动,且雌雄产生心房颤动持续时间差异无统计学意义(P=0.775);给予CaCl_25mg/mL+Ach25μg/mL混合液,第四天起心房颤动持续时间趋于稳定(30.5±3.5)s。结论:经小鼠球后静脉注射CaCl_2-Ach混合液可以诱导产生心房颤动,且造模周期短,持续时间趋于稳定,有利于临床心房颤动机制的研究。     

一种纯系小鼠动脉粥样硬化病理模型的建立

实验选用Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ纯系小鼠，饲喂含２％胆固醇饮食１６周后，血清脂质（包括总胆固醇、游离胆固醇和甘油三酯）水平升高，血清总胆固醇为３．６９±０．７８ｇ／Ｌ，与人类高脂血症接近；油红Ｏ方法染色后在光镜、激光扫描共聚焦显微镜下观察，形态学结果显示实验组小鼠在主动脉窦瓣膜、冠状动脉等部位均形成典型的含有大量泡沫细胞的动脉粥样硬化斑块，Ｒｏｂｅｒｔｓ＆Ｔｈｏｍｐｓｏｎ评分达到８．０±１．２。这表明成功地建立了一种实验性动脉粥样硬化纯系小鼠整体动物模型。     

烟曲霉提取物诱导小鼠哮喘模型的建立

目的:探讨小鼠哮喘模型建立的方法,为开展哮喘发生机制或药物治疗研究奠定基础。方法:40只,SPF级C57BL/6小鼠,雌雄各20只,随机分成对照组和模型组两组。模型组小鼠采用气管滴注烟曲霉提取物,隔天给药,对照组小鼠采用无菌0.9%氯化钠溶液气管滴注。给药21天后,最后一次给药24小时后收取肺泡灌洗液,离心后灌洗液上清检测炎症因子水平,灌洗细胞做Giemsa染色分类计数;取左肺做AB-PAS染色,右肺提取mRNA;腹主动脉取血ELISA检测Ig E水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠可见典型的哮喘症状,肺泡灌洗液中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞较对照组显著增多,肺泡灌洗液IL-3、IL-4、IL-5、IL-6及IL-17表达上调,与对照组相比分别为P<0.05和P<0.01。血清Ig E较对照组明显增加[(23.84±3.65)vs.(6.22±1.06)mg/L,P<0.01];AB-PAS染色黏液分泌较对照组明显加重。结论:烟曲霉提取物气管滴注可成功诱导小鼠哮喘模型。     

小鼠非酒精性脂肪性肝病模型的建立与评价

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）疾病谱包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎及肝硬化等多种类型。建立一个稳定可靠的、疾病谱完整的NAFLD动物模型，对研究NAFLD的发病机制及治疗方法有重要的意义。本研究采用胆碱和蛋氨酸缺乏的饲料喂养小鼠，旨在建立NAFLD的小鼠模型。[第一段]     

小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的建立

本文报告应用腹腔注射SEA致敏C57BL/6小鼠,继之经脾脏攻击注射虫卵的方法,建立了小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型,并与自然感染模型作比较.结果证明,SEA致敏组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为100%.其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程及单虫卵肉芽肿的直径和面积均与自然感染模型相似.本实验表明经脾脏注射虫卵及SEA致敏建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型是一种良好的肉芽肿实验动物模型.     

隐孢子虫感染小鼠动物模型的建立

目的 建立免疫抑制小鼠的隐孢子虫感染模型。方法 饮水中加地塞米松（DEX）抑制4周龄小鼠免疫功能，人工灌喂隐孢子虫卵囊（CSO）感染小鼠。通过观察小鼠粪便中CSO排出情况和小鼠生存情况，比较5个品系小鼠（BALB／c,C57,ICR,NIH,KM)的易感性，比较不同DEX剂量（1mg/L,2.5mg/L,5mg/L,5mg/L,10mg/L)对小鼠免疫功能的影响，比较不同CSO接种剂量（10^5,10^6)对小鼠感染的影响，从而确定适宜的模型小鼠，DEX剂量和CSO接种剂量，建立小鼠感染模型。结果 （1）5个品系小鼠中KM鼠的CSO排出量最多，而且持续整个实验期，小鼠死亡数较少（NIH鼠全部死亡）；（2）10mg/L，5mg/L DEX组小鼠CSO排出量较多，2．5mg/L，1mg/L组小鼠死亡数少，但卵囊排出量明显低于前两组，且不能持续整个实验组；（3）10^5与10^6个CSO接种量的小鼠CSO排出量没有明显差别，但前者的小鼠死亡数较少。结论 KM鼠饮水中加入DEX5mg/L，每只小鼠接种10^5个CSO，可以建立稳定的感染模型。     

犬心肌梗死模型制备的改进

目的改进制备犬心肌梗死模型的方法,形成透壁性心肌梗死。方法健康成年杂种犬16只,随机分为对照组(n=8)和实验组(n=8);对照组结扎左冠状动脉前降支,实验组结扎左冠状动脉前降支及第一对角支,建立心肌梗死模型。6周后,进行心脏大体形态及组织病理学观察。结果犬术后6周,对照组存活6只,存活率为75.0%,实验组存活5只,存活率为62.5%,两组存活率无统计学差异(P=0.590)。对照组存活的6只犬中,有2只犬大体及组织病理观察均见明显的心肌梗死区,而另外4只犬大体观察未见明显的心肌梗死区,组织病理观察可见梗死灶;实验组存活的5只犬大体及组织病理观察均可见明显的心肌梗死区;两组形成透壁性心肌梗死的犬只数有统计学差异(P=0.022)。结论结扎犬左冠状动脉前降支及第一对角支,能形成透壁性心肌梗死,是一种制备心肌梗死模型的有效可靠方法。     

大鼠急性心肌梗死模型的建立

目的建立大鼠急性心肌梗死实验模型。方法采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉、直视下经口腔气管插管、开胸行冠脉左前降支结扎法,术后给予呼吸道管理;并进行心电图、心肌酶谱、病理组织学和坏死心肌组织学定量检查来证实。结果 40只模型组大鼠中,死亡6只,模型制备成功率85%。大鼠术后30 min,心电图肢体导联ST段弓背向上抬高,出现病理性Q波;结扎前降支血管后24 h和40 h时间点,模型组肌酸激酶同工酶、血清乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶较假手术组明显高,差异有统计学意义(P0.05),在60 h时间点血清乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶亦升高(P0.05);组织切片镜下观察病变区心肌细胞排列紊乱、疏松,细胞核固缩、碎裂;模型组心肌梗死与左心室湿重比值较假手术组明显高,差异有统计学意义(P0.01)。结论该心肌梗死动物模型构建方法简单,创伤轻,成功率高,结果可靠。     

置入铜丝缠绕型支架制作猪急性心肌梗死模型

目的探讨在猪冠状动脉内置入铜丝缠绕型支架制作急性心肌梗死模型的可行性,建立一种新的急性心肌梗死模型方法。方法16头中国实验用小型猪经股动脉穿刺,在前降支置入自制的铜丝缠绕型支架。1周内观察心肌肌钙蛋白I、心电图、心脏超声和冠状动脉造影。然后处死取出心脏,取目标冠状动脉和心肌,做病理学检查。结果16头小型猪均发生了心肌梗死。梗死发生后死亡2头,其中1头在术后8 h猝死,1头在术后1周冠状动脉造影复查时死于麻醉中;其余14头均存活在1周以上,完成复查,总的成功率为87.5%。结论该模型制作具有操作简单、创伤小、成本低、死亡率低、成功率高等诸多优点,可作为较好的实验研究动物模型。     

经皮冠状动脉栓塞法建立猪急性心肌梗死模型及缺血修饰白蛋白水平的动态变化

目的探讨经皮冠状动脉明胶海绵栓塞法建立猪心肌梗死模型,观察猪急性心肌梗死(AMI)早期血清缺血修饰白蛋白(IMA)的动态变化。方法选用中华小型猪16只,麻醉后经股动脉穿刺,行冠状动脉造影后经微导管注入明胶海绵堵闭猪钝缘支。分别在术前及术后10、30 min和1、2、3、4、6、8、10、12、24、48 h抽血观察IMA的动态演变。于术后1、3、5、7、10天处死猪,取出心脏,取心肌组织做病理学检查。结果 15头猪心肌梗死造模成功,心电图、心脏标本、病理切片均显示典型心肌梗死改变。IMA在猪心肌梗死后10 min后即开始升高,6 h达峰值,48 h降至正常范围。结论经皮冠状动脉明胶海绵栓塞法建立猪AMI模型科学可靠,简单易行,可重复性强。IMA是AMI早期的敏感指标,血清IMA水平的动态检测对AMI的早期诊断有一定的临床意义。     

冠状动脉堵闭法建立猪心肌梗死模型

探讨运用经皮腔内冠状动脉成形术球囊堵闭猪冠状动脉建立急性心肌梗死动物模型的实验方法。选用苏中幼猪11只，麻醉后经股动脉或颈总动脉置入经皮腔内冠状动脉成形术球囊至冠状动脉左前降支远端，堵闭血流120min。观察心电图、心肌酶、心脏二维超声检查及冠状动脉和左心室造影。结果发现，存活7只猪均完成冠状动脉左前降支远端的封堵，心电图显示急性心肌梗死典型图形变化，血浆肌钙蛋白明显升高并呈动态演变：术后1h超声检查出现间隔上部及前壁局部运动异常；术后2至4周造影复查显示左心室前壁、心尖部心室壁异常运动；存活7只猪均成功地建立急性心肌梗死模型。另4只猪分别在堵闭60～100min因心室纤颤死亡。结果提示，运用经皮腔内冠状动脉成形术球囊封堵冠状动脉可成功建立猪急性心肌梗死模型，并保持封堵冠状动脉通畅；与开胸法相比更接近人体状态，具有创伤小、动物生存时间长并易于术后馒头等优点。     

逆行牵引改良气管插管法提高大鼠心肌梗死模型成功率

目的研究采用逆行牵引改良气管插管法提高大鼠心肌梗死模型造模成功率的实验方法。方法 125只SD雄性大鼠,采用逆行牵引改良气管插管法(逆行插管组)和经口气管插管法(经口插管组)建立人工气道,结扎冠状动脉左前降支制作心肌梗死模型。4周后采用超声心动图检测大鼠心肌梗死模型心脏结构和心功能变化,采用Masson染色实验检测大鼠心脏胶原容积分数(CVF)。分析这两种气管插管方法、术中利多卡因的使用、手术操作过程中的细节问题、术中及术后护理事项等对大鼠模型成功率的影响。结果逆行牵引改良气管插管法建立大鼠人工气道的成功率为100%,明显高于传统的经口气管插管法(成功率为85%)。于左心耳与肺动脉圆锥连线下方2 mm进针结扎、结扎前滴1滴利多卡因到心脏表面减慢心率便于操作并预防心律失常、术中及术后及时清除气道分泌物、术中及术后保暖、预防伤口感染等方法,可提高大鼠心肌梗死模型的存活率。与正常大鼠比较,两组大鼠均出现左心室收缩末期内径变小,左心室后壁代偿性肥厚,左心室射血分数降低,心脏非心肌梗死区CVF增加;且两组间比较上述指标差异无统计学意义。逆行插管组心肌梗死模型造模成功率(76.7%)高于经口插管组(65.0%)。结论逆行牵引改良气管插管法的应用能够为大鼠心肌梗死模型的制作迅速备好人工气道,术中使用利多卡因、精准的血管结扎部位及合适的术中及术后护理对提高大鼠心肌梗死模型造模成功率具有重要意义。     

左旋精氨酸对急性心肌梗死大鼠血管新生的影响及心肌保护作用

【目的】 观察左旋精氨酸干预对急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌梗死边缘区血管新生的影响及其心肌保护作用。【方法】 冠状动脉结扎法建立大鼠AMI模型,30只SD雄性大鼠被随机分为三组：假手术组,生理盐水对照组及左旋精氨酸干预组。在冠状动脉结扎后4周,超声心动图测量大鼠心脏左室舒张末内径（LVEDD）、左室收缩末内径（LVESD）、左室射血分数（LVEF）、左室短缩分数（LVFS）,Masson染色测定梗死面积,ELISA法检测各组大鼠血浆脑钠尿肽（BNP）水平;采用免疫组织化学技术检测大鼠心肌梗死边缘区CD31阳性的内皮细胞数量及 -SMA阳性平滑肌细胞数量,以评估新生血管情况,Western blot检测梗死边缘区内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）及胶原-1蛋白含量。【结果】 冠状动脉结扎后4周,与对照组相比,左旋精氨酸干预组LVEF、LVFS明显升高,而LVEDD及LVESD降低（P<0.01）,且梗死面积明显缩小（P<0.01）,血浆BNP水平亦较低（P<0.01）,而梗死边缘区CD31阳性的内皮细胞及 -SMA阳性平滑肌细胞密度则高于对照组（P<0.01）,梗死周围区eNOS蛋白水平高于对照组,而胶原-1蛋白含量则低于对照组（P<0.01）。【结论】 左旋精氨酸干预可促进AMI大鼠梗死心肌边缘区毛细血管及小动脉新生,减少胶原-1蛋白含量,促进eNOS的表达,并可达到改善左心收缩功能、降低血浆BNP水平、缩小梗死面积的心肌保护作用。     

Drinking Patterns and Myocardial Infarction: A Linear Dose–Response Model

Background: The relation of alcohol intake to cardiovascular health is complex, involving both protective and harmful effects, depending on the amount and pattern of consumption. Interpretation of data available on the nature of these relations is limited by lack of well‐specified, mathematical models relating drinking patterns to alcohol‐related consequences. Here we present such a model and apply it to data on myocardial infarction (MI). Methods: The dose–response model derived assumes: (1) each instance of alcohol use has an effect that either increases or decreases the likelihood of an alcohol‐related consequence, and (2) greater quantities of alcohol consumed on any drinking day add linearly to these increases or decreases in risk. Risk was reduced algebraically to a function of drinking frequency and dosage (volume minus frequency, a measure of the extent to which drinkers have more than 1 drink on days when they drink). In addition to estimating the joint impact of frequency and dosage, the model provides a method for calculating the point at which risk related to alcohol consumption is equal to background risk from other causes. A bootstrapped logistic regression based on the dose–response model was conducted using data from a case‐control study to obtain the predicted probability of MI associated with current drinking patterns, controlling for covariates. Results: MI risk decreased with increasing frequency of drinking, but increased as drinking dosage increased. Rates of increasing MI risk associated with drinking dosage were twice as high among women as they were among men. Relative to controls, lower MI risk was associated with consuming < 4.55 drinks per drinking day for men (95% CI: 2.77 to 7.18) and < 3.08 drinks per drinking day for women (95% CI: 1.35 to 5.16), increasing after these cross‐over points were exceeded. Conclusions: Use of a well‐specified mathematical dose–response model provided precise estimates for the first time of how drinking frequency and dosage each contribute linearly to the overall impact of a given drinking pattern on MI risk in men and women.     

色甘酸钠对大鼠心肌梗死后心肌凋亡及凋亡蛋白的影响

目的 研究肥大细胞脱颗粒程度对心肌梗死后的心肌凋亡及心肌纤维化的影响,探讨细胞凋亡机制在心肌梗死后心室重构中的作用.方法 建立雄性SD大鼠心肌梗死模型,分成假手术组(n=6)、模型组(n=8)、色甘酸钠组(n=7).术后4周,留取心肌标本行TUNEL染色观察心肌细胞凋亡指数(AI),Masson染色检测心肌胶原容积分数(CVF),Western blot法检测Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 与假手术组相比,模型组、色甘酸钠组在AI、CVF、Caspase-3及Bax蛋白表达量等方面均显著升高(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达明显下降;色甘酸钠组与模型组相比,AI、CVF、Caspase-3及Bax蛋白表达量均有所下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白有所升高,但两者差异无统计学意义(P=0.127).AI与CVF呈正相关(r=0.769,P＜0.01).结论 心肌梗死后心肌凋亡显著增加,抑制肥大细胞脱颗粒可明显减少心肌凋亡,减轻左心室心肌纤维化程度.