基于代谢组学的细胞内源性代谢物研究进展

代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后新兴的一种定性和定量分析复杂生物样品中所有小分子代谢物的组学方法,也是目前组学研究领域的热点之一。代谢组学主要考察生物体系受刺激或扰动后内源性代谢物的变化,是系统生物学的有机组成部分。近年来在代谢组学研究中,细胞内源性代谢物的研究已取得了很大进展。本文结合代谢组学的基本含义,综述了细胞样品前处理方法及代谢靶向分析、代谢轮廓分析、代谢组学分析和代谢足迹分析在细胞方面的研究进展。     

在线生物样品处理与LC-MS／MS联用新技术

1在线生物样品处理新技术概况 生物样品预处理是体内药物分析中的一个重要环节,也是分析中最困难、最繁琐的工作。在体内药物分析中,生物样品成分复杂,除被测组分外,往往含有大量内源性物质、代谢产物及共存药物等干扰物质,且被测组分的含量很低,要准确地测定生物样品中的药物浓度,必须除去妨碍测定的杂质,对样品进行预处理。     

非靶向代谢组学生物样品采集和制备方法探讨

生物样品采集和制备是代谢组学研究的第一步也是最关键的一步,合适的样品采集和制备方法是获得可靠结果的重要保证。样品采集和制备方法与分析通量、分析成本和基质效应等密切相关。样品采集与制备方法如不进行充分验证,实验数据常出现较大偏差,但在实际工作中样品采集和制备过程常被忽视。本文对非靶向代谢组学生物样品常用采集和制备方法作一综述,指明了实际操作中的注意事项,有助于我们根据实验目的和样品性质选择合适的方法。本文重点关注基于高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)的代谢组学研究中常用样品采集和制备方法。     

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的白术内酯I在大鼠体内代谢产物的鉴定及代谢途径分析

目的 采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)鉴定白术内酯I在大鼠体内的代谢产物，并探讨其可能的代谢途径。方法 SD大鼠单次灌胃给予白术内酯I后，收集大鼠血浆、尿液、粪便样品。以体积分数0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相，梯度洗脱。在电喷雾电离源(ESI源)正、负离子模式下分析大鼠生物样本。根据质谱提供的准分子离子峰、碎片离子及准确相对分子质量，鉴定白术内酯I体内代谢产物。结果 共鉴定出大鼠体内代谢产物30个，其中血浆样品中5个，尿液样品中17个，粪便样品中16个。氧化、水合、脱饱和、硫酸化、葡萄糖醛酸化、甘氨酸结合、半胱氨酸结合等是白术内酯I体内主要的代谢途径。结论 首次阐明了白术内酯I在大鼠体内的代谢产物及代谢途径，为其进一步的药效学评价和开发利用提供参考，此外也为单体药物代谢产物鉴定提供了一种综合研究方法。     

液相色谱-质谱法在生物样品药物定量分析中的基质效应

液相色谱-质谱法现已成为新药研发，尤其是药物代谢与药物动力学研究不可或缺的有力工具。液相色谱-质谱法由于其高分离效能、高选择性和高灵敏度，尤适于复杂生物样品中药物及其代谢产物的分析测定，其中以电喷雾电离(ESI)方式应用最为广泛。由于质谱检测的高选择性使人们认为样品制备过程可以简化，对组分间色谱分离的要求也相府降低。此外，为满足高通量分析的要求，     

杀虫双中毒致急性呼吸衰竭临床分析

杀虫双是当前农村使用较为广泛的杀虫剂之一，其引起的中毒事件时有发生，而呼吸衰竭是其主要死亡原因，为探讨杀虫双中毒致呼吸衰竭的特点和救治方法，对本院收治的杀虫双中毒及其发生呼吸衰竭的病例进行回顾性分析。     

质谱联用技术在生物样品分析中的应用

质谱分析具有分析范围广、灵敏度高、样品用量少、分析速度快、重复性好、操作简易、损耗低、分离与鉴定可同时进行等优点, 已广泛应用于环境科学、能源化工、生物医药等领域。本文综述了近3年国内外关于质谱联用技术在生物样品分析中应用的文献, 并着重介绍了质谱技术在药物代谢动力学和生物等效性、毒代动力学、药代动力学-药效学、群体药代动力学、药物及代谢物结构确证与裂解规律和代谢组学中的应用, 以期为生物样品分析的进一步发展提供参考。     

核磁共振谱技术在药物代谢研究中的应用

核磁共振谱技术在药物代谢研究中的应用司伊康（中国医学科学院、中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０）核磁共振谱（ＮＭＲＳ）是一种无损伤的物理测试方法，它可直接用于体内和体外的生物样品测定，提供分子水平的信息。近二十年来，这种生物核磁技术有很快发...     

代谢组学分析技术平台和数据处理的新进展

分析技术和生物计量学促进了代谢组学的飞速发展。代谢组学快速、灵敏、可定量、非侵入性以及系统性的特点,使其在新药研发、药物毒性筛选、疾病诊断等领域显示出广阔的前景。本文综述了代谢组学研究中的某些关键问题:样品处理方法,分析技术和数据处理的方法和原则,代谢组动态变化、生物标记物的鉴定和代谢途径的检索近年来的进展。评价了各种分析手段的优缺点,并展望代谢组学发展前景。     

双柱双泵高效液相色谱电化学检测器测定大鼠脑中生物胺及其代谢产物

用双柱双泵高效液相色谱电化学检测器测定大鼠脑皮层、海马、脑干和杏仁核中的生物胺及其代谢产物.此色谱系统把样品前处理柱放到色谱线上,使生物样品去杂质、富集成分和色谱分析一次连续进行.方法操作简便,回收率高,可以进较大的样品量,因而相对灵敏度明显提高.     

生物试样中5-氟尿嘧啶及其代谢产物的高效液相色谱定量法

本文报道了用高效液体色谱法同时测定各种生物试样中的5—氟尿嘧啶(5—FU)及其代谢产物5—氟尿嘧啶核苷(FUR)和氟脱氧尿核甙(FUdR)。方法系将样品中5-FU及其两种代谢     

止得咳颗粒在大鼠体内的代谢产物研究

目的 分析止得咳颗粒在大鼠体内的代谢产物并推测其代谢途径。方法 将雄性SD大鼠随机分为空白组、给药组（止得咳颗粒,9.45 g/kg）,每组灌胃超纯水或相应药液,每天2次,每次灌胃间隔6～8 h,连续3 d。收集各组大鼠血清、粪便、尿液样品,利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q-Exactive-MS）技术鉴定大鼠灌胃止得咳颗粒后上述生物样品中的代谢产物,并推测其代谢途径。结果 大鼠灌胃止得咳颗粒后,在其血清、尿液、粪便样品中共鉴定出16个原型成分（如野鸢尾黄素、黄芩素、绿原酸等）和11个代谢产物（如山柰酚或木犀草素水合产物、绿原酸甲基化产物、黄芩苷羟基化产物）。其中,血清样品中鉴定出8个原型成分和4个代谢产物;尿液样品中鉴定出10个原型成分和7个代谢产物;粪便样品中鉴定出8个原型成分和5个代谢产物。结论 止得咳颗粒在大鼠体内的代谢成分主要包括黄芩苷、野鸢尾黄素、绿原酸,主要涉及甲基化、羟基化、葡萄糖醛酸化等代谢途径。     

液相色谱-串联质谱与化学衍生化及在线氢／氘交换结合药物代谢物的特性策略

介绍了应用高效液相色谱．串联质谱（LC-MS／MS）与化学衍生化、在线氢／氘（H／D）交换技术联合研究粗提样品中药物代谢物结构的策略。讨论了子离子扫描、恒定中性丢失扫描、母离子扫描、多级的MS^n和精确质量测量的质谱扫描技术。尤其重要的是，只需微量的粗提样品就足以满足LC-MS／MS的分析要求，且可以免去从复杂生物样品中纯化低含量代谢产物的困难，从而减少工作强度。     

代谢组学研究中数据处理新方法的应用

目的探索代谢组学研究中数据处理的新方法。方法本文提出了在代谢组学数据预处理中，用稳健PCA的方法进行离群样品点的诊断，用变量的类内差异和类间差异的比较来判断非保守性代谢组分，用尺度同一化的方法进行数据预处理来消除数据的尺度差异。并以Arabidopsis thaliana属的四个基因型的植株代谢组学的数据为例，用以上的方法进行数据预处理后再用PCA的方法分析。结果与结论研究表明这三种数据预处理方法的应用会明显的改善代谢组学生物信息学分析中聚类分析的结果和生物标志物识别的准确性及全面性。     

快原子轰击质谱在药物分析中的应用

快原子轰击质谱(FAB-MS)只是在近年才引用于药物分析。本文论述该法在药物、药物代谢及生物样品研究中的最新应用。FAB-MS 的一般概念     

代谢组学信息获取与数据预处理瓶颈问题探讨

经过近15年的快速发展,代谢组学已逐步成熟并渗透到生命科学和医学研究领域的各个层面。随着认识的不断深入,各种影响代谢组学研究的细节因素和技术瓶颈逐步被揭示。从生物样品采集与制备、原始数据采集、数据预处理和方法学验证等方面系统探讨了影响代谢组学研究的主要瓶颈问题,以期推动代谢组学研究的精细化和规范化发展。     

色谱分析中生物样品的前处理方法

色谱分析中生物样品的前处理方法李章万，徐秀荣（成都华西医科大学药学院成都６１００４１）为了研究药物在体内的过程，即研究药物的吸收、分布、代谢、排泄等，色谱分析法（包括气相色谱、气相色谱－质谱联用、和高效液相色谱）已成为目前首先选用的分析方法。通常所获...     

胆管癌代谢组学研究进展

胆管癌（CCA）恶性程度高，由于早期缺乏典型症状且尚无准确的生物标志物，发现时常处于晚期，预后较差。胆管癌的发生发展与代谢密切相关，代谢组学是研究在病理生理或基因修饰等因素影响下，生物体内内源性小分子代谢物变化的学科，具有全局分析、高通量和反映生物体系实时变化的特点，可以为胆管癌生物标志物的筛选、疾病诊疗提供新途径。综述近年来代谢组学在胆管癌方面的研究进展，以期为进一步研究提供参考。     

生物分析方法确认策略

本文介绍了葛兰素威康研究实验室药物代谢研究部门对生物分析方法进行确认的策略。阐述了设计一个恰当生物分析方法的基本原理，以及建立一个适当的方法之前必须对实验数据进行评估，评估参数包括选择性、专属性、定量检出限、线性、准确度、精密度和回收率等。本文还讨论了药物各发展阶段确认设计前必须考虑的一些要点，如生物基质、分析工作标准、样品分批量大小及组成、分析仪器、初始方法确认、临床前方法确认、临床方法确认、方     

固相萃取在生物样品分析中的应用

生物样品中的药物浓度与药物的疗效有很大的相关性,尤其是血浆(或血清)药物浓度直接与药效相关。尿液中常常含有丰富的药物代谢产物,也被经常使用。唾液由于采集方便且有时和血浆游离药物浓度具有相关性而有时使用。其他脏器组织,除特别需要,较少用。生物样品的药物分析因其复杂多样性而对样品的预处理技术提出了较高的要求。在各种处理方法中,固相萃取由于其适用性广,实用性强而越来越受到广大科研工作者的重视。本文综述了固相萃取技术(SPE)及其在生物样品分析中应用的相关报道,以期对相关研究者提供理论指导和技术支持。