佳木斯地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药基因型分析

目的 检测佳木斯地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药基因型的流行状况,分析ESBLs的产生情况,为临床的合理用药提供参考.方法 采用全自动微生物鉴定系统对肺炎克雷伯菌进行鉴定和药敏分析;双纸片扩散法对产ESBLs菌株进行确证,应用PCR基因扩增技术及双脱氧DNA测序方法 ,分别对TEM、SHV、CTX-M编码基因进行分析.结果 肺炎克雷伯菌对16种抗生素的耐药性检测结果 显示,对亚胺培南、阿米卡星的耐药率较低,对酶抑制剂类抗生素较敏感,对第一、二代头孢菌素耐药率较高.在67株产ESBLs菌株中有57株为CTX-M型(85.1%),36株为TEM型(53.7%),47株SHV型(70.9%).结论 随着抗菌药物的持续使用,产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药情况日趋严重,主要临床流行基因型是CTX-M型,耐药性基因型监测对临床合理应用抗生素具有指导意义.     

肺炎克雷伯菌临床分离株产广谱和超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的 了解产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及其基因型分布特征,指导临床进行抗感染治疗,更好地控制耐药菌株的播散.方法 对38株经双纸片试验确认为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感性试验;采用PCR法对ESBLs阳性株进行TEM型、SHV型、CTX-M型、VEB型和PER型ESBL基因检测,对PCR阳性产物进行测序确定基因型别;同时采用PCR法检测整合酶基因,对PCR产物进行测序确定整合酶类别.结果 38株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对青霉素类和头孢菌素类耐药性十分严重,对庆大霉素和复方磺胺甲嚼唑的耐药率也均＞90%,未检测到耐亚胺培南和美罗培南的菌株.38株ESBLs阳性菌株检测到3种ESBLs型,分别为TEM型、SHV型和CTX-M型,VEB型和PER型没有被检出.CTX-M型、TEM型和SHV型阳性率分别为92.1%(35/38)、84.2%(32/38)、76.3%(29/38).整合酶基因阳性率为94.7%(36/38).经测序,所有TEM型均为TEM-1广谱β内酰酶.29株SHV型阳性的PCR产物经测序证实,SHV-12有19株,SHV-11有4株,SHV-2有3株,SHV-28有2株及SHV-1有1株.35株CTX-M型中,CTX-M-14有22株,CTX-M-15有13株.同时检测到3种基因的有22株(57.9%),同时检测到2种基因的有14株(36.8%).整合酶基因PCR产物经测序为Ⅰ类整合子.结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及多重耐药性严重,Ⅰ类整合子是其多重耐药和耐药性传播的主要原因;CTX-M-14及SHV-12为肺炎克雷伯菌产ESBLs的主要基因型.     

致病性猪沙门菌四环素耐药基因tetB的PCR检测

目的检测临床分离猪源致病性沙门菌四环素的耐药基因,确定沙门菌四环素耐药基因类型。方法用KB法测定分离株对四环素等21种抗生素的耐药情况,用PCR方法检测四环素耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG及tetK,并对扩增产物进行测序。结果临床分离株全部对四环素耐药,33株沙门菌中有29株扩增出tetB特异性片段,基因序列与参考菌的同源性为99%,tetB检测与药敏试验阳性符合率为87.9%。结论tetB的PCR检测对四环素耐药性具有较高的特异性,tetB基因是决定本试验中临床分离株四环素耐药的主要基因,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了依据。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌流行特征及耐药基因分析

目的调查分析我院2009年医院内获得性鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物的耐药性,研究耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌感染的克隆流行情况以及碳青霉烯酶基因型。方法用琼脂稀释法进行药敏试验,按CLSI（2009）标准判断细菌耐药性,并用PFGE法对2009年的102株对碳青霉烯耐药菌进行同源性分析,多重PCR扩增碳青霉烯酶基因bla_OXA-51like,bla_OXA-24like,bla_OXA-58like。结果药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对米诺环素、替加环素、多粘菌素B耐药率较低,对碳青霉烯耐药高。PFGE结果显示我院存在A/B/C克隆株流行,主要分布于呼吸科以及ICU等病房,时间上呈散发流行。102株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌产OXA-23型碳青霉烯酶率为71.6%,产OXA-51型碳青霉烯酶率为84.3%,另外仅2株检出OXA-24型碳青霉烯酶,3株检出（）XA-58型碳青霉烯酶。结论我院在呼吸科以及ICU等病房存在A/B/C克隆株流行,碳青霉烯酶基因型以OXA-23、OXA-51型为主,由于对多种抗菌药物尤其是碳青霉烯类抗生素耐药性的增强和克隆株的流行,应积极采取有效措施预防和控制鲍曼不动杆菌感染。     

产"超-超广谱"β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药表型及基因分析

目的 首次分析本地区产超-超广谱β-内酰胺酶(super-spectrum β-lactamase,SSBLs)菌株的耐药性及分子流行病学现状.方法 收集自2008年1月～2009年6月本院从临床分离的对头孢西丁和头孢他啶耐药的革兰阴性杆菌105株,采用改良三维试验与质粒结合实验筛选产SSBLs菌株,通过药敏试验鉴定其耐药表型,运用PCR扩增检测其ESBLs基因型与AmpC酶基因型.结果 筛选出的2株产SSBLs菌株(1株阴沟肠杆菌和1株大肠埃希菌)均表现为多重耐药,仅对亚胺培南敏感.阴沟肠杆菌质粒编码的ESBLs基因型为TEM、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT;大肠埃希菌质粒编码的ESBLs基因型为SHV、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT.结论 本院存在产SSBLs革兰阴性杆菌引起的感染,但此类菌株尚未在本院传播流行,ACT型是SSBLs菌株质粒AmpC酶主要基因型.     

产AmpC酶的克雷伯菌药敏结果分析及质粒介导的AmpC和ESBLs耐药基因检测

目的 了解克雷伯菌的耐药性及产AmpC菌株同时产ESBLs药敏的变化。方法 采用Vitek60型和Vitek32型、纸片扩散法（KB法）测定42株产AmpC酶同时产ESBLs克雷伯菌的药敏结果，并与24株产AmpC酶但不产ESBLs克雷伯菌和138株不产AmpC酶但产ESBLs的克雷伯菌药敏结果对比分析；采用PCR分析产AmpC酶但不产ESBLs肺炎克雷伯菌的AmpC基因型。结果 产AmpC不管是否产ESBLs的克雷伯菌对亚胺培南敏感，对其他抗生素均有不同程度的耐药；单纯产ESBLs时，第四代头孢菌素如头孢吡肟对其活性较好，但产AmpC酶同时产ESBLs时，令头孢吡肟几乎失去活性。肺炎克雷伯菌产AmpC酶但不产ESBLs的20株菌中7株检出blaDan基因，占35％，1株检出blaMIR基因，占5％。另外同时产AmpC酶和ESBLs的20株肺炎克雷伯菌中100％检出blaTEM基因，90％检出blacTX-M-1。基因，100%检出blaSHV基因，85％检出blaDHA基因，15％检出blaMIR基因，90％检出不同的氨基糖苷类修饰酶基因。结论 克雷伯菌产AmpC酶和同时产ESBLs的耐药性比单纯产AmpC酶的耐药性更高、更显著；肺炎克雷伯菌产AmpC酶的主要基因型为DHA，对同时存在2～6种不同类型耐药基因的克雷伯菌，碳青霉烯类药物亚胺培南的体外活性最好。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的 了解宁夏地区2所医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型分布.方法 采用微量肉汤法测定分离自宁夏地区两家医院的45株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对10种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),通过聚合酶链反应(PCR)法及克降测序分析其所产生ESBLs的基因型.结果 45株菌株对美罗培南全部敏感,对头孢嚷肟、奈替米星、氨苄西林、头孢噻吩、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑、卡那霉素的耐药率均在64%以上.45株ESBLs菌株有41株产CTX-M型,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-28.结论 宁夏地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均存在严重的耐药性,ESBLs基因型以CTX-M-14型为主.     

2型糖尿病伴慢性牙周炎患者病原菌分布及耐药性分析

目的：探讨2型糖尿病伴慢性牙周炎患者病原菌分布特点及耐药性。方法：选取本院2020年2月—2022年5月收治的112例慢性牙周炎患者作为单纯组,另选取同期112例2型糖尿病伴慢性牙周炎患者作为合并组,均采集患者龈下菌斑进行病原菌培养及药敏试验。结果：224例患者共检出289株厌氧菌,黑色素普雷沃菌、牙龈卟啉单胞菌构成比较高;合并组共检出152株病原菌,单纯组共检出137株病原菌,合并组产黑色素普雷沃菌、牙龈卟啉单胞菌、伴放线杆菌构成比均高于单纯组（P<0.05）,中间普氏菌构成比低于单纯组（P<0.05）;药敏结果显示,检出病原菌均对氯霉素、亚胺培南、阿莫西林、头孢西丁的敏感率较高,对青霉素、头孢美唑、甲硝唑、克林霉素有一定耐药性。结论：2型糖尿病伴慢性牙周炎患者以厌氧菌感染为主,产黑色素普雷沃菌、牙龈卟啉单胞菌是其中的优势菌,均对青霉素、头孢美唑、甲硝唑、克林霉素具有一定耐药性,但对氯霉素、亚胺培南、阿莫西林、头孢西丁敏感率较高。     

黏液型铜绿假单胞菌42株耐药性分析

目的了解黏液型铜绿假单胞的耐药特性,探讨其耐药机制,为临床治疗选药提供依据。方法采用K-B法分别测试42株黏液型和265株非黏液型铜绿假单胞菌对常见抗菌药物的耐药性,并进行统计分析。结果体外药敏试验结果显示,黏液型铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的敏感率明显高于非黏液型铜绿假单胞菌。结论黏液型铜绿假单胞菌的体外药敏试验敏感率明显高于非黏液型铜绿假单胞菌的敏感率,但临床治疗时应考虑其生物膜的存在,选择合适的药物进行治疗。     

铜绿假单胞菌DHA-1型AmpC酶的检测及耐药性分析

目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产阳性菌株,再经三维试验确诊;PCR扩增DHA结构基因。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%;26株三维试验阳性菌株PCR扩增出23株DHA-1型酶基因;药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产酶株和非产酶株对亚胺培南均有较高的敏感性。结论临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高;AmpC酶基因型以DHA-1型为主要流行株;产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药。     

深部病原性真菌感染及耐药性分析

目的:探讨深部病原性真菌感染的特点及耐药趋势.方法:用回顾调查的方法对我院住院病人及门诊病人各类标本培养的68株病原性真菌对常用抗真菌药物药敏试验结果进行分析.结果:分离出的68株病原真菌以内科系统为主,共52株(占76.47%);检出病原性真菌最多的部位是呼吸道,占真菌标本的64.71%;真菌以白色假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌和类星型念球菌为主,分别占58.82%、8.82%、8.82%;药敏结果,氟胞嘧啶、两性霉素B 90%敏感,白色假丝酵母菌对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐药率很高均在70%以上,5种常见抗真菌药物对其他病原真菌的敏感率均在90%以上.结论:加强临床病原性真菌分离株,对抗真菌药物的耐药性检测,然后根据药敏试验结果科学合理选用抗真菌药物十分重要.     

70株鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶基因型检测

目的调查和研究南京地区70株鲍曼不动杆菌耐药性及β内酰胺酶基因型。方法用KB法测定临床分离的70株鲍曼不动杆菌对5种抗生素的耐药性,采用PCR法检测β-内酰胺酶耐药基因型。结果70株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮／舒巴坦耐药率为7．1％,头孢吡肟和头孢他啶的耐药率分别为61．4％和64．3％,头孢唑啉和头孢呋肟的耐药率均在80．0％以上;有40株菌检测到TEM型β-内酰胺酶基因,且均对头孢吡肟等抗生素耐药,2株为GES型,1株是VEB型,未检出CARB、DHA和PER基因。结论南京地区鲍曼不动杆菌以TEM型为主,其对β-内酰胺类的高耐药率与TEM型基因有直接的关系。     

急性肾盂肾炎患者感染致病菌的特点与分布及其药敏试验结果对抗菌药物合理用药的影响

目的:探究急性肾盂肾炎(APN)患者感染致病菌的特点与分布及其药敏试验结果对抗菌药物合理用药的影响。方法:抽取2012年1月-2019年2月间医院收治的APN患者200例资料作为研究对象;统计其抗菌药物使用情况及致病菌的药敏试验结果,以及分析其患者在院期间感染致病菌的种类与分布;并采用Logistic回归模型分析影响APN患者用药合理性的因素。结果:200例APN患者的标本中,检出感染菌株122株,其中大肠埃希菌40株占32.78%,克雷伯菌26株占21.31%;产ESBLs菌对头孢唑林、头孢噻肟、氨苄西林、头孢曲松及头孢呋辛的耐药率为100.00%;肠球菌属对红霉素及环丙沙星的耐药率为100.00%及96.00%,显著高于其他药物;注射剂药物中左氧氟沙星、头孢地嗪及氨曲南的DUI均>1;APN患者病原菌感染种类、产ESBLs菌依照药敏结果用药及使用药物种类因素均是影响APN患者用药合理性的独立性影响因素(P<0.05)。结论:APN患者感染致病菌主要以革兰阴性菌为主,临床治疗应依照药敏试验结果合理选用抗菌药物,以确保患者用药有效性和安全性。     

Comparison of pathogenicity of various Candida tropicalis strains

To clarify the pathogenicity and the pathogenic factors of Candida tropicalis strains, five strains, IFO 0199, IFO 0587, IFO 0589, IFO 1400, and IFO 1647, of C. tropicalis were tested for their lethality to mice, adherence to Hela cells, hydrophobicity, cell growth under acidic conditions (pH 2.0-5.9), and sucrose assimilation using C. albicans NIH A-207 strain as reference. The pathogenicity for mice of all strains was observed in the increasing order IFO 1400=IFO 0589, IFO 0587, IFO 1647=NIH A-207, and IFO 0199. The pathogenicity for mice by all the tested C. tropicalis strains was not correlated with the adherence, the hydrophobicity, or the cell growth. On the other hand, the pathogenicity correlated well with the sucrose assimilation ability. These results show that the pathogenic mechanisms of the C. tropicalis strains were different from those of the C. albicans strains.     

Insights on antibiotic resistance of Staphylococcus aureus from its whole genome: genomic island SCC.

Staphylococci are ubiquitous colonizers of the skin and mucous membranes and Staphylococcus aureus is the most pathogenic species. The spread of antibiotic resistance among S. aureus strains is a major concern in the treatment of staphylococcal infections. Acquisition of resistance may involve mutation of a bacterial gene on the chromosome or transfer of a resistance gene from other organisms by some form of genetic exchange (conjugation, transduction, or transformation). Completion of whole genome sequences of three methicillin-resistant S. aureus (MRSA) strains has provided us a bird's-eye view of the distribution of the mobile genetic elements in the bacterial chromosome that encode antibiotic resistance as well as pathogenicity in S. aureus.     

安徽地区耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的 研究安徽地区耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)的耐药性、碳青 霉烯酶基因型及分子流行病学研究,为控制医院感染提供理论依据。方法 收集安徽地区43家三级医院2015年9月和2016年9月 CRAB非重复菌株312株,从中挑选出两年内均有CRAB的医院12家,菌株147株。对挑选出的147株CRAB采用琼脂稀释法测定 16种抗菌药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC);PCR扩增碳青霉烯酶耐药基因;采用多位点序列分型技 术(multilocus sequence typing, MLST)进行分子分型,使用eBURST软件分析菌株亲缘性。结果 147株临床分离的CRAB均为多 重耐药菌株,对16种抗菌药物耐药性均较高,其中对替加环素和米诺环素耐药性较低,分别为9.27%和54.26%。147株CRAB中 有134株携带blaOXA-23基因,1株携带blaOXA-24 基因,4株携带blaIMP基因,全部携带blaOXA-51基因,其余碳青霉稀类耐药基因均未检 出。147株CRAB分为26个ST基因型,其中13个ST分型属于CC92克隆群,ST195有48株,为安徽地区最常见ST型,另外新发现 15个ST基因型。结论 本研究中安徽地区147株CRAB对临床常用抗生素耐药性严重,除替加环素和米诺环素外,耐药率均在 76%以上。blaOXA-51是位于染色体上的固有基因,检出率为100%;blaOXA-23 是安徽地区最主要的碳青霉烯酶基因型,检出率为 91.15%。CC92为安徽地区最主要克隆群,与世界流行克隆群一致。本研究所测147株菌株间存在进化间关系,提示可能存在水 平传播趋势。     

慢性化脓性骨髓炎212例细菌培养及耐药性分析

目的:分析慢性化脓性骨髓炎致病菌及其耐药情况,为临床抗菌用药提供依据。方法:对从临床送检的281份标本中选出符合要求的212份标本行细菌培养和耐药性分析。结果:212份标本经细菌培养,共分离出致病菌252株,其中G 球菌142株,G-杆菌101株进行耐药性分析,另9株分枝杆菌未做耐药性分析。耐药菌株多集中在苯唑西林耐药的葡萄球菌,在G-杆菌中;单种药物以青霉素G平均耐药率最高达90.8%,呋喃妥因平均耐药率为0.7%。结论:慢性化脓性骨髓炎的致病菌多数对医院常用的抗菌药产生耐药,而对一些目前已很少应用的老抗菌药反而敏感,这种现象需引起临床医师的重视。     

The French antibiotic resistance monitoring programs

Surveillance of antimicrobial resistance in bacteria from animal origin in France is organised by the French Agency for Food Safety (Agence Française de Sécurité Sanitaire des Aliments, AFSSA) through two types of networks. The first collects non-human zoonotic Salmonella strains in one centre (AFSSA, Paris) where they are tested for their antimicrobial susceptibility. The others, managed by AFSSA Lyon, deal with bovine pathogenic strains and are multicentric, that is they collecting antibiotic sensitivity and other data from the local public veterinary diagnostic laboratories. This requires standardisation of the methods used in each partner laboratory. Statistical analysis of any change in French resistance patterns can be monitored by these three networks either as a function of strain pathogenicity and/or of the ecological origin of the isolate. The system also encourages efficient collaboration between veterinarians and the laboratory. Such collaboration improves both the quality of routine antibiotic testing and understanding of the molecular mechanisms underlying resistance.     

613株病原菌分布及其主要耐药情况分析

目的分析故城县医院检出的病原菌分布及其主要病原菌的耐药情况,为临床合理用药和控制医院感染提供参考。方法采用恒星细菌分析系统对2012年6月至2012年12月分离的613株病原菌进行鉴定,药敏试验采用琼脂纸片扩散法。结果 2012年下半年共收集非重复临床分离菌株613株,其中革兰阴性菌417株占68%,革兰阳性菌128株占20.8%,真菌68株占11.2%,除真菌外其他病原菌的耐药率较之上半年都明显增加。结论应完善抗菌药物的规范使用,加强细菌培养意识,严格控制医院感染病例的诊断和用药标准,预防抗菌药物耐药率的快速产生。革兰阴性杆菌在住院患者感染中占主要地位,临床医师应警惕革兰阴性菌引起的感染。     

1580例血流感染患者病原学分析

目的：了解我院2012年1月-2014年10月近3年血流感染患者病原学特征,为临床针对血流感染的治疗提供可靠依据。方法：对1580份患者血培养标本经Bactec 9120全自动血培养仪和Phoenix-100型全自动微生物分析仪进行培养和鉴定药敏。结果：近3年间血培养共分离出1580株病原菌,各科室检出病原菌较多的是中心ICU（399株,25%）,神经外科（336株,21%）,血液内科（207株,13%）。其中革兰阴性菌（875株,55.4%）,革兰阳性菌（614株,38.9%）,真菌（91株,5.7%）。检出率位于前5位的分离菌依次为大肠埃希菌（264株,16.71%）、肺炎克雷伯菌（189株,11.96%）、鲍曼不动杆菌（115株,7.28%）、金黄色葡萄球菌（94株,5.95%）、洋葱伯克霍尔德菌（75株,4.75%）。药敏试验显示,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率均为100%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（77株,81.9%）,对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基苷类抗菌药呈多重耐药。 D-试验阳性菌株数（249株,66%）。革兰阴性菌的大肠埃希菌对多黏菌素（0%）、头孢哌酮-舒巴坦（0%）、亚胺培南（1%）、美洛培南（1%）较敏感,对其他常见的抗菌药都存在不同程度的耐药。结论：血培养分离的病原菌种类较多,耐药性差异较大,对血培养分离株进行早期监测和耐药性分析非常必要,可为临床医生合理应用抗菌药物提供重要依据,避免滥用抗菌药,减少不合理的经验性治疗。