羧酸酯酶单核苷酸多态性与个体化药物治疗的研究进展

人类羧酸酯酶(carboxylesterases,CESs)属于丝氨酸酯酶超家族,在人体中主要包含羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)2种亚型。CES负责多种药物的代谢,如部分血小板凝集抑制剂、精神兴奋剂、抗肿瘤药等,由于CES的单核苷酸多态性(SNP)在人类基因组中广泛存在,其对药物代谢酶基因的表达和(或)酶活性的高低有着重要影响,从而最终影响着药物在体内的代谢过程。本文综述了CES1和CES2相关SNP所致酶活性的改变,以及由于其多态性导致代谢药物体内过程改变的相关药物基因组学研究,以期为临床治疗和研究提供参考。     

羧酸酯酶1和2基因多态性在药物代谢中的研究进展

人类羧酸酯酶属于α/β水解酶家族,负责许多内源性和外源性化合物的水解,广泛位于药物代谢的主要组织,例如肝脏和小肠等。人羧酸酯酶主要有羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)。单核苷酸多态性(SNPs)对药物代谢酶的表达和(或)活性有重要的影响,这可能解释部分药物反应的个体差异。本篇综述主要介绍了由CES1和CES2单核苷酸多态性导致的CES酶多态性。对于含有酯键的药物,一些有意义的SNP可能影响CES酶的功能从而影响其药动学,进而对其药理和毒理作用发挥重要影响。     

5种中药成分体外对羧酸酯酶活性的影响研究

目的:初步考察5种中药成分黄芩苷、穿心莲内酯、橙皮苷、茶多酚及黄豆苷元在体外对羧酸酯酶1(CES1)和羧酸酯酶2(CES2)活性的影响。方法:采用CES1、CES2特异性探针咪达普利和伊立替康(CPT-11)及其代谢产物咪达普利拉和SN-38,在大鼠肝微粒体孵育体系中初步考察上述5种中药成分抑制两种CESs活性强度。结果:上述5种中药成分在100μmol·L-1浓度下对CES1、CES2活性均无显著抑制作用(P<0.05)。结论:黄芩苷、穿心莲内酯、橙皮苷、茶多酚及黄豆苷元在体外不影响CESs活性,体内实验有待进一步开展。     

人类细胞色素P_(450)同工酶与药物代谢

细胞色素Ｐ４５０是一组结构和功能相关的超家族基因编码的同工酶。目前已鉴定了３０多个Ｐ４５０家族,其中１０个为哺乳动物所有。哺乳动物Ｐ４５０家族中按功能分为两大类:一类为体内甾体激素和胆酸的合成酶,另一类为外来化学物（ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃｓ）代谢酶［１］。在人类Ｐ４５０家庭中,主要有３族（ＣＹＰ１,ＣＹＰ２,ＣＰＹ３）１９种同工酶参与外来化学物的代谢［１］。由于Ｐ４５０表达有明显的个体或（和）种族差异,使之对某些治疗药物特别是治疗窗窄的药物及其它化学物的敏感性不同,易于产生毒性反应。环境与遗传因素均可改变…     

酯酶的药物代谢与种属差异研究进展

羧酸酯酶(CES)、芳基乙酰胺脱乙酰酶(AADAC)、丁酰胆碱酯酶(BCHE)和对氧磷酶(PON)是人体内重要的酯酶,参与药物在体内的代谢、活化解毒,在前药的设计中也起到非常重要的作用.围绕人体内广泛参与药物代谢的酯酶,对其在体内的组织分布、底物和抑制剂的特异性及种属差异研究进展进行综述,为临床前动物模型选择、新药的设...     

大鼠肝脏和肠道羧酸酯酶CES2对伊立替康的部位特异性代谢作用

目的探讨羧酸酯酶同工酶CES2在大鼠肝脏和肠道的表达特征,并研究其对伊立替康（CPT 11）的水解代谢作用。方法采用CPT 11与大鼠肝脏和各肠段S9组分共同孵育,高效液相色谱法测定代谢产物SN 38的生成量。采用荧光定量PCR技术（RT PCR）对各组织中的CES2进行定量分析。结果大鼠肝脏和肠道表现出对CPT 11的部位特异性水解作用,肝脏的水解活性强于肠道,各肠段水解CPT 11的作用强度依次为：十二指肠＞空肠＞回肠＞结肠。RT PCR结果同样显示CES2的两个主要同工酶AB010635和AY034877在肝脏中的含量明显高于肠道,并随着肠段的下行而递减。结论CPT 11在大鼠肝脏和肠道S9中可被有效水解,但代谢产物SN 38的生成量在各组织中不一致这一现象与CES2在不同组织中的部位特异性分布有关。该研究结果为通过抑制CES2预防CPT 11毒副作用的策略开发提供了基础。     

吡喹酮在诱导和未诱导大鼠肝微粒体内的羟化代谢概貌及其羟化物的质谱鉴定

用细胞色素P450（P450）特异诱导剂研?究参与吡喹酮（PQT）代谢的P450同工酶，在未诱导肝微粒体内，PQT代谢仅生成其D环单羟化物. 在β-萘黄酮诱导肝微粒体内，PQT代谢后也生成其D环单羟化物. PQT在苯巴比妥诱导的肝微粒体内代谢生成D环，B环和A环三个单羟化物. 在地塞米松和红霉素诱导的肝微粒体内，PQT代谢生成七个代谢产物. 结果表明参与PQT分子羟化的P450同工酶至少包括CYP1A，CYP2B和CYP3A亚家族，每个亚家族代谢PQT的概貌各不相同，CYP3A优先羟化A环，CYP2B优先羟化D环和B环，CYP1A则几乎仅羟化D环.     

核受体调控羧酸酯酶表达及活性的研究进展

羧酸酯酶(carboxylesterase,CES)是一类重要的Ⅰ相药物代谢酶,参与许多临床抗癌药物、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类杀虫剂、环境中有毒物质以及前致癌物的体内代谢。有研究表明,许多核受体(nuclear receptor,NR)家族成员在调控人和动物肝脏及肠道CES的表达和活性方面发挥着重要作用。本文查阅有关文献,综述NR对人和动物CES调节作用的研究进展,评价其在药物代谢、药物相互作用等方面的意义。近年来,随着基因敲除小鼠模型和转基因小鼠模型的应用,孕甾烷X受体蛋白(pregnane X receptor,PXR,NR1I2)和雄甾烷X受体蛋白(constitutive androstane receptor,CAR,NR1I3)调控CES的转录机制逐步被阐明,其他NR对CES调控机制的研究也有所突破,但目前有关NR对CES调节方面的研究大多局限于啮齿动物模型,后续可通过运用人源化小鼠模型以及临床试验等来深入探讨NR调控CES的作用机制以指导新药开发及临床合理用药。     

吡喹酮在诱导和未诱导大鼠肝微粒体内的羟化代谢概貌及其羟化物的质谱鉴定

用细胞色素Ｐ４５０（Ｐ４５０）特异诱导剂研究参与吡喹酮（ＰＱＴ）代谢的Ｐ４５０同工酶，在未诱导肝微粒体内，ＰＱＴ代谢仅生成其Ｄ环单羟化物．在β－萘黄酮诱导肝微粒体内，ＰＱＴ代谢后也生成其Ｄ环单羟化物．ＰＱＴ在苯巴比妥诱导的肝微粒体内代谢生成Ｄ环，Ｂ环和Ａ环三个单羟化物．在地塞米松和红霉素诱导的肝微粒体内，ＰＱＴ代谢生成七个代谢产物．结果表明参与ＰＱＴ分子羟化的Ｐ４５０同工酶至少包括ＣＹＰ１Ａ，ＣＹＰ２Ｂ和ＣＹＰ３Ａ亚家族，每个亚家族代谢ＰＱＴ的概貌各不相同，ＣＹＰ３Ａ优先羟化Ａ环，ＣＹＰ２Ｂ优先羟化Ｄ环和Ｂ环，ＣＹＰ１Ａ则几乎仅羟化Ｄ环．     

外源物对细胞色素P450同工酶表达的基因调控

细胞色素P450（CYP450）酶系中的1,2,3,4家族是代谢外来化合物的主要酶系。外源物进入体内,因其代谢活性的不同以及CYP450各家族敏感程度的差异,使CYP450的活性和表达受到不同程度的影响。近年来,可通过分子诊断学（如分子探针等）实验方法鉴定受影响的CYP450同工酶的种类,并精确了解外源物在代谢过程中对CYP450的调控方式。本文从的物在CYP450基因水平上的调节（包括对DNA、转录、mRNA及蛋白质合成水平的影响）和芳烃受体（AhR)对CYP450基因的调节等方面进行了综述。CYP450同工酶的存在类型及表达水平可直接影响机体对外源物的代谢转化,这与环境致癌物、化学毒物、药物等外源物对机体的致癌风险、中毒反应及药物间相互作用密切相关。对CYP450同工酶的合理调控将对防治疾病、维护人类健康有重要意义。     

利用细胞培养基或动物血浆中的荧光标记产物测定鞘磷脂合酶活性

鞘磷脂合酶（SMS）催化神经酰胺（ceramide,Cer．）转变为鞘磷脂（sphingomyelin,SM）。近来的研究表明神经酰胺和鞘磷脂参与了代谢综合征的过程,因而鞘磷脂合酶被认为是开发抗代谢综合征药物的潜在靶点。鞘磷脂合酶有两个同工酶,分别称为鞘磷脂合酶1（SMS1）和鞘磷脂合酶2（SMS2）。这两种同工酶的亚细胞定位不同,在不同组织中的表达水平也有差异。到目前为止,已发表有多种方法测定组织和细胞匀浆中的总SMS活性,这些方法通过分析总反应体系或细胞内的酶促反应产物来衡量SMS活性。本文介绍一种测定SMS活性或筛选SMS抑制剂的新方法。我们将荧光标记的神经酰胺（NBD-Cer．）作为底物与细胞孵育,或者将该底物注射到小鼠体内,然后监测在细胞培养基或小鼠血浆中出现的荧光标记的鞘磷脂（NBD-SM）的含量。采用这种办法可有效检测出D609（一种鞘磷脂合酶抑制剂）对细胞和小鼠整体SMs活性的抑制作用。我们进一步采用该方法检测了SMS1基因敲除小鼠和sMs2基因敲除小鼠的SMS活性,结果发现注射底物后,SMS2基因敲除小鼠（而不是SMS1基因敲除小鼠）血浆中NBD-SM的堆积被明显阻断。因而该方法可用于检测生理或药理条件下在体或离体组织的SMS活性、筛选SMS抑制剂、甚至筛选SMS2特异性抑制剂。     

与细胞色素P_(450)2D6相关的药物相互作用研究

细胞色素P450（CYP）是一组结构和功能相关的超家族基因编码同工酶。人体内参与药物代谢的CYP有17个基因家族，42个亚家族，64个酶。众所周知，在人体内许多因素如遗传因素、年龄、性别、疾病和环境都可以影响CYP的活性。本文着重综述了近年来国内、外文献报道的与CYP2D6相关的药物相互作用。CYP2D6是一种重要的细胞色素药物代谢酶，除参与代谢一些内源性物质和某些环境中毒性化合物外，主要是参与多种药物的代谢。CYP2D6参与代谢的药物占总CYP代谢药物的30％，同时对手性药物的代谢还呈现立体选择性。CYP2D6是临床上重要的肝药酶之一，与之相关的药物相互作用也十分多见。了解CYP2D6的底物以及相关的药物相互作用对临床合理用药具有十分重要的意义。     

普鲁卡因胺经羧酸酯酶1对咪达普利代谢的影响

目的:研究普鲁卡因胺经羧酸酯酶1（CES1）影响咪达普利代谢的作用。方法:进行体外大鼠肝微粒体酶孵育实验,通过测定CES1特异性底物咪达普利的代谢产物咪达普利拉的含量,来研究普鲁卡因胺对CES1活性的影响;将12只SD大鼠随机分为两组,分别给予生理盐水和普鲁卡因胺(50mg·kg^-1),连续4 d,随后灌胃给予咪达普利(10mg·kg^-1),于给药后不同时间点采集血样,采用LC-MS/MS法测定血浆中咪达普利拉的含量,计算药动学参数,来研究普鲁卡因胺对咪达普利在大鼠体内代谢的影响。结果:在体外研究中,普鲁卡因胺对CES1的调节呈现剂量依赖型抑制特征。体内研究发现,普鲁卡因胺显著降低咪达普利拉AUC_0-24h,AUC_0-∞和C_max。结论:普鲁卡因胺显著抑制CES1的活性,从而抑制咪达普利拉的形成,对酯类前药代谢的研究有一定的意义。     

CYP3A对AFB1致肝细胞癌的影响

细胞色素P450酶（cytochromeP450，CYP450）家族参与人体中许多内外源性化合物的转化过程．对生物体内的新陈代谢起着非常重要的作用。哺乳动物的CYP450酶主要表达在肝脏和小肠。根据结构特征、底物特异性和基因同源性来分类．其中有四个CYP450基因族（CYP1、CYP2、CYP3和CYP4）承担大量的肝脏内外源性物质和口服药物的代谢作用．与化学物质致癌关系比较密切。尤其重要的是CYP3A酶，含量最多，占肝脏总CYP450酶的30％～50％，小肠总CYP450酶的70％。     

Sirtuin2及其与代谢性疾病的关系研究进展

Sirtuins是NAD⁺依赖性的进化保守的脱乙酰酶家族,家族内不同蛋白在亚细胞定位和功能方面显示出多样性。Sirtuin 2（SIRT2）在全身组织器官中均有表达,富集于代谢相关组织,亚细胞定位显示其主要存在于细胞质中,并能穿梭于细胞核内,参与多种生理活动,尤其在调节代谢方面具有重要作用,是临床治疗代谢性疾病的潜在靶点。目前以SIRT2为靶点的特效药还处于抑制剂或激动剂研发阶段,尚未有相关靶向特效药物进入临床试验。总结近年来SIRT2对体内外代谢过程的调控作用、作用靶点和相关调节剂及其与代谢相关疾病的研究进展。     

以咖啡因为代谢探针测定细胞色素P450 CYP2A6活性

细胞色素P450CYP2A6（CYP2A6）是体内重要的药物代谢酶之一，主要在肝脏表达，约占肝脏细胞色素P450酶的5％。CYP2A6参与抗肿瘤药（环磷酰胺和异环磷酰胺）、麻醉药（氟烷和甲氧氟烷）、前致癌物（黄曲霉素B1、亚硝胺盐等）、环境化合物（汽油醚）及烟草中尼古丁的代谢。CYP2A6活性与这些物质的疗效或毒性以及一些肿瘤的易感性密切相关，测定CY1Y2A6活性有助于预测药物疗效、预防药物毒副反应及肿瘤病因调查。     

布格呋喃与大鼠肝脏药物代谢酶的相互作用

目的：研究参与布格呋喃代谢的CYP450同工酶类型和体外代谢的酶促动力学特征,并观察口服布格呋喃对大鼠肝脏药物代谢酶的影响。方法：采用比色／动态荧法光及UV—HPLC法检测大鼠口服布格呋喃（8mg&#183;kg^-1&#183;d^-1,连续3日）后肝脏CYP450同工酶（CYP1A2、2C6、2C11、2D2、2E1和3A2）和Ⅱ相酶-谷胱甘肽巯基转移酶（GST）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UDPGT）和谷胱甘肽还原酶（GR）活性。应用肝微粒体温孵法测定布格呋喃体外代谢速率（Vmax和米氏常数Km）。比较布格呋喃在正常及高诱导大鼠肝微粒体中代谢速率的差异以及CYP1A2、2C6、2C11、2D2、2E1和3A2的选择l生抑制剂（呋拉茶碱、磺基苯吡唑、奥美拉唑、奎尼丁、戒酒硫和酮康唑）对布格呋喃代谢的抑制程度,鉴定参与布格呋喃代谢的CYP450同工酶类型。结果：布格呋喃在乙醇、地塞米松和3-甲基胆葸诱导大鼠肝微粒体中的Km、Vmax分别为正常组的11倍、6倍和1.3倍;应用CYP3A2、2E1和IA2的选择性抑制剂酮康唑、戒酒硫和呋拉茶碱可不同程度地抑制布格呋喃的代谢,使代谢速率下降为对照组的34％、47％和78％。     

细胞色素P450同工酶在外源物代谢中的作用

细胞色素Ｐ４５０酶系（ＣＹＰ）中的Ｐ４５０Ⅰ￣Ｐ４５０Ⅳ家族是代谢外来化合物的主要酶系。环境致癌主要是ＣＹＰ１Ａ的底物，ＣＹＰ２Ｄ６的突出特征是它的遗传多态性，而ＣＹＰ２Ｅ１主要参与乙醇等小分子化合物的代谢，ＣＹＰ３Ａ则是参与大多数临床口服药物代谢的主要同工酶。本文综述了细胞色素Ｐ４５０铎外源性化合物代谢转换及调控研究，对ＣＹＰ１Ａ、ＣＹＰ２Ｅ的诱导机制及ＣＹＰ３Ａ的主要抑制机制也作了叙述。     

PEG-蛋白质类药物的体内代谢与安全性评价

聚乙二醇化蛋白质（pegylated protein,PEG-蛋白质）是延长蛋白质类药物半衰期的最有效的途径之一,通过延缓蛋白的排泄,提高其抗酶解的能力,增加其溶解性与稳定性,以及降低其免疫原性,可显著延长蛋白质类药物体内的生物活性,从而改善蛋白质类药物的药代动力学和药效学性质。由于方法学上的限制,PEG-蛋白质类药物的代谢、组织分布和排泄研究极具挑战,但众多的文献资料表明,聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）分子的体内代谢与安全性已经确立,无需过度担心PEG-蛋白质类药物的安全性。将从PEG-蛋白质体内组织分布与排泄研究方法、PEG的代谢与安全性和PEG-蛋白质类药物动物和临床应用的安全性3方面介绍和评述PEG-蛋白药物的体内代谢与安全性评价问题。     

中草药对孕烷X受体和组成型雄烷受体等核受体通路影响的研究进展

孕烷X受体（pregnane X receptor,PXR）是核受体亚家族的成员之一,参与大量的外源性和内源性化学物质的生物转化,能被多种中草药激活,调节下游靶基因的表达,在药物代谢酶和转运体的调节中起重要作用。组成型雄烷受体（constitutive androstane receptor,CAR）和PXR一样能与外源性配体结合调节CYP2B6、CYP3A4、CYP2C19、UGT1A1的表达,共同参与CYP药物代谢酶的调节,成为药物作用的靶标。