舌癌原代细胞化疗药物的体外敏感性观察

①目的探讨4种化疗药物对不同舌癌细胞的敏感性,为临床化疗提供理论依据。②方法通过MTT法对Tca83舌癌细胞株和裸鼠舌癌动物模型原代细胞按药物浓度梯度1ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、100ng/mL、5μg/mL进行药物敏感性试验,并通过SPSS 19．0对数据进行分析处理。③结果2种来源的肿瘤细胞对4种化疗药物的敏感性差别无统计学意义（ P ＞0．05）。④结论原代肿瘤细胞培养的化疗药物敏感实验可以获得较稳定的结果,对临床化疗药物的选择有一定的指导价值。     

肺癌细胞株对6种抗癌药物敏感性测定

目的　探讨肺癌细胞株抗癌药物的敏感性。方法　采用体外MTT比色分析法对 10株肺癌细胞进行NVB、GEM、TAX、SN - 38、CDDP、5 -Fu 6种抗癌药物的体外敏感试验。结果　 ( 1) 6种抗癌药物对SCLC的显效顺序依次为GEM、NVB、CDDP、TAX、5 -Fu、SN - 38,4株SCLC的敏感性顺序依次为Lu135、N2 31、H6 9、SBC - 3;( 2 ) 6种抗癌药物对NSCLC的显效顺序依次为 5 -Fu、NVB、GEM、CDDP、TAX ,对SN - 38均为耐药 ,3种 6株NSCLC的敏感性顺序依次为Lu 6 5、PC 7、LK - 2、PC 9、PC 14、A 5 49;( 3)SCLC株对 6种抗癌药物敏感性优于NSCLC ,6种抗癌药物对 4株SCLC的总有效率为 87 5 % ,敏感为 6 2 5 % ,较敏感为 2 5 % ,耐药为12 5 % ;对 6株NSCLC的总有效率为 5 2 78% ,敏感为 16 6 7% ,较敏感为 36 11% ,耐药为 4 4 4 4%。结论　 10株肺癌细胞株对 5 -Fu最敏感 ,GEM、NVB、CDDP、TAX次之 ,SN - 38效果最差。 6种药物中对 5 -Fu、CDDP未表现出明显耐药性 ,其余 4种均存在不同程度的耐药性 ,表明肺癌细胞株存在自然耐药性。     

干扰素生物活性两种测定方法的比较研究

目的：摸索改进的结晶紫染色法与噻唑蓝（MTT）比色法中哪一种方法能够提高干扰素的生物学活性测定（细胞病变抑制法）结果的准确性。方法：比较在干扰素的生物学活性测定后期,采用先结晶紫染色乙醇脱色然后比色的方法（方法一）和采用加入MTT后裂解比色的方法（方法二）,经过多次比较证明哪一种方法测定结果的准确性更高。结果：采用方法二测得的多次结果之间产生的偏差较小,单次结果的可信度较高,单次测定结果的相关系数r值较大。结论：采用MTT比色法比改进的结晶紫染色法更适合应用于干扰素的生物学活性测定,可提高结果的准确性。     

六亚甲基二乙酰胺体外对白血病细胞株的抗增殖作用及其机理研究

目的　研究抗肿瘤药物六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)在体外对人白血病细胞株U937,K5 6 2增殖和凋亡的作用 ,初步从细胞周期调控的角度探讨其作用机理。方法　应用MTT比色法和锥虫蓝拒染法观察HMBA对细胞增殖的抑制作用。用细胞周期素A/DNA双染色法检测不同浓度HMBA(1、2、4mmol/L)实验组细胞胞浆内细胞周期素A蛋白表达水平 ,并进行DNA含量分析。用异硫酸盐荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶双染色法 ,DNA片段变化和亚G1峰检测细胞凋亡。结果　 (1)HMBA能明显地抑制K5 6 2 ,U937细胞增殖 ,呈剂量依赖性 (K5 6 2细胞经HMBA干预后第六天 ,对照组、1、2、4mmol/L组MTT法的 5 95nm吸光度值分别为 1 0 3、0 81、0 5 8、0 36 )。 (2 )HMBA能剂量依赖性地下调胞浆内细胞周期素A表达水平 ,(K5 6 2细胞经HMBA干预后 ,对照组 ,1、2、4mmol/L组细胞周期素A阳性率分别为 34 4 %± 5 2 % ,16 1%± 2 5 % ,9 9%± 1 7% ,7 6 %± 2 0 % ) ,S期细胞比例与细胞周期素A的改变趋势是一致的。 (3)各实验组均未检测到有凋亡发生。结论　HMBA通过下调S G2期周期素A表达而打破了K5 6 2 ,U937细胞增殖的环节 ,是其发挥抑制白血病细胞增殖的机理之一     

姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞抗增殖作用的研究

目的 研究姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期分布及基因表达情况的影响.方法 MTT法测定姜黄素生物活性及姜黄素抗增殖效应、FCM分析细胞周期分布,RT-PCR技术测定bcl-2、bax、PCNA mRNA表达.结果 姜黄素对MCF-7细胞的IC50值为18.5 μmol/L.各实验组的姜黄素对MCF-7细胞的生长均有抑制作用,这种抑制作用呈时间-剂量依赖方式.FCM检测结果:姜黄素20 μmol/L及40μmol/L作用于MCF-7细胞24 h,可阻滞细胞周期于G0/G1期,并诱导部分细胞凋亡.RT-PCR测定结果:姜黄素0～80 μmol/L作用MCF-7细胞24 h,bcl-2、PCNA mRNA表达水平降低、bax mRNA表达水平增加.结论 姜黄素可抑制MCF-7细胞生长、阻滞细胞周期于G0/G1期,对MCF-7细胞有抗增殖作用,并能诱导部分细胞凋亡,其机制可能与姜黄素抑制bcl-2、PCNA mRNA表达,促进bax mRNA表达有关.     

MTT法测定食管癌对化疗药物敏感性的实验研究

目的探讨肿瘤药敏试验在食管癌化疗选药中的作用。方法将43例患者的食管癌组织进行体外培养,以临床常用的7种化疗药物加以干预,MTT法检测化疗药物对癌细胞的抑制率。结果食管癌对丝裂霉素、氟尿嘧啶、多西他赛、泽菲、环磷酰胺、健择、顺铂中度敏感,7种化疗药物对食管癌细胞的抑制率无显著性差异（P=0．69）。对食管低分化鳞癌细胞的抑制率显著高于高分化者（P=0．025）,DDP对食管中分化鳞癌细胞的抑制率显著高于高分化者（P=0．017）。食管上段、中段、下段癌细胞对以上7种化疗药物的敏感性无显著性差异（P〉0．05）。结论DDP、对食管癌细胞分化程度低者抑制作用较强。初次化疗的食管癌患者对多种化疗药物均较为敏感,但各药的抑制率无显著性差异,故可先使用价格便宜的普通药物,当病情出现反复时再更换化疗方案,以避免耐药,从而提高疗效,并节省费用。     

加热联合维拉帕米对人舌癌耐药细胞株Tca8113/BLM耐药性的影响

目的 研究加热(hyperthermia,HT)联合逆转剂维拉帕米(verapami,Vera)对人舌癌耐药细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113/BLM耐药性的影响.方法 采用MTT法检测40℃加热1h后联合Vera对人舌癌亲本细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113/BLM化疗药物的敏感性;流式细胞仪(FCM)检测细胞内阿霉素(Doxombicin ADM)浓度聚积以及细胞膜上P-gp和MRP的表达.结果 与单独Vera作用细胞相比,加热40℃ 1h联合5μmol/LVera作用细胞后,Tca8113、Tca8113/BLM细胞的IC50显著下降(P<0.01),且各组之间差异均有显著性(P<0.01),ADM浓度在两种细胞中明显增加(P<0.01),细胞膜上的P-gp和MPR荧光强度显著下降(P<0.01).结论 加热联合Vera能更好提高细胞内药物浓度的聚积,降低细胞膜上的耐药蛋白P-gp和MRP的表达,逆转人舌癌耐药细胞Tca8113/BLM对BLM的耐药现象.     

卟啉氮芥对人肝癌细胞SMMC7721的光动力杀伤作用

目的：研究新单体化合物卟啉氮芥的光化疗抗肿瘤作用。方法：用结晶紫色法测定 啉氮芥对人肝癌细胞SMMC7721的光动力抑制效应。用测定培养上清乳酸脱氢酶（LDH）活性方法研究光动力作用对人肝癌细胞SMMC7721细胞膜的作用,用^3H-Td掺入法研究光动力作用对人肝癌细胞SMMC7721DNA合成的影响。结果：卟啉氮芥（5μg/ml,培养1h）可使人肝癌细胞SMMC7721D值明显降低、经光激发可使培养上清LDH活性显升高;可使体外培养从肝癌细胞SMMC7721的^3H-TdR掺入显下降,经光激发可使体外培养人肝癌细胞SMMC7721的^3H-TdR掺入量进一步显下降。结论：卟啉氮芥可显抑制人肝癌细胞SMMC7721DNA的合成;对人肝癌细胞SMMC7721有显的光动力抑制作用,轲破坏肿瘤细胞的细胞膜,抑制肿瘤细胞DNA的合成,提示卟啉氮芥对肿瘤细胞有显的光动力杀伤作用,具有发展为光化疗抗癌新药的前景。     

藏红花素对人膀胱移行细胞BIU-87细胞抗增殖作用研究

目的 研究藏红花素(crocin)对人膀胱移行细胞株BIU-87增殖的作用及机制.方法 MTT法测定crocin抗增殖效应,FCM分析细胞周期分布,RT-PCR技术测定Cyclin D1, p27kip1 mRNA表达变化,Western blot检测Cyclin D1,p27kip1蛋白表达变化.结果 crocin对细胞生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖关系.FCM检测显示,crocin可使细胞阻滞于G0/G1期;3.2mmol/L crocin作用于BIU-87细胞后RT-PCR结果显示,Cyclin D1 mRNA表达明显下调,p27 mRNA无显著变化;Western blot结果表明Cyclin D1蛋白明显下调;p27kip1蛋白表达显著增加.结论 crocin对细胞有抗增殖作用,可阻滞细胞于G0/G1期,其可影响Cyclin D1 mRNA转录,但并不影响p27 mRNA表达水平,并调控Cyclin D1、p27kip1蛋白表达.     

索拉菲尼对人肝癌细胞株HepG2抑制作用的研究

目的:探讨分子靶向药物索拉菲尼(Sorafenib)在体外对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用.方法:采用MTT法检测Sorafenib对HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率.结果:Sorafenib能明显抑制HepG2细胞增殖,呈时间-剂量依赖效应;6μmol/L的Sorafenib理HepG2细胞72d,时,HepG2 细胞周期中的S期比例明显升高,G0-G1期、G2-M期比例明显下降,凋亡率明显上升(P<0.05,P<0.01).结论:Sorafenib对体外人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制作用,主要表现为抑制其增殖和促进其凋亡.     

丁酸盐与非甾体抗炎药对大肠腺瘤和腺癌细胞的抗增殖作用

目的：观察丁酸盐和两种非甾体药物(NSAIDs)阿斯匹林和高选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对原代培养的大肠腺瘤细胞和HT-29腺癌细胞抗增殖作用的影响，并探讨其可能的作用机制．方法用MTT法检测各药物对两种细胞的抗增殖作用。结果：三种药物均可起到抑制细胞增殖的作用；丁酸盐和两种NSAIDs的联用可不同程度的增强其作用。结论：单用丁酸盐和两种NSAIDs均有抗增殖的作用，两者联用可使其疗效增强．     

维拉帕米对人舌癌耐药细胞株Tca8113/BLM的逆转作用研究

目的研究维拉帕米（verapami，Vera）对人舌癌耐药细胞Tca8113／BLM的逆转作用和机制。方法采用MTT法检测Vera增加人舌癌亲本细胞Tca8113和耐药细胞Tca8113／BLM化疗药物的敏感性；流式细胞仪检测Vera逆转前后对细胞内阿霉素（ADM）浓度聚积、细胞膜上P-糖蛋白（p-glycoprotein P—gp）和MR-P耐药蛋白的表达；激光共聚焦观察细胞的凋亡。结果Tca8113、Tca8113／BLM细胞对BLM的IC50分别为16．1和86．23，加用10μmol／LVera作用细胞后Tca8113、Tca8113／BLM细胞对BLM的IcsD分别为8．1和8．06。亲本细胞和耐药细胞对BLM的增敏倍数分别为2和12倍，ADM在耐药细胞．Tca8113／BLM中蓄积明显增加（P（0．01），细胞膜上的P—gp荧光强度显著下降（P〈O．01），MPR荧光强度则无明显改变（P〉O．05）。结论Vera能逆转人舌癌耐药细胞Tca8113／BLM对BLM的耐药现象，其逆转机制主要与P—gp的作用降低有关。     

九节龙皂甙对8株人癌细胞的抑制作用

0　引言　川产九节龙 (Ardisea pusilla A. PC)系紫金牛科紫金牛属植物的全草 ,九节龙皂甙 (Ardipusilloside)是从该全草中分离出的 C5 3 H86 O2 2 .2 H2 O,经初步药理试验表明具有提高免疫功能的作用 [1 ] .我们采用 MTT法观察九节龙皂甙对 8株人癌细胞的细胞毒作用 .1　材料和方法1.1　材料　肝癌 (SMMC- 772 1) ,本校西京医院中医科提供 ;肝癌 (HCC- 92 0 4) ,本校病理科提供 ;胃癌 (SGC- 790 1) ,本校西京医院消化内科提供 ;卵巢癌 (HO- 8910 )本校西京医院妇产科提供 ;宫颈癌 (Hela)本校 40 3研究所提供 ;肺癌 (A5 49)、食…     

姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3的抗增殖作用

目的:探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV3的抑制增殖作用及其机制.方法:采用MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对SKOV3的抑制增殖效应,流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率,透射电镜观察细胞的超微结构变化,免疫细胞化学法检测凋亡相关基因蛋白的表达.结果:姜黄素可抑制SKOV3细胞的生长,其抑制率与药物浓度和作用时间呈依赖关系,72h的中效浓度(IC50)为79.96μmol/L,流式细胞仪分析证实姜黄素能使SKOV3细胞聚积在G2/M,电镜观察发现姜黄素可诱导细胞凋亡,姜黄素作用72h后,免疫细胞化学表明突变型P53蛋白(MTP53)及Bcl-2表达减弱,Bax及Fas表达增强.结论:姜黄素对SKOV3细胞有抑制增殖作用,通过下调MTP53、Bcl-2的表达及上调Bax、Fas的表达而诱导细胞凋亡.     

顺势疗法药物Hepeel与其各组分的酊剂对HepG2细胞的抗氧化、抗增殖和生化作用

Hepeel是德国用于治疗初期和二期肝功能紊乱的顺势疗法药物，由白屈菜(D2，此为稀释度)、水飞蓟(D2)、白藜芦(D3)、药西瓜(D3)、石松(D3)、肉豆蔻(D3)、毛金鸡纳(D3)等植物高度稀释的提取物组成。作者对该药物及其组分的酊剂进行了抗氧化、抗增殖和生化作用等实验。     

穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞株的体外增殖的影响

[目的]明确穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞株的体外增殖的影响.[方法]以不同浓度的穿心莲内酯处理低分化(MKN45)、中分化(SGC7901)和高分化(MKN28)胃腺癌细胞株,分别温育24h、48h,72h;采用噻唑蓝比色法检测各和穿心莲内酯对癌细胞的药物半数抑制浓度(IC50),比较穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞株的体外增殖抑制作用的异同.[结果]穿心莲内酯对胃癌细胞株MKN45、SGC7901、MKN28的体外增殖均具有显著的抑制作用,并且呈剂量效应和时间效应关系.低分化的MKN45细胞株对穿心莲内酯的敏感性明显高于高分化的MKN28细胞株和中分化的SGC7901细胞株.[结论]穿心莲内酯对不同分化程度的胃腺癌细胞株体外增殖抑制作用不同.     

17-AAG对人肝癌HepG2细胞株增殖和凋亡作用的影响

目的观察17-AAG对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的17-AAG对肝癌HepG2细胞增殖的影响;荧光显微镜观察碘化丙啶（PI）染色的细胞凋亡形态;流式细胞仪检测分析细胞周期分布和凋亡率的变化;免疫组化法检测肝癌HepG2细胞中重组人血管内皮生长因子相关蛋白（VEGF-C蛋白）表达水平变化。结果不同浓度的17-AAG呈时间、剂量依赖性抑制肝癌HepG2细胞的生长增殖（P〈0.05）;流式细胞仪分析显示,17-AAG作用HepG2细胞48 h后G2/M期细胞比例上升,G1/G0期细胞比例下降;0.63、1.25、2.5、5.0μmol/L 17-AAG作用HepG2细胞48 h后的凋亡率分别为（3.23±1.43）%、（9.71±2.20）%、（14.15±2.34）%、（23.65±2.58）%;随着药物浓度的加大,VEGF-C蛋白表达逐渐减少。结论 17-AAG对肝癌HepG2细胞有抑制增殖、诱导凋亡的作用,并能抑制VEGF-C蛋白的表达。     

丙烯酰胺单体对人肝细胞作用的实验研究

目的探讨丙烯酰胺单体(acrylamide,AA)对体外培养人肝细胞株(L-02)的生长抑制作用。方法 MTT比色法测定不同时间段、不同浓度AA对L-02细胞的生长抑制率,并设对照组,绘制生长抑制曲线。结果经不同浓度(0.625%、1.25%、2.5%、5%、10%、20%)的AA作用24 h、48 h、72 h后,与对照组比较,L-02生长抑制率差异均有统计学意义(P<0.05)。AA对L-02细胞均有明显毒性,表现为细胞增殖抑制作用。结论 AA对体外培养的L-02细胞具有增殖抑制作用,且呈时间剂量依赖性。     

MTT法对大肠癌的药敏实验及临床应用研究

目的探讨用MTT法测定大肠癌细胞对化疗药物体外敏感性,研究大肠癌药敏的异质性和个体化疗的可行性。方法用MTT法检测40份大肠癌标本对氟尿嘧啶（5-Fu）、奥沙利铂（L—OHP）、伊立替康（CPT）单药应用、两药及三药（全量或半量）联合应用的敏感性。结果不同标本的药物敏感性存在明显差异,单药中最有效的药物依次为伊立替康、奥沙利铂和氟尿嘧啶,敏感率分别为35．0％、27．5％和20．0％;两药联合应用均优于各自单药的抑制效果（P〈0．05）,伊立替康联合奥沙利铂弱于伊立替康或奥沙利铂与氟尿嘧啶联合的抑制效果（19〈0．05）;三药联合应用的抑制效果显著优于两药联合（P〈0．05）,三药全量及半量联合应用效果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论大肠癌对抗癌药物的敏感程度普遍较低,且存在明显异质性。试验结果与临床治疗经验比较一致,MTT可用于为大肠癌患者选择合适的化疗药物。由氟尿嘧啶、奥沙利铂及伊立替康的联合应用具有高效协同抑制大肠癌细胞的作用,可为临床难治性和复发性大肠癌患者的化疗提供参考。     

苦参碱对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖及超微结构变化的作用

为研究筛选抗高血压血管重构药物,在建立兔主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）体外培养方法的基础上,运用结晶紫染色法、^3HTdR掺入法及透射电镜,观察苦参碱（Mat）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的VSMC增殖及超微结构变化的作用。结果显示：AngⅡ能明显刺激VSMC增殖,引起VSMC肥大、高尔基体等细胞器增多。Mat低、中、高剂量组都能对抗AngⅡ的病理作用,且呈良好的量效关系,与雷米普利（Rap）组相比无明显差异。