小肠移植急性排斥反应期移植肠白细胞介素2受体和细胞间粘附分子1的表达

目的　探讨移植肠白细胞介素２ 受体（ Ｉ Ｌ２ Ｒ） 和细胞间粘附分子１（ Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１） 的表达在小肠移植排斥反应中的意义及诊断价值。方法　选用近交系大鼠 Ｆ３４４／ Ｎ 和 Ｗｉｓｔａｒ／ Ａ 进行全小肠异位移植,实验分４ 组,第１ 组： Ｗｉｓｔａｒ;第２ 组： Ｗｉｓｔａｒ→ Ｗｉｓｔａｒ ;第３ 组： Ｆ３４４ → Ｗｉｓｔａｒ;第４ 组： Ｆ３４４ → Ｗｉｓｔａｒ＋环孢霉素 Ａ（６ ｍｇ·ｋｇ － １·ｄ － １） 。术后第３ 、５ 、７ 天取各组动物移植肠标本进行病理学检查,应用免疫组化技术（ Ｓ Ｐ 法） 检测移植肠 Ｉ Ｌ２ Ｒ 和 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 的表达。结果　病理学检查显示第３ 组大鼠在术后第３ 、５ 、７天分别符合轻、中、重度排斥,第２ 、４ 组无明显排斥征象。第３ 组 Ｉ Ｌ２ Ｒ 表达在术后均非常显著高于其他３ 个对照组;第３ 组 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 表达在术后第３ 、５ 天较相似,尤其在上皮细胞表现为强阳性,并显著高于第１ 组。但第２ 、４ 对照组 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 表达也较高,第３ 组仅在术后第３ 天 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 评分显著高于第２ 组。结论　 Ｉ Ｌ２ Ｒ 和 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 阳性细胞在小肠移植排斥反应过程中发挥重要作用。应用单克隆抗体阻     

小肠移植急性排斥反应期移植肠白细胞介素2受体和细胞间粘？…

目的 探讨移植肠白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）和细胞间粘附分子１（ＩＣＭＡ－１）的表达在小肠移植排斥反应中的意义及诊断价值．方法 选用近交系大鼠Ｆ３４４／Ｎ和Ｗｉｓｔａｒ／Ａ进行全小肠异位移植,实验分４组,第１组：Ｗｉｓｔａｒ;第２组：Ｗｉｓｔａｒ→Ｗｉｓｔａｒ;第３组：Ｆ３４４→Ｗｉｓｔａｒ;第４组：Ｆ３４４→Ｗｉｓｔａｒ＋环孢霉素Ａ（６ｍｇ·ｋｇ＾－１·ｄ＾－１）。术后第３、５、７天取各组动物     

脑室注射血管紧张素II对雄性大鼠下丘脑促性腺激素释放激素含量的影响

本实验观察了脑室注射血管紧张素Ｉ（ＡＩ）对成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）含量的影响。摘取下丘脑组织，匀浆化，用放射免疫分析检测匀浆上清中ＧｎＲＨ的含量。结果表明，脑室注射ＡＩ（１２０ｎｇ／２０μｌ）后６０、９０及１２０分钟，下丘脑ＧｎＲＨ含量分别为２．８８±０．４７、２．６９±０．３８及２．５４±０．５５ｎｇ／１０ｍｇ湿重组织，均显著高于盐水对照组（Ｐ＜０．０５），提示ＡＩ可促进雄性大鼠下丘脑ＧＮＲＨ的生成。     

腰椎间盘突出症髓核内一氧化氮和白介素-6的检测意义

目的：了解一氧化氮（ＮＯ）和白介素６（ＩＬ６）在腰椎间盘突出症患者髓核内的含量,并探讨其意义。方法：共对２８例３０个间隙Ｌ４,５和／或Ｌ５Ｓ１间隙椎间盘突出患者突出髓核取组织匀浆测定了ＮＯ、ＩＬ６的含量,以光密度法测定ＮＯ,并以夹心法ＥＬＩＳＡ测定ＩＬ６。结果：ＮＯ的含量为５１７３±６８４μｍｏｌ／Ｌ,ＩＬ６０１３±００１ｎｇ／Ｌ;ＮＯ和ＩＬ６的含量明显相关,但两者与ＮＯＳ（一氧化氮合酶）的含量无明显的相关性,Ｌ４,５与Ｌ５Ｓ１间隙ＮＯ的含量有显著性差异。结论：腰椎间盘自身可合成ＮＯ,ＮＯ的合成与椎间盘的退变有关。ＮＯ、ＩＬ６参与局部的炎症调节,其含量与临床症状密切相关;通过调控ＮＯ的合成可能有助于防治椎间盘的退变、突出,并控制其临床症状。     

肿瘤坏死因子α和干扰素α对膀胱癌患者LAK细胞增殖和细胞毒作用的影响

为探讨联合应用白细胞介素２（ＩＬ２）和干扰素（ＩＦＮ）或肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对膀胱癌患者ＬＡＫ细胞的增殖和细胞毒作用的影响，采用淋巴细胞分离液梯度离心法从２１例膀胱癌患者外周血分离ＬＡＫ细胞并用ＩＬ２激活培养，细胞于９６孔细胞培养板用细胞计数方法观察不同浓度ＴＮＦα和ＩＦＮα对细胞增殖的影响，用膀胱癌细胞系ＢＩＵ８７和ＥＪ细胞作为靶细胞，用ＭＴＴ法测定ＬＡＫ细胞的细胞毒。结果：ＴＮＦα呈剂量依赖性地加强由ＩＬ２诱导的ＬＡＫ细胞增殖，１０００Ｕ／ｍｌ的ＩＦＮα于４８小时也对ＬＡＫ细胞产生刺激作用，用５０００Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦα可增强ＬＡＫ细胞对ＥＪ和ＢＩＵ８７细胞的细胞毒杀伤，ＩＦＮα对此则无明显影响。结果提示ＴＮＦα和ＩＦＮα增强膀胱癌患者ＬＡＫ细胞的增殖并在细胞毒杀伤中起重要作用，对临床膀胱癌的免疫治疗提供一定依据。     

LFA-1共刺激诱导狼疮性肾炎外周血单个核细胞IL-10表达的研究

目的：探讨淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）对活动性狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白介素 １０（ＩＬ－１０）的调节作用。方法：利用半定量 ＲＴ－ＰＣＲ技术观察 ＬＦＡ－ １共刺激对活动性 ＬＮ患者 ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：单独抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）能诱导ＬＮ 患者ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ轻微表达（０．４３＋０．０３ｖｓ ０．５５±０．４４,Ｐ＜０．０５）而在抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）存在的情况下,抗ＬＦＡ－１抗体（２ μｇ／ｍｌ,相当于ＬＦＡ－１配体）共刺激时明显增加了ＰＢＭＣ ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．５５＋０,０４,Ｐ＜０．０１）。ＬＦＡ－１中和抗体明显抑制了这种共刺激诱导的ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．６４ ±０．０３,Ｐ＜０．０１）。抗ＬＦＡ－１抗体单独刺激时并不引起 ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达变化（Ｐ＞０．０５）。结论：ＬＦＡ－１作为共刺激分子诱导 ＩＬ－ １０ ｍＲＮＡ表达可能是其参与 ＬＮ发病的机制之一。     

人重组γ-干扰素抗生育效应及其机理研究

本研究以新西兰品系实验兔为动物模型,观察人重组－γ干扰素（ｈｒＩＦＮ－γ）的抗生育效应并探讨其作用机理。实验结果：ｈｒＩＦＮ－γ能降低兔胚泡的着床率,对照组的着床率为８０％,ｈｒＩＦＮ－γ２．５、５．０和１０万ＩＵ３组的着床率分别为３０％、２７％和２７％。检测血清中雌二醇（Ｅ２）水平,对照组为１５７．９±３１．８ｐｍｏｌ／Ｌ,ｈｒＩＦＮ－γ各组均有降低趋势,分别为１０７．３±１９．２、１０６．３±２１．７和１０４．９±１９．８０ｐｍｏｌ／Ｌ;血清孕酮（Ｐ）水平,对照组为５０．５９±７．６２ｎｍｏｌ／Ｌ,ｈｒＩＦＮ－γ各组分别为１０．２１±３．１８、６．２３±１．６４和４．８７±０．２６ｎｍｏｌ／Ｌ。在对卵巢和子宫组织的实验病理学的系统观察发现,ｈｒＩＦＮ－γ剂量为１０万ＩＵ时,呈明显的黄体退化、子宫内膜的发育及内膜上皮和腺体的分泌均被抑制。研究表明ｈｒＩＦＮ－γ对孕兔有一定的抗生育效应,其抗孕作用的主要靶器官可能是卵巢,从而影响子宫内环境,使不利于妊娠     

脑室注射γ-氨基丁酸对雄性大鼠下丘脑促性腺激素释放激素含量的影响

本研究观察了不同剂量γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）对雄性大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）含量的作用。结果表明，脑室注射５、５０、２５０及５００ｍｍｏｌ／ＬＧＡＢＡ各为２０μｌ，４０分钟后下丘脑ＧｎＲＨ含量分别为３．５７±０．５８、３．７５±０．６６、４．６３±０．６３及５．０７±０．５９ｎｇ／１０ｍｇ湿重组织，均显著高于对照组下丘脑ＧｎＲＨ含量（１．７６±０．２１ｎｇ／１０ｍｇ湿重组织，Ｐ＜０．０５）。脑室注射２５０ｍｍｏｌ／ＬＧＡＢＡ２０μｌ后２０、４０、６０、１２０及２４０分钟下丘脑ＧｎＲＨ含量依次为２．２４±０．２９、４．６３±０．６３、５．１１±０．３８、４．２０±０．４０及３．９８±０．９１ｎｇ／１０ｍｇ湿重组织。ＧＡＢＡ受体拮抗剂荷包牡丹碱（ｂｉｃｕｃｕｌｉｎｅ，Ｂｉｃ）可阻断ＧＡＢＡ对下丘脑ＧｎＲＨ含量的促进作用。     

脑室注射血管紧张素Ⅱ对雄性大鼠下丘脑促性腺激素释放激素含量？…

本实验观察了脑室注射血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）地成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠下丘脑促性腺激素素释放激素含量的影响。摘取下丘脑组织，匀浆化，用放射免疫分析检测奖交涉 清中ＧｎＲＨ的含量，结果表明，脑室注射ＡⅡ后６０、９０及１２０分钟，下丘脑ＧｎＲＨ含量分别为２．８８±０．４７、２．６９±０．３８及２．５４±０．５５ｎｇ／１０ｍｇ湿重组织，均显著高于盐水对照组，提示ＡⅡ可促进雄性大鼠下丘脑ＧＮＲＨ的生成。     

肿瘤坏死因子与γ-干扰素抗膀胱肿瘤协同作用的实验研究

研究重组人肿瘤坏死因子（ｒＨＴＮＦ）与γ干扰素（ＩＦＮγ）协同抗膀胱肿瘤的作用机理，探索治疗膀胱肿瘤的新方法。材料与方法人膀胱肿瘤细胞株ＢＩＵ８７由北京医科大学泌尿外科研究所提供。（１）用ＭＴＴ法［１］测定ｒＨＴＮＦ或ＩＦＮγ，以及在单独应...     

脾动脉缩窄对门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达及Th1/Th2平衡的影响

目的 观察脾动脉缩窄对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏iNOS、Th1/Th2型细胞因子表达的影响,并探讨机制.方法 肝硬化门静脉高压大鼠随机分3组(n=10):假手术组(SOG)、脾动脉缩窄术组(SAC)和脾动脉结扎术组(SAL);正常大鼠10只行假手术作为对照组(NCG).免疫组化法测脾脏iNOS表达,RT-PCR法测脾脏IFN-γ、IL-4mRNA表达,对iNOS与IFN-γ、IL-4表达量作相关分析.结果 SOG脾脏iNOS明显高于NCG(P＜0.01),SAC和SAL明显低于SOG(P＜0.01).SOG脾脏IFN-γmRNA和IFN-γ/IL-4明显低于NCG(P＜0.01),IL-4mRNA明显高于NCG(P＜0.01);SAC脾脏IFN-γmRNA高于SOG(P＜0.05),SAC和SAL脾脏IL-4mRNA低于SOG(P＜0.05),而IFN-γ/IL-4高于SOG(P＜0.05).iNOS与IFN-γ负相关(r=-0.672,P＜0.01),与IL-4正相关(r=0.634,P＜0.01).结论 脾动脉缩窄术后门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达降低,IFN-γ/IL-4升高,脾脏Th1/Th2失衡改善可能与术后iNOS表达降低有关.     

利用RNA干扰诱导产生的CD8+CD28-抑制性T淋巴细胞的免疫学特性

目的 探讨通过RNA干扰技术诱导产生的CD8+ CD28-抑制性T淋巴细胞(Ts细胞)的免疫学特性.方法 取SD大鼠骨髓,培养分离树突状细胞(DC),设计、合成主要组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类小片段干扰RNA(siRNA),以MHC Ⅰ siRNA转染DC.先以Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液刺激转染MHCI siRNA的DC,然后将DC与从SD大鼠脾脏分离得到的CD8+T淋巴细胞共同培养,通过磁珠法分离出Ts细胞.分别在由SD大鼠脾脏淋巴细胞(反应细胞)和Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞(刺激细胞)组成的混合淋巴细胞培养体系中加入数量不等的Ts细胞,检测反应细胞增殖情况;分别以Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞和卵白蛋白(OVA)刺激SD大鼠脾脏淋巴细胞,然后再按不同比例加入Ts细胞,检测各组脾脏淋巴细胞的增殖情况;在由SD大鼠脾脏淋巴细胞、Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液和Ts细胞组成的混合淋巴细胞培养体系中加入可溶性重组白细胞介素2(rrIL-2),观察IL-2对Ts细胞功能的影响;采用实时定量聚合酶链反应(PCR)测定Ts细胞中转化生长因子β(TGF-β和γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达,流式细胞仪和实时PCR检测Ts细胞上CD25分子的表达.结果 Ts细胞对SD大鼠脾脏淋巴细胞和Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞之问的混合淋巴细胞反应(MLR)具有抑制作用,但对于SD大鼠脾脏淋巴细胞和OVA之间的MLR则无抑制作用.在SD大鼠脾脏淋巴细胞、Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液和Ts细胞组成的混合淋巴细胞培养体系中加入rrIL-2后,SD大鼠脾脏细胞的增殖并无明显增加(P＞0.05).与CD8+CD28+T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞比较,Ts细胞的TGF-β和IFN-γ mRNA的表达量明显升高(P＜0.01,P＜0.05),而CD25的表达量明显降低(P＜0.05).结论 采用经MHC I siRNA干扰的DC能够诱导CD8+T淋巴细胞产生CD8+ CD28-Ts细胞;Ts细胞在体外具有免疫抑制特性,其免疫抑制作用不被外源性IL-2所逆转,且其免疫调节作用具有抗原特异性.     

与大鼠胰岛细胞联合移植的骨髓间充质干细胞的免疫调节作用

目的 研究同种异体或自体的大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与胰岛肝内联合移植对胰岛移植物的免疫调节作用及其机制.方法 以链佐星制备Lewis大鼠的糖尿病模型,作为胰岛移植受者,分为3组:单纯移植组大鼠经门静脉单独移植SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg;同系MSC组大鼠经门静脉共同移植1×109/L的Lewis大鼠MSC 1 ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg;同种MSC组大鼠经门静脉共同移植1×109/L的SD大鼠MSC 1 ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg.检测受鼠的血糖变化,术后1、3 d大鼠外周血γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10的含量.结果 3组大鼠术后第1天血糖均下降到13.9 mmol/L以下.同系MSC组移植物存活时间为(11.38±4.03)d,同种MSC组为(5.50±2.07)d,单纯移植组为(2.88±1.25)d(P＜0.01).术后1、3 d,单纯移植组IFN-γ和IL-2的含量显著高于同系MSC组和同种MSC组(P＜0.01),同种MSC组IFN-γ和IL-2的含量高于同系MSC组(P＜0.05);单纯移植组IL-10的含量低于同系MSC组和同种MSC组(P＜0.01),同系MSC组IL-10的含量与司种MSC组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05);各组IL-4含量的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MSC与同种胰岛共移植可以延长胰岛移植物存活时间,应用同系MSC的效果优于同种异体MSC.共移植的MSC主要通过减少TH1类细胞因子(IFN-y和IL-2)的表达使受者TH1/TH2平衡向TH2方向偏移.

Abstract：

Objective To compare the immune regulation of syngenic and allogenic mesenchymal stem cells (MSCs) in the transplantation combined with islets. Methods After induction of diabetes in 30 Lewis rats with streptozotocin (STZ), the recipient Lewis rats received islets from SD rats combined with syngenic (group B) or allogenic (group C) MSCs injection via the portal vein. The group of islets transplanted alone served as control (group A). The survival time of grafts in all groups was assessed by the level of blood glucose. ELISA was used to detect the levels of interferon-γ (IFN-γ), interleukin 2 (IL-2), IL-4 and IL-10 in the peripheral blood on the 1st and 3rd day after transplantation. Results The blood glucose levels in all three groups were decreased in a normal range (13. 9 mmol/L) and the survival time of grafts in group B (11.38 ± 4. 03 days) was significantly longer than in group C (5. 50± 2. 07 days) as well as group A (2. 88 ± 1.25 days). On the 1 st and 3rd day after transplantation, the levels of TH 1 cytokines IFN-γ and IL-2 in group A were significantly higher than in groups C and B (P＜0.05). Meanwhile the levels of TH 2 cytokine IL-10were increased in group B, but there was no significant difference between groups A and C (P＞0.05). The levels of IL-4 had no significant difference among these three groups (P ＞ 0.05).Conclusion Islet transplantation combined with MSCs could prolong the survival time of grafts.Syngenic MSCs, superior to allogenic ones, were more effective in changing the balance of TH1/TH2to TH2. Decreased expression of TH1 cytokine (IFN-γ, IL-2), which was closely related to the induction of immune tolerance, was beneficial to the long-term survival of grafts.     

不同免疫治疗方案诱导大鼠原位肝移植免疫耐受的实验研究

目的 观察抗CD-40L单抗加小剂量CsA联合免疫治疗对肝移植大鼠受体免疫耐受诱导的作用.方法 在建立稳定大鼠肝移植模型的基础上,将肝移植模型分为5组.A组为SD→SD对照组;B组为SD→Wistar对照组,A,B组术后不用任何治疗措施;C组为SD→Wistar,术后用CsA1～5 d;D组为SD→Wistar,术后用CsA 1～5 d加抗CD-40L(CD-154)单抗0～2d;E组为D组+术前供体特异性输血(DSBT).观察受体存活时间、移植肝病理改变以及术后外周血中细胞因子的变化.结果 A,D,E组受体大鼠存活时点(均>60 d)均明显长于B组和C组.D,E组移植肝急性排斥反应明显减轻.B组IL-2和IFN-γ的血清水平显著高于其余各组(P＜0.05).B,C,D,E 4组IL-4和IL-10较A组均有明显增加,尤其D,E组的IL-10表达较B组显著增高(P＜0.05). 结论 抗CD-40L单抗加小剂量CsA(伴或不伴DSBT)联合免疫治疗,可有效延长肝移植大鼠受体生存时间、减轻急性排斥反应并诱导Th2类细胞因子的高水平表达,有助于受体和移植肝的长期存活.     

1,25-(OH)2 D3在大鼠肾移植急性排斥反应中的作用

目的 观察1,25-(OH)2D3在大鼠肾移植急性排斥反应中的作用,探讨其在免疫调节中的机制.方法 行Wistar为供体,SD大鼠为受体的肾移植术,24只SD大鼠随机分为4组,检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、Ca2+、P3+、白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ的水平及移植肾的病理变化.结果 Ⅰ组大鼠肾移植后5 d血清中BUN、Cr、IL-2、IFN-γ水平分别明显高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组(P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05),但分别与Ⅳ组比较均明显增高(P＜0.05).各组Ca2+、P3+比较差异无统计学意义(P＞0.05).病理结果 显示,Ⅰ组大鼠移植后肾脏排斥反应最重,其余组与之比较均有所减轻,以Ⅳ组最明显.结论 1,25-(OH)2D3通过减少IL-2、IFN-γ的产生,减少排斥反应的发生,改善移植肾的功能.     

红活麻有效部位抗皮肤移植排斥反应研究

目的 观察湖北民族药红活麻有效部位对小鼠皮肤移植排斥反应的影响.方法 采用小鼠同种异体皮肤移植模型,通过皮肤移植物存活时间、受体脾淋巴细胞增殖实验、细胞因子分泌水平测定及CD4+CD25+T细胞亚群分析研究红活麻有效部位抗皮肤移植排斥反应的作用及机制.结果 与模型对照组平均皮肤移植物存活时间(14.4±0.9)d比较,红活麻有效部位中剂量组、高剂量组皮肤移植物存活时间分别为(25.9±1.8)和(41.2±2.8)d,提示红活麻有效部位呈剂量依赖性延长小鼠皮肤移植物存活时间;中剂量组、高剂量组对非特异性刺激(ConA)的脾淋巴细胞增殖反应强度均低于模型对照组(P＜0.05);同时高剂量组抑制脾细胞分泌IL-2、IFN-γ水平明显(P＜0.01),刺激IL-10的分泌水平明显(P＜0.01).结论 红活麻有效部位通过刺激淋巴细胞表面CD4+ CD25+分布,调节IL-2、IL-10和IFN-γ等细胞因子的合成,抑制T淋巴细胞转化功能,诱导宿主细胞免疫耐受,从而有效抑制皮肤移植排斥反应.     

胸腺修饰诱导同种异体静脉移植的免疫耐受研究

目的 观察大鼠胸腺内注射异基因抗原在同种异体异基因股静脉移植免疫耐受中的作用.方法 将48只SD大鼠随机分为4组:自体股静脉移植组(A组)、异体股静脉移植组(B组)、异体股静脉移植免疫抑制剂组(C组)、胸腺内注射供体组织相容性(MHC)抗原后移植组(D组).于2周后进行影像学、组织学、免疫学检测.结果 组织学检测结果显示:D组、C组急性排斥反应损伤较轻,B组血管壁的各层结构破坏最重,可见大量炎性细胞浸润.B组受体大鼠血清干扰素(IFN)-γ浓度为(86.707±10.928)ng/L,显著高于A、C、D组[(29.328±4.170)、(69.076±8.059)、(63.355±4.895)ng/L,P<0.05];B组受体大鼠血清白细胞介素(IL)-4浓度为(23.656±3.369)ng/L,显著低于C、D组[(29.425±4.174)、(31.000±4.659)ng/L,P<0.05].结论 胸腺内注射异基因MHC抗原可诱导大鼠对同种异体血管移植的特异性免疫耐受.     

输注转染MyD88siRNA基因的供者树突状细胞延长小鼠移植心存活时间

目的 探讨输注供者来源的转染了髓样分化因子88(MyD88)siRNA基因的树突状细胞(DC)在延长同种小鼠移植心存活时间中的作用及机制.方法 以脂质体为载体,将化学合成的MyD88siRNA导入BALB/c小鼠(供者)骨髓来源的DC中,制备转染MyD88siRNA基因的DC(MyD88siRNA-DC).随机将27只C57BL/6小鼠(受者)平均分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、培养8 d的DC(Day8-DC)组及MyD88siRNA-DC组,分别将PBS、Day8-DC及MyD88siRNA-DC输注至受者体内.于输注后第7、14和21天时应用免疫双荧光染色法观察供者DC在受者脾脏内的存活情况;混合淋巴细胞反应(MLR)测定受者脾脏内T淋巴细胞对供者同种抗原的反应性.另取27对供、受者(BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠),通过袖套管技术建立颈部异位心脏移植模型,随机平均分为PBS对照移植组、Day8-DC移植组及MyD88siRNA-DC移植组,各组于移植前7 d分别经受者门静脉注射0.5 ml PBS、2.0× 106个Day8-DC及2.0× 106个MyD88siRNA-DC.于输注后第7天,观察各组移植心的存活时间;病理检查观察排斥反应程度;酶联免疫吸附试验测定受者血清巾Th1及Th2型细胞因子[γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4和IL-10]水平的变化.结果 MyD88siRNA-DC在受者脾脏内的存活时间明显延长,MyD88siRNA-DC组受者脾脏内T淋巴细胞对供者抗原的反应性最低(P＜0.01).PBS对照移植组、Day8-DC移植组及MyD88siRNA-DC移植组移植心的存活时间分别为:(6.67±1.37)d、(13.67±2.25)d和(24.50±4.42)d,与PBS对照移植组相比,Day8-DC移植组移植心存活时间延长(P＜0.01),而MyD88siRNA-DC移植组移植心存活时间较Dby8-DC移植组进一步延长(P＜0.01);MyD88siRNA-DC移植组移植心排斥反应病理分级最低,受者血清中INF-γ和IL-12水平显著降低(P＜0.01),而IL-4和IL-10水平明显升高(P＜0.01).结论 输注转染MyD88siRNA基因的供者DC能够延长同种小鼠移植心的存活时间;其机制可能与诱导受者Th1/Th2免疫偏移及形成供、受者微嵌合状态有关.     

泡状棘球蚴感染诱导免疫耐受的研究

目的 观察泡状棘球蚴感染对纯系大鼠异位移植心脏存活时间的影响并探讨发生机制.方法 建立Brwon norway(BN)大鼠到Lewis (LEW)大鼠的颈部异位心脏移植模型.对照组(n=12)以健康的LEW大鼠为受者;实验组(n=12)以感染泡状棘球蚴的LEW大鼠为受者.术后观察移植心的存活时间、组织病理学变化,测定血清内白细胞介素-4(IL-4)和y-干扰素(IFN-γ)水平.FACS 流式检测实验组和对照组大鼠脾内CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg细胞)的数量水平.结果 实验组与对照组移植心的存活时间分别为(16.17±3.19)d及(7.92±1.93)d,两组差异有统计学意义(P＜0.05).实验组移植心的组织病理学分级(平均分级为3.38级)与对照组(平均分级为3.79级)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).发生排斥反应后,实验组血清内IL-4水平为(152.21 ±45.62) ng/L高于对照组(50.85±22.15) ng/L,而实验组血清内IFN-γ水平为(12.35±1.02) ng/L水平低于对照组(42.63±4.15) ng/L,两组差异均有统计学意义(P ＜0.05);FACS流式检测结果提示实验组大鼠脾内CD4+ CD25+ Treg细胞数量为10.8％,高于对照组的6.1％,两组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 泡状棘球蚴感染造成Th1/Th2向Th2类细胞因子偏移,通过介导CD4+ CD25+ Treg细胞数量增加而导致大鼠异位移植心脏存活时间延长,它可能是诱导移植免疫耐受的原因之一.     

Analysis of anti-zona pellucida antibody and tumor necrosis factor-α,γ-interferon and interleukin-2 in sera from patients with premature ovarian failure

Objective:To investigate the role and the clinical significance of anti-zona pellucidaantibody (AzpAb) and tumor necrosis factor-α(TNF-α),γ-interferon(IFN-γ) and inter-leukin-2 (IL-2) in sera from patients with premature ovarian failure (POF).Methods: The AzpAb in the serum of POF patient was analyzed by means ofELISA. The levels of TNF-α, IL-2 and IFN-γ in the serum were determined by meansof radioimmunoassay (RIA).Results:The level of serum AzpAb in the POF patients was significantly higher thanthat of the normal controls(P＜0.001). The levels of TNF-α and IL-2 were significantlyreduced (P＜0. 001), and the level of IFN-γ was significantly elevated (P＜0.01). Thelevels of above three cytokines in AzpAb positive group were significantly higher thanthose of the negative group in POF patients.Conclusion: This study suggested that AzpAb, TNF-α, IFN-γ and IL-2 might playimportant roles in the pathogenesis of autoimmune POF.